Práctica 2 .

Determinación de calcio en leche mediante

gravimetría de precipitación

1.-Introducción

El calcio es el quinto elemento, en abundancia, en la corteza terrestre (3.6 % en peso).

No se encuentra en forma metálica sino formando diversas sales minerales, alguna de
ellas bastante insolubles como el carbonato, el sulfato o el oxalato...El calcio es un
elemento esencial para la vida humana; tal es así que en una persona adulta entre un 1.5
y un 2 % de su peso es calcio. El calcio corporal se concentra casi en un 90 % en huesos
y dientes. Además, en el organismo humano el calcio participa en numerosos procesos
como la coagulación sanguínea, la permeabilidad de las membranas, como regulador
nervioso y neuromuscular, modulando la contracción muscular (incluida la frecuencia
cardiaca), la absorción y secreción intestinal y la liberación de hormonas.

Se puede encontrar calcio en una gran variedad de alimentos. Los productos lácteos, los
frutos secos y semillas (almendras, semillas de sésamo), las sardinas y las anchoas, los
vegetales de hoja verde (espinaca, acelga, brócoli) son buenas fuentes de calcio. La
mayoría de las harinas están fortificadas con carbonato de calcio, de modo que los
productos de panadería pueden ser una buena fuente de calcio. Finalmente, el agua dura
también aporta calcio.

La leche es la fuente principal de calcio en la dieta (un vaso aporta unos 250 mg)
siendo, además, la materia prima principal para la elaboración de diversos derivados
lácteos ricos en calcio como el queso o el yogur. Con un contenido aproximado de un
87 % de agua, la leche es una mezcla homogénea de diferentes sustancias, unas en
emulsión, como las grasas, y , otras, en disolución como la lactosa, las vitaminas
hidrosolubles, proteínas, sales, etc.

Existen diferentes técnicas para la determinación de calcio en alimentos, tales como la

gravimetría, las volumetrías redox y de formación de complejos, la cromatografía iónica
y la espectrofotometría de absorción atómica, la potenciometría directa, etc.

2.-Fundamento

Los métodos gravimétricos de análisis son aquellos que se basan en la medida de la

masa de algún componente de la muestra o sustancia derivada. Los más utilizados son
los métodos gravimétricos de precipitación, en los cuales el analito se convierte en un
precipitado muy poco soluble que se filtra, se lava y se convierte, mediante un
tratamiento térmico adecuado, en un producto de composición conocida que se pesa
utilizando una balanza analítica.

Idealmente, un agente precipitante gravimétrico debe reaccionar selectivamente con el

analito para dar un precipitado cristalino, fácilmente filtrable y lavable, de solubilidad
baja, que no reaccione con los componentes atmosféricos y que tenga una composición
conocida. Entre los factores que favorecen la formación de precipitados cristalinos cabe
destacar:
 - el empleo de disoluciones diluidas.
- la adición lenta y con agitación del reactivo precipitante.
- La precipitación en caliente.
- El ajuste del pH del medio de precipitación cuando la solubilidad del precipitado
dependa de éste.

Sin embargo, en las condiciones normales de un laboratorio, en lugar de precipitados

cristalinos muchas veces se forman sólidos coloidales que no se pueden utilizar para el
análisis gravimétrico porque sus partículas son demasiado pequeñas para poder ser
filtradas fácilmente. Para poder conseguir precipitados más puros y fácilmente filtrables
se puede calentar el precipitado durante una o más horas, en la misma disolución en la
que se formó, proceso denominado peptización.

Después de la filtración, el precipitado se lava, preferentemente con una disolución que

contenga un electrolito, que se elimine fácilmente al calentar el precipitado, y se
calienta hasta peso constante. Algunos precipitados deben calcinarse para descomponer
el sólido y formar un compuesto de composición conocida, que será la especie pesada.
La temperatura elegida, en cada caso, depende del precipitado formado.

En esta práctica, la determinación de calcio en una muestra de leche se llevará a cabo

mediante un análisis gravimétrico de precipitación. Previamente, se separará el calcio
contenido en la leche del resto de los componentes para evitar posibles interferencias.
Posteriormente, se procederá a la precipitación del calcio en forma de oxalato de calcio
monohidratado por reacción con oxalato de sodio. Este producto se pesa, después de su
filtración, lavado y secado, de manera que a partir del peso obtenido, y, conociendo la
estequiometría de la reacción, será posible estimar el contenido en calcio de la leche.

3.-Aparatos y material

- Embudo de vidrio
- Kitasato de 500 mL
- Matraces aforados de 100 mL
- Papel indicador de pH
- Papel de filtro
- Pinzas termogravimétricas
- Pipeta de 50 mL
- Placas filtrantes del nº 4
- Probeta de 50 mL
- Vasos de precipitados de 250 y 500 mL
- Vidrio de reloj o pesasustancias
- Baño termostático
- Baño de hielo
- Desecador
- Estufa
- Sistema de succión al vacío
4.-Reactivos utilizados

- Acido tricloroacético
- Amoníaco
- Oxalato de sodio

5.- Determinación experimental

5.1- Pesada de la placa filtrante

Se toman 3 placas filtrantes de vidrio del nº 4, asegurándose que están bien limpias, se
etiquetan y se guardan dentro de una estufa a 110 ºC durante unos 30 minutos.
Transcurrido este tiempo, se sacan las placas cogiéndolas con una pinza
termogravimétrica y se colocarán dentro de un desecador durante unos 20 minutos. A
continuación, se procederá a la pesada de las 3 placas filtrantes en balanza analítica.
Una vez obtenido el peso de éstas, se mantendrán en el desecador hasta su empleo.

5.2- Extracción del calcio en la muestra de leche

Se toman alícuotas (3 veces) de la muestra de leche, de 50 mL, y se transfieren a vasos

de precipitados de 500 mL Se adicionan 50 mL de ácido tricloroacético al 24 % (p/v) y
se agita la disolución para separar el calcio del resto de los componentes de la leche. Se
observa la aparición de 2 fases, una fase líquida, el suero, que contiene el calcio y otra
fase con aspecto de sólido pastoso que contiene el resto de los constituyentes de la
leche, fundamentalmente proteínas y grasas. La separación de ambas fases se realiza
empleando un embudo de vidrio y filtro de pliegues, para aumentar la velocidad del
filtrado. Se lava el precipitado con agua destilada, recogiéndose las aguas de lavado,
junto con el filtrado en un vaso de precipitados de 500 mL.

5.3- Precipitación del calcio en el suero.

Sobre el líquido procedente del filtrado anterior se adiciona agua destilada hasta
completar, aproximadamente, la mitad del vaso de precipitados. Se introduce el vaso en
un baño termostático con una temperatura comprendida entre 60-80 ºC. Se deja durante
unos 15 minutos para que alcance la temperatura del baño y se adicionan 30 mL de
disolución de Na2C2O4 0.1 M y, a continuación, se adiciona lentamente una disolución
de amoníaco 2 M, observándose la aparición de un precipitado de color blanco. La
adición de la disolución de amoníaco debe continuar hasta alcanzar un pH entre 8-9
(realice la comprobación con papel indicador de pH). Compruebe que ya no precipita
más calcio, mediante la adición de 1 mL más de oxalato de sodio.

5.4- Digestión, filtrado y lavado del precipitado

Se agita y se mantiene la disolución durante unos 30 minutos en el baño termostático,

añadiendo, de vez en cuando, unos mililitros de la disolución de amoníaco 2 M (con
objeto de reponer las pérdidas de NH3 como consecuencia de la evaporación; de esta
manera mantenemos el pH entre 8-9). Transcurridos los 30 minutos de digestión del
precipitado, se enfría la suspensión en un baño de hielo durante unos 15 minutos y se
procede al filtrado mediante un sistema de succión a vacío muy suave, utilizando las
placas filtrantes previamente pesadas. Se recoge todo el precipitado ayudándose con una
varilla de vidrio. Se debe lavar con abundante agua destilada para eliminar posibles
impurezas que acompañen al precipitado.

5.5- Secado y pesada del precipitado

Una vez lavado el precipitado, se llevará la placa filtrante a una estufa a 110-120 ºC,
con la ayuda de pinzas termogravimétricas y se secará el precipitado de CaC2O4.H2O
obtenido durante, aproximadamente, 1 hora. Transcurrido dicho tiempo, se introducirá
la placa filtrante en el desecador hasta que llegue a temperatura ambiente y se pesa.

6.- Bibliografía

1.-Experimentación en Química Analítica. Universidad Rey Juan Carlos.

2.- Métodos analíticos en Alimentaria. Leche y productos lácteos. Panreac, reactivos
para análisis.