c
 

Se aplico la cromatografía en capa fina para separar los fármacos de una mezcla,
y se calculo el Rf de los fármacos para su identificación.

Se elaboraron 2 cromatoplacas con silica gel, se activaron por 20 min a 120°, se

prepararon los estándares de 4 diferentes y se adiciono una pequeña muestra en
las placas. Se saturo la cámara cromatografica con los vapores de la fase móvil, y
se prosiguió con sumergir las cromatoplacas, se observo con rayos UV y se
marco la distancia recorrida de las muestras. Los resultados obtenidos fueron que
la tableta T que nos dieron era de acetaminofen, llegando a la conclusión que las
muestras polares quedan en la sílice gel y las no polares corren con el disolvente.

c
 

La cromatografía en capa fina (CCF o TLC por sus siglas en inglés) es una
técnica de separación de mezclas de compuestos que se encuentran en mínimas
cantidades. Es un procedimiento rápido y cualitativo que solo permite identificar la
presencia de estos.

La CCF es una técnica de partición sólido-líquido en la cual se encuentra una O


  
 
  llamada también O
 

  debido a que tiene la
capacidad de adherir selectivamente sobre su superficie, gases, líquidos o sólidos
arrastrados por una O
 o fluida.

La separación de los componentes de una mezcla es debida a la diferencia en la

velocidad a la cual los componentes individuales de esta avanzan a lo largo de
una placa de vidrio o metal.

Cuando se tiene una mezcla abundante en compuestos, cada uno tendrá su

propio patrón de solubilidad en la fase móvil, y adsortividad en la fase estacionaria
dependiendo de los grupos funcionales presentes en su estructura. En general la
fase estacionaria es fuertemente polar y puede unir fuertemente compuestos
polares, mientras que la fase móvil líquida, es comúnmente menos polar que la
fase estacionaria o adsorbente y puede disolver compuestos los cuales sean poco
polares o no polares. Por lo tanto, los compuestos más polares atraviesan
lentamente la placa (debido a que son retenidos por la fase estacionaria) y
presentan velocidades de elución altas con respecto a los componentes con baja o
nula polaridad los cuales eluyen más rápidamente de la placa.

La alúmina G (óxido de aluminio) y la silica gel G (ácido silícico, son adsorbentes

comunes en CCF, los cuales mezclados con algún disolvente forman una masa
sólida que puede adherirse a placas de vidrio (soporte).

La elección de la fase móvil depende de los compuestos que se requieran separar.

Comúnmente se utilizan mezclas de disolventes para lograr separaciones
satisfactorias. El cloroformo y el benceno son disolventes con polaridad intermedia
y se seleccionan para separar una amplia variedad de grupos funcionales. El éter
de petróleo y el hexano en combinación con diversas proporciones de benceno, se
utilizan para separar hidrocarburos.

Durante el desarrollo de la técnica de CCF un compuesto puede moverse a través

de una placa cromatográfica a una distancia fija relativa a la distancia a la cual se
mueve el disolvente sobre la misma placa (frente del disolvente). La relación entre
estas distancias se conoce como c   y se expresa como una fracción decimal. El
valor del c es una constante física para un compuesto en particular determinado
en función de la fase móvil de elección. Este valor permite identificar un
compuesto desconocido de una muestra problema.

La presencia de los componentes de una mezcla se manifiesta por la presencia de

manchas independientes las cuales requieren ser visualizadas si es que no son
visibles. Las manchas pueden hacerse visibles mediante el ³revelado´ que puede
ser por medio de luz ultravioleta (lámpara de uv) o bien el uso de vapores de yodo
el cual forma con los componentes complejos coloridos.

Los factores que influyen en una separación cromatografica de capa fina son:

a) Temperatura: a menor temperatura las sustancias se adsorben más en la

fase estacionaria.

b) La cromatografía debe llevarse a cabo en un área sin corrientes de aire.

c) Limpieza de las placas. Muchas placas están contaminadas con grasa o

agentes plastificantes o adhesivos. Para el trabajo a pequeña escala, éstas
deben limpiarse corriendo primero una mezcla de cloroformo y metanol y
después dejar secar completamente antes de aplicar la muestra.

d) Pureza de los disolventes.

La cromatografía en capa fina se ha convertido en el caballo de carga de la

industria farmacéutica para la importante función de determinar la pureza de
productos farmacéuticos. También ha encontrado un amplio uso en laboratorios
clínicos, en estudios bioquímicos y biológicos. Finalmente se emplea en muchos
laboratorios industriales.
  c 
cc c c


 cido  cetilsalicilico ! Fármaco de la
familia de los
salicilatos.
!  cido orgánico
simple con un pKa
de 3,0.
! Poco soluble en
agua.
! Molécula no polar.
 cetaminofén ! Poco soluble en
agua.
! Molécula no polar.
! Pertenece al grupo
de las aminas.
Cafeína ! Es un alcaloide
! Molécula polar

salicilamida ! Molécula no polar

! Llamado salicilato
de sodio

 


a)  plicar la CCF para separar los componentes (fármacos) de una mezcla

b) Calcular los Rf de los fármacos y los identifique.

 c




! Básico: cámara cromatográfica, 2 placas cromatográficas, capilares, 2

vasos de precipitados de 50 mL, 2 pipetas graduadas (5 y 10 mL), una
probeta graduada de 10 mL, mortero con pistilo, estufa, cámara de yodo,
lámpara de uv, lápiz , regla, acetato de etilo, cloroformo, etanol absoluto.
! Muestras problema: estándares de ácido acetilsalicílico (  ),
acetaminofén ( C), cafeína (C), salicilamida (S), disueltos por separado en
proporción de 1 g en 20 mL de mezcla cloroformo-etanol 50:50. Tableta
(T).

Prepare la muestra  de acuerdo a lo siguiente: Triture finamente la mitad de una

tableta (proporcionada por el profesor). Transfiera el polvo a un matraz
erlenmeyer y adicione 5 mL de una mezcla etanol absoluto-cloroformo 50:50.
 gite y luego caliente suavemente durante 5 minutos en un baño de agua. Deje
reposar. Los excipientes no se solubilizarán y la muestra se tomará del
sobrenadante.

 ntes de aplicar las muestras a la placa cromatográfica, es necesario activarlas

por medio de calor en estufa durante 20 minutos a 120°. Es recomendable evitar el
contacto de la piel con el material adsorbente de la placa. Sature de vapores
previamente la cámara cromatográfica a la aplicación de las muestras adicionando
2 mL de la fase móvil (acetato de etilo) a la cámara cromatográfica y cubriéndola.

En cada una de las placas (2), dibuje una línea horizontal en la parte inferior (con
lápiz) a aproximadamente 5 mm de la base. Sobre la línea marque tres puntos de
aproximadamente 4 mm de separación entre cada uno de ellos.  plique las
muestras problema en orden alfabético (de acuerdo al esquema siguiente) con el
capilar (uno para cada muestra) aplique la muestra tres veces cada una y dejando
evaporar entre cada aplicación. Coloque en la cámara cromatográfica. Cubra y
observe hasta que el frente de disolvente este cerca de 1 cm de la parte superior
de la placa. Marque con un lápiz la distancia recorrida por el disolvente (frente del
disolvente). Con unas pinzas retire la cromatoplaca y deje evaporar el disolvente.
Observe con lámpara uv e identifique las marcas con un lápiz. Si no son lo
suficientemente visibles revélelas en la cámara de yodo. Ubique el centro de las
manchas y calcule a partir de este la distancia recorrida por la muestra. Calcule el
Rf con el frente del disolvente. Complete la tabla de resultados.

ppppppp

pppp
ppp
ppp

 K  K

PL C  1  PL C  2


c


v


 




MUESTR  Rf ESTRUCTUR  QUIMIC 

   


 C

Parecido a la tableta T 


C 



S 





La fase móvil es líquida y la fase estacionaria consiste en un sólido. La fase

estacionaria es fuertemente polar y puede unir fuertemente compuestos polares, y
el eluyente será por lo general menos polar que la fase estacionaria por tanto
puede disolver compuestos los cuales sean poco polares o no polares, de manera
que los componentes que se desplacen con mayor velocidad serán los menos
polares. Los compuestos mas polares atraviesan lentamente la placa y presentan
velocidades de elución altas con respecto a los componentes con baja o nula
polaridad los cuales eluyen más rápidamente de la placa.
De acuerdo a la estructura de los compuestos, se deduce en orden creciente de
polaridad:

Un alcaloide del grupo de las xantinas (C FEIN ) †  mida ( CET MINOFEN)

† Ácido (ÁCIDO  CETILS LICÍLICO)   mida (S LICIL MID ).

De acuerdo a la polaridad y al RF de los compuestos, el orden de elución queda

de la siguiente manera:

1. Cafeína (RF= 0.17)

2.  cetaminofen(RF=46)
3. Ácido acetilsalicílico (RF= 0.52)
4. Salicilamida (RF= 52)

p
v
  K 
    
 p
v
      
 

 
 

Utilizamos la cromatografía en capa fina en placas de sílice gel que se prepararon

en el laboratorio.

Se utilizo la lámpara de rayos ultravioleta para poder visualizar con más precisión
el corrimiento de las muestras, así como de los vapores de yodo para revelar las
manchas.

Se calculo el RF de las diferentes muestras con ayuda de los rayos UV porque con
los vapores de yodo no se mostraban muy bien las marcas.

De acuerdo con las muestras problema podemos decir que la muestra de la

tableta T era acetaminofen ya que el corrimiento de ambas fue similar. 

  c

! http://www.textoscientificos.com/quimica/cromatografia/capa-fina
! http://books.google.com.mx/books?id=CU7yWvK1kGQC&pg=P 730&lpg=P
 730&dq=aplicacion+de+la+cromatografia+en+capa+fina+en+la+farmaceut
ica&source=bl&ots=RPglyDMtjM&sig=U1EWRhzD8FWMLBiuwirRm_ E3Y
Y&hl=es&ei=pRXPTOSOGIaBl ffv-
njC &sa=X&oi=book_result&ct=result&resnum=2&ved=0CBoQ6 Ew Q#v=
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! http://es.wikipedia.org/wiki/Cromatograf%C3% Da_en_capa_fina
! http://www.ciencias.unal.edu.co/unciencias/data-
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 ! http://depa.pquim.unam.mx/~fercor/dqo/manuales/1311/p7.pdf
! http://es.wikipedia.org/wiki/Paracetamol
! http://es.wikipedia.org/wiki/Cafe%C3% Dna
! http://es.wikipedia.org/wiki/Salicilamida
! http://es.wikipedia.org/wiki/%C3%81cido_acetilsalic%C3% Dlico
! http://www.cosmos.com.mx/h/tec/44cz.htm