Universidad Central de Venezuela

Facultad de Agronoma
Departamento de Qumica y Tecnologa
Ctedra de Anlisis de Productos Agrcolas I

INFORME POST LABORATORIO CROMATOGRAFIA CAPA FINA

2. Introduccin
3. Objetivos de la prctica
4. Muestras, equipos y fundamento
Muestras usadas, equipos e instrumentos empleados y
Fundamento de la practica
5. Resultados:

A. Esquematice el procedimiento empleado para el desarrollo

de cada Prctica.
B. 1era. Parte:
- Presentar cuadro de las distancias recorridas por las manchas y calcular el Rf de
cada una.
- Comparar los dimetros de cada mancha.
- Relacione la concentracin de Colesterol sembrados en la placa con los Rf y
dimetros de las manchas.
- Es la solucin de Colesterol una muestra pura?. Razone su respuesta.
C.
-

2da. Parte:
Presentar cuadro de las distancias recorridas y calcular el Rf de cada una.
Hacer un dibujo de la placa con las manchas.
Realice un anlisis de la misma basado en: Rf, tamao de las manchas, cantidad de
manchas por muestra (pureza), fluorescencia.

6. Conclusin:
7. Bibliografa
8. Anexos
REALICE UN BREVE RESUMEN E INTERPRETACIN DE LA SEPARATA
QUE SE PRESENTA A CONTINUACION:

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Prctica N 3.-CROMATOGRAFIA CAPA FINA

APA 2015

CROMATOGRAFA DE CAPA DELGADA APLICADA EN LA

CARACTERIZACIN DE MUCLAGO DE Opuntia hyptiacantha
Sarah, Rodrguez Gonzlez1*; Hctor Eduardo, Martnez Flores1; Lourdes I., Macas
Rodrguez2; Carla Karina, Chvez Moreno1.
1Programa
Institucional de Maestra en Ciencias Biolgicas, Facultad de Qumico
Farmacobiologa, 2Instituto de Investigacin de Ciencias Qumico biolgicas, Universidad
Michoacana de San Nicols de Hidalgo.
*shary_200@hotmail.com
INTRODUCCIN
En el estado de Michoacn se han registrado 20 especies de Opuntia (Segura et al., 2009),
Entre las especies silvestres se han identificado: Opuntia hyptiacantha, O. atropes, O.
joconostle, O. streptacantha y O. tomentosa (Bravo-Hollis, 1978), las cuales han sido poco
estudiadas, pero representan un gran potencial para su estudio y caracterizacin ya que
podran traer grandes beneficios tecnolgicos, econmicos, sociales y culturales (Senz et al.,
2006).
Las pencas de nopal excretan una sustancia viscosa llamada muclago, es uno de los
componentes ms importantes ya que forma parte de la fibra diettica (FD) del nopal (Gibson y
Nobel, 1990), es un polisacrido fibroso, altamente ramificado con azcares y ac. Uronicos.
Debido a su conformacin polimrica y sus propiedades reolgicas y funcionales los muclagos
representan compuestos de gran inters para la investigacin y el desarrollo de productos en el
sector industrial de alimentos y farmacia. Por lo tanto, es muy importante caracterizar
qumicamente el polisacrido (muclago) de O. hyptiacantha, para determinar sus componentes
a fin de establecer sus posibles aplicaciones, para esto se debe de asegurar que la extraccin
del muclago sea la adecuada y no afecte la estructura nativa del polisacrido.
MATERIALES Y MTODOS
La extraccin del muclago de Opuntia hyptiacantha se efectu mediante el mtodo de
extraccin de Opuntia ficus indica desarrollado por Rodrguez-Gonzlez (2010) a partir de las
tcnicas de Forni et al. (1994) con las sugerencias de Medina-Torres y col. (2000) citado por
Arizmendi en el 2004, y modificado por Zavala-Mendoza (2012). Las variables de modificacin
del mtodo fueron: Relacin nopal/H 2O, tiempo y temperatura de calentamiento. Para verificar
si el polisacrido est presente en la muestra extrada a 65C, 75C y 83C (2 h.) relacin
nopal/H2O (1:2, W/V) (Zavala-Mendoza, 2012), y comprobar si la temperatura de extraccin
afecta a la estructura del muclago (aparicin de monosacridos libres) se realiz una
cromatografa de capa delgada (TLC), esto se realiz con y sin lavados previos del nopal en
H2O desionizada. Por otra parte, tambin se realiz la TLC de los lavados del nopal, y
comprobar si estos contienen monosacridos libres, y eliminarlos antes de la extraccin. La
TLC se llev a cabo de acuerdo a Ribeiro et al., 2010. Posteriormente, se modific la relacin
de nopal/H2O (sin H2O, 1:1, 1:2), as como el tiempo de extraccin (0 min., 1 h y 2 h) y se corri
las TLC de cada extraccin antes de precipitar con etanol al 96%. Despus, se llev a cabo la
extraccin con H2O (1:1), con etanol al 50% (1:1), con etanol al 80% (1:1) (todas estas sin
temperatura y tiempo de extraccin) y se corrieron las TLC antes de precipitar con etanol al
96% y de los precipitados en polvo de estos mismos. Y por ltimo se corri en una misma
placa, para comparar, la TLC del muclago en polvo extrado con etanol al 50 y 80% (1:1), y del
muclago en polvo extrado segn el mtodo de Zavala-Mendoza (2012) (relacin nopal/H 2O
1:8, a 83 C por 2 h.) y del muclago extrado de acuerdo al mtodo de Rodrguez-Gonzlez
(2010) (relacin nopal/H2O 1:2, a 83 C por 1 h.)
RESULTADOS Y DISCUSIN
Los resultados de la primer corrida de TLC, indican que hubo presencia d(mayoritariamente Xilosa), as
como las presencia de ac. Urnicos, aunque tambien se encontr la presencia del polisacarido en menor
cantidad, tanto en las corridas con lavados y sin lavados previos. Se observ que en la extraccion a
temperatura ambiente con y sin lavados, result con menor concentracion de monosacridos y ac.
Urnicos (Fig. 1). Lo cual indica que la temperatura si afect a la estruactura del muclago. En la TLC de
los lavados del nopal no hubo presencia de monosacridos, polisacarido, ni ac. Uronicos. En los
resultados de la TLC de la modificacin de la relacin nopal/H 2O y tiempo de extraccin (Fig. 2) hubo
presencia de monosacaridos y del polisacarido, aunque la mancha menos concentrada fu en la corrida del

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muclago con extraccin nopal/H2O 1:2 (W/V) pero, esto se puede deber a que hay menos conentracin
de monosacridos ya que hay ms cantidad de H 2O, por lo tanto, esto no quiere decir que efectivamente
haya menos concentracin de monosacridos en esta extraccin, as que, se decidi que la relacin
nopal/H2O debe ser 1:1 para obtener resultados ms confiables. Y en las corridas de TLC del tiempo de
extraccin, la corrida a 0 min. Fu menos concentrada que las otras dos (Fig. 3). En los siguientes
resultados, hubo presencia tanto de monosacridos como del polisacrido, aunque con H 2O result menos
concentracin que con etanol al 50 y 80%, esto es de muclago antes de precipitar con etanol al 96% (Fig.
4), pero al llevar a cabo las TLC de estas con muclago precipitado en polvo, en la extraccin con etanol
al 50 y 80% no hubo presencia de monosacridos ni ac. Urnicos, pero si del polisacrido (Fig. 5). Al
comparar las TLC de estas extracciones con las de los mtodos mencionados en metodologa se observ
que en el muclago estrado por estos mtodos, al contrario, si hubo presencia de monosacridos y ac.
urnicos admas del polisacrido (Fig. 6).
CONCLUSIONES
La presencia de monosacridos y ac. uronicos se debe posiblemente a la temperatura y tiempo de
extraccin, as como al solvente utilizado (etanol); este ltimo es un factor importante ya que disuelve a
los monosacridos y ac. Urnicos libres, que al momento de precipitar con etanol al 96% no permite que
estos sean precipitados junto con el polisacarido, por lo tanto, slo precipita el muclago sin la presencia
de estos.

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