PRUEBA DE TOLERANCIA ORAL A LA

GLUCOSA
INTRODUCCIN
Los niveles de glucosa sangunea son finamente regulados por mecanismos neurales
y hormonales. En ayunas, los niveles de glucemia dependen fundamentalmente de la
produccin heptica (endgena) de glucosa (85%). De este modo, los niveles de
glucemia en ayunas deben permanecer entre 70 y 100 mg/dl despus de 8 horas de
ayuno. Si un individuo ingiere una comida rica en carbohidratos, la glucosa que es
absorbida a nivel de intestino delgado ingresa a la circulacin sangunea y, en
segundos, estimula una rpida secrecin de insulina por parte de las clulas pancreticas (pncreas endocrino). Del mismo modo, se produce una supresin de la
secrecin de glucagn por parte de las clulas del pncreas. La insulina promueve la
captacin de glucosa por las clulas hepticas, adiposas y principalmente en el tejido
muscular (85%) para su posterior utilizacin. De este modo, los niveles de glucemia
regresan a los valores normales. Se establece como normal que 2 horas despus de
una carga de 75 gramos de glucosa anhidra, los niveles de glucemia deben estar entre
70 y 140 mg/dl (Figura 1).
I.
OBJETIVOS DE LA PRCTICA:
Al finalizar la prctica las (os) alumnas (os) debern estar en capacidad de:
.Evaluar los mecanismos de control homeostticos de los niveles circulantes de
glucosa en sangre.
.Entender los mecanismos de liberacin y accin de la Insulina.
.Conocer los mtodos para determinar los niveles de glucosa en sangre y orina.
.Realizar una prueba de tolerancia oral a la glucosa.
.Leer e interpretar una curva de tolerancia a la glucosa.

II.

MATERIAL REQUERIDO PARA LA EXPERIENCIA PRCTICA:

Glucosa anhidra 600 gr o en su defecto sacarosa

Tubos de ensayo 13 x75 (8 gradillas con 10 tubos c/u)
Pipetas automticas de 500 ul y de 10 ul
Reactivo de Glucosa + estndar de la misma
Espectrofotmetro
Centrifuga
300 ml de limonada por grupo (SOLO LIMON Y AGUA)
Vasos descartables, mandilones, plumones para marcar vidrio.

III.

PROCEDIMIENTO:

1.-Se seleccionarn con antelacin voluntarios(as) entre el grupo de prctica

correspondiente
(Que no hayan sido debidamente diagnosticados como diabticos con anterioridad)

2.-Los (as) voluntarios(as) seleccionados(as) debern cumplir un ayuno nocturno

riguroso, por
Lo menos con 12 horas con anterioridad a la realizacin de la prctica.
3.-A cada voluntario (a) se le realizar una prueba de glicemia basal en ayunas, la cual
se
Realizar tomando una muestra de sangre que ser la basa
4.-Preparar la solucin glucosada: pesar 75 gr de Dextrosa y disolverlo en 300 ml de
limonada que ser ingerida en su totalidad en 3 minutos por el (la) voluntario
5.-Procdase a obtener muestras de sangre a los 30, 60, 90 y 120 minutos, despus
de 15 minutos centrifugar la sangre para obtener el suero con que se trabajara
6.- Medir los niveles de glicemia
Enumerar 7 tubos T (blanco) ST (estndar) B(basal ) 30, 60,90 y 120
A cada tubo agregar 500 ul del reactivo de glucosa
Luego aadir 5 ul de estndar, del suero basal, de 30 etc., mezclar
Leer en el espectrofotmetro, sacar los clculos respectivos para obtener la
concentracin de la glucosa en mg%
7.-Anote los resultados obtenidos y grafquelos para obtener la curva correspondiente
-RESULTADOS OBTENIDOS-DISCUSION.
IV.

RESULTADOS

TABLA N1
VALORES OBTENIDOS DE GLICEMIA
Glicemia
ayunas
(mg/dl)

en

Glocemia a las
30 min (mg/dl)

Glicemia a las 60
min (mg/dl)

Glicemia a los
90 min (mg/dl)

Glicemia a los 120

min (mg/dl)

0,1421

0,1807

0,2636

0,2814

0,2763

BASAL

ESTANDAR

0.1159

0.1254

1.- Restamos PRUEBA ESTANDAR PRUEBA BASAL.

0.12540.1159=0.0095
2.- Restamos los valores obtenidos de la resta VALORES DEL PLASMA PRUEBA BASAL
1.
2.
3.
4.
5.

GLICEMIA EN AYUNAS
GLICEMIA A LOS 30 MIN
GLICEMIA A LOS 60 MIN
GLICEMIA A LOS 90 MIN
GLICEMIA A LOS 120 MIN

0.1421 0.1159 = 0.0262

0.1807 0.1159= 0.0648
0.2636 0.1159 = 0.1477
0.2814 0.1159 = 0.1655
0.2763 0.1159 = 0.1604

Resultados Finales
Basal
30
113.32
144

60
210

90
224

120
213

Curva de tolerancia a la glucosa

250
210

200
150

224

213

144

113.32
100
50
0
Basal

30

60

90

120

Curva de tolerancia a la glucosa

Grafico1: Se observa en la grfica que la curva de tolerancia a la glucosa con

sus resultado basal comparado con el resultado normal de 80mg/100ml. A los
30 y 60 minutos, nuevamente se eleva del rango normal 110mg/100ml y
170mg/100ml. En 90 y 120 minutos, los valores normales serian de
70mg/100ml a 120mg/100ml. Por haber comido antes de la prueba los valores
pasan de 200mg/100ml.

V.
-

DISCUSIN PARTE 1
Segn la pgina Clnica Dam Anlisis de glucemia, nivel de glucemia (azcar
en la sangre) o glucemia en ayunas es un anlisis de sangre que mide la
cantidad de un azcar, llamado glucosa, en una muestra de suero. El examen
se puede hacer mientras uno est ayunando o en forma aleatoria. Si uno va a
practicarse un examen de glucemia en ayunas, NO debe comer ni beber nada
durante 8 horas antes del examen. Hasta 100 miligramos por decilitro (mg/dL)
se consideran normales para un examen de glucemia en ayunas.

- Alumnos: La prueba de tolerancia la glucosa se realiz con una persona con

malo estado de salud en ayunas. Se observ en la prctica que su primer
resultado se obtuvo 113.32 ml por 100 ml, lo que significa que no est en los
lmites normales; los cuales 60 y 100mg /ml.
- En este caso nuestro alumno puede haber comido antes esto hara con que el
resultado saliera alterado.
- Cuando se proporcion a la persona la limonada azucarada se observ que
los niveles de glucosa subieron. En la prctica no se utiliz glucosa,
sustituyendo por sacarosa.
-

Segn el libro Houssay Fisiologa pg. 54. El azcar comn, es la sacarosa,

que contiene glucosa y fructosa, ambas molculas tienen un peso molecular de
180
gramos.
La fructosa no es utilizada inmediatamente por el organismo, de all su uso en
edulcorantes
para
diabticos.
Por lo cual, si vas a sustituir la glucosa, por el azcar comn, deberas usar el
doble, o sea 150 gramos, pues en el proceso digestivo y de absorcin, el
azcar, se desdobla y libera las molculas de glucosa y las de fructosa.
Si necesitas que el metabolismo tenga 75 gramos, si tomas solo los 75 gramos,
tendras la mitad de glucosa o sea 37.5 gr. Si tomas los 150, disueltos en un
vaso de agua, tendras los 75 g. metablicos que necesitas para la prueba.
-Alumno: En el experimento fue utilizado 100gr. de sacarosa siendo 75 gramos
de glucosa y 25 gramos de fructosa se necesitara de otros 75 gramos para
que salga el valor normal en la prueba

Segn FISIOLOGA HUMANA DE STUART IRA FOX pg. 84: Treinta minutos
despus de la ingestin de la glucosa, cuando sta ya se haya trasladado al
torrente sanguneo, se realizar otra extraccin: se tomarn muestras de
sangre una, dos y tres horas despus de beber la glucosa. Estas pruebas se
analizarn para ver cmo ha respondido el cuerpo a la glucosa .Para que los
resultados sean fiables la persona que se somete a las pruebas debe estar en
buenas condiciones de salud, dado que, desafortunadamente, un simple
resfriado o cualquier otra enfermedad podra falsear los resultados. Tambin es
imprescindible que la prueba se realice en ayunas, porque un solo caf o bien

fumar
un cigarrillo puede trastocar
los niveles del anlisis.
Mientras se realiza la prueba oral de tolerancia a la glucosa, el paciente debe
estar en reposo, por lo que se recomienda que lea un libro o vea la televisin.
Las extracciones en el plazo de tres horas despus de haber bebido la glucosa
mostrarn el aumento y la disminucin de los niveles de azcar a lo largo del
tiempo. Una persona que no padece Diabetes presentar un pico de los niveles
de glucosa y, despus, estos disminuirn rpidamente. Pero un diabtico no
ser capaz de tolerar la glucosa y sus niveles presentarn un pico. Despus
irn disminuyendo gradualmente y con mucha ms lentitud. Aunque las
pruebas muestren niveles altos de Glucemia, la prueba oral de tolerancia a la
glucosa deber realizarse una segunda vez antes de poder emitir un
diagnstico firme de diabetes, con el fin de asegurar que ningn factor externo
haya
falseado
los
resultados.
- Alumno: como refiere un autor un simple malestar puede alterar la prueba,
este no fue el caso de nuestra prueba pero al parecer el compaero Percy
ingiri un caf y jugo. Esto es el resultado de su elevada glucosa en sangre
que registra esta prueba por lo tanto esta prueba sali falseada.

-Segn la pg. Nutricin para corredores cuando los niveles de azcar en

sangre empiezan a subir es la insulina la que se encarga de mantenerlos a
raya, a travs de varios mecanismos: estimula la entrada de glucosa en el
msculo y en el tejido adiposo (retirndola del torrente sanguneo), estimula la
formacin de glucgeno (utilizando la glucosa) en el hgado y en el msculo,
estimula la formacin de grasa (partiendo de la glucosa) en el hgado y en
tejido adiposo, estimula la captacin de aminocidos por parte del msculo y
favorece la sntesis de protenas en el mismo. Por todo ello decimos que es
una hormona hipoglucemiante (baja niveles de azcar en sangre) y
anablica (estimula la formacin del msculo y tejido adiposo).
Alumno: En el cuarto y quinto resultado, la glucosa debera haber disminuido
quiere decir que una glucosa de 200 mg/dl o ms despus de dos horas de
haber tomado la solucin glucosada. Confirma el diagnostico de que hubo un
error en la prueba y no fue realizada conforme las indicaciones
-

El ultimo resultado una persona diabtica suele encontrase por encima de

110mg/100ml y muchas veces por encima de 140mg/100ml. Cuando estas
personas ingieren glucosa, la concentracin de esta aumenta mucho ms en la
sangre.

VI.
DISCUSIN PARTE 2
1. En qu lugar del tubo intestinal se absorbe la glucosa ingerida, y cul es
su mecanismo bsico de absorcin? Puede utilizar esquemas o dibujos
La absorcin de estos azcares se realiza fundamentalmente en la porcin final del
duodeno e inicial del yeyuno, y las molculas absorbibles son la glucosa, la galactosa
y la fructosa, productos de la accin enzimtica del ribete en cepillo. El resto de los
posibles monosacridos (por ejemplo la manosa) no se absorben y quedan en el
lumen, de forma que el incremento de su concentracin luminal puede llevar a un
incremento de la presin osmtica luminal, con el consecuente trasvase de agua hacia
el lumen intestinal y la aparicin de diarrea.
- Explicacin:
La absorcin intestinal de monosacridos se da por un mecanismo de cotransporte
con el sodio. En primer lugar, el transporte activo de los iones sodio, que cruzan las
membranas basolateras de las clulas del epitelio intestinal hacia la sangre, provoca el
descenso de la concentracin intracelular del ion. En segundo lugar, esta reduccin de
sodio intracelular induce el paso de sodio desde la luz intestinal al interior de la clula
epitelial a travs del borde en cepillo, gracias a un transporte activo secundario. El
sodio se combina primero con una protena de transporte pero esta no podr llevar a
cabo su funcin si no se combina con alguna otra sustancia adecuada, como la
glucosa. La glucosa intestinal se combina tambin con la misma protena de
transporte, de modo que tanto el sodio como la glucosa se transportan juntos hasta el
interior de la clula. La menos concentracin de sodio dentro de la clula, empuja
literalmente al ion y a la glucosa que lo acompaa al interior del enterocito. Una vez
all, otras protenas de transporte y enzimas facilitan la difusin de la glucosa hacia el
espacio paracelular a travs de la membrana basolateral, y de ah a la sangre.

2. Indique el lugar de produccin de la insulina.

La insulina se sintetiza en las clulas beta con la maquinaria celular habitual para la
sntesis de la protena, primero las ribosomas acoplados al retculo endoplasmtico
traducen el ARN de la insulina y forman y forman una prepoinsulina. Esta
prepoinsulina inicial tiene un peso molecular de aproximada 11500, pero luego se
desdobla en el retculo endoplasmatico para formar la proinsulina, con un peso
molecular cercano a 9000 y cosiste en tres cadenas de pptido A, B Y C. La mayor
parte de la proinsulina sigue escindindose en el aparato de Golgi para formar insulina
conectada a uniones disulfuro y la cadena C y pptidos denominadas pptidos de
conexin (pptido C). la insulina del pptido C empaquetan en los grnulos secretores
y son secretados en cantidades equimolares . Aproximadamente 5-10% del producto
final secretado persiste en forma de preinsulina. 1
3. -Cmo acta la insulina una vez liberada a la circulacin sangunea?
Qu accin tiene a nivel de hgado y msculo?
La mayor parte de la insulina liberada hacia la sangre circula de forma no ligada; su
semivida plasmtica es de unos 6 minutos por trminos medio y desaparece de la
circulacin de unos 10 a 15 minutos. Con la excepcin de una parte de insulina que se
une a los receptores de las clulas efectores el resto se degrada por efecto de la
enzima insulinasa, sobre todo en el hgado y, menor medida, en los riones y en los
msculos, y de forma muy ligera un casi todos los dems tejidos. Su desaparicin
inmediata del plasma tiene inters porque, a veces, es tan importante desactivar con
rapidez el efecto de insulina como activar sus funciones reguladoras.2
4. -Mencione, Cmo acta la insulina a nivel de la membrana plasmtica
celular para lograr o facilitar el pasaje o entrada de glucosa a la misma?
La insulina es la hormona hipoglucemiante. Como tal, su funcin primaria es reducir la
concentracin de glucosa en sangre (glucemia) promoviendo su transporte al interior
de las clulas, pero slo acta en este sentido sobre el tejido adiposo (adipocitos), el
msculo (fibras musculares o miocitos) y el corazn (fibras cardiacas o
miocardiocitos). La insulina realiza esta funcin activando el transportador de glucosa
GLUT4, que slo se encuentra en la membrana plasmtica de esas clulas. La
glucosa es una sustancia poco polar, y como tal puede difundir libremente por las
membranas de las clulas. Sin embargo, todas las clulas tienen transportadores
especficos de glucosa para acelerar su trnsito a travs de sus membranas, pero el
nico transportador dependiente de insulina est slo en las clulas citadas, las cuales
tienen adems transportadores no dependientes de insulina.
Los transportadores de glucosa son protenas integradas en la membrana plasmtica
de las clulas que permiten o facilitan el transporte de sustancias especficas en
ambos sentidos (del medio extracelular al citoplasma, o en sentido contrario, de
acuerdo con las condiciones termodinmicas). Se conocen hasta doce transportadores
1 GUYTON Y HALL- PSICOLOGA MDICA PAG:940
2 GUYTON Y HALL- FISIOLOGA MDICA PAG:940

diferentes de glucosa El ms general y ms ubicuo es GLUT1. El transportador GLUT3

se encuentra slo en el cerebro, y GLUT4 (que se encuentra en los msculos, el
corazn y el tejido adiposo) es el nico de los doce sensible a la insulina. As, la
mayora de las clulas no necesitan insulina para consumir glucosa.
5.

Con base a los resultados obtenidos, Usted grfico la Curva de

Tolerancia Oral a la Glucosa en tres diferentes tiempos. Analice el grfico
y discuta en el grupo las implicaciones y consecuencias fisiolgicas
derivadas del mismo. Brevemente, anote los comentarios ms
importantes.
6. Explique la razn del incremento y posterior decremento de la glicemia
en la Curva de tolerancia Oral a la Glucosa, y discuta qu hormonas
pueden estar implicadas en este efecto fisiolgico?
LAS RESPUESTAS DE LAS PREGUNTAS 5 Y 6 ESTN EN LA DISCUSIN PARTE
UNO
7. Qu situaciones podran alterar los resultados dando falsos positivos?
- Cuando agregamos reactivos en cantidades inadecuadas a las muestras.
- Una mala calibracin de esfectofotrmetro.
- Cuando la persona al cual se le va a ser la prueba no ha cumplido
adecuadamente los pasos del ayuno.
- 3 DIAS ANTES DE LA PTGO
- Planifica comer tres comidas saludables y meriendas durante 3 das antes de
la prueba. No necesitas comprar nada en especial, pero necesitas asegurarte
que tengas alimentos saludables para comer. Tus comidas deben ser
balanceadas con muchos carbohidratos. Los alimentos que contienen
carbohidratos incluyen:
- Frutas
- Panes
- Cereal
- Pasta
- Arroz
- Galletas
- Verduras que contienen almidn (maz/alverjas/zanahorias)
- 12 HORAS ANTES DE LA PTGO
- NO comas, fumes o realices ejercicios fatigosos 12 horas antes de la prueba.
(Por ejemplo: si tu prueba est programada por la maana a primera hora,
ejemplo: a las 8 AM-No comas, fumes, o hagas ejercicio que demanden mucho
esfuerzo luego de las 8pm la noche anterior). Puedes tomar agua pura, NO con
saborizantes.
8.

Con los resultados obtenidos, podra Usted indicar si los (las)

voluntarios (as) participantes en el ensayo, son sujetos sanos o padecen
trastornos de utilizacin de la glucosa.
Son sujetos sanos porque los valores normales de una persona en ayunas son
entre 80 10 mg/100ml, y cuando ingiere glucosa despus de dos horas no
debe ser mayor de 140 mg/100ml.

VII.
CONCLUSIONES:
Segn Fisiologa de Guyton y Hall

Una curva anormal de tolerancia a la glucosa; esto explica un mal funcionamiento

del metabolismo de la glucosa regulado por la insulina. En su efecto inicial hay un
mayor transporte de glucosa, en su efecto intermedio se da mayor sntesis de
glucgeno y de cidos grasos y en su efecto tardo hay ms glucosa en la
sangre..
Cuando una persona sana ingiere 1g de glucosa por kg de peso corporal en
ayunas, la glucemia se eleva desde aproximadamente 90mg/100ml hasta 120 a
140mg/100ml y luego retorna a la normalidad en unas 2 horas.
Alumno: Tolerancia Anormal a la Glucosa: Se considera que una persona
tiene una respuesta anormal de su glucosa a la insulina, es decir, que es
intolerante a la glucosa, cuando el nivel de glicemia en ayunas fue mayor de 100
mgs/dl y menor a 125 mgs.dl pero el nivel de glicemia 2 horas despus de la
ingesta de la solucin glucosada, estuvo entre 140 mg/dl. a 199 mg/dl.. En este
caso la nuestro resultado fue de 133 mgs/dl en ayunas y el nivel despus de la
ingesta estuvo en 213 mg/dl se lleg esto como causa que el alumno haya
comido un diagnstico ms preciso sera una pre diabetes

PRCTICA N 04
DETERMINACIN DE PROTEINA TOTAL, ALBMINA Y GLOBULINAS
I.INTRODUCCIN

Las protenas son macromolculas orgnicas ampliamente distribuidas en el organismo. Actan

como elementos estructurales y de transporte y aparecen bajo la forma de enzimas, hormonas,
anticuerpos, factores de coagulacin, etc.
En el plasma las protenas contribuyen a mantener el volumen del fluido circulante transportan
sustancias relativamente insolubles y actan en la inactivacin de compuestos txicos y en
defensa contra agentes invasores.
La determinacin de protena total es til para el monitoreo de cambios ocasionados por
diversos estados de enfermedad. En condiciones patolgicas como perdidas renales,
desnutricin, infecciones prolongadas, etc. suelen presentarse hipoproteinemias con desarrollo
de edema y ascitis o acumulacin de lquido en la cavidad abdominal, mientras que en otras
como mieloma mltiple, endocarditis bacteriana y hemoconcentracin de diversos orgenes (ej.
Deshidratacin) se observan hiperproteinemias.
La albmina es el mayor componente proteico del suero. Se sintetiza en el hgado y posee una
gran capacidad de cambios en su configuracin.
Entre sus funciones se distinguen el transporte de una amplia variedad de sustancias como
hormonas esteroides, cidos grasos, bilirrubina, catecolaminas, que en forma libre son
insolubles en medio acuoso. Tambin contribuye al mantenimiento de la presin osmtica que
estara relacionado con su bajo peso molecular y su gran carga neta. Los aumentos de
albumina son ocasionales y se relacionan casi siempre con la deshidratacin que provoca la
reduccin en el contenido de agua plasmtica.
La hipoalbuminemia ocurre en la perdida excesiva de protenas, en el sndrome nefrtico,
desnutricin, infecciones prolongadas, quemaduras severas, otras causas son la dieta
deficiente. Enfermedad heptica o malabsorcin.

La globulina es una protena de la sangre. Junto con la albmina constituyen

las dos protenas sricas. Reagrupadas en cuatro familias de protenas -las
alfa 1 globulinas, las alfa 2 globulinas, las beta globulinas y las gamma
globulinas- permiten transportar lpidos, iones y otras vitaminas. La
globulina contribuye a la constitucin del cogulo de sangre y participa en la
defensa del organismo en el sentido que contiene anticuerpos. Por ejemplo,
en caso de inflamacin la tasa de alfa 1 aumenta en la sangre.
II.OBJETIVOS
2.1. Determinar la concentracin de protena total, en una muestra de suero sanguneo como
apoyo al diagnstico clnico, de acuerdo a los mtodos actuales.
2.2. Determinar la concentracin de albumina, en una muestra de suero sanguneo como
apoyo al diagnstico clnico, mediante el mtodo colorimtrico.
III.MATERIALES
-

Espectrofotmetro.
Pipetas automticas de 10 100 ul y de 100 a 1000 ul.
Tubos de ensayo y gradilla
Tubos de espectrofotmetro
Suero sanguneo
Kit de reactivos para la determinacin de Protenas Totales
Kit de reactivos para la determinacin de Albmina

IV.PROCEDIMIENTO
4.1 Protenas Totales
Fundamento:

Los enlaces peptdicos de las protenas reaccionan con el ion cprico en medio alcalino, para
dar un complejo color violeta con mximo de absorcin a 540 nm.
En tres tubos de ensayo marcados B (Blanco), E (Estndard) y D (Desconocido), colocar:
B
Estndard
Muestra
Reactivo

E
----2 ml

D
20 ul
--2 ml

--20 ul
2 ml

Mezclar e incubar durante 15 minutos a 37C. Leer en espectrofotmetro a 540 nm, llevando a
cero con el blanco de reactivo.
Calculo de los resultados:
Protena Total (g/dl)
=

Dxf

f = Estandard (g/dl)
Abs. Estndar

Donde: D = Desconocido o muestra problema

f = Factor
Valores de referencia:
Protena Total 6.1 a 7.9 g/dl (6 8 g/dl)
4.2. ALBMINA
Fundamento:
La albumina reacciona con la forma aninica del bromocresol verde (BSG), con una
absorbancia mxima a 625 nm.
En tres tubos de ensayo marcados B (Blanco), E (Estandard) y D (Desconocido), colocar:

Estndard
Muestra
Reactivo

----2 ml

10 ul
--2 ml

--10 ul
2 ml

Mezclar e incubar durante 10 minutos entre 15 y 28C. Leer en espectrofotmetro a 625 nm,
llevando a cero con el blanco de reactivo.
Calculo de los resultados:
Albumina (g/dl) =

Dxf

f = Estandard (g/dl)
Abs. Estndar
Donde: D = Desconocido o muestra problema
f = Factor

Valores de referencia:
Albumina 3.5 a 4.8 g/dl (3.5 5 g/dl)
4.3 GLOBULINAS
Protenas totales albmina = Globulinas
Indice de Hoffman
Relacin A/G 1.2 a 2.2

Cuestionario
1. Que mtodos se conocen para el estudio de las protenas plasmticas?
2. En que consiste la realizacin de un proteinograma?
3. Describa las patologas relacionadas a las protenas: Inflamacin aguda, inflamacin crnica,
enfermedades hepticas, sndrome nefrtico, hipogammaglobulinemia y perdida de protenas
por el aparato digestivo.