Penilaian in vitro aktivitas sitotoksik

Sitotoksisitas MEP serta bahwa dari lima senyawa terisolasi diukur menggunakan uji sulphorhodamine B (SRB) [22] terhadap lima
baris sel kanker manusia: sel kanker usus besar (HCT116), sel kanker laring baris (HEP2), sel kanker payudara (MCF7), sel kanker
leher rahim baris (HeLa) dan hati sel kanker (HepG2). Penilaian ini dilakukan di National Cancer Institute di Mesir (NCI). IC50
(dosis yang mengurangi kelangsungan hidup untuk 50%) dan IC10 (dosis yang mengurangi kelangsungan hidup 10%) nilai untuk
setiap sampel diuji dihitung dan dicatat dalam (Tabel 3) dibandingkan dengan obat referensi Doxorubicin, yang digunakan
sebagai kontrol positif dalam penelitian ini. Hasil dihitung sebagai rata-rata tiga percobaan standard error.

Penilaian in vivo karsinoma hepatoseluler (HCC)

Hewan dan pengelompokan: Empat puluh tikus betina bawaan strain albino putih tikus berat cocok (120-150 g) dimasukkan
dalam penelitian ini. tikus yang dipelihara sesuai dengan pedoman standar Kelembagaan Hewan Peduli. Hewan diberi makan diet
semi-dimurnikan yang berisi (g / kg): 200 kasein, 555 sukrosa, 100 selulosa, 100 campuran lemak, 35 vitamin campuran, dan 35
campuran mineral. Hewan-hewan itu dibagi rata ke berikut kelompok: kelompok 1: kelompok tikus kontrol, kelompok 2: HCC
(hepatocellular karsinoma) kelompok yang diinduksi oleh dietil-nitroseamine (DENA) dan CCl4, Kelompok 3: (HCC-1) kelompok
menerima MEP (100 mg / kg b.wt) dan kelompok 4: (HCC-2) kelompok menerima MEP (200 mg / kg b.wt).
Persiapan model HCC: Hepatocarcinogenesis diinduksi kimia pada tikus dengan suntikan dosis intraperitoneal tunggal
diethylnitrosamine dengan dosis 200 mg / kgb.wt. diikuti oleh mingguan suntikan subkutan CCl4 dengan dosis 3 ml / kg.b.wt.
selama 6 minggu. Pada saat yang tepat scarification, sampel darah dinilai untuk fetoprotein - (AFP) dengan ELISA (disediakan
oleh Sistem Diagnostik Laboratorium, Inc., Webstar, Texas, USA.) Menurut produsen instruksi, Alanine Amino Transferase (ALT),
aspartat Amino Trasferase (AST) dan albumin oleh uji laboratorium biokimia rutin. Selain itu, jaringan hati dikumpulkan ke
Phosphate Buffer Serum (PBS) dan tetap semalam di 40 g / l paraformaldehyde di PBS pada suhu 4 C. Serial 5- um bagian dari
hati diwarnai dengan Hematoksilin dan Eosin (HE) dan diperiksa secara histopatologi.
Analisis statistik: Semua data dinyatakan sebagai mean SEM
(n = 10). Berarti dibandingkan dengan One-Way Analisis Varians
(ANOVA) dilanjutkan dengan uji Tukey-Kramer. Nilai-nilai yang dianggap
menjadi berbeda secara signifikan ketika nilai P kurang dari 0,01.