Reconocimiento de protenas.

Por coagulacin de protenas:

Las protenas, debido al gran tamao de sus molculas, forman con el agua soluciones
coloidales. Estas soluciones pueden precipitar con formacin de cogulos al ser calentadas a
temperaturas superiores a los 70C o al ser tratadas con soluciones salinas, cidos, alcohol, etc.
La coagulacin de las protenas es un proceso irreversible y se debe a su desnaturalizacin por
los agentes indicados, que al actuar sobre la protena la desordenan por la destruccin de
subestructura terciaria y cuaternaria.

Procedimiento:
Para ver la coagulacin de las protenas se puede utilizar clara de huevo, para conseguir ms
volumen puede una dilucin de clara de huevo en agua, de forma que quede una mezcla an
espesa.
1.

Colocar en un tubo de ensayo una pequea cantidad de clara de huevo.

2.

Aadir 5 gotas de cido actico y calentar el tubo a la llama del mechero.

Reacciones coloreadas.
Reaccin xantoproteica

Es debida a la formacin de un compuesto aromtico nitrado de color amarillo, cuando las

protenas son tratadas con cido ntrico concentrado. La prueba da resultado positivo en aquellas
proteinas con aminocidos portadores de grupos bencnicos, especialmente en presencia de
tirosina. Si una vez realizada la prueba se neutraliza con un lcali vira a un color anaranjado
oscuro.
La reaccin xantoproteica se puede considerar como una sustitucin electroflica
aromtica de los residuos de tirosina de las protenas por el cido ntrico dando un
compuesto coloreado amarillo a pH cido.
Segn las guas qumicas es una reaccin cualitativa, ms no cuantitativa. Por
ende determina la presencia o no de protenas. Para cuantificar se usa otra
reaccin, como la de Biuret, y se hace un anlisis espectro fotomtrico.

Procedimiento
1.

Poner en el tubo de ensayo de 2 a 3 cc. de solucin problema (clara de huevo).

2.

Aadir 1 cc. de HNO3 concentrado.

3.

Calentar al bao mara a 100C.

4.

Enfriar en agua fra

5.

Aadir gota a gota una disolucin de sosa al 40%.

Reaccin de Biuret.
La producen los pptidos y las protenas, pero no los aminocidos, ya que se debe a la
presencia del enlace peptdico (- CO- NH -) que se destruye al liberarse los
aminocidos.
Cuando una protena se pone en contacto con un lcali concentrado, se forma una
sustancia compleja denominada Biuret.

Debido a dicha reaccin fue que observamos que al agregar el reactivo de sulfato de
cobre mas solucin de protena precipito una coloracin violeta. Quedando en el fondo
del tubo una tonalidad azul cielo reaccin positiva.
Precipitando a una coloracin amarilla la reaccin nos torna negativa al no haber
presencia de protenas.

La reaccin se basa en la formacin de un compuesto de color violeta, debido a la

formacin de un complejo de coordinacin entre los iones Cu2+ y los pares de
electrones no compartidos del nitrgeno que forma parte de los enlaces peptdicos
presentando un mximo de absorcin a 540 nm.
Da positiva esta reaccin en todos los compuestos que tengan dos o ms enlaces
peptdicos consecutivos en sus molculas.

Procedimiento
1.

Tomar un tubo de ensayo y poner unos 3 cc. de albmina de huevo.

2.

Aadir 2cc. de solucin de hidrxido sdico al 20%.

3.

A continuacin 4 5 gotas de solucin de sulfato cprico diluida al 1%.

4.

Debe aparecer una coloracin violeta-roscea caracterstica.

Reaccin de los aminocidos sulfurados

Se pone de manifiesto por la formacin de un precipitado negruzco de sulfuro de plomo. Se

basa esta reaccin en la separacin mediante un lcali, del azufre de los aminocidos, el cual al
reaccionar con una solucin de acetato de plomo, forma el sulfuro de plomo.
Procedimiento
1.

Poner en el tubo de ensayo de 2 a 3 cc. de albmina de huevo (clara de huevo).

2.

Aadir 2 cc. de solucin de hidrxido sdico al 20%.

3.

Aadir 10 gotas de solucin de acetato de plomo al 5%.

4.

Calentar el tubo hasta ebullicin.

5.

Si se forma un precipitado de color negruzco nos indica que se ha formado sulfuro de

plomo, utilizndose el azufre de los aminocidos, lo que nos sirve para identificar proteinas que
tienen en su composicin aminocidos con azufre.

Nihidrina