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UNIVERSIDAD DE QUINTANA ROO

DIVISION DE CIENCIAS DE LA SALUD

PRCTICA DE LABORATORIO DE ESTRUCTURA


Y FUNCIN MOLECULAR

PRACTICA 2: OSMOSIS
Introduccin
La osmosis se define como una difusin pasiva, caracterizada por el paso del
agua (disolvente) a travs de la membrana semipermeable, desde la solucin ms
diluida a la ms concentrada. La diferencia en concentraciones de solutos produce
un presin conocida como presin osmtica, la cual es la presin que se debe
aplicar a una solucin para detener el flujo neto de disolvente a travs de
una membrana

semipermeable.1 La

cuatro propiedades

coligativas de

presin

osmtica

las soluciones(dependen

es
del

una

de

nmero

las
de

partculas en disolucin, sin importar su naturaleza).


La osmosis es una de las caractersticas principales a tener en cuenta en las
relaciones de los lquidos que constituyen el medio interno de los seres vivos, ya
que la membrana plasmticaregula la entrada y salida de soluto al medio
extracelular que la rodea, ejerciendo de barrera de control.
En la mayora de las membranas la permeabilidad al agua es muy elevada y el
movimiento pasivo es extremadamente rpido, en muchos casos el equilibrio del
agua se alcanza de manera instantnea. El tiempo medio de intercambio del agua
en eritrocitos humanos tiene un valor de 4,5milisegundos.
La smosis puede entenderse muy bien considerando el efecto de las diferentes
concentraciones de agua sobre la forma de las clulas. Para mantener la forma de
un clula, por ejemplo un hemate, esta clula debe estar rodeada de una
solucin isotnica, lo que quiere decir que la concentracin de agua de esta

solucin es la misma que la del interior de la clula. En condiciones normales, el


suero salino normal (0.9% de NaCl) es isotnico para los hemates.

Si los hemates son llevados a una solucin que contenga menos sales (se dice
que la solucin eshipotnica), dado que la membrana celular es semi-permeable,
slo el agua puede atravesarla. Al ser la concentracin de agua mayor en la
solucin hipotnica, el agua entra en el hemate con lo que este se hincha,
pudiendo eventualmente estallar (este fenmeno se conoce con el nombre
dehemolisis.

Por el contrario, si los hemates se llevan a una solucin hipertnica (con una
concentracin de sales superior a la del hemate) parte del agua de este pasar a
la solucin producindose el fenmeno decrenacin y quedando los hemates
como "arrugados".

Algunas molculas son demasiado grandes como para difundir a travs de los
canales de la membrana y demasiado insolubles en lpidos como para poder
difundir a travs de la capa de fosfolpidos. Tal es el caso de la glucosa y algunos
otros monosacridos. Esta sustancias, pueden sin embargo cruzar la membrana
plasmtica mediante el proceso de difusin facilitada, con la ayuda de una
proteina transportadora. En el primer paso, la glucosa se une a la protena
transportadora, y esta cambia de forma, permitiendo el paso del azcar. Tan
pronto como la glucosa llega al citoplasma, una kinasa (enzima que aade un
grupo fosfato a un azcar) transforma la glucosa en glucosa-6-fosfato. De esta
forma, las concentraciones de glucosa en el interior de la clula son siempre muy
bajas, y el gradiente de concentracin exterior --> interior favorece la difusin de la
glucosa.

Objetivos
Se pretende que el estudiante adquiera la capacidad de:
1.- Comprender fenmenos de osmosis realizada en clulas animales.
2.- Preparacin de soluciones en porcentajes.
3.- Desarrollar la capacidad de anlisis de grficos y tablas obtenidos de los
resultados de esta prctica.

Materiales
El siguiente material se necesita por cada 8-10 estudiantes
1 Gradilla
16 Tubos de ensayo
8 Tubos de centrfuga
1 micropipeta de 10-10l
1 micropipeta de 100-1000l
Puntas amarillas
Puntas azules
Centrfuga clnica
Espectrofotmetro
1 Jeringa de 5 ml
1 Tubos morado para verter la sangre
Soluciones de NaCl al 2%, 3%, 4%, 5%, 6%, 7%, 8%
Soluciones de Glucosa al 0.5%, 1%, 2%, 3%, 4%, 5%, 6%
Procedimiento
1.- Extraiga 3 ml de sangre venosa de un compaero y virtalos a un tubo de
ensayo que contenga 1mg de heparina

2.- Rotule 7 tubos de ensayo con las concentraciones del NaCl. Agregue 5 ml de la
solucin que le corresponda a cada tubo.
3.- Rotule 7 tubos de ensayo con las concentraciones de glucosa. Agregue 5 ml de
la solucin que le corresponda a cada tubo.
4.- Control del experimento. Agregar 5ml de agua destilada en un tubo de ensayo
(rotulado como +CTR=control positivo). Otro tubo debe rotularse como control
positivo y contendr solucin fisiolgica 0.9% (+CTR).
5.- Agregue a cada uno de los tubos 3 gotas de sangre previamente mezclada.
Debes mezclar gentilmente la mezcla de sangre con la solucin correspondiente.
6.- Deje reposar por un espacio de 10 minutos cada tubo, al paso de este tiempo
mida la turbidez de los tubos poniendo un papel blanco en la parte de atrs, para
observar adecuadamente el rompimiento de los eritrocitos.
7.- Mide arbitrariamente la cantidad y el color del precipitado. Asigna el valor del
100% al precipitado con la solucin que contiene el 0.8% de NaCl o 5% de
glucosa.
8.- Para medir la cantidad de Hb liberada al romperse el eritrocito con las
concentraciones hipotnicas e hipertnicas de glucosa y NaCl se cuantificar la
cantidad de Hb mediante un espectrofotmetro. La absorbancia a la que debes
leer cada uno de los sobrenadantes el 550. Los tubos se centrifugan 3400rpm por
1 minuto.
Preguntas a contestar:
1.- Explique lo que sucedi con cada una de las concentraciones de soluciones de
NaCl y glucosa.
2.- Interprete la forma en la que actan los eritrocitos a la concentracin de 0.5%
de NaCl y de glucosa
3.- De acuerdo con los resultados puedes hacer una asociacin entre el grado de
turbidez y la concentracion tanto de NaCl y glucosa. Fundamente su respuesta.
4.- Compare entre las concentraciones de NaCl y las concentraciones de glucosa.
Y luego compare cada una entre glucosa y NaCl.

5.- Cmo es la concentracin del tubo control comparativamente con las


concentraciones de NaCl y glucosa.
Bibliografia
http://bibliotecadigital.ilce.edu.mx/sites/ciencia/menu.htm
http://bibliotecadigital.ilce.edu.mx/sites/ciencia/volumen1/ciencia2/16/html/fenomen
o.html
1 Voet, Donald; Voet, Judith G.; Pratt, Charlotte W. (2001). Fundamentals of
biochemistry. Wiley. p. 30.ISBN 9780471417590.