COCCIDEOS

Frida S. Rojas Pacheco

Coccidios Intestinales: Generalidades

Las infecciones humanas son causadas por Cryptosporidium
parvum, Cyclospora cayetanensis e Isospora belli.
Transmisin fecal-oral
Diarrea es la principal manifestacin clnica
Individuos inmunocompetentes e inmunocomprometidos

Criptosporidiosis produce la ms severa y prolongada

enfermedad en pacientes con SIDA.

Coccidios Intestinales: Generalidades

Ciclospora cayetanensis es importante causa de diarrea en

inmunocompetentes.

Isosporiosis es grave y prolongada en imnocomprometidos

aunque se presenta tambin en inmunocompetentes.

Coccidios. Taxonomia
Taxonomia
Coccidios.
Reino Protista
Filo Apicomplexa (Sporozoa)
Clase Sporozoa (Sporozoasida)
Orden Eucoccidida (Eucoccidiorida)
Suborden Eimeriina (Eimeriorina)
Famlia
Sarcocystidae
Eimeridae
Cryptosporidae

Toxoplasma
Sarcocystis

Neospora

Eimeria Cryptosporidium
Isospora C. parvum (Mamiferos
CyclosporaC. muris
Babesia, Theileria

Cryptosporidiosis.
Cryptosporidiosis.

Es una infeccin gastrointestinal (bsicamente)

causada por protozoarios coccidios pertenecientes al
gnero Cryptosporidium
Son parsitos obligatorios, pequeos, que afectan las
clulas epiteliales de los vertebrados y pueden causar
una diarrea de corta duracin en inmunocompetentes
y una enfermedad prolongada, parecida al clera, en
inmunosuprimidos (Chacin Bonilla, 1995).

Cryptosporidiosis..
Cryptosporidiosis

Durante los ltimos 30 aos, nuestro concepto de

cryptosporidiosis ha cambiado desde una enfermedad
rara, asintomtica, para una importante causa de
diarrea en animales y humanos en todo el mundo
(Mosier & Oberst, 2000).

Cryptosporidium parvum
parvum
Cryptosporidium
C. parvum no es nuevo: Tyzzer 1907
Patgeno de animales humano (Nime et al., 1976)
Patgeno emergente SIDA
Parsito oportunista (inmunocompetentes tambin)
Principal patgeno entrico
Resistente al cloro
Ubicuo en muchos animales (mamferos)
Asociado a agua (enfermedad hdrica)
Dos genotipos: I o H: infeccin humana/zoonotico
II o C: animales/humanos
No existe tratamiento paliativo o definitivo

Cryptosporidium parvum
parvum
Cryptosporidium

Ciclo monoxenico
No especificidad de huesped
Ooquiste sin esporoquiste con 4 esporozoitos
Microgametos sin flagelos
Intracelular extracitoplasmtico
Ciclo: fase asexual sexual
Ooquistes: 80% pared gruesa (ambiente)
20% (autoinfeccin)

Variable

Cyclospora

Tamao Ooquiste
8-10
No. esporoquistes 2
No. esporozoitos
2
ZNm
Variable
Autofluorescencia Verde-Azul

Cryptosporidium
4-6
Ninguno
4
Si
Brillante

20-30 x 10-19
2
4
Si
Variable

Isopora

Transmisin
Transmisin

1) Directa: persona a persona. Los ooquistes son infectantes

al ser expulsados
2) A travs del agua: con 30 ooquistes puede ocurrir la
infeccin (URBANA)
3) Zoonotica: ambos genotipos estn presentes en animales
(RURAL)

Crytosporidium parvum
A. Quiste. Soluc. Salina
B. Quiste. ZNm

Diagnstico
Diagnstico
Mtodos directos
A. Diagnostico parasitolgico
Demostracin de ooquistes en heces
Visualizacin de ooquistes/otros estadios en secreciones y
biopsia intestinal

1. Mtodos de concentracin
2. Coloraciones (ZNm, Safranina,
quimioluminescentes
3. Histologa
B. Deteccin de Antgenos en Heces
Kit comerciales (IFI, IFD, ELISA)

Mtodos indirectos
C. Diagnostico Inmunolgico
IFI
Ac monoclonales y policlonales
ELISA
Inmunoblot (Wester Blot)
D. Electroforesis
E. Biologia molecular: PCR

C. parvum

Al fresco. Grnulos negros en

los ooquistes

Contraste de fase. Flotacion de

Sheather. Ooquistes refractiles.

El mtodo de flotacin de Sheather solo es usado con

heces frescas

C. parvum

Kinyoun. Ooquistes de Rojo

intenso con granulos negros
caracteristicos.

Kinyoun. Ooquistes de Rojo

intenso con granulos negros
caracteristicos. Diferciar de las
levaduras.

Varias modificaciones de la coloracin ZN (acid-fast) pueden ser

usadas.
La coloracin de los ooquistes varia segn la
modificacin usada de rosado a rojo intenso.

Cyclosporacayetanensis
cayetanensis
Cyclospora

Protozoario coccidio de reciente descripcin

Enteropatgeneo emergente
Se Busca, se encuentra
No transmisin persona a persona
Distribucin estacional (meses mas calientes)
Transmisin: alimentos y agua
Diarrea, enfermedad biliar en SIDA
Por resolver: supervivencia ambiental (alimentos ,
vegetales), potencial zoonotico, transmisin a
humanos, epidemiologa.

Cylospora cayetanensis
cayetanensis
Cylospora
Taxonoma
Taxonoma

Reino Protista
SubFilo Apicomplexa
Subclase: Cossidiasina
Orden Eucoccidiorida
Familia Eimeriidae
Gnero Cyclospora

Ciclo vital de
C. cayetanensis

PUNTOS CLAVE PARA EL DIAGNOSTICO LABORATORIAL DE

Cyclospora
Identificacin de ooquistes en especimenes fecales por microscopia
de luz
Otros mtodos bajo investigacin
A. Microscopia

Guas bsicas
1) Muestras de heces multiples (al menos 3)
2) Usar mtodos de concentracin (Formol eter)
3) Tcnica diagnostica de eleccin:
Disponibilidad de equipos y reactivos
Experiencia
Tiempo y costo

PRUEBAS DIAGNOSTICAS PARA Cyclospora

1) Montaje el fresco
a) Microscopia de campo brillante (Contraste diferencial por interferencia
Esferas refractiles
Otros objetos con aspecto similar
No permanente

Contraste de fase: fcil

Autofluorescencia verde (330-335 nm)
Otros objetos con aspecto similar
No permanente
Microscopio de fluorescencia

b) Fluorescencia bajo LUV

PRUEBAS DIAGNOSTICAS PARA Cyclospora

2) Coloracin Acido-alcohol resistente modificada de Kinyoun

Color rojo sobre un fondo verde azulado
Pueden tener tonos variables (algunos no coloreados)
Pueden no ser perfectamente redondos (colapsados o
distorcionados)
Grnulos y/o tener una pared caracterstica
Permanente
Artefactos (errores diagnsticos)

3) Coloracin con Safranina

Se colorean uniformemente de rojo a naranja
Requiere calentamiento (equipo adicional, p.e.
microonda)
1997: Safranina modificada con calentamiento en
microonda
(Visvesvara et al.)

PRUEBAS DIAGNOSTICAS PARA Cyclospora

4) Otros Mtodos:
Coloracin tricromica
Los ooquistes pueden ser detectados pero no confirmados por este mtodo
Pueden aparecer no coloreados
Cuando por Tricromico se sospecha, usar las colroaciones anteriores para
confirmar

Identificacin histolgica en biopsias intestinales

No rutina
Varias observaciones

B. Ensayo de Esporulacin
C. Mtodos Moleculares

DIFERENCIACIN ENTRE OOQUISTES DE Cyclospora y

Cryptosporidium
Cryptosporidium
Cyclospora
Caracteristica
4-6 m
8-10 m
Tamao
Discernibles No visibles
Esporozoitos
Ausente
Presente
Autofluorescencia
Ensayo de Anticuerpos
Fluorescentes directo Disponible
Disponible
Ensayo inmunoenzimtico

No
No

C. cayetanensis

Yodo de Dantoni

Lugol

Solucin Salina
Al fresco (heces recin emitidas: masa morular granular en su
interior dejando un espacio libre entre esta y la cubierta
externa.

Isosporabelli
belli
Isospora
Pacientes con SIDA/ normales
Parasita enterocitos
Alli ocurre ciclo sexual y asexual
Ooquistes elptico no esporulados en las heces.
Polos finos y doble pared lisa.
Transmisin: agua y alimentos mas frecuente tropico
y en paises subdesarrollados.

 PUNTOS CLAVE PARA EL DIAGNOSTICO LABORATORIAL DE I. belli

? Demostracin de ooquistes alargados tpicos (20-33 m x 10-19

m) NO esporulados en las heces.
? Examen directo o concentracin (flotacin o sedimentacin).
? En ZNm (acid-fast) el esporoblasto dentro del ooquiste se
colorea de rojo

Ooquistes esporulados no son

vistos en heces frescas
Al fresco. Heces recientes: Ooquiste con
Despus de varias horas a
1 esporoblasto
temperatura ambiente. Ooquiste con 2
esporoquistes.

Variable

Cyclospora

Tamao Ooquiste
8-10
No. esporoquistes 2
No. esporozoitos
2
ZNm
Variable
Autofluorescencia Verde-Azul

Cryptosporidium
4-6
Ninguno
4
Si
Brillante

20-30 x 10-19
2
4
Si
Variable

Isopora