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Cabealho com Logo UFCG, nome do depto responsvel, n do documento, nome do POP e equipamento a que se refere, n da verso e data,

nmero da pgina, nome de quem preparou e de quem revisou e data de reviso. 1. OBJETIVO Este procedimento orienta o uso e manuteno da Autoclave XX, segue descrio, usada para xx, localizada na xx. 2. ESCOPO Este POP aplicvel para todos os pesquisadores, professores, funcionrios e estudantes do laboratrio. 3. RESPONSABILIDADE 3.1 responsabilidade de XX assegurar que todo equipamento est calibrado, certificado, em ordem e disponvel para uso dos professores e pesquisadores. 3.2 responsabilidade de XX assegurar que todo pesquisador e equipe que usa este equipamento tem treinamento e experincia adequados. 4. FUNDAMENTO

O termo esterilizao refere-se completa eliminao de patgenos, agente biolgico com capacidade de reproduo ou potencial infeccioso. A esterilizao o melhor mtodo de eliminao do risco biolgico. O uso da autoclave a tcnica mais utilizada nas instituies de sade e pesquisa, assegurando a completa destruio de microrganismos. Este processo geralmente envolve aquecimento da gua em uma cmara sob presso gerando vapor sob uma presso de 15 psi, o que ocorre em temperatura de cerca de 128 C por aproximadamente 16 minutos. O tempo medido aps a temperatura do material envolvido atingir 128 C. 5. PROCEDIMENTOS

ANTES DE USAR O EQUIPAMENTO LEIA ATENTAMENTE O MANUAL DE INSTRUO! O procedimento a seguir orienta as operaes bsicas com a autoclave XX. Para maiores informaes consulte o manual de instrues. 5.1 Instalao A) O local da instalao dever ser arejado, limpo, afastado do local de das demais reas do laboratrio, fora do alcance dos raios solares, fontes de

irradiao de calor ou umidade. O ideal para a instalao que seja feita em uma sala exclusiva. B) Instale a autoclave em lugar plano, nivelado e firme a uma altura ergonomicamente adequada ao operador (aproximadamente 80 cm de altura do cho). C) Deve haver espeo livre ao redor de 50 a 60 cm para garantir fcil acesso ao manuseio dos materiais a serem esterilizados e em caso de manuteno preventiva ou corretiva. D) Antes de iniciar a instalao da autoclave consulte o manual do equipamento para informaes pertinantes instalao eltrica e hidrulica recomendadas pelo fabricante. E) Antes da instalao eltrica verifique se a chave comutadora encontra-se na posio desligada e se a teno da rede a mesma indicada na plaqueta de identificao da Autoclave. Utilize um disjuntor exclusivo para ligar o aparelho, nunca use extenses, faa a ligao do fio terra seguindo as normas ABNT, NBR S.410 seo aterramento. Importante! Instale a autoclave onde ela possa ser facilmente desconectada da rede eltrica. 5.3 Precaues de segurana A) fundamental que o operador leia atentamente todas as instrues e certifique-se do seu correto entendimento antes de usar a autoclave. B) Este equipamento que trabalha com presso, eletricidade, vapor e outros; sendo assim deve ser manuseado por pessoas devidamente habilitadas e bem informadas quanto as suas caractersticas de funcionamento. No permitir o manuseio por pessoas sem conhecimento do mesmo, mesmo quando desligado; C) O equipamento trabalha com temperaturas da ordem de 127C, que podem provocar queimaduras, sendo necessrio em seu manuseio utenslios de proteo, tais como luvas de trabalho. D) Sempre desligue o disjuntor da rede eltrica antes de um servio de manuteno ou conservao. E) Quando o equipamento ficar muito tempo fora de uso, retire toda a gua , retire todo material da cmara de esterilizao e em seguida desligue o disjuntor da rede eltrica e seque o aparelho por dentro e por fora. F) Certifique-se sempre de ter desligado sua autoclave da tomada para realizar qualquer tipo de manuteno (limpeza diria ou at mesmo troca de fusvel). G) Utilizar somente gua destilada na esterilizao. H) Antes de usar a autoclave verificar se as sadas de vapor Externo e Interno esto desobstrudas. I) Nunca urilizar manguiera de pltico na Sada Externa de Vapor, pois a Autoclave atinge temperaturas superiores s suportadas por esse material.

5.4

Riscos associados ao uso

Ateno! Perigo de queimadura! Autoclaves usam vapor em alta temperatura e presso para esterilizao. Os riscos potenciais para os operadores so: A) Queimaduras causadas pelo contato com o interior da autoclave, pelo contato com os itens autoclavados ou com o vapor pressurizado. B) Linhas entupidas, malfuncionamento do equipamento ou falha no fornecimento do vapor podem levar a cmara da autoclave a se encher com gua escaldante. Se hover vazamento na frente da autoclave, NO abra a porta da cmara. C) Perfurao por agulhas e injrias nas mos e braos ao fechar a porta. D) Potencial exposio a agentes infectantes atravs do ar, gotas ou contato. E) Injrias em caso de exploso. Nota: Quando se processa lquidos, usar apenas frascos e lacres recomendados pelo fabricante. Isso ajuda a evitar que garrafas lacradas explodam e ruptura de recipientes de vidro. 5.5 Gerenciamento de Riscos A) Autoclaves devem ser inspecionadas e certificadas anualmente. Todos os registros devem ser afixados junto a autoclave. B) Todos os operadores (novos e antigos funcionrios) devem ser treinados em procedimentos de uso seguro das autoclaves. C) Os documentos de procedimentos e instruo devem ser seguidos. D) obrigatrio o uso de EPI. 5.6 Material necessrio A) Saco e embalagens para autoclave. B) Bandeja de alumnio ou polipropileno. C) Recipientes para prfuro-cortantes. D) Equipamento de verificao de esterilidade. E) Equipamento de proteo individual: - Luvas de amianto - Protetores de olhos - Jaleco - Sapatos fechados

5.7 Instrues para operaes A) Preparao de material - Assegure-se de que o material pode ser autoclavado. leos, ceras, alguns plsticos, materiais inflamveis, materiais radioativos, e amostras contendo solventes ou substncias que podem emitir gases txicos NO devem ser autoclavados. - Todo material a ser autoclavado deve estar em recipientes apropriados: Para materiais secos usar sacos para autoclaves, embalar em papel prprio para autoclavao ou cobertos com folhas de alumnio. A embalagem deve permitir a entrada de vapor. Cuidado quando manusear saco de autoclave infectado pois pode existir objetos prfurocortantes colocados inadvertidamente no saco. Recipientes para prfuro-cortantes. Recipientes com lquido devem estar cheios at no mximo 2/3 da capacidade, com as tampas afrouxadas. - A vidraria deve ser de borosilicato resistente ao calor e ser inspecionada a procura de rachaduras antes da autoclavao. - Os plsticos devem ser resistentes ao calor. Por exemplo: policarbonato (PC), PTFE (Teflon) e a maioria dos polipropilenos (PP). No usar bandejas de polietileno (hdpe). Estas bandejas no suportam as condies da autoclave. - Colocar os recipientes com lquidos, sacos de placas de meio de cultura, ou outros materiais que podem ferver ou vazar, em uma vasilha secundria. A vasilha deve ser larga o suficiente para contar todo vazamento do contedo. - Assegure-se de que no h recipientes lacrados no interior dos sacos (vials com lacres, tubos de ensaio com tampas etc). B) Carregamento da Autoclave Usar os EPI. Preencher a lista de utilizao da autoclave (Apndice 2). Transportar o material de descarte usando um carrinho. Colocar os sacos com resduos em recipiente de polipropileno ou ao

inox. Nota: Nunca levante um saco pelo fundo para colocar na cmara. Segurar sempre pelo topo. - Ao usar um indicador de esterilizao, coloc-lo entre os volumes no centro da autoclave. - Colocar o material na autoclave. No misturar materiais incompatveis. - No encha totalmente a autoclave. Deixe espao suficiente para a circulao de vapor. Se necessrio, colocar o recipiente de lado para maximizar a penetrao do vapor e evitar o impedimento da circulao. - Fechar a porta firmemente.

Nota: NO deixar uma autoclave em funcionamento sozinha por mais de 45 minutos. C) Ciclos de Operao - Certifique-se de que todas os dutos de ventilao desobstrudos. - Escolha o ciclo apropriado. - NO tente abrir a porta enquanto a autoclave estiver operando. D) Controle do processo Um dos controles da esterilizao o uso de esporos de Bacillus stearothermophilus. Esta cultura pode ser adquirida comercialmente. Aps a esterilizao o material incubado e observa-se se h viragem do indicador. Em caso positivo indica que houve crescimento microbiano e falha no processo de autoclavao. Em uma perfeita esterilizao no haver crescimento microbiano ou viragem do pH. Os indicadores qumicos tambm podem ser empregados no controle de esterilizao por autoclavao. A fita de autoclave um exemplo deste indicador. Neste caso o indicador na fita branca muda para uma cor negra ou cinza, indicando que houve uma autoclavao eficiente. E) Descarregamento da Autoclave - Usar o EPI. - Antes de abrir a porta o ponteiro do manmetro dever estar na posi0. - Use luvas e posicione-se atrs da porta como precauo, e abra um apenas um pouco para liberar o vapor residual e fazer a presso dentro dos lquidos e recipientes normalizar. - Aguarde por 10 minutos. Isto permitir que o vapor se dissipe e o ar escape dos lquidos aquecidos, reduzindo os riscos para o operador. - Remover a carga usando as luvas apropriadas para evitar queimaduras. - No agite os recipientes ou remova tampas antes de descarregar. - Checar os indicadores de esterilizao. Reprocessar o material em caso de falaha na esterilizao. - Aps a remoo da autoclave, colocar os intens aquecidos em uma rea indicativa de material quente antes deles atingirem a temperatura ambiente. - Descartar o material autoclavado no recipiente apropriado (Sacos e perfurantes). Esses recipientes devem ser esvaziados diariamente. - Processar os indicadores de esterilizao de acordo com as recomendaes do fabricante e documentar.

Nota: Resduos autoclavados no devem ser levados de volta ao laboratrio ou armazenados em corredores. Eles apenas sero recolhidos dos recipientes apropriados. 6. DOCUMENTAO Os registros devem ser feitos segundo o Apndice 2 em livro prprio sempre que a autoclave for usada. Estes registros so teis para agendamento de manuteno / servios e comunicao de incidentes, acidentes ou falhas. 7. MALFUNCIONAMENTO, MANUTENO E REPARO A) Fazer inspeo interna semanalmente (Apndice 1). B) Nenhuma pessoa deve operar a autoclave a menos que esteja inspecionada e certificada. C) Sero colocados cdigos prximos s autoclaves indicando o possvel problema sinalizado pela autoclave. D) Registrar a ocorrncia em livro prprio. E) Todo e qualquer reparo deve ser feito por servio autorizado. 8. ACIDENTES A) Em caso de acidente com o material, lavar a rea imediatamente e procurar auxlio mdico. B) Se o operador tiver a roupa encharcada com gua/vapor quente, remov-las e esfriar a rea afetada com gua fria. 9. LIMPEZA DE VAZAMENTO - Se h derramamento na cmara da autoclave, deixe a unidade esfriar antes de limp-lo. Se houver quebra de vidro, usar pinas, forceps ou outro meio mecnico de recolher os fragmentos. No recolha os resduos com as mos nuas ou com luva. - No permitir o uso da autoclave at que o vazamento tenha sido limpo. - O operador responsvel pela limpeza do vazamento. Fazer o descarte de acordo com o protocolo estabelecido. - Colocar a vidraria quebrada em recipiente prprio. 10. FONTES CONSULTADAS 1) Wfuhs environmental health & safety. standard operating procedure for the general autoclave use in treating biowast. Em: http://www1. wfubmc.edu . 2) Universidade da Califrnia Santa Cruz. Programa de segurana Biolgica. Em: http://ehs.ucsc.edu . 3) Department of Environmental http://www.envbio.uoguelph.ca . Biology, University of Guelph. Em:

4) Manual de Instrues de Autoclave marca Cristfoli, modelo Vitale21. Apndice 1: inspeo semanal interna A) Indicadores (qumicos ou biolgicos); B) Dreno da cmara: se est limpo ou bloqueado. Se a tela estiver bloqueada com sujeira, uma camada de ar pode ser formada no fundo da autoclave, comprometendo a operao. Preencher: Data / Nome e assinatura do inspetor / comentrios

Apndice 2: Lista de uso da autoclave Data / Hora / Ciclo / Resduo Biolgico (Sim ou No); Nmero de sacos / Indicador (aceitar ou rejeitar) / Nome e laboratrio (Sem iniciais)