Biomolcules dorigine vgtale

dintrts industriels:
Les polyphnols

Cours ULBI 456 Licence L2

Second semestre 2011
Christian Jay-Allemand

Universit Montpellier 2
France
(Tl: 04 67143612, E-mail: jay-allemand@univ-montp2.fr)

Mtabolites secondaires ?

Plan gnral du cours

-Diversit des structures chimiques

Partie I- Introduction

-Proprits physico-chimiques

-Biodiversit vgtale, adaptation et

plantes comme source de biomolcules

-Principales techniques danalyse

-Sensibilisation aux !mtabolites

secondaires! produits par les plantes
-Alcalodes
-Saponines et sapognines
-Acides phnoliques et flavonodes

- Extraction, hydrolyses,
- Sparat, dtect, quantificat
- Histolocalisation
Partie III- Activits cellulaires!et rles
des composs phnoliques / Utilisations
- Fonctions cellulaires ?

-Mtabolisme et voies mtaboliques

- Couleur du bois

-Importance des composs phnoliques

utiliss par lhomme / Historique

- Couleur des fleurs et des fruits

Partie II- Biochimie des phnols et

techniques danalyses

- Qualits organoleptiques

-Quest-ce quun phnol ?

-Rseaux mtaboliques

- Brunissement des tissus

- Proprits pharmacologiques
Partie IV- Conclusion et perspectives

PARTIE I
INTRODUCTION
I-1 Quest-ce quune plante ?
I-2 Les plantes, sources de biomolcules
dintrts industriels
I-3 Importance conomique des mtabolites
utiliss dans le monde
I-4 Historique et notion de mtabolites
secondaires

I-1 Quest-ce quune plante ?

Comparaison entre Animal et Vgtal ?

Plante = Vaste surface fixe arienne et
souterraine pour un volume modeste.
Animal = Une symtrie bilatrale avec une
double polarit.
Plante = Une symtrie radiale avec une
seule polarit verticale pour les plantes.
Toute forme dpend de la gravit, de lespace et de
la taille des organismes.
Adaptation la fixit chez les vgtaux =>
Diversit des biomolcules

Graines

Fertilit et pollinisation
Forte intensit
lumineuse et UV

Flavonodes

Basses tempratures
Anthocyanines

Ptrocarpanes
Esters sinapiques
Flavonodes
Isoflavonodes
Psoralnes

Blessures
Coumestrol
Psoralnes
Coumarines
Acide chlorognique
Esters fruliques
Lignines et subrine
Taxifoline glucosyle

Signalisation distance
Acide salicylique ?

Attaques par les

pathognes
Ptrocarpanes
Isoflavonodes prnyls
Stilbnes
Coumarines
Flavanols
Aurones
Actosyringone

Interactions avec les microorganismes

symbiotiques du sol Lutoline,
Lutoline, Apignine
Daidzine,
Daidzine, Rutine, Tannins

Larve dinsecte

Rgulation des
flux dauxine et du
dveloppement
Naringnine chalcone
Kaempfrol
Querctine

Carences en fer, nitrate et phosphate

Acides phnoliques, Flavonodes
Isoflavonodes,
Isoflavonodes, Anthocyanines

Graines darabette
(Figures 3 et 4)

Figure 3 : Comparaison des tguments de graines dArabidopsis thaliana sauvage (WT) et

mute (tt12) grce une tude histochimique ralise laide dune coloration au bleu de
toluidine (coloration en bleu-vert intense des composs de nature phnolique). Embryon
(emb), couche aleurone (al), tgument interne (e), tgument externe (cl). Barre = 40 !m.

Daprs Debeaujon et al., 2001.

Plant Cell, 13, 853-871

Temps dimbibition (heure)

Figure 4 : Capacits germinatives de 4 lots de graines
dArabidopsis thaliana de type sauvage (WT) ou mute (tt12)
dtermines en fonction de la dure dimbibition applique
ces diffrents lots.

Figure : Voie mtabolique

des principaux flavonodes
connus chez les vgtaux.
Sont indiqus les enzymes
(CHS, CHI, ) et les
mutants (tt2, tt7, ).
Daprs Marinova et al.,
Plant Cell, 2007.

I-2 Les plantes, une source de biomolcules dintrts industriels

Glucides / Monosaccharides (oses) et polysaccharides
Lipides / A. gras => Triglycrides, phospholipides,
Protides / Aminoacides => peptides et protines
Nuclotides / ARN, ADN, ATP, ADP, NAD, NADP, FAD, FMN
Acides organiques / Cycles de Krebs et de Calvin, voie
shikimique,
Polyamines aliphatiques et aromatiques
Hormones / Auxines - cytokinines - gibbrellines - thylne Brassinostrodes
Composs poly-isoprniques, jasmonates, thanol, vitamines,
lments minraux
Chlorophylles, carotnodes, strols, terpnes, alcalodes,
saponines, composs phnoliques, => Usine chimique

Alcalodes et composs
azots particuliers

Htrosides

Terpenodes
Composs
phnoliques

Wink et al. (2003) Phytochemistry 64, 319

B
I
O
D
I
V
E
R
SI
T

Relations entre mtabolisme

secondaire et mtabolisme primaire
CO2+ H2O
Photosynthse

Saponosides
Cardnolides

Glucides
Glycolyse
Respiration

Assimilation
de lazote

Htrosides
cyanognes et
glucosinolates

Voie du
shikimate
Auxines, Polyamines

Acetyl CoA
Terpenodes
Cytokinines
Brassinostrodes

Acides
amins

Composs
phnoliques

Malonyl CoA

Acides gras

Oxylipines
Jasmonate

Cires

Alcalodes

Flavonodes

Acide
salicylique

Tannins condenss

La pervenche de
Madagascar

Alcalode
dimrique

Structure de quelques alcalodes dintrts

Morphine

Cochicine

Rserpine

Codine

Quinine

Cocane

Atropine

Ergotamine

Intrts thrapeutiques des alcalodes

Atropine = Traitement des spasmes viscraux
Bromocriptine = Inhibiteur de la lactation
Cocane = Anesthsiques locaux et stupfiant
Codine (mthyl-morphine) = Analgsique et calmant de la toux
Colchicine = Anti-inflamatoire spcifique / Goutte
Driv dihydrogn de lergotamine = Vasodilatateur / anti-migraine
Ergotamine = Dpresseur du systme nerveux sympathique
srine / Carbamates = insecticides puissants
Morphine = Analgsique / calmant de la douleur
Quinine = Antimalarique / forme grave du paludisme (Plasmodium f.)
Rserpine et chlorpromazine = Neuroleptiques des psychoses aiges
Vinblastine et vincristine = Leucmies, Maladie de Hodgkin, cancers

Centella asiatica
Saponines et sapognines
triterpnodiques
Cicatrisants, anti-inflamatoires,
rgnration du derme / cosmto

Pouvoir Hmolytique des saponines de

Centella asiatica

110
100
90
80
% d'hmolyse

70
60

Acide Asiatique

50

Acide Madcassique
Asiaticoside

40

Madcassoside

30
20
10
0
-10 0

0,0133

0,0266

0,0399

0,0532

0,0665

0,0798

0,0931

Concentration en mMol.L

Figure: Pouvoir hmolytique des

diffrentes saponines de Centella
asiatica mesur par spectrophotomtrie

-1

0,1064

0,1197

0,133

0,1463

Les saponines
strodiques et
triterpnodiques

La gnine,
prcurseur des
strodes

Couleur

corce

B
Aubier

Lignines
Zone de
Transition

Bois de coeur

Colorants

- CHS
.

- DFR - F35H + F35H

- FLS

Brunissement

Diversit des structures de nature phnolique

Drivs dacides hydroxycinnamiques

Flavonodes

I-3 Importance des mtabolites utiliss dans le monde

Poids conomique des !drogues! dorigine

vgtale dans le monde (estimation pour 2002)

Alcalodes (nicotine, cocane, morphine, )

=> 4 milliards $
Terpnes et strodes (diognine, taxol, )
=> 12 milliards $
Glycosides et phnols (lignanes, digoxine, )
=> 14 milliards $

Utilisation des composs phnoliques

Paramtres de la qualit sensorielle des produits
vgtaux
Brunissement et altration des produits
alimentaires
Importance des composs phnoliques dans
lalimentation, la sant et la cosmtologie
Implications industrielles: Tannins, colorants,
dgradation des lignines, qualit des bois,
protection des plantes cultives,

ROLES MAJEURS

Pigments

Parfums et armes
(Jasmin)

Substances biologiquement actives

I-4 Historique et notion de mtabolites secondaires

XIXme
Avnement de la phytochimie
Isolement et caractrisation de nombreux
composs spcifiques aux vgtaux
Recherche de principes actifs chez les
plantes mdicinales

Un compos
phnolique : lacide
salicylique
En 1825, un pharmacien italien,
Francesco Fontana, isole le
principe actif du saule blanc qu'il
appelle la "salicine"

En 1828 : Johann Bchner

isolement partir dcorces
de saule du salicylate

Un compos phnolique :
lacide salicylique
1899 : Felix Hoffman (Bayer)
Synthse dAspirine = actylsalicylate
partir de salicylate extrait de Spiraea
ulmaria (Reine des prs) !

Dcouverte dun alcalode :

la morphine
1803 : isolement
1827 : commercialisation par Merck
Guerre de 1870 dveloppement de lusage
mdical

>30 alcalodes
diffrents dont
10% de
morphine
Papaver somniferum album

Dcouverte dun alcalode :

la morphine
1925 : caractrisation de la structure
chimique
Sir Robert Robinson

Prix Nobel de
Chimie

Les premires hypothses

Julius von SACHS (XIXe sicle): Les
tannins sont des dchets du
mtabolisme

J. von Sachs
(botaniste allemand)

Historique des mtabolites

secondaires
Frederich Czapek (1921)
Taxons vgtaux ! processus
biochimiques qui pourraient ne pas tre
indispensables ! caractres secondaires
Dveloppement de lide que les mtabolites
secondaires nont aucun rle : des dchets ou
des excrments / incrments ?
Un exutoire du mtabolisme primaire en
situation de flux excessif (produits de fin de
chane mtabolique) ?

Annes 70-80 : Deux coles

1- Anglo-saxonne : Chemical
Ecology
Miriam Rothschild
Jeffrey Harborne
Le MS est dune importance capitale
dans les interactions cologiques

2- Allemande : Kurt Mothes

Le MS na pas de signification
physiologique
! Thorie neutraliste de lvolution

Aujourdhui : Nombreuses
fonctions reconnues pour les
mtabolites secondaires
Fonctions cologiques
& physiologiques
Activits biologiques et autres
proprits physico-chimiques
valorises par lhomme

WT

tt4

At seedlings 13 days
after germination

Les flavonols (cas de la naringnine) et le NPA (acide

naphtylphtalamidique, molcule de synthse) inhibent le transport
polaris de lauxine dans les racines dArabidopsis thaliana
via
linhibition des faciliteurs / transporteurs defflux dauxine. WT, type
sauvage; tt4, mutant chalcone synthase (CHS) dficient en flavonodes.

Programme de recherche
Transporteurs
auxiniques (TA)

OH

OH

TA

OH
OH

Flavonols

OH

OH

OH

AIA

OH
OH

Synthse
Transport
glycosylation

-Eau
- Nitrates
- Phosphates
- Sulfates

AIA
Dans les
cellules
pricycliques
AIA en M

AIA= Acide indole 3actique

Complexit des rseaux mtaboliques / Mtabolismes primaire et

secondaire (mtabolisme phnolique via la voie de lacide shikimique)

La formation des racines

latrales est sous contrle des
flux dauxines / transporteur!dinflux AUX1

WT

aux1

Daprs Swarup et al., 2001. Gene & Develmopment, 15,

2648-2653.

Figure: Analyse de lauxine (IAA) accumule dans les pointes

racinaires de larabette (At) sauvage (WT) ou mutante (aux1). B,
image dune racine colore / activit Glucuronidase (gne
pDR5::GUS) chez WT; C, image dune racine colore / activit
Glucuronase (gne pDR5::GUS) chez le mutant aux1.

ws

tt4

Biotests / Roots

+
-