UNIVERSIDAD NACIONAL PEDRO RUIZ GALLO

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLGICAS

DECANATO

PROYECTO DE INVESTIGACIN.
INFORME

TITULO

Evaluacin de la planta "Helechito de agua" (Azolla filiculoides) como

fitorremediador sobre aguas contaminadas con Cobre. Lambayeque. SeptiembreDiciembre del 2015

AUTORES

Barbosa Castro Roger1, Pisfil Colchado Katheryn1.

Lambayeque, 09 de diciembre del 2015

DEDICATORIA

Les dedicamos este presente trabajo

a Dios padre que siempre nos cuida y
gua, a nuestros padres por su apoyo
y al Msc Jhon Garca Lpez.

AGRADECIMIENTOS

Agradecemos en primer lugar a nuestros

padres que con su apoyo nos han
encaminado da a da para lograr nuevas
metas. A nuestro profesor Msc. Jhon
Garca Lpez, que con las enseanzas
brindadas hemos podido realizar esta
investigacin aumentando as la ciencia en
nuestra facultad.

CONTENIDO
RESUMEN
I.

INTRODUCCION

II.

MATERIAL Y METODOS
2.1METODOS
2.2METODOS
2.2.1 Recoleccin de las muestras.
2.2.2 Aclimatacin de las plantas en condiciones de laboratorio.
2.2.3 Eleccin de Procedimiento Experimental.

2.2.4 Anlisis de los muestras con sulfato de cobre (II) mediante

espectrofotometra.
2.2.4.1 Espectro de absorcin del sulfato de cobre.
2.2.4.2 Curva de calibracin.
2.2.5 Absorbancia obtenidas mediante espectrofometra.
2.2.6 Determinacin del peso fresco.
2.2.6.1 Determinacin fsica de los tratamientos.
III.

RESULTADOS
3.2

Recoleccin de las muestras.

3.3

Aclimatacin de las plantas en condiciones de laboratorio

3.3

Plantas acuticas en soluciones de sulfato de cobre (II)

3.4
Anlisis de los muestras con sulfato de cobre (II) mediante
espectrofotometra.
3.4.1 Espectro de absorcin del sulfato de cobre

3.4.2 Curva de calibracin

3.4.3 Absorbancias obtenidas mediante espectrofometra
3.5

Determinacin de peso fresco.

IV.

DISCUSION

V.

CONCLUSIONES

VI.

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

VII.

ANEXOS

LISTA DE TABLAS.

Tabla N02: Absorbancia de sulfato de cobre (II) a 0.031M cada 40nm.

Tabla N03: Absorbancias iniciales y finales obtenidas luego de 10 das a 660nm.
Tabla N04: Absorbancias iniciales y finales obtenidas luego de 10 das a 700nm.
Tabla N05: Absorbancias iniciales y finales obtenidas luego de 10 das a 805nm.
Tabla N06: Peso final e inicial, diferencias y % de prdida en cada muestra.

LISTA DE FIGURAS.
Figura N1: Espectro de absorcin.
Figura N02: Variacin de absorbancia de 600 a 850nm.
Figura N03: Curva de Calibracin.

RESUMEN

El presente trabajo de investigacin se realiz con el propsito de evaluar la planta

"Helechito de agua" (Azolla filiculoides) como fitorremediador de aguas contaminadas con
cobre.Las muestras fueron colectadas en la quebrada Shambo en el poblado de
Laquipampa, ubicada en el distrito de Incahuasi Ferrenafe. Las plantas fueron
aclimatadas en el laboratorio de Gentica de la Facultad de Ciencias Biolgicas - UNPRG
durante 15 das en bandejas de 5l con aguas de las lagunas y Agua Destilada (1:4), adems
de sustancia nutritiva.Se realizaron 2 ensayos con 3 tratatamientos de la soluciones de
sulfato de cobre (II) a 0,125M, 0.063M, 0.032 y un 1 grupo control(Agua destilada ) .Se
seleccionaran plantas jvenes con caractersticas viables y se agreg 3 g de plantas por
tratamiento en 8 envases de 200 ml con150 cm3 de cada solucin .Los resultados se
obtuvieron mediante espectrofometra, obteniendo un porcentaje mayor de absorbancia a
concentraciones de 1,25M de sulfato de cobre(II), con un porcentaje de cambio del valor
inicial a final de 28, 26;30,04 %, y 31,44 a 660nm, 700nm y 805nm respectivamente
.Adems el porcentaje mximo de perdida fue de 34,33% a esta misma concentracin.
Concluimos que Azolla foliculoides absorbe iones de cobre contribuyendo en un proceso
de fitorremediacin.
Palabras claves: Azolla foliculides,sulfato de cobre(II),fitorremediacin,absorbancia

I.INTRODUCCIN

Azolla filiculoides (helecho de agua) es una especie de Azolla, nativo de regiones templadas
y tropicales de las Amricas, as como la mayor parte del viejo mundo, incluyendo Asia y
Australia. Crece en regiones templadas en altitudes desde cerca del nivel del mar hasta
5.000 msnm. En general, Azolla prefiere condiciones fras y semisombreadas y se
desarrolla mejor en contenidos altos de fsforo, tanto en el agua como en el suelo.
Taxonmicamente podemos ubicarla dentro de la clase Polypodiopsida /Pteridopsida;
orden Salviniales; familia Azollaceae. Son plantas acuticas flotantes, de hojas pequeas
con races cortas. Frondes divididas cuyo color oscila entre rojo y prpura a pleno sol y de
verde plido a verde azulado en la sombra. Crece muy rpido, ideal para cubrir la
superficie. Ayuda a controlar el desarrollo de las algas al limitar la disponibilidad de la luz.
Son intolerantes al agua salada. Flotan en la superficie del agua por medio de numerosas,
pequeas, estrechamente sobrepuesta escamas como hojas, con sus races colgando en el
agua. Forman relaciones simbiticas con la cyanobacterium Anabaena azollae, que da a la
planta la capacidad de fijar nitrgeno del aire.
Azolla es tambin una seria maleza en muchas partes del mundo, cubriendo cuerpos de
agua tanto que no se ve el agua. As se deriva el nombre 'helecho mosquito', por la creencia
de que ningn mosquito puede penetrar la cubierta verde de helechos para poner sus huevos
en el agua. Azolla tiene fama de ser capaz de crecer tan rpido de duplicar su biomasa en
tres das en buenas condiciones.Puede crecer en temperaturas frescas, con prolongadas
heladas en invierno, y a veces no pueden pasar el invierno as. Son utilizadas como planta
ornamental.
La fitorremediacin puede definirse como una tecnologa sustentable que se basa en el uso
de plantas para reducir in situ la concentracin o peligrosidad de contaminantes orgnicos e
inorgnicos en agua, suelo y aire; a partir de procesos bioqumicos realizados por las
plantas y microorganismos asociados a su sistema de raz que conducen a la reduccin,
mineralizacin, degradacin, volatilizacin y estabilizacin de los diversos tipos de
contaminantesEn los ltimos aos el tratamiento de aguas residuales por medio de
estanques con plantas acuticas ha despertado un gran inters, por el potencial que han
presentado para la depuracin de las mismas. Algunos de estos sistemas han logrado
proporcionar un tratamiento integral en donde no solamente se remueven eficientemente
material orgnico y slidos suspendidos sino que tambin se logran reducir nutrientes, sales
disueltas, metales pesados y patgenos.

El cobre es uno de los metales pesados que mayor preocupacin est causando en el mundo
por su accin sumamente toxica para los organismos y para el hombre. Se considera poco
peligroso en forma metlica y en sales minerales, pero en compuestos orgnicos su accin
se torna muy toxica para el hombre como ltimo consumidor de pescados y mariscos, que
tienen la propiedad de acumularlos en sus tejidos.
La fitorremediacin ha sido propuesta para limpiar tanto el agua del suelo y la superficie
contaminada con metales pesados para que las plantas son capaces de contener, eliminar o
neutralizar. Entre esas plantas dirigidas a los procesos de fitorremediacin, especies de
helechos poseen la capacidad de acumular metaloides tales como Cd, Pb, Cu, Cr, Ni, Zn, y
As; y pueden alcanzar niveles altos de estos contaminantes sin mostrar ningn signo de
toxicidad. Esta acumulacin natural est relacionada con la resistencia que representa la
respuesta de las plantas a condiciones de estrs metal.
Debido al incremento en la poblacin, el desarrollo industrial y la produccin agrcola
intensificada, se han liberado enormes cantidades de contaminantes al medio ambiente,
deteriorando los cuerpos de agua; por lo que es necesario desarrollar estrategias para
reducir y prevenir su contaminacin .En el presente trabajo de investigacin se estudi y
determin la capacidad que tiene la planta Azolla filiculoides de absorber y acumular en sus
estructuras metales pesados como el Cobre y lograr as disminuir la contaminacin en las
aguas. Por ltimo este estudio servir de gran ayuda para futuros proyectos a gran escala
que permitan la identificacin de contaminacin y la disminucin de esta misma sobre las
aguas lo que beneficiara al medio ambiente que lo rodea.

II.MATERIALES Y MTODOS.
2.1METODOS
Este estudio fue realizado en cuatro meses en el laboratorio de Gentica de la Facultad
de Ciencias Biolgicas UNPRG.
El material vegetal empleado en este estudio, se obtuvo de plantas colectadas en la
quebrada Shambo en el poblado de Laquipampa, ubicada en el distrito de Incahuasi Ferrenafe.
2.2METODOS
2.2.1

Recoleccin de las muestras.

Las muestras de Azolla filiculoides sern en el poblado de Laquipampa,
ubicada en el distrito de Incahuasi - Ferrenafe, y se transportaron en baldes de
4L con agua de las lagunas, a temperatura ambiente (25 C).

2.2.2

Aclimatacin de las plantas en condiciones de laboratorio

Las plantas sern aclimatadas en el laboratorio de Gentica de la Facultad de
Ciencias Biolgicas - UNPRG hasta el momento de la realizacin del
experimento. Esta fase se considerara absolutamente necesaria pues permitir
determinar si la planta puede adaptarse a las condiciones de laboratorio.
Las plantas se colocaran en bandejas de 5 litros conteniendo en estos
recipientes una mezcla de Aguas de las lagunas de donde se colecto, con la
adicin de Agua Destilada (1:4) y Sustancia Nutritiva para su respectiva
aclimatacin, para este proceso tendr una duracin de 7 a 10 das.

2.2.3

Eleccin de Procedimiento Experimental

El experimento se llevara a cabo bajo un diseo completamente al azar y ser
conformado por 4 grupos con 2 repeticiones.
De las plantas aclimatadas, se seleccionaran plantas jvenes con buenas
caractersticas y que estn viables se agregar 3g de muestra por tratamiento.

Se agregaron 150 cm3 de las soluciones de sulfato de cobre (II) segn el

protocolo (Tabla N 1).

Tabla N 1: Protocolo de la solucin

# de Envase
Composicin y concentracin (moles dm-3)
1y2
Sulfato de cobre (II), 0,125M
3y4
Sulfato de cobre (II), 0.063M
5y6
Sulfato de cobre (II), 0.032M
7y 8
Agua destilada + nutrientes
2.2.4

Anlisis de los muestras con sulfato de cobre (II) mediante

espectrofotometra.
2.2.4.1 Espectro de absorcin del sulfato de cobre
Se representar el espectro de absorcin del sulfato de cobre, es decir se
realizara medidas de la absorbancia de la solucin ms diluida cada 40
nm para seleccionar la longitud de onda ms adecuada para medir con
precisin el resto de tratamientos.
2.2.4.2 Curva de calibracin
Realizaremos una curva de calibracin a dichas longitudes de onda:
medir la absorbancia de las soluciones preparadas y graficar absorbancia
en funcin de concentracin.
2.2.5

Absorbancia obtenidas mediante espectofometra.

Se determinara el valor inicial de absorbancia de cada una de las muestras
antes y despus del tratamiento despus de 10 das aplicado el
tratamiento.
Se calculara la variacin de absorbancia y/o concentracin en estos
perodos y se construir una tabla con los resultados y a partir de ellos
realizar un grfico para mostrar la variacin

2.2.6

Determinacin del peso fresco.

Para la determinacin de la biomasa (peso fresco) se tomaron al inicio del
ensayo cada planta seleccionada ser pesada antes y despus de los
tratamientos para determinar la ganancia o prdida de biomasa como peso
fresco.

2.2.6.1 Determinacin fsica de los tratamientos

Para la lectura se tomara en cuenta los siguientes parmetros: Clorosis

(hojas amarillentas con presencia mnima en la mitad de una de las dos
hojas); Necrosis (borde quemado, mnimo en la mitad de una de las dos
hojas); Peso hmedo (despus de 10 das).

III.RESULTADOS
3.1 Recoleccin de las muestras.
Se colect las plantas de Azolla filiculoides en la quebrada Shambo en el
poblado de Laquipampa, ubicada en el distrito de Incahuasi - Ferrenafe, y se

transportaron en baldes de 4L con agua de las lagunas, a temperatura ambiente

(25 C) con el debido cuidado para lograr que las plantas no pierdan sus races
y permanezcan vivas.
3.2 Aclimatacin de las plantas en condiciones de laboratorio
Las plantas fueron aclimatadas en el laboratorio de Gentica de la Facultad de
Ciencias Biolgicas - UNPRG hasta el momento de la realizacin del
experimento.
Las plantas fueron colocadas en bandejas de 5 litros conteniendo en estos
recipientes una mezcla de Aguas de las lagunas de donde se colecto, con la
adicin de Agua Destilada (1:4) y Sustancia Nutritiva.
Debido a la dificultad de aclimatar las plantas en laboratorio se adecu una
cmara de luz simuladora con un foco de 20 watts donde las plantas estuvieron
expuestas por unas 5 horas luego se colocaron cerca de una ventana de luz
natural. Debido a estas dificultades y pruebas para aclimatar las plantas este
proceso tuvo una duracin de 15 das realizando dos aclimataciones para
mejores resultados.
3.3 Plantas acuticas en soluciones de sulfato de cobre(II)
Se realiz 2 ensayos conformado por 3 tratamientos ms 1 grupo control,en
cada uno de ellos.
De las plantas aclimatadas, se seleccionaran plantas jvenes con
caractersticas viables. Se consider adecuado utilizar 3 g de las plantas por
tratamiento (8 envases) en depsitos transportes de 200 ml.
Se agreg 150 cm3 de las soluciones de sulfato de cobre (II) segn el
protocolo de la Tabla N 1 en cada uno de los ensayos y se colocaran en una
mesa ambientada cerca de la ventana para que tengan una buena iluminacin.
3.4 Anlisis

de

los

muestras

con

sulfato

de

cobre

(II)

mediante

espectrofotometra.
3.4.1 Espectro de absorcin del sulfato de cobre
Se midi la absorbancia de la solucin de sulfato (II) de cobre ms
diluida (0,031M) Cada 40nm (Tabla N02) y con estos resultados se
represent el espectro de absorcin de sulfato de cobre (II) (Figura N1).

Tabla N02: Absorbancia de sulfato de cobre (II) a 0.031M cada 40nm.

(nm) 460
A

500

540

620

660

700

740

0.007 0.007 0.018 0.025 0.049 0.101 0.19

780

820

860

900

940

980

0.273 0.323 0.316 0.293 0.266 0.248

Figura

A
0.35
0.3
0.25
0.2
0.15
0.1
0.05
0
400

500

600

700

800

900

N1: Espectro de absorcin

Se grafic la variacin de absorbancia de 600 a 850 nm (Figura N02).

1000

1100

Absorbancia
0.35
0.3

f(x) = 0x - 1
R = 0.97

0.25
0.2
0.15
0.1
0.05
0
600

650

700

750

800

Figura N02: Variacin de absorbancia de 600 a 850nm.

Luego seleccionamos las longitudes de onda ms adecuadas, mediante
Excel (Hypothesis Test: Paired Observations) para medir la validez de
nuestra afirmacin con respecto a la proporcin de toda poblacin de
espectros de absorcin.
Se seleccion las longitudes de onda en el rango de 660nm a 820nm
como el rango ms adecuado y significativo (Cuadro N1).
Cuadro N01: Hiptesis de Prueba

850

Hypothesis Test:
Observations

Paired

########
0.026595
0.011894
5
4

hypothesize
d value
mean Group
1
mean Group
2
mean difference (Group 1 - Group
2)
std. dev.
std. error
n
df

-5.01

.0074

p-value
(two-tailed)

0.000000
0.127600
0.187200

Hypothesis Test:
Observations

Paired

0.016667
########
0.005568
0.003215
3
2

hypothesize
d value
mean A
mean Group
2
mean difference (A - Group 2)
std. dev.
std. error
n
df

-1.87

.2029

p-value
(two-tailed)

0.000000
0.010667

Hypothesis Test:
Observations
0.000000
0.291667
0.269000
0.022667
0.004509
0.002603
3
2
8.71

Paired

hypothesize
d value
mean Group
1
mean Group
2
mean difference (Group 1 - Group
2)
std. dev.
std. error
n
df
t
p-value
(two-

3.4.2

Curva de calibracin
Se realiz una curva de calibracin a dichas longitudes de onda (660nm)
para medir la absorbancia de las soluciones preparadas y se grafic la
absorbancia en funcin de la concentracin (Grafico N02).
Figura N03: Curva de Calibracin

3.4.3

Absorbancias obtenidas mediante espectrofometra

Se determin el valor inicial de absorbancia de cada una de las muestras
de concentracin de sulfato de cobre (II) inicialmente y despus de 10
das.
Se calcul la variacin de absorbancia y/o concentracin en estos
perodos y se construy una tabla con los resultados. (Tabla N03, Tabla
N04 y Tabla N05).
Tabla N03: Absorbancias iniciales y finales obtenidas luego de 10 das a
660nm.

Concentracin
Muestra
de CuSO4

Valor inicial

Valor
final

Diferencia

%
de
cambio

0.125 M
0.063 M
0.031 M

#1
#2
#3
#4
#5
#6

0.368
0.368
0.256
0.368
0.124
0.124

0.264
0.293
0.213
0.184
0.105
0.117

0.104
0.075
0.043
0.072
0.019
0.007

28.26%
20.38%
16.80%
28.13%
15.32%
5.65%

Tabla N04: Absorbancias iniciales y finales obtenidas luego de 10 das a

700nm.
Concentraci
n de CuSO4
0.125 M
0.063 M
0.031 M

Muestra

Valor inicial

#1
#2
#3
#4
#5
#6

0.679
0.679
0.342
0.342
0.179
0.179

Valor
final
0.4750
0.5290
0.3120
0.2930
0.1520
0.1700

Diferencia
0.204
0.15
0.03
0.049
0.027
0.009

%
de
cambio
30.0441826
22.0913108
8.77192982
14.3274854
15.0837989
5.02793296

Tabla N05: Absorbancias iniciales y finales obtenidas luego de 10 das a

805nm.
Concentracin
Muestra
de CuSO4
#1
0.125 M
#2
#3
0.063 M
#4
#5
0.031 M
#6

Valor inicial
1.23
1.23
0.624
0.624
0.322
0.322

Valor
final
0.843
0.929
0.462
0.432
0.234
0.248

Diferencia
0.387
0.301
0.162
0.192
0.088
0.074

%
de
cambio
31.46
24.47
25.96
30.77
27.33
22.98

3.5 Determinacin de peso fresco.

Para la determinacin de la biomasa (peso fresco) se tom el peso de cada
ensayo antes y despus de los tratamientos para determinar la ganancia o
prdida de biomasa como peso fresco.
Los resultados fueron registrados (TablaN06).

Tabla N06: Peso final e inicial, diferencias y % de prdida en cada

muestra.
Concentracin
Muestra
de CuSO4

Peso inicial

Peso final

Diferencia

%
perdida

0.125 M

#1

3.000

1.970

1.03

34.33

#2

3.000

2.060

0.94

31.33

#3

3.000

2.210

0.79

26.33

#4

3.000

2.150

0.85

28.33

#5

3.000

2.450

0.55

18.33

#6

3.000

2.570

0.43

14.33

0.063 M
0.031 M

3.5.1

de

Determinacin fsica de los tratamientos

Para la lectura se tom en cuenta los siguientes parmetros: Clorosis
(hojas amarillentas con presencia mnima en la mitad de una de las dos
hojas); Necrosis (borde quemado, mnimo en la mitad de una de las dos
hojas); Peso hmedo (despus de 10 das) (Anexo).

IV .DISCUSION
Azolla filiculoides (helecho de agua) flota en la superficie del agua por medio de
numerosas, pequeas, estrechamente sobrepuesta escamas como hojas, con sus
races colgando en el agua, estas son muy sensibles a movimiento o manipulacin
brusca, es por ello que esto fue uno de las limitantes del transporte desde el lugar de
recoleccin hasta el laboratorio donde se realiz el experimento , para superar este
inconveniente se recolecto gran nmero de muestra en baldes que fueron

transportados con mucho cuidado hasta el laboratorio y all se eligi las plantas
aptas para la aclimatacin.
La planta Azolla, Crece en regiones templadas en altitudes desde cerca del nivel del
mar hasta 5.000 m.s.n.m prefiere condiciones fras y semisombreadas y se
desarrolla mejor en contenidos altos de fsforo, tanto en el agua como en el suelo.
Es por estas razones que la aclimatacin fue otra de nuestros retos ya que Azolla no
se adaptaba fcilmente a las condiciones de laboratorio y el tiempo de aclimatacin
duro ms de lo programado, para solucionar estas dificultades se adecuo en el
laboratorio una lmpara con un foco donde fueron colocadas las muestras a
aclimatar y otras fueron colocados frente a luz natural cerca de una ventana
,finalmente se pudo lograr aclimatarlas utilizando macro y micro nutrientes y la
mezcla de materia orgnica en el fondo trada de la misma zona de recoleccin, lo
que demuestra la gran importancia del uso de materia orgnica de esta planta para su
sobrevivencia.
De acuerdo a los resultados obtenidos mediante espectofometria en las tablas y
grficos, luego de 10 das se pudo demostrar que las plantas absorben iones de cobre
y esto se pudo determinar a partir de la medicin de la absorbancia de cada uno de
las muestras antes y despus del tratamiento. Esto indica que la concentracin de
iones cprico disminuyo del valor final respecto al inicial. Es decir que se corrobor
con la hiptesis planteada. Adems a partir de estos resultados se puede interpretar
que las plantas podran contribuir a un proceso de fitorremediacin .Se puede
observar que el porcentaje de cambio de absorbancia y por lo tanto en la
concentracin del ion de solucin es ms pronunciado cuando las soluciones tienen
altas concentraciones (1,25M), lo que podra indicar que la planta Azolla requiere
una cierta concentracin adecuada de cobre en el medio para empezar a absorber
este metal ya que estas plantas son capaces de retener en sus tejidos una gran
variedad de metales pesados (como cadmio, mercurio, arsnico) y el mecanismo de
cmo acta se cree es a travs de formaciones de complejos entre el metal pesado
con los aminocidos presentes dentro de la clula, previa absorcin de estos metales
a travs de las races esto abre el inicio de nuevas investigaciones por resolver.

V. CONCLUSIONES
Se Determin la quebrada Shambo en el poblado de Laquipampa, ubicada
en el distrito de Incahuasi - Ferrenafe,como la zona donde se extrajeron
las plantas de "Helechito de agua" (Azolla filiculoides).
Logramos Aclimatar las plantas de "Helechito de agua" (Azolla filiculoides)
en condiciones de laboratorio usando recipientes de 5 litros que contenan

una mezcla de Aguas de las lagunas de recoleccin y con la adicin de

Agua Destilada (1:4) junto con Sustancia Nutritiva, el proceso tuvo una
duracin de 10 das.
Se Determin las concentraciones de Cobre (II) 0,125M, 0.063M y 0.032,
para cada uno de los tratamientos junto con agua destilada con nutrientes
(grupo control) agregando 150 cm3 de cada uno a los 8 envases de 200ml
con 3g de la planta.
Pudimios Comprobar la capacidad de "Helechito de agua" (Azolla
filiculoides) para absorber iones de Cobre y as disminuir la contaminacin
de las aguas, con un porcentaje de cambio del 28 a 34% a una
concentracin de 1,25M de sulfato de cobre (II).

VI.RECOMENDACIONES
Se propone utilizer distintas variedades de plantas y de iones metlicos para
corroborar y comparer los resultados obtenidos en este trabajo de investigacin.
Asi mismo se propone ampliar el estudio usando diferentes periodos de tiempo
con diferentes tratamientos para garantizar mayor validez de los resultados.
Por otro lado, se recomienda probar con concentraciones de iones de
concentraciones mayores de 1,25M sulfato cuprico(II).
Se recomienda medir la absorbancia de las soluciones con tiempos de ensayo
inicial, durante y final a diferentes longitudes de onda.

VII.REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
1. Rao, V.V., S. Gurundhra, R.L. Dhar and K. Subrahmanyam: Assessment of
contaminant migration in ground water from an industrial development area, Medak
District, Andhra Pradesh, India. Water Air Soil Pollut., 128, 369-389 (2001).
2. Forni, C., J., Chen, L., Tancioni, M.G., Caiola, Evaluation of the fern Azolla for
growth, nitrogen and phosphorus removal from wastewater, en Water Research,
vol. 35, 1592-1598, 2001
3. Martha Isabel Posada; Maria del Pilar Arroyave. EFECTOS DEL MERCURIO
SOBRE ALGUNAS PLANTAS ACUATICAS. Revista EIA, num. 6, diciembre,
2006, pp. 57-67
4. Metcalf, L.; Eddy, H. (1995); Ingeniera de aguas residuales. Tratamiento, vertido y
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VII.ANEXOS