Académique Documents
Professionnel Documents
Culture Documents
PRÁCTICA NÚMERO 3
LA COLORACIÓN DE GRAM
UNIDAD DE COMPETENCIA:
Identifica prácticamente los microorganismos patógenos con los
alteraciones orgánicas por ellos producidas: con responsabilidad y
orden.
ELEMENTO DE COMPETENCIA:
Comprende los pasos necesarios para realizar la tinción de Gram
además de reconocer los microorganismos Gram positivos y
negativos, al igual de la aplicabilidad clínica de la tinción con orden e
iniciativa.
NÚCLEOS DE CONOCIMIENTO:
Técnica de tinción – La Coloración Gram. Realización de tinción
por el método de Gram a partir de colonias. Visualizar al microscopio
de gérmenes Gram positivos y Gram negativos. Ver la utilidad clínica
de la coloración por el método de Gram.
CRITERIOS DE EVALUACIÓN:
Comprender la aplicabilidad clínica de la tinción Gram y la morfología
bacteriana en cuestión de distinción entre Gram positivas y Gram
negativas.
COLORACIÓN DE GRAM.
OBJETIVO:
✔ Comprender los pasos necesarios para realizar la tinción de
Gram
✔ Reconocer los microorganismos Gram positivos y negativos, al
igual de la aplicabilidad clínica de la tinción.
FUNDAMENTOS DE LA PRÁCTICA:
La tinción de Gram fue creada por Hans Christian Gram a fines del
siglo XIX y puede utilizarse para separar la mayoría de las especies
bacterianas en dos grandes grupos, a saber, las que captan el
colorante básico, cristal violeta (es decir las bacterias gran positivas),
y las que pierden ese colorante por el lavado con el decolorante
alcohol o acetona (es decir las bacterias gram negativas).
TINCION DE GRAM
MATERIALES:
✔ Portaobjetos
✔ Cubreobjetos
✔ Asas de inoculación
✔ Mechero Bunsen
✔ Pipetas
✔ Hisopos
✔ Colorantes
PROCEDIMIENTO:
El procedimiento clásico de la tinción de Gram consiste en fijar el
material orgánico a la superficie del portaobjetos del microscopio ya
por calor o con metanol.
PRINCIPIO:
Las diferencias de composición de las paredes de las bacterias
grampositivas, que contienen una gruesa capa de peptidoglucano con
numerosos enlaces cruzados de acido teicoico, y las paredes de las
células gramnegativas, en las que la capa de peptidoglucano es más
delgada, explican las diferencias de la tinción de Gram entre estos
dos grupos principales de bacterias es probable que la gran cantidad
de enlaces cruzados de acido teicoico de los microorganismos gram
positivos contribuya a su capacidad de resistir la decoloración con
alcohol.(Fig. 2) Si bien el colorante de contraste puede ser captado
por los microorganismos gram positivos, su color violeta no se altera.
BIBLIOGRAFÍA
1.Koneman, E. Diagnostico microbiológico, Editorial médico
panamericana,
2.Jawetz Ernest, Microbiología médica, 17ª edición en español, Manual
moderno, México, México 2002.
3.Bailey & Scott, Diagnóstico microbiológico, 11ª edición, Editorial
Panamericana, Buenos Aires – Argentina, 2 004.
4. Salazar Wilson, Guías de práctica de Laboratorio de Microbiología,
Depart. de publicaciones de la Facultad de Ciencias Médicas, Quito –
Ecuador, 2007.