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Aislamiento y recuento de bacterias

anaerobias facultativas y aerobias

Introduccin
En un ecosistema los microorganismos se encuentran
como poblaciones mixtas en las que interactan entre
ellos mismos asi como con otros organismos, los
componentes y condiciones del medio. De este modo
para efectuar estudios detallados de una especie en
particular es necesaria su separacin a partir de su
hbitat natural, lo que implica la utilizacin de
procedimientos adecuados para el aislamiento y
obtencin de un cultivo puro, asi como su
mantenimiento en un ambiente artificial.

Objetivos
Aprender a practicar las tcnicas de aislamiento por
medio de la estra cruzada y el mtodo de las
diluciones
Hacer la estimacin cualitativa y cuantitativa del
contenido microbiano de diferentes grupos de
microorganismos de las muestras de suelo o agua
estancada.

Tcnicas para cultivo en laboratorio

La separacin fsica puede lograrse a travs de:
Estra cruzada

 Diluciones

1. Numerar tubos

2. Adicionar agua
destilada

7.Extender las alcuotas

con una varilla de vidrio
acodada estril

3.Pesar muestra de tierra o

agua estancada.
Homogenizar y sedimentar
de 2 a 3 min.

4. Realizar disoluciones decimales.

6. Colocar la
disolucin con el asa
en la superficie de las
cajas.

5. Marcar la base del

medio que se utiliza con
la disolucin que se va a
hacer.

Una colonia que se

desarrolla en un medio
slido y procede de una
sola bacteria, espora o
agrupacin de
microorganismos de la
misma especia a los que
se denomina UFC
RECUENTO x Factor de
dilucin= UFC /mL

 Mtodo de siembra por extensin

Mtodo de siembra por vertido en placa

Recuento de clulas viables

Una clula viable es aquella que es capaz de dividirse
y formar descendencia, se supone que cada clula
viable crecer y se dividir para formar una colonia,
de manera que el numero de colonias refleja el
numero de clulas.
El numero de colonias que se desarrollan no debe ser
ni demasiado alto ni demasiado bajo, si el numero de
colonias es demasiado pequeo, la significacin
estadisctica del recuento ser baja.
Contar colonias en placas que contengan entre 25250.

Fuentes de error en recuento en placa

Falta de homogeneidad en las siembras
Imprecisiones en el pipeteo de la muestra lquida
Muestras no uniformes ( con grumos celulares)
Mezclado insuficiente
Intolerancia al calor si se preparan por el mtodo de
vertido

Bibliografa
Brock. 2015 . Biologa de los microorganismos. 14 ed.
Pearson Education. pp 162-163.
Ramrez Gama Ma. R. 2013. Tcnicas bsicas de
microbiologa y su fundamento. Ed trillas. pp 167-173