Laboratorio 7

La membrana y el transporte celular

Marcela Bernal Mnera BIOL3051

Objetivos


Describir los componentes de las membranas biolgicas.

Discutir los factores que pueden afectar la integridad de las membranas.

Explicar como la difusin y la smosis son importantes para la clula.

Mencionar los factores que afectan la velocidad de difusin.

Explicar que son soluciones hipotnicas, hipertnicas e isotnicas.

Explicar que es osmolaridad en los tejidos.

Las membranas celulares



Las membranas celulares son barreras selectivas que separan las clulas y forman compartimentos intracelulares. Entre sus funciones estn: Permitir la entrada o salida de mol molculas de la clula o del organelo. Generar seales para modificar el metabolismo. Adherir clulas para formar c tejidos.

Composicin de la membrana


Doble capa de fosofolpidos, protenas y carbohidratos:

Glicoprotena
Protena Protena perifrica Periferal

Canal de Transporte

- Fosfolpidos: Fosfolpidos: Barrera hidrofbica entre los compartimentos acuosos de la clula.

Colesterol Fosfolpidos Protena Integral

Composicin de la membrana
-

Protenas: Protenas: Permiten paso de molculas hidroflicas a travs de la membrana y determinan funciones especficas de la membrana, incluyen bombas, canales, receptores, molculas de adhesin, transductores de energa y enzimas. Carbohidratos: Carbohidratos: Comunicacin intercelular y adhesin. Colesterol: Colesterol: Determina la fluidez de la membrana.

Caractersticas de la membrana


La membrana es una estructura funcional activa, con mecanismos enzimticos que desplazan molculas especficas penetrando o saliendo de la clula con un gradiente de concentracin. En las clulas vegetales existe una pared celular que presenta numerosos orificios diminutos por donde pueden pasar sustancias de un lugar a otro.

Caractersticas de la membrana


El acceso de las sustancias depende de: La permeabilidad selectiva: para mantener la homeostasis de la clula. El tamao de las molculas. La carga elctrica: no polares o hidrofbicas (pasan por la capa de lpidos), las polares o hidroflicas (pasan por los canales). Gradiente de concentracin: Diferencia de concentracin en 2 lugares. La solubilidad.

Movimiento Browniano
El movimiento que lleva a cabo una partcula muy pequea que est inmersa en un fluido.


Modelo

Se caracteriza por ser continuo y muy irregular. irregular. La trayectoria que sigue la partcula es en zigzag. zigzag. Es la fuerza motrz de la difusin. difusin.

Difusin


Es el movimiento de molculas de una regin de alta concentracin a otra de menor concentracin producido (hasta que se iguala) por la energa cintica de las molculas. No requiere gasto de energa (movimiento pasivo). Movimiento activo requiere gasto de ATP.

Osmosis


El componente principal de la clula es el agua, agua, que acta como solvente (el agente que disuelve) de solutos orgnicos e inorgnicos. El movimiento de agua a travs de una membrana selectivamente permeable se llama osmosis (difusin de agua) y sucede siempre del rea de mayor concentracin de agua (con menor concentracin de soluto) al rea de menor concentracin de agua (con mayor concentracin de soluto).

Osmosis


Cuando la clula contiene una concentracin de solutos mayor que su ambiente externo, se dice que la clula est en una solucin hipotnica, y como consecuencia, el agua hipotnica, entra a la clula causando que se expanda. Si la concentracin de solutos es mayor fuera de la clula, se dice que la clula est en una solucin hipertnica; la hipertnica; clula pierde agua y se encoge. Si las concentraciones de soluto son iguales en ambos lados de la membrana, se dice que la clula est en una solucin isotnica, donde el movimiento neto es cero isotnica,

Comportamiento de la clula animal y la vegetal:

Clula animal:  Crenacin: ocurre cuando la Crenacin: clula est expuesta a un ambiente hipertnico y se arruga al perder agua. agua.


Clula vegetal:  Plasmolisis: ocurre cuando Plasmolisis: la clula est expuesta a un ambiente hipertnico y pierde agua. Se observan agua. areas blancas. blancas.


Hemlisis: Hemlisis: ocurre cuando la clula est expuesta a un ambiente hipotnico y explota al llenarse de agua

Turgencia: Turgencia: ocurre cuando la clula est expuesta a un ambiente hipotnico y esta comienza a llenarse de agua, pero no explota porque la pared celular la protege. protege.

Figura 12

Presin osmtica


Se entiende por presin osmtica la presin que sera necesaria para detener el flujo de agua a travs de la membrana semipermeable. Cuando una clula se sumerge en un lquido con diferente concentracin a la de su interior, la presin osmtica puede ocasionar plasmlisis o turgencia.

Presin osmtica


Se entiende por presin osmtica la presin que sera necesaria para detener el flujo de agua a travs de la membrana semipermeable. Las clulas animales funcionan ptimamente en ambientes isotnicos. En las clulas vegetales, sin embargo, cuando la vacuola se llena de agua, sta ejerce presin contra la pared celular hasta llegar a un punto donde se impida que entre ms agua (presin de turgencia) y la clula se encuentra trgida (presin turgencia) (firme), lo cual es el estado ideal de estas clulas. Por otra parte, si la clula vegetal pierde agua, la clula sufre plasmlisis al separarse la membrana celular de la pared celular, lo cual suele ser letal para la clula.

Ejercicio 1. Osmolaridad en clulas c vegetales

Observar cmo soluciones con diferentes molaridades afectan el equilibrio y el funcionamiento de las clulas vegetales. Procedimiento: 1. Rotule 6 vasos para cada solucin de sacarosa (0.1 a 0.6 M) y un vaso para agua destilada (0.0 M). 2. Aada 100 ml de la solucin correspondiente a cada vaso. 3. Con el sacabocado obtenga 7 cilindros de papa de 1 cm de largo (cubrirlos con papel toalla hmedo). 4. Pese los cilindros de papa, anote el peso inicial para cada uno y transfieralos inmediatamente a los vasos rotulados.

Ejercicio 1. Osmolaridad en clulas c vegetales

5. Deje los cilindros en los vasos por dos horas. 6. Saque los cilindros, remueva el exceso de agua con papel toalla y anote el peso final de cada uno. Asegurese de mantener saparados los cilindros correspondientes a cada vaso. 7. Anote si hubo cambios en textura (blandos o duros) y anote en la Tabla 1 el peso final de los cilindros. 8.Con los datos de la Tabla 1, calcule el cambio en peso para cada 8.Con cilindro y prepare una grfica sealando los cambios en peso.
Cambio en peso (%) = peso final peso inicial X 100 peso inicial

Tabla 1. Molaridades de las soluciones

0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6

Peso inicial (g)

Peso final (9)

Cambio en peso (%)

Nota: REPORTE CORTO DE LOS RESULTADOS DE ESTE EJERCICIO * Osmolaridad: expresa concentracin (nmero total de partculas/L de solucin).

Grfica cambio en peso vs molaridad

Cambio en peso (%)

0.0

0.1

0.2

0.3

0.4

0.5

0.6

Osmolaridad

Nota: Seleccione una escala apropiada para el eje Y de la grfica (el cero debe gr colocarse en el centro del eje). El aumento de peso se grafica sobre el cero y la disminucin en peso se grafica debajo del cero.

Ejercicio 2. Efecto de la temperatura sobre las membranas celulares.

Se utilizar la planta de remolacha (Beta vulgaris), cuyas clulas almacenan (Beta vulgaris), en la vacuola central el pigmento violeta betacianina. Procedimiento: 1. Corte 6 pedazos de remolacha (1 cm) con un sacabocado y cloquelos en tubos de ensayo rotulados del 1 al 6. 2. Aada en el tubo 6, 3 ml de agua y llvelo al congelador por 30 minutos. 3. Coloque en el tubo 5, 3 ml. de agua y pngalo en bao de hielo por 30 minutos. 4. Coloque en el tubo 4, 3 ml de agua y deje a temperatura ambiente por 30 minutos.

Ejercicio 2. Efecto de la temperatura sobre las membranas celulares.

5. Aada al tubo 1, 3 ml de agua y colquelo en un bao de agua caliente a 70 C por 1 minuto, despus de 20 minutos sacar el pedazo de remolacha del tubo. 6. En un bao de agua a 55 C haga lo mismo con el tubo 2. 7. Repetir el proceso con el tubo 3, pero a 40 C . 8. Comparar intensidad de color al finalizar el experimento. 9. Coloque los resultados intensidad de color vs. temperatura en la tabla 2.

Tabla 2. Efecto de la temperatura

Tubo 1 2 3 4 5 6

Temperatura (C) ( 70 55 40 Ambiente (24) Bao de hielo Congelador

Intensidad de color

* (1 = menos intenso; 6 = mas intenso)

Ejercicio 3. Efecto de los solventes sobre las membranas celulares.

Ejercicio preparado por instructor: 1. En 6 tubos de ensayo colocar un pedazo de remolacha de 1 cm. 2. A los tubos 1, 2 y 3 se les aade 3 ml. de las siguientes soluciones en orden: metanol de 1%, 25% y 50%. 3. A los tubos 4, 5 y 6 se les aade 3 ml de acetona a 1%, 25% y 50%. 4. Esperar 30 minutos, remover la remolacha colocar los tubos en orden de mayor a menor intensidad de color.

Ejercicio 4. Efecto de los solventes sobre lpidos y protenas .

Ejercicio preparado por instructor:
1.

   

Rotule 4 tubos adicionales y aada lo siguiente a cada uno: Tubo a: 1 ml aceite + 1 ml acetona Tubo b: 1 ml aceite + 1 ml metanol Tubo c: albmina + 1 ml de acetona Tubo d: albmina + 1 ml de metanol

Ejercicio 5. Transporte celular: Difusin + movimiento browniano

En este ejercicio se estudiar el movimiento browniano de las molculas y mol el efecto de la temperatura sobre dicho movimiento. Procedimiento: 1. Aada agua a temperatura ambiente a un vaso y a otro vaso aada agua fra. 2. Deje reposar los vasos por 10-15 min para que no haya movimiento del 10agua. 3. Aada cuidadosamente una gota de colorante a cada envase y observe la dispersin de la gota. 4. Afect la temperatura la difusin del tinte? Explica tu observacin.

Ejercicio 6. Transporte celular: Difusin a travs de una membrana selectivamente permeable (dilisis).
Procedimiento: 1. Cortar bolsas de dilisis de 15 cm. Doblarlas al final y hacer un nudo fuerte. 2. Aadir mitad de solucin de glucosa y mitad de almidn a la bolsa y cerrar con un cordn (que se pueda abrir luego). 3. Mezclar el contenido interno y observar el color. 4. En un beaker con 100 ml de agua aadir varias gotas de solucin de yodo hasta tener un color dorado. 5. Poner la bolsa dentro del agua y esperar 30 minutos. 6. Sacar la bolsa del agua y ponerla en un beaker vacio. Anotar el color de las soluciones dentro y fuera de la bolsa y comprelas. 7. Realizar prueba de Benedict para las soluciones.

Ejercicio 7. Transporte celular: Osmosis en clulas animales.

Tubo 1: agua con sal + sangre de res (solucin hipertnica). (soluci hipert Tubo 2: agua + sangre de res (solucin hipotnica). (soluci hipot Procedimiento: Rotular y preparar 4 laminillas: laminilla 1: gota de sangre, coloque el cubreobjeto y observe los eritrocitos bajo el microscopio. Laminilla 2: gota de la mezcla del tubo 1, coloque el cubreobjeto. Observe bajo el microscopio y compare con laminilla 1. Laminilla 3: Repetir el procedimiento anterior con la mezcla del tubo 2. Eritrocitos en ambiente hipertnico: crenacin hipert crenacin Eritrocitos en ambiente hipotnico: hemolisis hipot

Ejercicio 8. Transporte celular: Osmosis en clulas vegetales.

Procedimiento: 1. Rotular 3 laminillas 2. Laminilla 1: hoja de elodea con una gota de agua de la pecera (solucin isotnica). 3. Laminilla 2: hoja de elodea con una gota de la mezcla agua + sal (solucin hipertnica). 4. Laminilla 3: hoja elodea con una gota de agua destilada (solucin hipotnica).

Clula vegetal en ambiente hipertnico: plasmlisis Clula vegetal en ambiente hipotnico : turgencia

Elodea (hipotnica) hipotnica)

Elodea (hipertnica) hipertnica)

Medio isotnico
Elodea Eritrocitos

Prxima semana


Parcial I (marzo 6): prcticas 1 al 6. Cambiar mis horarios de atencin del martes al lunes de 3 a 5. Prueba corta (10 ptos.): 4 preguntas de la prctica 7 y 1 de la 8. Laboratorio 8. Respiracin celular. Revise la presentacin de power point. Traer bata y vestimenta adecuada.

Prxima semana


Elaborar reporte cientfico: Resultados del ejercicio 1: Osmolaridad en clulas vegetales (12.5 puntos). El reporte debe ser en computador y debe tener:

- Texto describiendo los resultados ms relevantes: (4.5 ptos.) - Tabla con los datos (4 ptos.) - Grfica A MANO (4 ptos.)

Recuerde que en los resultados no se discute. No olvide todos los detalles que deben tener las tablas y grficas para estar bien construidas. SEA CONCRETO. Recomendaciones: Haga su informe a tiempo, evtese inconvenientes, solo se recibir en la fecha indicada.