PRACTICA No.

QUIMICA CLINICA

Determinacin de Nitrgeno por el mtodo de kjeldahl-Gunning y Arnold

El contenido total de protenas en los alimentos est conformado por una mezcla compleja de protenas. Estas existen en una combinacin con carbohidratos o lpidos, que puede ser fsica o qumica. Actualmente todos los mtodos para determinar el contenido protico total de los alimentos son de naturaleza emprica. Un mtodo absoluto es el aislamiento y pesado directo de la protena pero dicho mtodo se utiliza slo a veces en investigaciones bioqumicas debido a que es dificultoso y poco prctico En 1883 el investigador dans Johann Kjeldahl desarroll el mtodo ms usado en la actualidad para el anlisis de protenas (mtodo Kjeldahl) mediante la determinacin del nitrgeno orgnico. En esta tcnica se digieren las protenas y otros componentes orgnicos de los alimentos en una mezcla con cido sulfrico en presencia de catalizadores. El nitrgeno orgnico total se convierte mediante esta digestin en sulfato de amonio. La mezcla digerida se neutraliza con una base y se destila posteriormente. El destilado se recoge en una solucin de cido brico. Los aniones del borato as formado se titulan con HCl (o H2SO4) estandarizado para determinar el nitrgeno contenido en la muestra. El resultado del anlisis es una buena aproximacin del contenido de protena cruda del alimento ya que el nitrgeno tambin proviene de componentes no proticos. El mtodo Kjeldahl ha sufrido varias modificaciones. Originalmente se utiliz permanganato de potasio para llevar a cabo el proceso de oxidacin (digestin), sin embargo, los resultados no fueron satisfactorios, de manera que este reactivo se descart. En 1885 Wilforth encontr que se poda acelerar la digestin utilizando cido sulfrico y aadiendo un catalizador. Gunning en 1889 propuso aadir sulfato de potasio que eleva el punto de ebullicin del cido sulfrico utilizado en la digestin para disminuir el tiempo de la reaccin. En la actualidad se utiliza principalmente Sulfato de Cobre penta hidratrado CuSO4.5H2O como catalizador. Ventajas del mtodo de Kjeldhal
y y y

Apropiado para varios tipos de productos. Alta fiabilidad. Usado como mtodo de referencia.

Desventajas del mtodo de Kjeldhal

y y y

Interfieren compuestos nitrogenados no proteicos. Uso de catalizadores txicos o caros. Eleccin del factor de conversin.

Leche en polvo Exige deshidratacin al vaco para no alterar sus componentes. Envasada hermticamente la leche en polvo, se conserva bien. Excepcionalmente pueden enranciarse las grasas. Con 125 g de leche en polvo se reconstruye un litro de leche

Abigail Reyes Vzquez

Anlisis de alimentos

PRACTICA No.5

QUIMICA CLINICA

lquida, es decir, cada kilogramo del producto desecado rinde 8 litros de leche para el consumo. Se puede encontrar en tres clases bsicas: entera, semi-descremada y descremada. Adems puede o no estar fortificada con vitaminas A y D. La leche en polvo contiene un elevado contenido en calcio. As por 100 g de leche entera en polvo se obtienen 909 mg de calcio frente a los 118 mg que se obtienen por la misma cantidad de leche entera. Procesado La caracterstica principal del procesado es la atomizacin. El procesado depende en gran parte de la temperatura necesaria para su elaboracin, que suele ser por regla general alta (180 C), media o baja (temperatura de pasteurizacin). Se vigila en todo momento la existencia de grmenes o de impurezas que induzcan a una disminucin de la calidad del producto final. El proceso de deshidratacin es capaz de reducir al 50% de los contenidos hdricos existentes en el contenido de la leche inicialmente. El envasado ms efectivo para este producto lcteo es el de envases de hojalata al que se le suele aadir una cierta cantidad de dixido de carbono.

Contenido en 100 gramos de Leche Nido Energa: Glcidos: Protenas: Lpidos: Nitrgeno: Fibra Total: Agua: Grasas: Ceniza: Observaciones: 501 Kcal 51 g 26 g 20 g 2.88 g 3g 2.5 g 27g 6.1

Se procedi a pesar la muestra.

Se coloco en un matraz de Kjeldahl, le adicionamos la mezcla digestora, junto con el acido sulfhdrico y unas cuantas perlas de ebullicin.

Se colocaron los matraces Kjeldahl en el extractor previamente prendido asi como las parrillas para el calentamiento de la solucin.

Abigail Reyes Vzquez

Anlisis de alimentos

PRACTICA No.5

QUIMICA CLINICA

Se observo un color negro con precipitado.

Al observar un lquido verde casi transparente sin precipitados, se detuvo el proceso en el extractor.

Destilacin En un matras EM se agregaron el acido borico diliudo, con algunas gotas de rojo de metilo, se procedio a colocarlo en la parte de las mangueras del extractor.

Mientras tanto en el matraz Kjeldahl que contiene la solucin (previamente enfriado) se le agrego agua destilada, granadallas de zinc y sosa al 50 %, la mezcla tomo un color azul obscuro.

Se procedi a mezclarlo y a ponerlo en las parrillas superiores encendidas, para proceder a la destilacin y obtener 150 ml de lquido. Titulacin:

El liquido contenido en el matraz es de un color amarillo trasparente.

Abigail Reyes Vzquez

Anlisis de alimentos

PRACTICA No.5

QUIMICA CLINICA

Se procedi a titularse con HCl hasta el cambio a un color canela o rosa plido. Donde los ml gastados de HCl fueron ocupados para la determinacin de Nitrgeno orgnico y protenas de la leche.

Calculos: % N = (ml problema ml blanco) (meqN) (N HCl)/ (Peso de la muestra) x 100 % N = (80-0) (0.014) (0.1) / (1.1) x 100 % N = 10.18% % de protena = (% N) 6.25 % de protena = (10.18) 6.25 % de protena = 64.95% o .64 grs Conclusiones: Gracias a esta prctica pudimos aprender el mtodo para la determinacin de nitrgeno orgnico asi como de protena total de un alimento en este caso la leche para lactantes, que se determina obteniendo dicho porcentaje del nitrgeno. La realizacin es algo tarda pero siempre y hay que tener especial cuidado con la titulacin para no pasarnos mas all. Bibliografa: http://www.grupo-selecta.com/notasdeaplicaciones/analisis-alimentarios-y-de-aguasnutritional-and-water-analysis/determinacion-de-proteinas-por-el-metodo-de-kjeldahlkjeldahl-method-for-protein-determination/ http://www.fao.org/docrep/010/ah833s/Ah833s17.htm

Abigail Reyes Vzquez

Anlisis de alimentos