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UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

Universidad del Per, Decana de Amrica


FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUMICA
DEPARTAMENTO ACADMICO DE FARMACOLOGA, BROMATROLOGA Y
TOXICOLOGA

LABORATORIO
DE

TOXICOLOG
A

DETERMINACIN DE
PLOMO EN SANGRE
POR EL MTODO DE
BAUBACH Y BURKEY

INTEGRANTES:

ANCHANTE SARAVIA MANUEL


GARCIA TAIPE ELIZABETH
QUISPE GUEVARA JOSE
RUBIO PACHECO VICTOR

Grupo de Prcticas: martes - mesa 2

Semestre Acadmico 2016-I

DETERMINACIN DE PLOMO EN SANGRE POR EL MTODO DE BAUBACH Y BURKEY

DETERMINACIN DE NIVELES DE PLOMO EN SANGRE POR EL


MTODO DE BAUBACH Y BURKEY
I.

INTRODUCCIN

El plomo es un metal txico cuyo uso generalizado es la causa de la importante


contaminacin ambiental y los problemas de salud registrados en muchos lugares del
mundo. Se estima que la exposicin al plomo provoca 143.000 muertes cada ao y es
responsable del 0,6% de la carga de morbilidad mundial. 1 El plomo es una sustancia
txica que se acumula en el organismo y afecta a mltiples sistemas orgnicos, como el
neurolgico, el hematolgico, el gastrointestinal, el cardiovascular y el renal. La exposicin
crnica comnmente tiene efectos hematolgicos, como anemia, o provoca trastornos
neurolgicos, como cefalea, irritabilidad, letargo, convulsiones, debilidad muscular, ataxia,
temblores y parlisis. La exposicin aguda puede provocar trastornos gastrointestinales
(anorexia, nuseas, vmitos, dolor abdominal), dao heptico y renal, hipertensin y
trastornos neurolgicos (malestar, somnolencia, encefalopata) que pueden causar
convulsiones y provocar la muerte.2,3 Los nios son especialmente vulnerables a los
efectos neurotxicos del plomo, e incluso los bajos niveles de exposicin pueden causar
dao neurolgico grave y, en algunos casos, irreversible. Se calcula que la exposicin al
plomo provoca cada ao alrededor de 600. 000 nuevos casos de nios con deficiencias
intelectuales.4,5
El diagnstico clnico de la intoxicacin por plomo es difcil de establecer cuando no
existen antecedentes claros de exposicin, porque los intoxicados a veces no tienen
sntomas y porque los signos y sntomas, cuando estn presentes, son relativamente
inespecficos. Las investigaciones de laboratorio son la nica va fiable para diagnosticar a
las personas expuestas al plomo, por lo que su papel en la identificacin y el tratamiento
de la intoxicacin por plomo, y en la evaluacin de la exposicin ocupacional o ambiental,
es esencial.1,5.
Actualmente, los laboratorios evalan la exposicin al plomo principalmente a travs de la
determinacin de las concentraciones de plomo en la sangre entera. A pesar de que la
exposicin al plomo tambin se puede detectar en otros tejidos y lquidos corporales,
como el pelo, los dientes, el hueso y la orina, las determinaciones de la concentracin de
plomo en la sangre entera han ganado amplia aceptacin como el ms til para la
deteccin sistemtica y las pruebas diagnsticas. En los nios muy pequeos, el nivel de
plomo en la sangre entera es principalmente un indicador de exposicin reciente, aunque
una parte variable (pero no dominante) de la concentracin total de plomo en la sangre
puede provenir de la acumulacin de plomo en el organismo en el pasado. En los adultos,
particularmente en los trabajadores expuestos, la acumulacin de plomo en el organismo
en el pasado puede ser un factor ms determinante de las concentraciones totales de
plomo en la sangre.6
El lmite de deteccin requerido es un elemento importante a tomar en cuenta. En muchos
pases el lmite para considerar de importancia clnica las concentraciones de plomo en la
sangre se ha ido reduciendo progresivamente. Esto sucede porque indicios cada vez ms
numerosos sugieren que es probable que no haya un umbral de concentracin de plomo
en la sangre por debajo del cual no se producen efectos adversos para la salud. Adems,

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las medidas de salud pblica adoptadas en algunos pases han tenido xito y logrado
disminuir la media de las concentraciones de plomo en la sangre en la poblacin. 6,7 Un
ejemplo se observa en los Estados Unidos, donde la media geomtrica de la
concentracin de plomo en la sangre en la poblacin ha disminuido de 15 - 17 g/dl a
mediados de la dcada de 1970 al valor actual inferior a 2 g/dl. Estos dos elementos han
aumentado el inters por detectar concentraciones cava vez ms bajas de plomo en la
sangre y crearon la necesidad de contar con mtodos analticos ms sensibles. En
situaciones en las que las concentraciones de plomo en la sangre de la poblacin o de
una sub poblacin siguen siendo elevadas, podran seguir siendo tiles algunas
tecnologas ms antiguas con lmites de deteccin ms altos.7
II.

OBJETIVOS

III.

Determinar la concentracin de plomo que presenta una muestra de sangre mediante el


mtodo de Baubach y Burkey.

PARTE EXPERIMENTAL

Nombre del Ensayo: Mtodo de Bambach y Buckey para la determinacin cuantitativa de


plomo en sangre.
Sensibilidad: 0.04 ug/dL de plomo en solucin neutra y 1ug/dL de plomo en solucin
bsica.
Fundamento: Se basa en la formacin de un complejo coloreado de Ditizonato de Plomo,
en medio bsico, dando diferentes tonalidades, desde verde hasta rojo, y que puede
cuantificar por espectofotmetro a 520 nm.

Tcnica Operatoria:
-

Realizar la destruccin de la materia orgnica de la muestra.


Luego en una pera de decantacin agregar 10 mL de muestra problema.
15 mL de citrato de amonio 40%.
III gotas de rojo de fenol (indicador)

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NH4OH (hasta pH = 8) para el medio bsico.


5 mL de KCN 10 % para facilitar la formacin del complejo
1 mL de Hidroxilamina Chorhidrato (16 mg DTZ / 100 mL CHCl3) el cual forma el

complejo.
Agitar por 4 minutos y dejar separar
La muestra pasa de color Verde a rojo (mxima saturacin de metales).
Extraemos la fase clorofrmica.
Agregamos 50 mL de solucin Buffer pH 3.4, agitar por 4 minutos y pasa a la fase

acuosa en Pb.
15 mL de Ditizona estndar (8 mg DTZ / 100 mL CHCl3)
7 mL de solucin amonio cianurada, y agitar constantemente.
Extraer la fase acuosa, que contiene la muestra y leer al espectrofotmetro a 520
nm.

IV.

RESULTADOS

Absorbancia MP: 0.019


Valores para la curva de calibracin
Absorbancia blanco: 0.025
Cantidad de estandar (ug)

Absorbancia St

0.1

10

0.2

15

0.3

20

0.4

Grfica Absorbancia Vs Concentracin de Plomo en ug

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Chart Title
0.6
0.5
0.4
0.3

ABSORBANCIA

0.2
0.1
0
0

10

15

20

[ug]

Ec. Recta: 0.02X = Y


R2= 1
Utilizando la Ecuacion de Recta:
Absorbancia MP: 0.019 MP: 0.95 ug de Pb
0.95 ug de Pb 10 mL de solucion

Dilucion en D.M.O.
5 g de sangre ----D.M.O-------- 100 mL de solucion
0.5 g de sangre -------------------- Extraemos 10 mL de solucion para el metodo
Densidad de la sangre (valor referencial): 1.06 g/mL
0.95 ug de Pb 10 mL 0.5 g de sangre
0.95 ug de Pb 0.5 g de sangre
0.95 ug de Pb

0.0047 dL de sangre

202.13 ug/dL de Pb en sangre

25

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V.

DISCUSION DE RESULTADOS

En la practica el paciente presento 202.13 ug/dL, por lo tanto segn la OMS, sobrepasa el
limite permisible 40 ug/dL. Esto es en base a que hasta 50 ug/dL de plomo en sangre, los
eritrocitos muestran una capacidad elevada de unin al plomo. Por encima de esos
valores, esta capacidad disminuye y aumenta las concentraciones de plomo libre en
plasma. Hasta 100 ug/dL de plomo en sangre menos del 1% del plomo est libre en el
plasma. Esto es importante ya que la proporcin de plomo libre en plasma tiene relacin
con su actividad biolgica8. Desde el punto de vista patologico, el plomo de localiza en los
hueso alterando su estructura cristalina, la medula osea responde alterando sus sistema
enzimaticos que organizan la sintesis de hemoglobina y madura de globulos rojos. En
higado, rios y vasos sanguineos cerebrales resulta en bloqueos de sintesis de
citocromos modificando la detoxicacion de radicales libres.8 Por esta razon la
determinacion de plomo en sangre debe ser complementado por otros analisis de
laboratorio como hemograma completo, determinacion cloporfirina III en sangre y orina,
volumen corspucular medio de los globulos rojos, etc. 9 En caso de la practica no se
presenta informacion del pactiente sobre la realizacion de estas pruebas para un mejor
panorama de la intoxicacion por plomo.
Este hallazgo encontrado en practica es importante, ya que puede ser comparable con la
intoxicaciones por plomo producida en Managua-Nicaragua, en donde se presento un
caso clinico con 246 ug/dL de plomo en sangre, y sus sintomas y signos eran palidez
mucocutanea, periodos de irritabilidad, dificultad para deambular y aumento de reflejos
osteotendinosos.8
En la practica se tomo la densidad de la sangre como una valor de referencia, esto puede
constituir un porcentaje de error de medicion, por esta razon de recomienda ajustar la
densidad de la muestra siguiendo metodos como el de ELKINS. 10 Tambien es importante
tener en cuenta las diluciones realizadas en la D.M.O. para el calculo del volumen real de
la muestra.
Por motivos de optimizacion del metodo, en practica se realizo las extracciones ditizona
innnediatamente despus de la adicin de reactivos y ajuste del pH a aproximadamente
9,2 para la eliminicacion de interferencias.11 Esta parte del metodo es el mas critico debido
a que las interferencias del metodo de Bambach y Burkey son bismutuo, estao y talio,
por el cual debe realizarce una adecuada extraccion de plomo, aunque estos se
encuantran en bajas concentracion en sangre.12 En el caso de los fosfatos presentes en la
sangre pueden causar interferencia por una coprecipitacion.11
La sensibilidad del metodo de bambach y burkey para la determinacion de plomo es muy
baja sensibilidad (1 ug/dL), por esta razon se utilizan otro metodos de mayor sensibilidad
como la espectroscopia de absorcion atomica para la determinacion de plomo que
presenta una sensiblidad de 0.012 ug/mL/1% nm.13
VI.

CONCLUSION
- La concentracion de plomo cuantificado mediante el metodo de Bambach &
Burkey fue 202.13 ug/dL.

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VII.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
1. Catalogacin por la Biblioteca de la OMS: Gua breve de mtodos analticos para
determinar las concentraciones de plomo en la sangre. Organizacin Mundial de la
Salud 2013.
2. Renner Rebecca. Algo no est a plomo: cuando el tratamiento del agua causa
contaminacin con plomo. Salud pblica Mx [revista en la Internet]. 2010.
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