Practica No 4.

“Examen microscópico del sedimento urinario”

Objetivo:

Realizara correctamente el examen microscópico del sedimento urinario.

Fundamento:

El examen microscópico constituye una parte vital del análisis de orina en rutina.
Es una herramienta diagnostica valiosa para la detección y evaluación de
trastornos renales y del tracto urinario, así como de otras enfermedades
sistemáticas. El valor del examen microscópico depende de dos factores
fundamentales; el examen de una muestra adecuada y el conocimiento de la
persona que realiza el estudio.

Introducción:

La muestra para el análisis de rutina de orina es la primera micción de la mañana.

Los cilindros y los hematíes tienden a disolverse o lisarse en muestras de bajo
peso específico o de pH alcalino. La primer orina de la mañana por lo general
proporciona el medio concentrado y acido necesario para mantener esas
estructuras. El sedimento debe examinarse lo antes posible después de su
recolección, pero si no es posible hacer el examen en forma inmediata, puede
refrigerarse la muestra durante horas.

En el diagnóstico de la enfermedad renal, las células y los cilindros son estructuras

importantes a investigar; a menudo son referidos como elementos formes. Los
cristales y las sustancias amorfas que se encuentran comúnmente en el
sedimento urinario son en general de menor importancia, pero ocasionalmente nos
puede facilitar una información de importancia decisiva.

Material:

• Microscopio compuesto y de contraste de fase.

• Centrifuga eléctrica

• Tubos de ensayo de 13/100

• Porta y cubre objetos

• Pipeta Pasteur con bulbo de goma

• Frasco goteros con: Lugol, ácido acético al 10%

 • Colorante Sudan III y NaOH al 10%

Método:

1- Se mezcla la muestra y se colocan aproximadamente 10 o 15 ml de orina

en un tubo de centrifuga.

2- Centrifugar a 2000 r.p.m durante 5 minutos.

3- Eliminar el sobrenadante.

4- Se suspende el sedimento en la orina que baja por las caras del tubo.

5- Se dan golpecitos en la parte inferior del tubo para mezclar el sedimento.

Se coloca una gota d este en un porta objeto limpio. Se cubre con un cubre
objetos y se examina inmediatamente.

6- Cerrar parcialmente el iris del diafragma y ajustar luego el condensador

hacia abajo hasta lograr el contraste optimo: si hay demasiada luz algunas
estructuras se pasaran por alto.

7- Ajustar continuamente el tornillo micrométrico.

8- Primero el examen debe hacerse a 100X se registra el porta objetos en

busca de cilindros, cristales y elemento que se presenten en algunos
campos. Los cilindros tienden a moverse hacia los del cubre objetos, por
eso debe examinarse la totalidad de su perímetro. El examen con poco
aumento pueden verse cilindros, cristales y otros elementos, dando una
estimación de su número. Para los cilindros puede hacerse el promedio del
número existente en 10 o 15 campos a 100X. Por ejemplo si el número de
cilindros hialianos en 10 campos diferentes es de 1, 3, 2, 1, 1, 2, 2, 3, 1 y 3
entonces se informa; 1-3 cilindros hialinos por campo en poco aumento.
Algunos laboratorios prefieren dar los informes sobre cilindros, células
epiteliales y demás estructuras diferentes de leucocitos y hematíes como
raros, pocos moderados, muchos y numerosos. En cuanto a los cristales
epiteliales se encuentran con elevado aumento 400X y se informa el
número promedio de 10-15 campos.

Interpretación:

Materiales extraños y sintéticos (artefactos)

 a) Las fibras pueden confundirse con cilindros. Las características de las fibras
son las estrías y orillas bien definidas.

b) Burbujas de aire varían en tamaño y sus orillas se observan obscuras sin

representar ningún color en su interior.

c) Las imperfecciones de los cubre objetos y las rayas pueden parecer

cristales de glóbulos rojos. Vuelva a enfocar usando bajo aumento en una
célula conocida como puede ser una epitelial escamosa.

d) Las partículas de tales se asemejan a cristales. Deje que una gota de yodo
penetre bajo el portaobjetos. El talco se teñirá negro o azul oscuro.

Micro pruebas confirmatorias

Criterio de decisión

Prepare otra laminilla en fresco de la misma muestra para la prueba confirmatoria.

En algunos casos puede ser más útil desarrollar la prueba después de la
cuantificación al microscopio.

Coloque una gota de reactivo apropiado en el cubreobjetos permitiendo que este

fluya bajo el cubre objetos.

Glóbulos rojos: Los glóbulos rojos se disuelven cuando se aplica en la orilla del
cubre objetos una gota de ácido acético al 10%

Levaduras: no se disuelven en ácido acético al 10%

Glóbulos blancos: si se coloca una gota de ácido acético al 10% a una preparación
al fresco que contiene glóbulos blancos, se provocara que el núcleo del leucocito
no se altere.

Estoy ayuda a diferenciarlos de las células epiteliales coloidales pequeñas que

tienen una sola capa central en el núcleo.

Tinción de grasa: Centrifugue la orina, tome algunas del sobrenadante y

colóquelas en la laminilla.

Agregue una o dos gotas del colorante de Sudan III, Espere 5 minutos, examine la
laminilla en seco con bajo y alto aumento. Las grasas se coloran de rojo
anaranjado.

Almidón: Centrifugue y monte el sedimento en la formula usual, agregue una o dos

gotas de yodo en la orilla del cubre objetos. Observe el sedimento con gran
aumento en seco. El almidón se teñirá de color azul-negro. El hielo no colorea los
cristales.

Cristales de ácido úrico: Centrifugue y monte el sedimento en la forma usual para

conformar los cristales de ácido úrico, agregue una gota de NaOH al 10% en la
orilla del cubre objetos. Los cristales de ácido úrico se disolverán.

Cristales de fosfato amorfo: Centrifugue y monte el sedimento en la forma usual,

agregue una o dos gotas de ácido acético al 10% en la orilla del cubre objetos. Se
disolverán tanto los cristales de fosfato amorfo como los glóbulos rojos.

Cristales de urato amorfo: Deje que fluya una o dos gotas de NaOH al 10% bajo el
cubre objetos. Los cristales de urato se disolverán

Bacterias: Las bacterias no se disuelven con el NaOH al 10% ni con el ácido

acético al 10%

Cuantificación.

Criterio de decisión:

1- Cilindros:

a) Examine las orillas del cubre objetos con microscopio de fase y con
poco aumento (10X) y busque cilindros.

b) Cuente y registre el número de cada tipo de cilindro encontrado en cada

campo de bajo aumento. Si es necesario cambie el gran aumento en el
microscopio de la luz brillante para la identificación de los cilindros.

c) Promedie cada tipo de cilindro y registre como número X con bajo

aumento. Si solo se encuentra un tipo de cilindro en algunos campos,
regístralo como menor de 1X campo con bajo aumento.

2- Elementos diversos:

a) Mueva el centro del cubre objetos y examine 10 campos con gran

aumento 4oX en luz brillante. Utilice fase si es necesario.

b) Cuente y registre el número de GB, GR, células epiteliales, parásitos y

grasas encontradas en cada uno de los campos con gran aumento.

Cualquier elemento en abundancia puede registrarse 2007campo con

gran aumento, cuando se haya contado ¼ por campo.
 c) Estime y registre bacterias, levaduras, cristales y moco de la manera
siguiente:

El elemento llena menos que ¼ campo= trazas, hueyas.

El elemento llena ¼ campo = + (1 cruz)

El elemento llena ½ campo = ++ (2 cruces)

El elemento llena ¾ campo = +++ (3 cruces)

El elemento llena el total del campo = ++++ (4 cruces)

d) Promedie cada elemento contando en paso b) y regístrelo como: # /

CGA. Si un elemento se encuentra solo en pocos campos, regístralo
como: menor que 1/CGA.

Correlación

Criterio de decisión

Correlacione los hallazgos microscópicos son el reporte macroscópicos.

Microscópicos Macroscópicos

Cilindros Posible proteína positiva

Posible proteína negativa

Posible gravedad especifica alta.

Usualmente pH acido neutro.

Glóbulos blancos Posibles proteína positiva

Posible pH alcalino (fresco)

Posible orina turbia

Glóbulos rojos Posible reacción de sangre

Posible reacción de proteínas (+)

Posible reacción de sangre (-)

Si hay pocos GR al microscopio Posible reacción de orina turbia

Posible reacción de orina roja, café.

Bacterias Posible pH alcalino (fresco)

Posible reacción de proteínas (+)

Posible reacción de nitrito (+)

Posible orina turbia

Levaduras Posible glucosa

Posible orina turbia

Cristales Debe sugerir pH aproximados

Posible orina turbia

Posible gravedad especifica alta

Tricomonas Posible orina turbia debido a un

Aumento de GB y de moco.

Reporte los hallazgos microscópicos si están relacionados con los macroscópicos.

No reporte cristales anormales a menos que se confirmen por pruebas posteriores
y por el patólogo.

No reporte espermatozoides. Reporte los cristales comunes si se solicitan o

cuando se encuentre una cantidad anormal de un solo tipo.

Correlación de los resultados.

En la tabla siguiente se registran los resultados de los análisis.

 A- Los resultados son normales. Hay correlación entre las pruebas
macroscópicas, microscópicas y químicas. Reporte los resultados.

B- Los resultados son normales. No hay correlación entre las pruebas

macroscópicas, microscópicas y químicas. No reporte los resultados. Repita
las pruebas en las que no hay correlación.

C- Los resultados son anormales, pero hay correlación en las pruebas

macroscópicas, microscópicas y químicas. Reporte los resultados.

D- Los resultados son anormales, pero no hay correlación entre los resultados
macroscópicos, microscópicos y químicos. Repita

E- Los resultados son posibles pero se necesitan pruebas adicionales. Lleve a

cabo pruebas adicionales, antes de reportar.

Examen general de orina

Volumen__________

Densidad__________

pH__________

Albumina__________ gr%

Glucosa__________ gr%

Acetona__________

Bilirrubina__________

Sedimento.- Objetivo seco fuerte

Leucocitos__________ por campo

Eritrocitos__________ por campo

Cilindros__________ por campo