UNIVERSIDADE FEDERAL DO VALE DO SO FRANCISCO GRADUAO EM CINCIAS FARMACUTICAS DISCIPLINA DE BIOQUMICA II PROF. JACKSON GUEDES ALUNO: RAIMUNDO G.

. DE OLIVEIRA JUNIOR ESTUDO DIRIGIDO: METABOLISMO DE NUCLEOTDEOS 01. Escreva a estrutura e sugira um mecanismo de ao para a fluorouracila na quimioterapia do cncer. Fluorouracila um medicamento antineoplsico, anlogo da pirimidina, que age como antimetablico uracila. A ao destes compostos devida aos seus produtos de anabolismo, produtos estes que provocam interferncia na sntese de DNA bloqueando a converso do cido deoxiuridlico em cido timidlico pela enzima timidilato sintetase. O mecanismo de ao exato de fluorouracila no est bem determinado, mas acredita-se que a substncia age como antimetablico atravs de pelo menos trs vias diferentes. As aes bioqumicas que podem explicar a citotoxicidade do composto so as seguintes: a fluorouracila convertida sua correspondente ribosefosfato (5-FUTP), que por sua vez incorporada ao RNA, inibindo o processamento e a funo deste ltimo; um segundo metablito, o 5-FdUMP, liga-se timidilato sintetase, inibindo a formao eventual de dTTP, um dos quatro precursores necessrios para a sntese do DNA. Assim, o composto interfere com a sntese dos dois cidos nuclicos, o que explica a sua citotoxicidade. Em terceiro lugar, a fluorouracila inibe a utilizao da uracila preformada na sntese do RNA bloqueando a uracila fosfatase. A degradao catablica do composto ocorre em clulas normais, porm no em clulas cancerosas, explicando assim a sua ao antineoplsica. Foi demonstrado que fluorouracila administrada por via parenteral, inibe o crescimento de tumores em humanos e estes efeitos teraputicos so maiores sobre as clulas da medula ssea, mucosa intestinal e determinados tumores de mama, reto e clon. Segue abaixo a estrutura da fluorouracila:

02. Qual uma das diferenas mais importantes entre a biossntese dos nucleotdeos de purina e a dos nucleotdeos de pirimidina? Existem dois tipos de vias que levam at os nucleotdeos: as vias de novo e as vias de recuperao. As vias de novo para a biossntese de purinas e pirimidinas parecem ser quase idnticas em todos os organismos vivos. notvel o fato de as bases livres, guaninas, adenina, timina e uracila, no serem intermedirios nessas vias, isto , as bases no so sintetizadas e ligadas ribose, como se poderia esperar. A estrutura do anel de purina construda enquanto est ligada ribose durante o processo de adio de um ou de poucos tomos de uma vez. O anel de pirimidina sintetizado como orotato, ligado ribose fosfato, e depois convertido nos nucleotdeos comuns de pirimidina empregados na sntese de cidos nuclicos. Embora as bases livres no sejam intermedirias nas vias de novo, elas so intermedirias em algumas das vias de recuperao. Vrios precursores importantes so compartilhados pelas vias de novo para as pirimidinas e purinas. O fosforribosilpirofosfato (PRPP) importante em ambas, e aqui a estrutura da ribose mantida no nucleotdeo produzido em contraste com seu destino nas vias do triptofano e da histidina. Em cada via um aminocido um importante precursor: glicina no caso das purinas e aspartato no caso das pirimidinas. Novamente, a glutamina a fonte mais importante dos grupos amino, desempenhando esse papel em cinco diferentes passos nas vias de novo. O aspartato, fonte de um grupo amino, tambm empregado duas vezes nas vias das purinas. O anel purnico construdo passo a passo comeando com a 5-fosforribosillamina. Os aminocidos glutamina, glicina e aspartato fornecem todos os tomos de nitrognio das purinas. O ncleo purnico formado aps dois passos de fechamento do anel. Enquanto isso, as pirimidinas so sintetizadas do carbamoilfosfato, do aspartato e a ribose 5-fosfato ligada depois para formar os ribonucleotdeos da pirimidina.

03. A droga sulfanilamida e outras sulfas relacionadas foram amplamente usadas para tratar doenas de origem bacteriana antes que a penicilina e outras drogas mais modernas estivessem disponveis. O efeito inibitrio da sulfanilamida no crescimento bacteriano pode ser revertido pelo PABA. Sugira um mecanismo de ao para a sulfanilamida. A sulfanilamida um anlogo do cido p-aminobenzico (PABA), que um precursor essencial na sntese de cido flico nas bactrias. O folato necessrio para a sntese dos precursores do DNA e do RNA tanto nas bactrias quanto nos mamferos, porm enquanto as bactrias precisam sintetizar o cido flico, os mamferos podem obt-lo de fontes dietticas. As sulfonamidas (como a sulfanilamida) competem com o PABA pela enzima diidropteroato sintetase, e o efeito da sulfonamida pode ser superado adicionando-se PABA em excesso. Isto o porqu de alguns anestsicos locais que so steres do PABA (como a procana) poderem antagonizar o efeito antibacteriano desses agentes. A ao de uma sulfonamida inibir o crescimento das bactrias, no destru-la; equivale dizer, ela bacteriosttica em vez de bactericida. A ao crucial na presena de pus ou de produtos da degenerao tecidual, porque estes contm timidina e purina, que as bactrias utilizam diretamente, contornando necessidade de cido flico. A resistncia aos frmaco, que comum mediada por plasmdeo e resulta da sntese de uma enzima bacteriana insensvel ao frmaco. 04. Por que a arginina considerada um aminocido essencial se ela produzida no ciclo da uria? As vias de sntese da prolina e da arginina so algo diferentes nos mamferos. A prolina pode ser obtida da arginina da dieta ou da hidrlise de protenas teciduais. A arginase, uma enzima do ciclo da uria, converte arginina em ornitina e uria. A ornitina convertida em glutamato gama-semi-aldedo pela enzima ornitina delta-aminotransferase. O semi-aldedo ciclisa em delta-pirrolina-5-carboxilato, que convertido em prolina. Quando a arginina de fontes alimentares ou provenientes da reciclagem de protenas insuficiente para a biossntese de protenas, a ornitina delta-aminotransferase opera na direo da formao de ornitina e esta convertida em arginina e citrulina no ciclo da uria. 05. A deficincia de cido flico, acreditada ser a deficincia vitamnica mais comum, provoca um tipo de anemia na qual a sntese da hemoglobina est prejudicada e os eritrcitos no amadurecem adequadamente. Qual a relao metablica entre a sntese de hemoglobina e a deficincia de cido flico?

O cido flico um precursor do tetraidrofolato, requerido na biossntese da glicina, um precursor das porfirinas. A deficincia do cido flico, portanto, prejudica a sntese da hemoglobina. 06. Sob condies de subnutrio ou jejum, os organismos podem usar protenas e aminocidos como fontes de energia. A desaminao dos aminocidos fornece esqueletos carbnicos que podem entrar na via glicoltica ou entrar no Ciclo de Krebs para liberar energia na forma de ATP. Entretanto, os nucleotdeos no so degradados de forma similar para emprego como fornecedores de energia. Quais observaes sobre a fisiologia celular suportam essa informao? Qual aspecto da estrutura molecular dos nucleotdeos faz deles uma fonte de energia relativamente pobre? Os organismos no armazenam nucleotdeos para serem usados como energticos e no os degradam completamente, mas, ao contrrio, hidrolisam-os para liberar bases, que podem ser recuperadas nas vias de salvao. A baixa razo CN dos nucleotdeos tornam-os pobres fontes de energia. 07. O alopurinol, um inibidor da xantina oxidase um frmaco usado para tratar a gota crnica. Explique as bases bioqumicas desse tratamento. A gota uma doena das articulaes provocada por elevada concentrao de cido rico no sangue e nos tecidos. Devido a um depsito anormal de cristais de urato de sdio nas articulaes elas inflamam, tornam-se dolorosas e artrticas. Os rins so afetados porque o cido rico tambm depositado nos tbulos renais. A gota ocorre predominantemente no sexo masculino. A causa precisa da gota no conhecida, mas frequentemente ela envolve uma excreo diminuda de urato. Uma deficincia gentica de alguma enzima que atua no metabolismo das purinas tambm pode ser um fator em alguns casos. A gota pode ser tratada com eficcia por uma combinao de terapias nutricionais e farmacuticas. So retirados da dieta os alimentos especialmente ricos em nucleotdeos e cidos nuclicos, tais como o fgado e os produtos glandulares. Em adio, grandes melhoras se seguem ao emprego da droga alopurinol, um inibidor da xantina oxidase, a enzima responsvel pela converso das purinas e cido rico. O alopurinol um substrato da xantina oxidase que o converte em oxipurinol (aloxantina). O oxipurinol inativa a forma reduzida da enzima por permanecer firmemente ligado no seu stio ativo. Quando a xantina oxidase inibida, os produtos excretados do metabolismo da purina so a xantina e a hipoxantina, que so mais

solveis em gua que o cido rico e, por isso, menos provveis de provocarem depsitos cristalinos. 08. A azasserina um poderoso inibidor da glutamina amidotransferase. Se as clulas que esto em processo de multiplicao so tratadas com a azasserina, quais intermedirios nas vias de biossntese dos nucleotdeos se acumularo? Explique. O 5-fosforribosil 1-pirofosfato; esse o primeiro receptor de amnia na via biossinttica das purinas. A multiplicao das clulas cancerosas no controlada da mesma maneira que controlada a multiplicao das clulas da maioria dos tecidos normais. As clulas cancerosas necessitam de quantidades maiores de nucleotdeos precursores do DNA e do RNA, consequentemente so, em geral, mais sensveis que as clulas normais aos efeitos dos inibidores da biossntese dos nucleotdeos. Um conjunto cada vez mais numeroso de importantes agentes quimioterpicos age na inibio de uma ou mais enzimas dessas vias. O primeiro grupo de exemplos inclui compostos que inibem as enzimas glutamina aminotransferases. Vale ressaltar que a glutamina atua como um doador de nitrognio e, pelo menos, meia dzia de reaes separadas na biossntese dos nucleotdeos. Os stios de ligao para a glutamina e o mecanismo pelo qual o NH4+ extrado so muito similares em vrias dessas enzimas. A maior parte delas fortemente inibida por anlogos da glutamina, como a azasserina. A azasserina, caracterizada por John Buchanan nos anos 50, foi um dos primeiros exemplos de um inativador enzimtico que funciona com base no mecanismo de reao da enzima (inibidor suicida).