ESTERILIZACION

M. ALVARADO, E. RUIZ, M. SAYRE Facultad de Ingeniera Qumica y Textil, Universidad Nacional de Ingeniera 16 de Setiembre, 2009

RESUMEN Mediante el presente informe daremos a conocer todo al proceso de esterilizacin; el cual es una tcnica que nos permite que un material est libre de contaminacin tanto biolgica como contaminacin por agentes qumicos. El proceso de Esterilizacin requiere seguir pasos muy estrictos y manteniendo los cuidados y precauciones debidas ya que de ello depende de que nuestro cultivo este totalmente estril para poder as cultivar solo la especie que deseamos y no tener agentes contaminantes que malogren nuestra experiencia. Debemos recordar que cada tipo de material tiene sus propios pasos para la esterilizacin siendo distinto los pasos para esterilizar una placa Petri y un tubo de ensayo. Primero realizamos la esterilizacin de la placa petri: realizaremos dos formas de esterilizacin Esterilizacin de placa petri con residuos slidos y placa petri sin residuos slidos. Para esterilizar la placa petri sin residuos slidos que se dio en la mayora de los grupos de laboratorio, lo hicimos de una forma ms rpida por cuestin de tiempo en el laboratorio, ya que no utilizamos el autoclave , sino que hicimos hervir agua en una olla, metimos las placas petri en una bolsa de plstico (esto para que no ingresara agua en las placas) y las colocamos dentro de la olla durante unos 15 minutos, luego sacamos las placas petri y las lavamos con agua y lava vajilla para eliminar todos los restos de suciedad que haban en la placa petri, luego enjuagar con agua de cao, despus enjuagara con agua destilada y

dejar boca abajo sobre la franela y dejar escurrir el agua durante 5 minutos, una vez seca enjuagar la caja petri con unas cuantas gotas de alcohol y secar , una vez seco se envolvi con papel kraft ; el papel Kraft posee una zona lisa y otra rugosa se debe poner la parte lisa por dentro y envolver la caja petri; luego se marco el papel con los respectivos datos como nombre de equipo de trabajo, fecha de trabajo; esto es para evitar posibles confusiones con otras placas de esterilizacin; luego se introdujo la placa a la estufa (Figura N 5) por 45 minutos a 180 C (pero solo llego a 138C). Para esterilizar las placas petri con residuos slidos se coloca las placas en una bolsa de plstico (para evitar que el vapor de agua ingrese en la placa petri y se llene de agua) para luego colocarlas en el autoclave durante unos 15 minutos sacarla y proceder a separar los residuos solidos de los liquidos,hechando los residuos slidos en una bolsa (para desecharlas) y hechar los liquidos al lavadero,una ves realizado esto se prosiguio de manera similar a la esterilizacion de placa petri sin residuos slidos, lavando,secando y colocando las placas petri en la estufa a las mismas condiciones. Esterilizacin de otros materiales de vidrio. Para la esterilizacin de los tubos de ensayo tambin lo hicimos de una forma rapida tapando los tubos con las tapas roscas pero dejando un poco floja la tapa para ecitar que estos revienten al colocar en la autoclave (colocar los tubos en una gradilla o en un lata de leche), a una temperatura de 120 C durante 15 minutos y despues retirar los tubos y lavar con lava vajilla enjuagar con agua de cao y finalmente agua destilada,para ponerlosa secar boca abajo en la gradilla,sin necesidad de colocarlos en la estufa. En el caso de las probetas y las pipetas deben ser lavadas con agua y detergente y al final con uan solucion de hipocorito de sodio 5% por 24horas. Manejo del Autoclave Tambien aprendimos a como utilizar la autoclave, primero verificamos que la llave de purga este cerrada para poder agregarle 4 litros de agua aproximadamente,colocamos la canastilla(donde se colocan los objetos a esterilizar),cerramos la tapa y aseguramos las llaves ,esperamos a que el agua hierva colocando el controlador de nivel de temperatura en el as alto nivel,luego

observamos a que salga vapor y cerramos la llave de vapor y verificar que la presion no suba a ms de 10 psia. MATERIALES Y METODO Los materiales empleados en la prctica de laboratorio de esterilizacin fueron las placas petri que pueden ser de material de prex o de plsticos las descartables, los tubos de ensayo de vidrio al igual que la probeta, algunos materiales adicionales utilizados fueron unas bolsas de plstico y papel kraft. Tambin se nos proporciona un asa de siembra de material de nicrom por la caracterstica de enfriar y calentar rpidamente. Los equipos con los cuales realizamos la prctica de laboratorio fueron la estufa (Figura N 4) en la cual se calentaron las placas petri, el autoclave (Figura N 1). La esterilizacin se considera como una operacin indispensable en el laboratorio debido a los microorganismos que forman colonias en los medios ms apropiados, estos puedes ser patgenos (que producen enfermedades) o banales (que son encontrados en el medio ambiente comn y no hacen dao al hombre). El hecho que estos microorganismos coexistan en el medio del laboratorio hace que haya una dificultad al tratar de estudiar una bacteria especifica ya que ser vera contaminada por estos microorganismos, en estos casos la esterilizacin se har en los objetos donde se quiera estar libre de estos microorganismos. En conclusin la esterilizacin comprende mtodos, procedimientos ya sean fsicos, mecnicos y qumicos que se emplean para desactivar, destruir los microorganismos ya mencionados con nfasis al inicio. Existen tres mtodos prcticos para el tratamiento de los materiales de laboratorio desechados y de los desechos contaminados: La esterilizacin por autoclave. La incineracin. La desinfeccin qumica.

La eleccin se realiza atendiendo a la naturaleza de los materiales; si es desechable o recuperable y, en este ltimo caso, si se ve afectado por el calor.

Con ciertas excepciones, ninguno de estos mtodos excluye a los dems. Puede verse en la ms abajo que la incineracin sola nicamente puede aconsejarse si el incinerador se halla bajo el control del personal del laboratorio. La desinfeccin sola es aconsejable nicamente para las pipetas graduadas recuperables.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS AMELIA SANTOS Macas, CIENCIA COMBINADA, Editorial Reverte S.A, Pg. 118. GMEZ PERAL P, Fernndez Ruiz-Pereda c, Villanueva Pelayo P. Garanta de calidad en la central de esterilizacin. La Autoclave 1999; 2: Pg. 47-49. http://www.biologia.edu.ar/microind/crecimiento%20bacteriano.htm Fecha de consulta 12/09/2009 http://www.ucv.ve/Farmacia/Micro_web/Catedras02/metodesteril.pdf Fecha de consulta 12/09/2009

ANEXO APLICACIN DE UN PROGRAMA DE CONTROL DE INFECCIONES INTRAHOSPITALARIAS EN ESTABLECIMEINTOS DE SALUD-REGION SAN MARTIN, PER Algunos de nosotros ya habr escuchado por los medios de comunicacin de la transmisin de enfermedades en el hospital ya sea la tuberculosis, VIH, siendo las enfermedades ms graves; las infecciones intrahospitalarias (IIH, enfermedades que son adquiridas en los hospitales durante la estada del paciente ya sea para la recuperacin de otra enfermedad propiamente dicha) representan actualmente uno de los mayores problemas sanitarios que enfrentan las instituciones prestadoras de salud tanto del sistema privado como pblico y aquejan de igual manera a pases desarrollados como a pases en vas de desarrollo. En el 2003, el Centros de Control de Enfermedades (CDC) de Atlanta

report que slo en EE.UU. ms de 80 000 pacientes mueren anualmente debido a una IIH. Estas IIH originan adems un prolongado tiempo de hospitalizacin, produciendo una carga econmica de unos 5000 millones de dlares al ao. Un tercio de estas muertes y una fraccin an mayor de los gastos, podran evitarse con programas de control de infecciones y con el cumplimiento de normas preventivas. En nuestro pas, a pesar que an los estudios son escasos, la magnitud del problema es perceptible. Los estudios realizados en nuestro medio respecto al conocimiento, actitudes y prcticas (CAP) del personal de salud en lo referente a las medidas bsicas para la Prevencin y control de las IIH (lavado de manos, aislamiento, uso de tcnica asptica, desinfeccin y esterilizacin y salud laboral inmunizaciones), han permitido observar y documentar la desinformacin y falta de prctica. Estos hallazgos sugieren que intervenciones destinadas a educar al personal de salud y modificar sus conductas y prcticas, podran tener grandes repercusiones a un relativo bajo costo. Como se ve la esterilizacin correcta de los instrumentos usados en los centros mdicos de salud podra ayudar a bajar estos ndices de pacientes que son afectados por los grmenes que estn expuestos en el medio ambiente de los hospitales.

FOTOS DE LA PRCTICA DE LABORATORIO REALIZADA

Figura N 1: Autoclave del Laboratorio de Bioqumica y Microbiologa

Figura N 2: Retirando la canastilla del autoclave

Figura N 3: Colocando los seguros al Autoclave

Figura N 4: Estufa del Laboratorio de Bioqumica y Microbiologa

Figura N 5: Interior de la Estufa, donde se colocaran las Placas petri