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DEMO O PAPE La trastienda de las publicaciones cientificas MG Te Woe Inzombiavirus y otras yerbas: la historia nunca antes contada sobre la zombificaci6n MELINA LaGuia BECHER* Laboratorio de Investigaciones Esotéricas, Departamento de Genética Molecular Resumen La zombificaci6n es una de las practicas mas antiguas y enig- maticas del culto vudd. Provoca en sus victimas un estado de de- mencia caracterizado por pérdida de facultades cognitivas. He- mos logrado reproducir por primera vez esta patologia en un ambiente controlado, estableciendo las causas fisiol6gicas de sus sintomas, asf como el origen de la sustancia disparadora. Ademés, descubrimos la correlacién de esta afecci6n con un virus nunca antes descripto en la bibliograffa, inzombiavirus, IZV, y dos cla- ras caracteristicas en los animales predispuestos a la conversién, su origen étnico y el insomnio. PALABRAS CLAVE inzombiavirus, IZV; zombificacién; polvo zombi. Introducci6én Desde hace cientos de afios el mito “zombi” ha aterrorizado a los pueblos devotos de la religion vudt y desconcertado a la so- * Melina Laguia Becher es licenciada en biotecnologia y realiza su doctora- do en el laboratorio de Inmunologia Molecular y Estructural del Instituto Leloir, estudiando las bases moleculares de la maduracién de afinidad de anticuerpos antiproteinas. 78 DEMOLIENDO PAPERS ciedad occidental, provocando la busqueda de respuestas racio- nales que permitieran descubrir la verdad oculta tras los muertos vivientes. Cuenta la leyenda que los bokors (magos negros) utilizan sus poderes para robar los dos espiritus que habitan el cuerpo huma- no, el Gro Bonani y el Ti Bonani, capturandolos en una botella blanca y causando la muerte del individuo; entonces los brujos se vuelven duefios del cuerpo fisico, pudiéndolo revivir para trans- formarlo en un zombi que someterdn a su voluntad mientras no consuma agua 0 alimentos salados, ya que la sal libera al zombi de la maldici6n y le permite recuperar la cordura y regresar a su tumba. Los fanaticos del vudii afirman que en el rito de zombifi- caci6n intervienen dos brebajes: el polvo zombi 0 poudré (sus- tractor del alma) y el pepino zombi. La primera de estas bebidas provocaria la muerte, mientras que la segunda permitirfa al bokor despertar al zombi y convertirlo en su esclavo [1]. Hace tiempo que los ingredientes “m4gicos” de estas pécimas han sido develados (2]. El polvo zombi -cuyo aditivo mas Ilama- tivo es la tetradoxina- es un compuesto elaborado a partir de dis- tintas sustancias de origen vegetal (tcha-tcha y pwa grande), ani- mal (sapos, reptiles, insectos y arafias) y humano, que, mezcladas en su exacta proporcién, producen el veneno més fascinante de la brujerfa afroamericana, capaz de confundir el diagnostico de Jos mas expertos forenses. El pepino zombi se prepara a partir de la potente planta alucindgena Datura extramonium. La interpretacién cientifica actualmente aceptada sobre el misterio de los zombis afirma que la tetradoxina puede atacar y suspender en un estado de carencia limite al sistema nervioso au- t6énomo y al cerebro, hasta el punto de causar la total ausencia de sefiales vitales. La Datura extramonium eliminaria la tetradoxi- na provocando una reanimacion fisica, ademas de una amnesia permanente y un estado alucinatorio. Esto se suma al panico que sufre la victima al ser enterrada viva, capaz de dafiar el cerebro irreversiblemente, y a la posible anoxia o encefalopatfa letargica DEMOLIENOO PAPERS 79 hipertensiva debido a los efectos t6xicos de la tetradoxina, lo cual explicarfa el patético estado fisico-psicolégico de total abandono y sometimiento en que se ve sumido el zombi. Sin embargo, to- dos los intentos por reconstruir la psicopatologia en modelos ani- males han fracasado hasta el momento. En territorio vudt ni la leyenda ni la explicacién cientffica pa- recen tener validez; la creencia sobre la zombificaci6n cuenta una historia muy diferente: existirian personas protegidas por los loas (dioses) a quienes ningun brujo podria sustraer el alma. Por otro lado, los bokors reconocerfan a sus potenciales victimas entre aquellos que vagan de noche, en particular los insomnes [3]. En 1993 un médico norteamericano publicé un articulo en el que relacionaba los brotes de sida en Haitf con el culto vudd [4]. Tras analizar los primeros focos de sida localizados en Haiti y Africa Negra, lleg6 a la conclusién de que el Gnico punto en co- min era la religion vudd, y m4s concretamente las practicas de zombificaci6n. Segtin esta audaz hipotesis, el virus del HIV, que se encontraba en estado latente, era estimulado de alguna forma a través de las pécimas utilizadas por el bokor. Por otra parte, estudios realizados en los tiltimos veinte afios en clinicas psiquiatricas de Haiti sugieren una causa viral para di- ferentes trastornos mentales [5, 6]. Si bien estas investigaciones nunca fueron tomadas en cuen- ta por la comunidad cientifica, creemos que tras ellas podria es- conderse la clave para desentrafiar finalmente el misterio: un po- tencial virus capaz de volver a un individuo refractario o proclive de ser convertido en zombi. Teniendo en cuenta estos hechos, nos propusimos reproducir en el laboratorio el proceso de zombificacién, tomando como ob- jeto de estudio el utilizado por los bokors, los insomnes, y anali- zar qué los vuelve susceptibles y los diferencia del resto, restrin- giendo esta busqueda a un virus. 80 Demottenoo Papers Materiales y métodos Animates. Un total de 115 humanos machos purgando cadena Perpetua en la Penitenciarfa Popular de Puerto Principe (PPPP) se ofreci6 voluntariamente a intervenir en nuestra investigacién a cambio de una reduccién de las condenas. Los individuos fueron sometidos a distintas pruebas biol6gicas, psicofisiolégicas, subjeti- vas y cognitivas [7-11] con el fin de establecer quiénes sufrfan de insomnio. Sélo 38 de los 115 postulantes alcanzaron un puntaje sa- tisfactorio; del resto seleccionamos 15 al azar para utilizarlos como controles negativos regionales. Los otros 36 individuos utilizados como controles fueron provistos por el gobierno de Marruecos. El Promedio de edades de los 90 sujetos utilizados fue de 33,3 afios, con el minimo en 16 y el maximo en 38. Misteriosamente uno de los controles y tres de los insomnes murieron en una excursi6n por el rfo Duvallier organizada por es- te equipo en cardcter de recreacién. Los cadaveres fueron apro- vechados como material necrético para microscopfa. Zomais. Cinco zombis de aproximadamente 30 afios fueron recogidos por nuestro grupo de tres plantaciones de cafia situa- das en distintas locaciones de Haitf. Tras la extraccién de liquido cefalorraquideo, LCR, fueron sacrificados para utilizarlos como material de las necroscopias. Povo zomai - PEPINO Zomel, Ambas bebidas fueron amablemen- te cedidas por la Sociedad Secreta de Brujos Afroamericanos (SoSBA) bajo amenaza de mutilacién si la naturaleza y propor- cidn exacta de sus ingredientes eran publicadas en este trabajo. Muestras. Se extrajeron 5 ml de LCR por puncién lumbar. El material fue sometido a una ultracentrifugacién en gradiente de sa- carosa para recolecci6n de la fraccién viral segtin el protocolo in- ternacional de extracciones y procesamiento de lfquidos biolégicos [12] y las muestras fueron mantenidas a 4 °C hasta su utilizacion. Los extractos cerebrales se prepararon por licuacién de encé- falos, incluido material 6seo, a través de un procesador eléctrico. DEMOLIENOD PAPERS 381 Se utiliz6 un micrétomo para realizar cortes de distintas partes del encéfalo de los cadaveres tras la fijacidn, inclusién y tincién estandar para microscopia [13]. PCR. Se utilizaron 3 ml de LCR para realizar una multiple nes- ted PCR, mnPCR [14]. Se incluy6 como control interno de la reac- cidn 10‘ copias de un plasmido conteniendo al virus de la rabia equi- na, ERV (provisto por Jeckyll et al., 2000). Tanto para la extracci6n del DNA como para la PCR se siguié el protocolo estandarizado del Instituto de Biotecnologia “Dr. Sabato” [15]. Se emple6 el par de pri- mers universales dpv para la amplificaci6n de un fragmento de cual- quier DNA polimerasa viral. Como control negativo se utilizé H,O. Sélo se dieron como positivos aquellos casos que, al repetirse el en- sayo usando otra alicuota de la muestra, resultaron positivos. AISLAMIENTO VIRAL. Se agregaron 500 pl de LCR positivo para IZV a monocapas con 80% de confluencia de células nigromdnticas (If- nea celular NG48 derivada de cerebro de infantes mozambiquenses, Tepiques 66 .a 99, suministrada por el Dr. Olié de la Universidad de Zaire). Tras una hora de incubacién a temperatura ambiente se reti- 6 la muestra y se afiadieron 2 ml de medio de cultivo. Las placas se mantuvieron a 37 °C y atmésfera de CO, al 5% hasta visualizacion de efecto citopatico. Se hicieron 3 pasajes previamente a la recolec- ci6n de particulas viricas por centrifugacién (700 g, 45’). ESTUDIOS IN vivo. La infeccién con IZV de los controles se realiz6 por inyeccién intracraneal de 33 pl del aislado viral. ZomBiFiCaciOn. Los sujetos fueron mantenidos en aislamien- to durante siete dias; tras la cuarentena se les suministré en una dosis tinica (desayuno) la sustancia como prueba de provocar zombiogénesis, excepto los sujetos sometidos a la zombificacién clasica, que recibieron el pepino zombi como cena, el resto ayu- né por 24 horas. En todos los casos fueron monitoreados du- rante las dos semanas subsiguientes para determinar la apari- cion de caracteristicas zombis medidas de acuerdo con la escala comparativa de Comportamiento y Manifestaciones Psicépatas del Dr. Asimov [16]. 82 DewoLienoo papers Resultados DETECCION DE viRUS POR PCR. La mnPCR del LCR de insomnes, controles y zombis permitié amplificar un total de 8 virus conoci- dos y un virus desconocido, al cual bautizamos como inzombiavi- rus, IZV, por haber sido hallado sdlo en las muestras de insomnes. En conjunto los insomnes mostraron una mayor carga y tipo viral que los controles; sin embargo, entre los controles fueron los hai- tianos los positivos para virus, mientras que los controles marro- quies resultaron no encontrarse infectados. Estos resultados po- drian deberse a las causas socioeconémicas en las que se encuentra inmersa Haitf, las cuales favorecerian la transmision de enfermeda- des. Contrariamente a los resultados esperados para zombis, éstos mostraron no contener IZV en LCR, aunque la incidencia de in- feccién con los demds virus fue de un 100% (Tabla 1). Tabla 1 Virus encontrados en LCR Virus Insomne Control. «= Zombi_—'ZV= Inzombiavirus eee CMV= Ciclometalovirus Ws Virus vampiro zafo IZv ! a ie 2 g VHH66= Virus de honor humano 66 ‘ 09 ' jobovirus wz 07 07 1 tus de la hiedra simple HHe6 069 014 1 WHV= Virus humane lobo EBV 0.13 0.02 1 GSHV= virus humano goodson ni oe 001 ; HIV= virus infecto humano WHY 0,65 028 ' GSHV 0 0.04 1 HIV 024 0,13 1 RESULTADOS DE LA PCR Los productos de PCR fueron observados en gel de agarosa al 4% teflido con bromuro de etidio utilizando un patrén de peso mo- lecular preparado con casos positivos para los diferentes virus neu- DEMOLIENDO PAPERS 83 rotr6ficos conocidos, lo que permitié detectar distintos tipos de virus segtin el tamafio de banda: IZV 140 pb, VHS 120 pb, EBV 118 pb, VVZ 98 pb, HIV 95 pb, CMV 78 pb, VHH66 66 pb y WHV 54 pb, GSHV 49 pb. Parte superior: calles 1 y 6, patrén de peso molecular, calles 2-5, casos positivos IZV; calles 7 y 8, casos positivos VVZ; ca- lle 9, caso negativo. Parte inferior; calle 1, patrén de peso molecular; calles 2-4, casos positivos CMV; calle 5, caso positivo VHH66. ZomerFicacion. La Tabla 2 resume los resultados obtenidos en los experimentos de zombificacién utilizando distintos preparados. De- be aclararse que tanto los insomnes como los controles tratados tni- camente con polvo zombi murieron en un lapso de 8 a 13 horas, por lo que el experimento no se repitié en los controles infectados con IZV. Las autopsias de los 10 sujetos demostraron que las muertes se produjeron por paro cardiorrespiratorio causado por la intoxicaci6n con tetradoxina. Tras la administracién de polvo zombi + pepino zombi y extractos de cerebro zombi sélo los insomnes fueron con- vertidos en su totalidad. Los 3 controles infectados que se volvieron zombis pertenecfan al grupo de haitianos y fueron los tnicos en los que se evidencié un marcado cambio de cardcter tras la infeccién con IZV. En todos los casos los controles infectados no mostraron problemas de insomnio en e] momento de los experimentos, que se realizaron un mes después de Ja inoculaci6n con el virus. La infec- ci6n se corroboré por mnPCR. Tabla 2 Zombificaciones Insomne Control Control infectado Polvo zombi + pepino zombi 717 os 210 Polvo zombi on 013 Z Pepino zombi on 09 08 Cerebro zombi triturado a on 0) Cerebro humano triturado o7 03 03 * p<0,001 iguales entre si pero significativamente diferentes al resto (AOV test). 84 DEMOLIENDO PAPERS Los sujetos zombificados comenzaron a mostrar rasgos dis- tintivos al resto a partir del tercer dia de ingesta de los prepara- dos. El primer cambio observado fue de cardcter fisiolégico (dis- minucién cardfaca) y lo atribuimos al excesivo estado de reposo en el que se sumieron estos animales. Las pardlisis musculares se presentaron como episodios de no mds de 30 minutos de dura- cion y se volvieron mas marcadas a partir del noveno dia (estos ataques desaparecieron en todos los casos al dfa 23). Aunque las facultades mentales fueron declinando progresivamente, el res- to de las caracteristicas psicopatolégicas medidas fueron desa- pareciendo hasta un plateau a partir del mes, siendo las prime- ras las tnicas que no se recuperaron. El promedio diario de horas de suefio de los zombis fue de tres, sin embargo, no esta- mos en condiciones de distinguir si esta caracteristica es resabio de viejas costumbres 0 efecto de nuevos problemas. Microscopria. Los cerebros de zombis observados por micros- copfa 6ptica mostraron distinto grado de neurodegeneracién en el sistema reticular activador, SRA. Consideramos que estos re- sultados pueden relacionarse con la cantidad de tiempo transcu- rrido desde su conversién, la cual desconocemos. Los insomnes, como el control estudiado, mostraron el aspecto esperado de un cerebro normal (datos no mostrados). Discusién Los experimentos realizados en este trabajo nos permitieron separar a los individuos del estudio en dos poblaciones bien dife- renciadas, acorde con su capacidad de ser zombificados, demos- trando de esta forma que no todos los seres humanos pueden ser convertidos en zombis. El grupo refractario estuvo constituido por hombres tanto de origen marroqui como haitiano, mientras que aquellos que se volvieron zombis compartfan tres caracteristicas DeMOLIENDO PAPERS 85 por demas destacables: eran oriundos de Haiti, sufrian de insom- nio y se encontraban infectados por un virus desconocido en el momento de realizada esta investigaci6n. Si bien resulta esencial la correcta caracterizacién de este virus antes de aventurarse al postulado de hipétesis que den cuenta de su relaci6n con el in- somnio y la zombificacién, pensamos que, por no haber sido des- cubierto previamente, es probable que afecte a un niimero redu- cido de personas y que sus efectos pasen inadvertidos o no sean los esperados para un agente pat6geno viral. Podemos afirmar sin equivocarnos que los trastornos del suefio han sido suficientemen- te investigados como para descartar la eventual participacién de un virus en ellos. Por otra parte, los resultados son claros al mos- trar que la infeccién por IZV, aunque siempre presente, no es su- ficiente para la zombificacién. Esto nos lleva a plantear la posibi- lidad de que IZV no sea la causa del insomnio en estos individuos, como lo prueban los controles infectados, sino que este grupo par- ticular de insomnes sean los receptores naturales de IZV y que ambas caracterfsticas se encuentren ligadas 0 influenciando a la que los vuelve susceptibles de convertirse en zombis o que sean en conjunto la causa de ésta. El particular resultado obtenido en los tres casos de controles haitianos infectados que se volvieron zombis no contradice las ideas recién formuladas, ya que desco- nocemos la via de transmision de IZV: asi, al inocularlo en LCR bien pudimos franquear el acceso natural alcanzando infecciones exitosas en todos los casos. Creemos que estas tres personas no eran inmunes al IZV: si no se encontraban infectadas es simple- mente porque no estuvieron en contacto con el virus, y el hecho de que no tuvieran insomnio se debe al corto perfodo transcurri- do desde la infeccién. Si bien ésta no es mas que una posible in- terpretaci6n, pensamos que seria un error desestimar la impor- tancia del virus y del insomnio en esta patologfa. Queda por responder por qué los insomnes, que eran IZV “’, se negativiza- ron al convertirse; deberemos comprobar que el virus realmente se encuentra ausente en zombis, ya que s6lo lo buscamos en LCR, 386 DemoLienoo PAPERS y analizar cémo los cambios producidos en el organismo lo afec- tan. Aunque con nuestro trabajo logramos refutar la hipdtesis que sefialaba a la tetradoxina y la Datura extramonium como dispa- radores de la transformacién zombi y demostramos que lo que sea que la provoque se encuentra en el cerebro de los afectados, atin debemos descifrar la naturaleza de este componente. Los interro- gantes sobre la zombificacién se han multiplicado a partir de nuestra investigacién; sin embargo, consideramos haber avanza- do como nunca antes en este misterio, probando de forma feha- ciente la predisposicion en un grupo caracteristico de personas a ser convertidos en zombis, proceso que nada tiene que ver con la magia 0 la brujeria. Agradecimientos Este trabajo fue financiado con donaciones de la Liga Inter- continental de exfetiches en rehabilitacién y de la Asociacién de Insomnes Republicanos Abatidos (IRA). Agradecemos sinceramente la colaboracién brindada por los gobiernos de Haitf y Marruecos y las autoridades de la PPPP. Referencias . Hemingway, E., Las Nieves Del Bokor, Espafia, Iberoamerica- na, 1935. 2. Quilmes, M.; Heineken, E. e Iguana, L., “Wie sehr viel nehmend und kranker nicht zu werden”, Anonymer Alkoholiker, 185, 1985, pp. 456-655. 3. Watson, N.; Aluau, C.; Phillips, M.; Fierro Colon, A. 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