22/09/2013

AGUA PARA USO

FARMACUTICO
Farm. Mercedes Leonor Stein
FCEQyN- UNaM

Excipiente ms empleado en la Industria

Farmacutica por:
- Propiedades fisicoqumicas
- Excelente disolvente de sustancias
inicas y polares
- Compatibilidad fisiolgica
Se utiliza como DISOLVENTE y como
lquido de lavado.

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AGUA POTABLE:
Agua apta para la alimentacin
y uso domstico
(Resolucin 494/94 MSyAS, Ley 18284/69 Cdigo Alimentario
Argentino, Cap. XII))

El agua potable no puede emplearse con fines

farmacuticos por diferentes razones:
Su composicin es muy variable (segn zona geogrfica, poca
del ao,, etc.)
Las impureza o contaminantes pueden afectar la calidad del
preparado ( compuestos orgnicos, inorgnicos, gases, slidos,
microorganismos).

AGUA PURIFICADA
AGUA DESTILADA
AGUA DESTILADA ESTERILIZADA

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MONOGRAFAS
FA

USP

- Agua purificada
- Agua para inyectables

Materia Prima
(Vol 2)

Producto Terminado
(Vol 3)

FA 8- Vol 2
Materias
Primas

- Agua estril para

inyectables
- Agua estril para
irrigacin
- Agua estril para
nebulizar

COT ( 0,5 mg/L)

Aguas
envasadas

AGUA PARA
INYECTABLES

AGUA PURIFICADA
-

Aguas a
granel

- COT ( 0,5 mg/L)

sustancias oxidables

Conductividad

Endoxinas ( 0,25
UE/mL)

ESPECIFICACIONES

- Conductividad

USOS

ANTIMICROBIANOS
U OTROS
AGREGADOS

Todos los productos que no

requieran agua para
inyectable

Preparacin de FF de
administracin
parenteral

NO

NO

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AGUA ESTRIL PARA

INYECTABLES

AGUA ESTRIL PARA

IRRIGACIN

X
Esterilizada en su envase
final

X
Esterilizada en su envase
final

ENVASE MONODOSIS

1L

>1L

20 mL

ENVASE MULTIDOSIS

NO

NO

NO

FA 8 Vol 3
Prod. Term.
AGUA PURIFICADA
AGUA PARA
INYECTABLES
ESTRIL

ANTIMICROBIANOS
ENSAYOS

USOS

ENVASE

AGUA ESTRIL PARA

NEBULIZAR
X

NO

NO

NO

-Endotoxinas
-Esterilidad- pH - Amonaco- CalcioCO2- Cloruro- SulfatoSustancias oxidables

Esterilidad- pH- Amonaco- CalcioCO2- Cloruro- SulfatoSustancias oxidables

Diluyente de preparados
parenterales
extemporneos

Solo para irrigacin.

No para inyectables.

Solo para nebulizar

Plstico- Vidrio TI II

Plstico- Vidrio TI II

Plstico- Vidrio TI II

-Partculas en inyectables
-Endotoxinas
-Esterilidad
- pH -Amonaco- CalcioCO2- Cloruro- SulfatoSustancias oxidables

Pureza
qumica
orgnica
inica.
Esterilidad

Endotoxinas

Partculas en
inyectables

INYECTABLES

AGUA ESTRIL PARA

IRRIGACIN
NEBULIZAR

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FA 8

AGUA PURIFICADA

OBTENCIN

Destilacin- OR Intercambio
inico u otro proceso validado

CONDUCTIVIDAD en lnea
ENDOTOXINAS BACTERIANAS

A 25C 1,3 S/cm

Para soluciones concentradas para
hemodilisis: no ms de 0,25 UE/ml

TOC
SUSTANCIAS OXIDABLES
(si no se realiza TOC)
USOS

AGUA DE PARTIDA
AGREGADOS

0,5 mg/ml
Cumple ensayo

AGUA PARA INYECTABLES

Destilacin- OR de doble paso
A 25C 1,3 S/cm
No ms de 0,25 UE/ml

0,5 mg/ml
------------------------------------

Empleada para la preparacin de

todos los medicamentos que no
requieran agua para inyectables

Empleada para la preparacin de

FF de administracin parenteral y
cualquier otro uso indicado en FA

Agua potable
Ninguno

Agua potable o purificada

Ninguno

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Agua purificada
Agua utilizada en la preparacin de

Productos Medicinales NO PARENTERALES:

Agua utilizada para el lavado de equipos, y
componentes que entran en contacto con el
producto no parenteral.
El agua del lavado final ser de la misma calidad
del agua empleada para el preparado o mejor.
FA 8

PRODUCTOS
Parenterales
Soluciones de Hemofiltracin
Soluciones de Hemodilisis
Soluciones de Irrigacin
Soluciones de Dilisis Peritoneal
Oftlmicos
Soluciones para nebulizar
Preparaciones ticas y nasales
Preparaciones de uso drmico

CALIDAD DE AGUA
REQUERIDA
Agua para Inyectables
Agua para Inyectables
Agua para Inyectables
Agua para Inyectables
Agua para Inyectables
Agua Purificada
Agua Purificada
Agua Purificada
Agua Purificada

FA 8

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<1230> AGUA PARA USO MDICO

AGUA PARA HEMODILISIS

< 1231> AGUA PARA USO FARMACUTICO

1. Agua purificada
2. Agua para inyeccin
3. Agua para hemodilisis *
1.
2.
3.
4.
5.

Aguas a granel
con monografas

Agua para inyeccin

Agua bacteriosttica para iny.
Agua estril para inhalacin
Agua estril para irrigacin *
Agua purificada estril
Cap <1230> *

Aguas
envasadas
con
monografas

<1231>

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Fueron constatados mediante pruebas qumicas especficas y no especficas para

detectar especies qumicas indicativas de una purificacin incompleta o inadecuada.
A pesar de que tales mtodos pudieron ser considerados escasamente adecuados
para controlar la calidad de estas aguas , sin embargo superaron la prueba del
tiempo.
Esto se basa en que la operacin del sistema de agua y los controles de
conductividad en lnea que se usaban y se siguen usando, conduce a un producto
final donde es imposible que fallen estas pruebas arcaicas de atributos qumicos.
La medida de conductividad reemplaz a todas las pruebas qumicas inorgnicas
(Amonaco, Calcio, Dixido de Carbono, Cloruro, Sulfato), salvo a la de Metales
Pesados.
Se reemplazaron las tcnicas arcaicas por tcnicas analticas contemporneas.
Primero sobre aguas a granel (a partir del 5to suplemento de USP23-1999), y luego
tambin para aguas envasadas (USP30-2007).
La prueba COT reemplaz la de Sustancias Oxidables, que principalmente
apuntaba a contaminantes orgnicos.

La prueba COT reemplaz la de Sustancias Oxidables, que principalmente

apuntaba a contaminantes orgnicos.
Slidos Totales y pH no estn cubiertas por la prueba de conductividad
S.T.: se consider redundante pues las pruebas no selectivas de COT y
Conductividad podran detectar la mayora de las especies, excepto slice
(coloidal), que se elimina fcilmente en las etapas de purificacin del agua, y que
, adems, no constituye un riesgo mdico o funcional salvo en situaciones extremas
o infrecuentes.
PH: se reconoci que era redundante para la prueba de conductividad. (Se
elimina la prueba en el 8vo. Suplemento de la USP 23, 1998).
Metales Pesados: Fue excluida la prueba por diferentes razones:
El agua de fuente tiene una especificacin ms estricta al respecto
Los materiales de construccin de los sistemas de agua no lixivian metales
pesados
No hay registros de no pasar la prueba en este atributo y s hacerlo para los
dems.

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Algas
Protozoos
Cryptosporidium
Giardia

Bacterias
Pseudomona
Gram (-)
E. coli y coliformes

Hongos y levaduras
BIOFILMS:
Los microorganismos acuticos utilizan mucopolisacridos para colonizar
superficies (ej. sistemas de almacenamiento de agua), formando comunidades
complejas (se les adhieren otros microorganismos, nutrientes, etc.)

La presencia de un Biofilm es una fuente de contaminacin

difcil de eliminar del sistema de obtencin y almacenamiento
de agua.
Para destruir el biofilm se requiere:
Usar ciclos de agente biocida y soluciones de pH muy bsico (OHNa)
para digerir y eliminar la capa ms superficial.
Los ciclos biocida-lcali deben repetirse 5-10 veces.

Biofilms de Pseudomona aeruginosa es uno de las ms corrientes

y difciles de erradicar.

22/09/2013

Principal fuente exgena: agua fuente o de alimentacin.

Otras fuentes exgenas: relacionadas al diseo del equipo de
purificacin, accesorios, removibles, vlvulas, etc. pueden ser
microorganismos no necesariamente acuticos (del suelo o
humanos) indicativos de fallas en algn componente del
sistema.
Fuentes endgenas (biopelculas o biofilms): Las operaciones
unitarias y el sistema de distribucin. Una vez formada la
biopelcula, constituye una fuente de contaminacin microbiana
continua.

Niveles de alerta (o Lmites de alerta)

Niveles que excedidos no constituyen de por s un peligro y por lo tanto no requieren
una accin inmediata, pero alertan que el proceso no funciona todo lo correctamente
que sera deseable. Constituye un aviso.
102 ufc/ml para agua purificada

Niveles de accin (o Limites de accin)

Niveles que excedidos indican un serio peligro de contaminacin y por lo tanto hacen
necesaria la toma de las acciones adecuadas. Se debe parar la produccin y tomar
las acciones correctivas para volver el proceso a las condiciones normales.
103 ufc/ml para agua purificada

Permiten controlar el proceso para tomar las acciones correctivas que

impedirn que el sistema se desve fuera del control y produzca agua no apta
para el uso previsto.
Los niveles derivan de datos de tendencia del usuario.
Ausencia de microorganismos/100 ml : Escherichia coli y Pseudomona
aeruginosa

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Endotoxinas:
Lipopolisacridos de la envoltura celular externa de la
pared celular de bacterias G(-), de la que se desprenden.
Pueden estar asociadas a microorganismos vivos, a
fragmentos de microorganismos muertos, o a la capa mucosa
de polisacridos que rodea las bacterias de la biopelcula.
Los niveles de endotoxinas pueden reducirse:
- Controlando la entrada en el agua de alimentacin.
- Reduciendo la proliferacin microbiana dentro del
sistema.

Conductividad (L): medida del flujo de electrones facilitado con

los iones.
Las molculas de agua se disocian en iones en funcin del pH y
la T.
Algunos gases (CO2) se disuelven fcilmente en agua e
interactan para formar iones extraos que afectan la L y el
pH (predecible, intrnsecos del agua)
Otros iones extraos (Cl-, Na+) afectan la L.
Los contaminantes inicos (orgnicos e inorgnicos) modifican la
L.
En las especificaciones de conductividad, se consideran las
contribuciones de los iones detectados anteriormente por
pruebas de qumica hmeda.

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Lmites de iones extraos (impurezas)

USP XXII:
Clmx 0,47 ppm
NH4+
mx 0,3 ppm
Na+
AFECTAN LA PUREZA QUMICA DEL AGUA
AFECTAN EL PH
AFECTAN LA CONDUCTIVIDAD

Se modifican las especificaciones de las aguas

envasadas:
Agua purificada estril
Agua estril para inhalacin
Agua estril para irrigacin
Se eliminan:
pH Cloruros - Sulfatos
Calcio- CO2 Amonaco
Se agrega:
Conductividad

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22/09/2013

Mediciones en tiempo real

Permiten tomar decisiones e intervenir el
proceso.

CONDUCTIVIDAD EN
AGUA CALIDAD
FARMACUTICA
<75> FA 8

Captulo <645> USP; Introduccin: 1996

Cambios: 2008
Mediciones en lnea
Mediciones fuera de lnea
Requisitos del equipo (precisin)
Cambios en los valores de conductividad
p/agua envasada

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Agua a granel
Pruebas en lnea
Pruebas sobre muestra

Agua
envasada
Pruebas sobre
muestras

Muestreo

Mtodo
Envase
Factores
ambientales
C (CO2)
Vapores orgnicos

Afectan
la
muestra

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22/09/2013

Instrumento calibrado
Constante de conductividad de celda conocida ( 2%) y
verificable con lquido estndar o con otro instrumento
rastreable
Verificaciones peridicas del instrumento
Mediciones sin/con compensacin de temperatura
T: medir con exactitud 2C
La aptitud del instrumento depende del sitio de muestreo en el
sistema de agua a granel

ETAPA 1
En lnea
Fuera de lnea

Sin compensacin T
Tabla de aceptacin L-T (pg.87- Vol1)

ETAPA 2
25 1C
< 2,1 S/cm

Muestra (100 ml o ms)

Se agita

ETAPA 3
Dentro de los 5 minutos etapa 2
+ ClK ss (0,3ml/100ml)- Determinar pH (0,1)

Tabla Etapa 3 - pH 5,0-7,0

Conduct tabulado

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22/09/2013

Idem etapa 2
de Aguas a Granel
Vol nominal 10 ml: L 25 S/cm
Vol nominal > 10 ml: L 5 S/cm

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22/09/2013

SISTEMA DE OBTENCIN DE AGUA PURIFICADA POR DOBLE

OSMOSIS INVERSA
sistema de obtencin de agua purificada doble smosis.PDF

Filtro primario: 20 micras

Ablandado: previene la incrustacin de las membranas
precipitacin de sales insolubles de Ca++ y Mg++
Filtro final: 1 micra
Intercambiador de calor: mantenimiento a 22C
Decloracin con metabisulfito reacciona con Cloro libre y lo
convierte en sales inofensivas para la membrana (cloro libre
degrada la membrana)
Ajuste de pH: adicin OHNa para transformar el CO2
disuelto cuantitativamente a bicarbonato (y Na+) que son
iones eliminados por la membrana
Lmpara UV: control del contenido microbiano y eliminacin
de vestigios de cloro.
Membranas de smosis inversa

FNA VI Ed : Ensayo para sustancias piretgenas (conejos)

FA 7: <330> Ensayo de endotoxinas bacterianas
FA 8: <330> Ensayo de endotoxinas bacterianas

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22/09/2013

El descubrimiento de que la inyeccin de soluciones acuosas a un paciente

poda causar fiebre data de 1876.
Los agentes responsables de este incremento en la temperatura fueron
llamados "pirgenos".
Esencialmente los pirgenos son sustancias que administradas por va
parenteral y en dependencia de la dosis, son capaces de provocar una
respuesta febril, shock y muerte.
Existe una gran variedad de pirgenos entre los que se encuentran el
cido lipoteicoico, el peptidoglicano, las endotoxinas y ciertos virus,
hongos, esteroides y enterotoxinas.
Los pirgenos ms comunes son las endotoxinas, por ejemplo los lipopoliscridos (LPS), que provienen de fragmentos de la pared celular de
bacterias Gram-negativas.
En 1923 Sieber determin el origen de estas sustancias debido a la
presencia de bacterias y productos de su metabolismo, y estableci un
mtodo para su deteccin in vivo.

En general, los pirgenos elevan los niveles de citosinas inflamatorias

circulantes, seguido de eventos clnicamente relevantes como fiebre,
hipotensin, linfopenia, neutrofilia, niveles elevados de cortisol de plasma y
protenas de fase aguda.
Bajas dosis de pirgenos inducen reacciones inflamatorias, sin sntomas
clnicamente significativos. Dosis moderadas de pirgenos inducen fiebre y
cambios significativos en la composicin del plasma.
La administracin de altas dosis de pirgenos puede llevar a choques
spticos, caracterizados por una disfuncin cardiovascular, incluyendo la
depresin y dilatacin del miocardio, la vasodilatacin, vasoconstriccin,
disfuncin del endotelio y disfuncin de rganos (rin, hgado, pulmones y
cerebro), seguido de la falla de mltiples rganos y muerte.
Las clulas endoteliales juegan un rol muy importante en la regulacin de la
hemostasis, manteniendo una barrera antitrombtica. El dao celular de las
clulas del endotelio debido a endotoxinas es una implicacin de la
patognesis de los choques spticos, dado que estas clulas cambian como
respuesta al estmulo pirognico y desarrollan propiedades protrombticas
(alterando la regulacin de la trombomodulina, la adherencia de leucocitos
y la proliferacin y reparacin de si mismas, entre otras funciones
importantes). La informacin disponible sugiere que los LPS causan daos
irreversibles al endotelio.

18

22/09/2013

Por ms de 40 aos el ensayo de pirgenos se realiz mediante la

determinacin de la respuesta febril en conejos (Rabbit Pyrogen Test o RPT).
Permaneci prcticamente invariable y su efectividad fue escasamente
cuestionada.
En la actualidad, para la aprobacin y comercializacin de gran parte de los
productos farmacuticos y biotecnolgicos diseados para ser administrados
por va parenteral, las agencias reguladoras internacionales exigen el control
de pirgenos por el mtodo del lisado de amebocitos de Limulus (LAL).
El LAL es un mtodo in vitro que detecta con alta sensibilidad la presencia
de endotoxinas bacterianas.
Por su efecto farmacolgico, ciertos citostticos, algunos sedativos y anestsicos,
corticosteroides, derivados de la fenotiazina y antipirticos, no son posibles
evaluar por el mtodo en conejos, puesto que enmascaran el potencial
pirognico de las muestras
Frente al mtodo LAL, el RPT es ms lento, no ofrece resultados cuantitativos y
adems pueden existir otros factores que alteren el estado del conejo, aunque
el espectro de aplicacin sea mayor.

En la actualidad, la mayora de las monografas de drogas

parenterales descritas en las principales Farmacopeas regulan
el ensayo LAL para el control de pirgenos en producto
terminado.
El mtodo tambin se emplea en el control de proceso de la
produccin de inyectables, control de endotoxinas en los
accesorios mdicos que tendrn contacto con la circulacin
sistmica, en la industria alimenticia, en la clnica, en el control
del agua que se emplea en la industria de semiconductores y
en controles medio ambientales.

19

22/09/2013

El ensayo de endotoxinas bacterianas se aplica a la determinacin o

cuantificacin de endotoxinas provenientes de las bacterias Gram
negativas, empleando como reactivo, lisados de amebocitos circulantes
del cangrejo herradura de Limulus polyphemus (ensayo LAL), de
Tachypleus tridentatus, etc. Cuando se enfrenta el reactivo a soluciones
que contienen endotoxinas produce gelificacin.
La reaccin requiere la presencia de cationes bivalentes. La velocidad
de la reaccin depende de la concentracin de endotoxina, del pH y
de la temperatura.
El lisado contiene un sistema enzimtico que acta en cascada y que se
activa progresivamente en presencia de endotoxinas.
Como resultado final, la protena coagulable (coagulgeno) se
transforma en un gel (coagulina), siendo la base del mtodo de gel en
tubo.

Se han desarrollado otros mtodos basados en los cambios

turbidimtricos que ocurren durante la formacin del gel y
mtodos cromognicos, basados en el desarrollo de color luego
del clivaje de un pptido sinttico que contiene un cromforo.
Estos mtodos permiten estimaciones cuantitativas del contenido
de endotoxina, mientras que el mtodo de gel en tubo se emplea
como ensayo lmite y tambin como mtodo semicuantitativo.
Los mtodos descriptos en el captulo <330> FA 7 son:
a) gel en tubo: ensayo lmite y semicuantitativo
b) cromognico de punto final
c) cintico cromognico
d) cintico turbidimtrico

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22/09/2013

Representacin de la reaccin en cascada entre el LAL (enzimas proteolticas tipo

tripsina) frente a las endotoxinas y las -(1-3) glucanas segn el modelo actual.

Hemolinfa azul del cangrejo

herradura

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