微珠包被及检测

532nm Green LASER

Detector
Flow cell

Filters

635nm RED LASER

Detectors

悬浮微球芯片液流检测系统
 Available Assay Formats

Sandwich Ligand binding

immunoassay assay

Nucleic acid- Enzymatic assay

based assay
Bio-Rad’s Bio-Plex System

www.bio-rad.com/bioplexsystem
 Integrated System Solution
Software Validation Tools

Hardware

• Instrument control • Validation Kit

• Data reduction • MCV plate

Assays Global Support

• Protein Array Reader

• Microplate Platform

• Cytokine assays
• Phosphoprotein assays • Field engineers
• Amine coupling kit • Technical support
• Custom assay mixing & development Technical support
• Sales support
Cytokine Immunoassay

IL-2 IL-4

TNFα GmCSF
 Bio-Plex Cytokine Assays
Human Mouse Rat
• IL-1β • G-CSF • IL-1α • G-CSF • IL-1α
• IL-2 • GM-CSF • IL-1β • GM-CSF • IL-1β
• IL-4 • IFN-γ • IL-2 • IFN-γ • IL-2
• IL-5 • MCP-1 • IL-3 • KC • IL-4
• IL-6 • MIP-1β • IL-4 • MIP-1α • IL-6
• IL-7 • TNFα • IL-5 • RANTES • IL-10
• IL-8 • IL-6 • TNFα • GM-CSF
• IL-10 • IL-10 • IFN-γ
• IL- • IL-12(p40) • TNFα
12(p70) • IL-12(p70)
• IL13 • IL-17
• IL-17
Format:
• Cytokine Reagent Kit
• Diluent Kits for Serum and Plasma
 Cytokine Assay Protocol
BIO-PLEX CYTOKINE ASSAY
PREPARE
STANDARDS PRE-WET FILTER PLATE
(30 min) PREPARE
Filter BEADS
PREPARE
SAMPLES ADD BEADS
Filter, Wash 2x

ADD STANDARDS
ADD SAMPLES

PREPARE
INCUBATE/SHAKE (30 min) DETECTION
Filter, Wash 3x ANTIBODY
ADD DETECTION ANTIBODIES

PREPARE
INCUBATE/SHAKE (30 min) STREPTAVIDIN-PE
Filter, Wash 3x

ADD STREPTAVIDIN-PE

INCUBATE/SHAKE (10 min)

Filter, Wash 3x
RESUSPEND BEADS

READ PLATE
目前已经可以检测的细胞因子
磷酸化蛋白、激酶系统
Phosphoprotein Immunoassay
Phosphoprotein Detection

P
JNK IκBα
P

P
ERK1 STAT3
P
 Phosphoprotein Testing
Phosphoprotein Total Target
• Akt • ATF-2
• ATF-2 • ERK2
• ERK1 • IκB-α
• ERK2 • JNK
• ERK1/2 • p38MAPK
• EGFR
• GSK-3α/β
• IκB-α
• JNK
• p38MAPK
• STAT3
Format:
• Phosphoprotein Reagent Kit
• Cell Lysis Kit
 Detection of Phosphoproteins

Method
• Lysate preparation – cell culture or tissue
samples.
• Bio-Plex assay – standard 3 step sandwich
immunoassay
Incubation of samples with beads (overnight)
Reaction with detection antibody
Introduction of reporter molecule: streptavidin-PE
Detection of Phosphoproteins
Results – Correlation with Western Blot
 自身免疫病及过敏原检测
• Rouquette AM ， Am J Clin Pathol 同时检测 9
种 antinuclear antibody

Autoimmune Allergy
ASCA PCNA Alternaria (Mold)
beta-2 Microglobulin PR3 Bermuda Grass
Centromere B PR3 (cANCA) Cat Dander
ENA-78 Ribosomal P Egg White
Histone RNP Milk
Histone H1 RNP-A Mite Pternoyssinus
Histone H2A RNP-C Mountain Cedar
Histone H2B SCF Short Ragweed
Histone H3 Scl-70 Timothy Grass
Histone H4 Serum Amyloid P Wheat (food)
HSP-32 Sm General
HSP-65 Smith
HSP-71 SSA
HSP-90 a SSB
HSP-90 b Streptolysin O
Jo-1 TPO
抗体亚型鉴定
 肿瘤标志物

• alpha Fetoprotein
• Cancer Antigen 125
• Carcinoembryonic Antigen
• PSA, Free
• others
兴奋剂、毒品及代谢物检查
 感染性疾病病原体检测

• 病原体：病毒、细菌
• 特异性抗体西尼罗病毒
• Antibody against HPV types 6, 11, 16, and 18
• Antibody against tetanus, diphtheria, and
Haemophilus influenzae Type b.
• respiratory viral antibody: influenza A and B,
adenovirus, parainfluenza viruses 1, 2, and 3,
and respiratory syncytial virus
 食品安全与生物反恐

• Escherichia coli, Salmonella, Listeria

monocytogenes and Campylobacter jejuni
23S rRNA 基因
Dunbar SA ， J Microbiol Methods, 2003
• Anthrax toxin antibody
Biagini RE, Clin Diagn Lab Immunol, 2004
感染性病原体
 特 点

• BIO-PLEX 是一个定量检测系统 , 每孔可检测多

达 100 种不同指标
• 灵敏 ---- 荧光素的应用，可检测 10pg/ml 蛋白
• 快速 ---- 全部反应及数据处理只需 2 小时
• 微量 ---- 样品只需 20ul 血清或 10ug 蛋白
• 方便 ---- 样品无需复杂处理 , 可直接上样
Hybridization
 第四部 分，组织芯 片

述概

 高通量 • 成百 甚至 上千份
 多组织 标本 • 正常 或处 于疾病
 同时、 平行 分析 状态

 同时研 究一 个或多 个基 因 • 疾病 不同 发展阶

或蛋白 的研 究工具 • FISH段 （荧光 原位 分子杂
交）
 高质、 高效 ，省材 ，操 作
便捷 • mR NA IS H （原 位杂 交
）
 应用广 泛
• IHC （免疫组 织化 学）
基因、 转录 、表达 水平 三方 面
组织芯片的优
点
 高通量— —短 时（一 次即 获大量 信息 ）、 高效 （成百 成千 倍地提 高
效率 ）
含数十 甚至 数百例 组织 样本
仅 2CM 2 ，一次 操作 即可完 成普 通实
验所需 的数 十甚至 数百 次操
作。
 有助于减 少实 验误差 —— 实验条 件保持 一致
 便于设置 各种 实验对 照 传统
 费用仅 1/10 -1 /10 0 芯片

上
几 百
十 个
单 一 几 只
次
六 — 位 个 万 需
个 — 的 单 —
一 珍
月 上 次 位 — 1/10
— 百 贵 的 几
一 试
— 张 张 试 十 ︱
一 一 玻 剂 剂
玻 万 1/100
年 周 片 片

样本准备时间 实验操作工作量 实验试剂用量 研发费用

 组织芯片技术的突破
 1998-NIH-Kononen-Tissue microarray-1w 内 -645 乳腺
癌
种基因 p53
 3Schraml-1w 、 C-erb-B2
内检测了 17 种肿瘤 表达
、 ER397 预后 组织样
例-CRCC
本中
CCND1 、 CMYC 和 ERBB2 三种癌基因的表达 - 发生
、肿瘤
 Richter-2w 内检测了 1842 例膀胱癌患者中 2317 份样本
抑制因子
中
E 基因和 CCND 的表达 - 短生存期 ( 低 ) 、早期
优点：显著提高检测效率、加速研究的进程、缩
cyclin
浸润 (高 )
短研究周期、节约研究经费
组织芯片（意义）
对人 类基 因组学 、后 基因组 学的 深入研 究与发 展
特别 表现 在如下 几个 方面：
 研究特定 基因及其所 表达的蛋白 质与疾病之间 的相互关
系
 疾病的分 子诊断 前
列
腺
 预后指标 的确定 癌

 治疗靶点 的定位
 治疗过程 的追踪与预 测
 抗体和新 药物的开发 和筛选
乳腺 癌
广阔的
基因治疗 的研发等方 面
应用前景

高通量 研究
DNA 、 RNA 和
PROTEIN
 组织芯片（国内外现状）
国外 中国

• 起步阶 段 刚刚起 步
• 组织获 取难 进展迅 速
• 产品数 量少 组织学 、遗 传学资 源极 其丰
• 价格高 、品种 单一 富
• 尚缺通 行的行 业标 准 国家重 视
• 种族差 异 科技部 将组织芯片 技术 列为
• 实验数 据无法 共享 “十五”
• 该技术 的广泛 应用 受阻 国家 863 技术攻 关开 发重大
碍 项目
组织库的构建
组织 标本 液氮保存
10% 中性缓冲 福尔 马
林
组织标本 DEPC 处理蒸馏 水配
制
处理
的 70% 分析纯级 乙
醇
相 完整的临 床等 资料
组织标本
关
制片 、染 色
生
物 组织库
学
组织标本
信
诊断 、标 记
息

组织标本
编码 、存 储

组织标本
查询 、管 理
组织芯片库的构建
组织库

组织选 择 芯片设计

相 组
组织取样
组织阵 列 排列 关 织
数
组织阵列 据 芯
组织芯 片 制片、 染色 信 片
息
库
芯片编码 存储 芯片诊断

芯片 查询 管理
o
肝癌 组织 芯片（ OD-CT-DgLiv03-
001 ）
高通 量—— 478 个样 本
 高质 量—— 最新 鲜的 标本材 料和 最敏感的 生物 学活 性
 高价 值—— 203 例肝 细胞 癌 18 例肝 硬化 10 例正常肝 14 例其 他组
织对 照

HE

IHC
Tissue Microaray of HCC（ 2001/10/03）
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18
1 QD-01K QD-01N QD-02K QD-02N QD-03K QD-03N QD-04K QD-04N QD-05K QD-05N QD-06K QD-06N QD-07K QD-07N QD-08K QD-08N QD-09K QD-09N

2 QD-10K QD-10N QD-11K QD-11N QD-12K QD-12N QD-13K QD-13N QD-14K QD-14N QD-15K QD-15N QD-16K QD-16N QD-17K QD-17N QD-18K QD-18N

3 QD-19K QD-19N QD-20K QD-20N QD-21K QD-21N QD-22K QD-22N QD-23K QD-23N QD-24K QD-24N ZS-01K ZS-01N ZS-02K ZS-02N ZS-03K ZS-03N

4 ZS-04N ZS-04N ZS-05N ZS-05N SY-01K SY-01N SY-02K SY-02N SY-03K SY-03N SY-04K SY-04N SY-05K SY-05N GX-01K GX-01N GX-02K GX-02N

5 GX-03K GX-03N GX-04K GX-04N GX-05K GX-05N GX-06K GX-06N GX-07K GX-07N GX-08K GX-08N GX-09K GX-09N GX-10K GX-10N GX-11K GX-11N

6 GX-12K GX-12N GX-13K GX-13N GX-14K GX-14N GX-15K GX-15N GX-16K GX-16N GX-17K GX-17N GX-18K1 GX-18N1 GX-18K2 GX-18N2 GX-19K GX-19N

7 LIVER1 LIVER2 LIVER3 LIVER4 LIVER5 LIVER6 LIVER7 LIVER8 LIVER9 中山（ M）中山（ H） 军 HCC 浙 1号 K 浙 1号 N Q01-06K Q01-06N

8 WM-L BALB/c-L S CID-L-T 7402-1 7402-2 7 721 Hep3B-W Hep3B-M Hep3B-P

 肝癌组织芯片的应
用
p53 、 COX-2 、 AFP 蛋白表 达

COX-2

p53

AFP
 人胰腺癌组织芯片
高通量 —— 289 个样本
高质量 ——最新 鲜的标本材 料和最敏感 的生物学活 性
高价值 —— 167 胰腺癌 （胰腺导管 腺癌 133 例，粘液性囊 腺癌 16 例
，腺鳞癌 7 例，其 他 11 例） 01 癌旁 胰腺组织、 7 例粘 液性囊腺
瘤、胰腺 炎组织 4 例与 10 正常胰 腺
胰腺癌组织芯片的应用
ATM 、 p53 、 p21 、 p14 、 p33 AFP 蛋白 表达
Shanghai Shanghai
Outdo Biotech Outdo Biotech
Co., Ltd.. Co., Ltd..
CT-Dig-Pan01-001 CT-Dig-Pan01-001

ATM P53

P14 P21

P33
 第五部 分：其他类 型的芯片

 微缩芯片 实验 室（ Lab-on-a-chip)

 药物运输 芯片

 生理功能 辅助 芯片

 纳米 芯片
上海生 物芯 片有限 公司 / 生物 芯片上 海国 家工程 研究 中心

欢迎垂询：上海市张江高科技园区李冰路 151 号（ 201203 ）

021 － 51320288 － 5221 ， 800 － 8205086
Email: huasheng_xiao@shbiochip.com
Website: Http://www.shbiochip.com