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Boumaza Nahla Ouarda

07/02/2016
Section : A , Groupe : 5
Tp n=01 de Immunologie: ablation dorganes immunitaire et prparation
de frotti mdullaire

Observation :

Note :

But :
- dissection dune rat ou une souris afin de faire une ablation dorgane lymphode primaire
( thymus ) et secondaire ( rate ) , et aussi pour faire une ponction au niveau de la moelle
osseuse afin de prpar un frotti mdullaire
-apprendre faire une injection de BSA afin de prpar le tp de limmunisation par BSA

1-Materiels et Methodes :
Matriels :
-planche de fixation
- aiguille et seringue
-pinces
-paire de ciseaux
-scalpel
-pingles

-Tubes eppendrof
-solution NaCl
-rfrigrateur
2-Protocoles :

1ere partie : dissection du rat blanc


-anesthsier le rat.
- faire une boutonnire en bas du ventre du rat blanc a laide des ciseaux ensuite monter
jusquau cou de lanimal et faire la mme chose en parallle aux pattes ensuite faire une
autre boutonnire sur la chair et refaire le mme schma et fixer les tout a laide des
pingles
2 eme partie : ablation dorganes immunitaires primaire ( thymus) et
secondaire ( rate )
1

-on repaire le thymus juste sous le cou de lanimal puis la rate sur le coter gauche en bas
du ventre et on les coupe tous les deux pour les mettre dans des tubes eppendroff
remplis avec du NaCl et on les place dans le rfrigrateur.
3 eme partie : ponction mdullaire
-On coupe au niveau du fmur de lanimale et on introduit lintrieur de los une
aiguille contenant un peu dNaCl pour linjecter ensuite on aspire nouveau laide de
laiguille
-On dpose le contenue de la seringue sur une lame et on ltale a laide dune autre afin
de faire un frotti mdullaire .
-prparation de la lame coloration au MGG : aprs que le liquide tal aie scher on met
15 gouttes a peut prt de MG et on laisse 3 minutes puis on ajoutes 15 autres gouttes
deau et on laisse scher pour ensuite rincer et inond avec du geisma et on laisse
scher pendant 15 minutes pour laver nouveau , lobservation des lames se fera lors
dun prochain TP.
4eme partie : injection de BSA
-mobiliser un animal vivant par la peau du dos et les oreilles et lui injecter le BSA sous la
peau du ventre
3-Discussion :

On remarque que le thymus est un organe bilob


Le MGG est un indicateur contenant 2 colorants neutre qui lorsque ils entrent en
contact ils forment de sels capable de color distinctement le noyau et le
cytoplasme dune cellule , ce qui nous aidera pour lobservation des lames pour le
prochains TP