Avaliao da eficcia dos extratos de Malva sylvestris, Calndula officinalis, Plantago major e Curcuma zedoarea no controle do crescimento das

bactrias da placa dentria. Estudo in vitro. Marilene da Cruz Magalhes Buffon1; Maria Lcia da Costa Lima2; Izabel Galarda3; Laura Cogo3
Professora do Departamento de Sade Comunitria da UFPR Professora do Departamento de Fitopatologia da UFPR 3 Professora do Departamento de Patologia Bsica da UFPR
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Este estudo teve como objetivo avaliar in vitro a eficcia dos extratos fludos de quatro plantas: Malva sylvestris, Calndula officinalis, Plantago major e Curcuma zedoarea; No controle da placa bacteriana e comparadas com a soluo de Digluconato de Clorhexidina a 20%. Os extratos fluidos de Calndula officinalis e Curcuma zedoarea apresentaram em mdia os melhores resultados. Palavras-chaves: fitoterapia, preveno, placa bacteriana.

RESUMO

This paper aimed at assessing how successful fluid extracts from : Malva sylvestris, Calndula officinalis, Plantago major e Curcuma zedoarea could be in tube, so as to control bacterial plaque and also compared to Clorhexidina Digluconato solution at 20%. Fluid extracted from Calndula officinalis and Curcuma zedoarea were the ones chich presented better results, roughly spesking. Key words: phytotherapy, pervention,bacterial plaque.

ABSTRACT

1. INTRODUO A arte dos benzedores, curandeiros e xams, herdados dos magos e feiticeiros de outrora, pode ser vista hoje, em teste, nos laboratrios cientficos, os quais passaram a avaliar experimentalmente a veracidade destas informaes, tendo em vista a descoberta de novos medicamentos, com base justamente nos conhecimentos que foram adquiridos durante milhares de anos e repassados de gerao em gerao por aqueles que so os ancestrais da cincia moderna. As informaes sobre os usos das plantas medicinais e suas virtudes teraputicas foram sendo acumuladas durante sculos, e muito desse conhecimento emprico se encontra disponvel atualmente. De domnio pblico, o conhecimento sobre as plantas medicinais representou e ainda representa o nico recurso teraputico de muitas comunidades e grupos tnicos. Essa prtica, que se caracteriza pela utilizao dos recursos naturais como forma de tratamento e cura de doenas, to antiga quanto a espcie humana. Aldous Huxley, famoso por suas obras de fico cientfica, arrisca-se a dizer que o homem deve ter sido antes farmacologista que fazendeiro (Lobo, 1996), aludindo grande importncia e preocupao da espcie humana com a manuteno de sua integridade fsica desde os primrdios da civilizao. Nesse contexto, um dos assuntos mais integrantes e fascinantes da pesquisa com plantas medicinais reside na origem desse conhecimento, na forma e nos procedimentos que o homem utilizou para descobrir as virtudes teraputicas das espcies vegetais. Sem dvida, a origem dessas descobertas se encontra na observao constante e sistemtica dos fenmenos e caractersticas da natureza e na conseqente experimentao emprica
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desses recursos. O homem deve ter avaliado por si mesmo vrias espcies, que de alguma forma sugeriram a potencialidade de uso para amenizar seus problemas, seja como medicamento, seja como alimento ou produo de ferramentas e artesanatos; Santos, 1988. Com certeza, inmeras espcies vegetais foram incorporadas medicina tradicional, nica e exclusivamente, pelo acaso, caracterizado pelo uso emprico de espcies vegetais, seguido de avaliao, mesmo que rstica e grosseira, dos sinais e sintomas que apareceriam aps seu consumo, at selecionar pela qualidade de respostas, se determinada espcie lhe seria til ou no. O mtodo usado o mesmo mtodo da tentativa e erro, ainda muito comum e til em pesquisas de diversas reas do conhecimento cientfico, que serve para mostrar a forte ligao entre o conhecimento popular e o cientfico (Guyot, 1990). Com base no uso e conhecimento popular, o importante crescimento mundial da fitoterapia dentro de programas preventivos e curativos (Guyot, 1990) tem estimulado a avaliao da atividade de diferentes extratos de plantas para o controle da placa bacteriana (Osawa et al., 1990 I; Osawa et al., 1990 II). Diversos trabalhos tem demonstrado que a placa dental o fator determinante da crie e doena periodontal, justificando desta maneira, a utilizao de medidas para o seu controle (Axelsson & Lindhe, 1974; Kornman, 1986). Mesmo assim, os programas ofertados a populao carente dificilmente atingem os objetivos em sua plenitude, uma vez que desvinculam os componentes sociais na incidncia da crie e doena periodontal, em funo de que a maior parte da populao brasileira no tem condies financeiras para aquisio peridica dos instrumentos para o controle bacteriano, quer sejam mecnicos ou qumicos, fazendo com que o perfil epidemiolgico brasileiro seja desastroso (Buischi et al, 1989; Medeiros, 1991). Desta maneira, com a placa bacteriana no sendo adequadamente controlada, instala-se um processo de contnua destruio, comprometendo o dente e o periodonto e contribuindo para diminuio da longevidade dos dentes (Glickman, 1974; Rateitschak et al., 1989). Este fato justifica a intensificao das medidas de preveno da crie e da doena periodontal baseadas no controle da placa supragengival atravs de meios qumicos e mecnicos (Suomi et al., 1971; Axelsson & Lindhe, 1978; Lobene, 1979; De Micheli & Sarian, 1990). Face as consideraes expostas, pretende-se investigar a eficcia dos extratos de Malva sylvestris, Calndula officinalis, Plantago major e Curcuma zedoarea no controle do crescimento das bactrias da placa dentria, comparando os extratos com a soluo de Digluconato de Clorhexidina a 20 %, que comprovadamente eficiente no controle da placa bacteriana, atuando de forma bactericida e bacteriosttica, porm deixando uma pigmentao amarronzada na lngua, dentes e restauraes, quando utilizado (De Micheli, 1990). 2. MATERIAL E MTODOS A atividade da soluo de Digluconato de Clorhexidina a 20 % e dos extratos de Calndula officinalis, Malva sylvestris, Plantago major e Curcuma zedoarea foram testadas sobre o cultivo misto de bactrias coletadas da placa dental. Paralelamente foi feito teste com culturas puras ATCC (American Type Culture Collection) de algumas bactrias encontradas em placa dental: Streptococcus mutans, Streptococcus salivarius, enterococcus faecalis, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus saprophyticus, Staphylococcus aureos, Streptococcus pyogenes, pseudomonas aeruginosa, proteus mirabilis, bacillus subtilis e
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corynebacterium matruchotr. Inicialmente o material coletado da placa dental foi inoculado em meio de cultivo lquido de Tryptic Soy Broth (TSB) da Biobrs, para enriquecimento e incubado a 37C durante 24 a 48 horas. Dos tubos com crescimento, cuja turbidez foi acertada ao do tubo n. 5 da Escala de MacFarland ( equivalente a um milho e quinhentos mil bactrias por ml) foi retirado 0,1 ml da cultura e semeado em placas de T.S.A., com auxlio de ala de Drigalski. A seguir sobre a superfcie semeada foram colocados discos de papel de filtro estreis, impregnados com 0,05 ml dos extratos das plantas e da soluo de Digluconato de Clorhexidina a testar. o mtodo de Kirby Bauer baseado na difuso em gel da substncia antibacteriana. Aps a incubao de 24 horas a 37C, observar-se o crescimento bacteriano ao redor dos discos ou a sua ausncia em forma de halos. Os dimetros dos halos de inibio foram medidos com auxlio de rgua. Foi observado a inibio total ou parcial da microbiota cultivada. Em todos os experimentos, como termo de comparao e como teste positivo, foram utilizado discos de papel impregnados em Clorhexidina. Foram coletadas 37 amostras de placa bacteriana. 3. Resultados e Discusso A populao brasileira ao longo dos anos tem utilizado de diferentes formas extratos de plantas, para solucionar doenas da cavidade bucal e percebendo a importncia no repasse desses conhecimentos, resolvemos testar in vitro os extratos de quatro plantas amplamente utilizadas pela populao, e com isso contribuir com informaes para indicao e controle do uso adequado dessas espcies de plantas. Adotou-se o mtodo in vitro de verificao de atividade antimicrobiana pelo contato direto, atravs dos discos de papel embebidos pelos extratos das seguintes plantas: Malva sylvestris, Calndula officinalis, Plantago major e Curcuma zedoarea, contra os germes (bactrias) contidos em placas de cultura. O mtodo de contato direto permite uma anlise comparativa entre os extratos e a soluo de Digluconato de Clorhexidina a 20%. A seleo dos inculos utilizados, no presente trabalho, baseou-se nos levantamentos da ecologia oral que apontam os estreptococos do grupo alfa gama como os mais representativos da flora oral, juntamente com os estafilococos, difterides. As bactrias foram testadas em culturas puras e atravs de culturas mistas, estas provenientes de placa dentria que foi obtida de um nico paciente adulto. Com as culturas mistas, pretendeu-se verificar a ao dos extratos de plantas sobre bactrias de ocorrncia freqente na placa dentria. Os extratos das plantas testadas possuem algumas propriedades fitoqumicas. A Curcuma zedoarea possui leos essenciais que caracterizam o aroma da planta e atuam como analgsicos, antiespamdicos, antivirticos, cicatrizantes, desinfetantes, so auxiliares na recuperao do tecido da pele e apresentam ao anti-inflamatria. O extrato da Plantago major, possui ao adstringente, cicatrizante, antimicrobiana, anti-inflamatria, devido a presena do componente fitoqumico tanino (so bons inibidores enzimticos e atuam como anti-envenenamento por determinados alcalides) e mucilagens (suco viscoso que funciona como anti-inflamatrio, cicatrizante e protetor das mucosas). A Malva sylvestris e a Calndula officinalis apresentam tambm mucilagem, taninos, leos essenciais e
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flavanides (evitam que os hormnios propiciadores do cncer se liguem s clulas normais). Santos, 1988. Os quatros extratos foram testados e comparados com a soluo de Digluconato de Clorhexidina a 20% que serviu como controle positivo, pois j amplamente conhecido o seu efeito bactericida e bacteriosttico sobre as bactrias da placa dentria. Os resultados correspondem s mdias dos 37 halos de inibio, expresso em milmetros, correspondente as 37 repeties de cada extrato da planta testada. As leituras foram realizadas com uma lupa, para melhor anlise do crescimento de colnias minsculas que cresceram no interior dos halos de inibio e que logicamente resistiram s solues testadas. As bactrias que cresceram no interior dos halos de inibio foram as seguintes: Enterococcus faecalis, Enterobacter aerogenes, Serratia liquefaciens, Proteus mirabilis, Staphylococcus epidermidis. Essas bactrias so transitrias na cavidade bucal e no possuem papel significativo no processo da crie dentria e da doena periodontal mesmo estando presente na placa dentria. TABELA 1- Ao do extrato de Calndula officinalis, Malva sylvestris, Plantago major, Curcuma zedoarea e Digluconato de Clorhexidina a 20%, sobre as 37 amostras de bactrias da placa dentria. Inibio Total EXTRATO Calndula officinalis Malva sylvestris Plantago major Curcuma zedoarea Digluconato de Clorhexidina
GRFICO 1

Inibio Parcial % N amostras 17 16 16 15 % 45,9 43,2 43,2 40,5

Sem inibio N amostras 14 15 16 18 % 37,8 40,5 43,2 48,6

N amostras 6 6 5 4 37

16,4 16,4 13,5 10,8 100

100% 90% 80% 70% 60% 50% 40% 30% 20% 10% 0%

Calndula officinalis Malva sylvestris Plantago major Curcuma zedoarea Digluconato de Clorhexidina a 20% Inibio Total Inibio Parcial Sem inibio

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A tabela 1 mostra que o extrato de Calndula officinalis e Malva sylvestris apresentaram um ndice de inibio total no crescimento das bactrias da placa dentria em torno de 16,4%. Os extratos de Plantago major e Curcuma zedoarea apresentaram um ndice de inibio total em torno de 13,5% e 10,8% respectivamente. Em 17 amostras o extrato de Calndula officinalis, ou seja 45,9%, apresentou halo de inibio parcial e em 37,8% no apresentou inibio. Observamos que em uma mesma amostra de placa dentria as repeties apresentaram resultados com comportamentos diferentes. TABELA 2 - Comparaes de halos de inibio total dos extratos de Calndula officinalis (C), Malva sylvestris (M), Plantago major (P), Curcuma zedoarea (Z) e Digluconato de Clorhexidina a 20% (CL), em milmetros. Extrato ml ml ml ml ml ml Mdia C 8 18 8 15 15 10 12,33 CL 17 30 17 25 35 20 24,00 M 12 10 11 12 10 15 11,67 CL 30 17 25 35 15 21 23,83 10,80 19,80 13,25 19,50 P 10 12 10 12 10 CL 17 25 15 21 21 Z 10 14 20 9 CL 17 16 25 20

GRFICO 2

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A tabela 2 evidencia que os extratos de Calndula officinalis e Curcuma zedoarea, apresentaram melhores mdias em halos de inibio total em torno de 12,33 ml e 13,25 ml, respectivamente; porm sempre inferiores aos halos obtidos pela soluo de Digluconato de Clorhexidina a 20%. Estatisticamente a diferena entre os halos de inibio total entre os extratos no foram significativas. 5. Concluso A soluo de Digluconato de Clorhexidina a 20% apresentou resultado 100% positivo como era esperado, inibindo o crescimento das bactrias da placa. Os extratos apresentaram um comportamento de inibio total e inibio parcial em torno de 60% das repeties, mostrando portanto que apresentam propriedades de possvel controle no crescimento das bactrias da placa dentria. As bactrias que cresceram no interior dos halos de inibio, foram isoladas e identificadas, sendo estas transitrias na cavidade bucal e no possuem papel significativo no processo da crie dentria e da doena periodontal. H ainda muito a ser investigado, para melhor anlise e compreenso dos fatores que influenciaram nos resultados., Sugerimos a conduo de novos experimentos para comprovar os resultados obtidos neste estudo preliminar que indicam que os extratos testados apresentam resultados significativos, possibilitando mais um suplemento para o controle da placa dentria, podendo ser mais uma medida de preveno e controle, contribuindo para qualidade da vida da populao brasileira. 6. REFERNCIAS
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