Antibody Formation and Cell-Mediated Immunity to Dog Pulp Tissue Altered by N2 Paste via the Root Canal

Dalam mengevaluasi keberhasilan dari setiap jenis terapi adalah penting untuk memiliki pemahaman yang menyeluruh dari kompatibilitas biologis dari bahan digunakan dalam pengobatan. Para terapi keuntungan dan manfaat menyadari dari berbagai endodontik bahan harus dipertimbangkan terhadap mereka potensi iritasi dan toksisitas. Telah ditunjukkan '`3 yang nekrotik jaringan dan produk sampingan yang beracun tetap di sistem saluran akar bahkan setelah memadai instrumentasi biomekanik telah dicapai. Pentingnya hal ini yang tersisa jaringan nekrotik dan puing-puing telah dievaluasi pada sebuah basis.4 terbatas Ini telah menunjukkan bahwa berbagai antigen berasal dari bacteria5 7, bovine serum albumin telur, albumin, domba erythrocytes8, atau serum kuda protein9 kekebalannya dapat peka host melalui sistem saluran akar. Honjo et al (1970) 10 memiliki antibodi IgA lokal, IgG, dan IgM terhadap uninflamed dan meradang pulp pada kelinci. Naidorf (1975) "memanfaatkan gel teknik difusi menunjukkan periapikal imunoglobulin pada manusia. Meskipun antigenik yang potensi formaldehid dan fenol senyawa yang mengandung telah ditetapkan oleh banyak investigators'2-5; Nishida et al (1971) 16 telah menunjukkan bahwa kelinci pulpa jaringan ketika diinkubasi dalam antigenisitas mengakuisisi formalin dan menghasilkan humoral spesifik respon. Spector dkk (1968, 1969, 1970) "7" 19 20 dan Ryan dan Spector (1968) "8 telah menunjukkan bahwa kelangsungan granuloma adalah tergantung pada deposisi iritasi di sitoplasma makrofag. Selain itu, Rosengren yang investigations6'7 menunjukkan bahwa ketika Proyek ini didukung oleh Dana Penelitian Hewan Bedah, McGuire Rumah Sakit Veteran, Richmond, Virginia D38 bakteri yang terbatas pada saluran akar antibodi respon sangat minim, namun ketika infeksi menyebar ke jaringan periapikal bahwa respon kekebalan ditingkatkan. Dari data tersebut tampak mungkin bahwa intracytoplasmic endapan bahan asing

seperti antigen dinding sel bakteri, antigenantibody kompleks, sebagian terdegradasi mikroorganisme, bahan mengisi endodontik, atau jaringan pulpa nekrotik sendiri, atau produk sampingan yang dalam kombinasi dengan salah satu agen ini, mungkin bertanggung jawab untuk memproduksi imunologi yang respon yang terlibat dengan periapikal granuloma. Hipotesis ini diuji sebagian oleh Eleazer et al (1975) 21 yang menggunakan saluran akar produk sampingan dari subyek manusia sebagai antigen dan menemukan kurangnya stimulasi limfosit (Sel imunitas dimediasi). Namun, tidak ada yang mengukur kemampuan sealer endodontik atau pasta bila dikombinasikan dengan jaringan pulpa dalam saluran akar untuk merangsang kekebalan yang reaksi. Untuk saat ini, bukti ilmiah menunjukkan bahwa mungkin ada kompleks dan intim hubungan antara bahan digunakan dalam terapi endodontik dan host imunologi dan respons jaringan penyembuhan. Oleh karena itu, adalah penting bahwa lebih besar pemahaman tentang respon kekebalan host untuk prosedur endodontik klinis diperoleh. Sebagai terapis, kita harus terus bertanya pada diri sendiri pertanyaan: "Tepat apa yang endodontik terapi menyelesaikan jika agen dan bahan secara rutin digunakan untuk pengobatan berkontribusi untuk produksi antigen dan sensitisasi mekanisme kekebalan host respon? " Tujuan dari penelitian ini adalah untuk menentukan apakah anjing jaringan pulpa menjadi antigenically diubah bila dikombinasikan dengan * N2 sisipkan dalam saluran akar. Metode dan Bahan UJI BINATANG. - The hewan percobaan lima sehat anjing jantan AC masing-masing berat 27 hingga 31 kilogram. Dengan tiga dari hewan, bahan percobaan, N2 * pasta, dikombinasikan dengan pulp gigi anjing dan ini kompleks bertindak sebagai antigen. Sisanya dua anjing menjabat sebagai kontrol. Kontrol pertama anjing itu dikombinasikan dengan garam pulpa gigi nya untuk menguji antigenisitas ini kompleks ', yang kedua anjing itu eritrosit domba, antigen yang dikenal, disuntikkan ke dalam saluran akar nya. Anjing-anjing itu ditempatkan di kamar di kelembaban dikontrol dalam bolak siklus terang dan gelap. Anjing-anjing diberi makan makanan anjing laboratorium ad libitum. METODE sensitisasi. - Para sensitisasi teknik yang digunakan adalah modifikasi dari prosedur

dikembangkan oleh Nishida dan associates'6. Prosedur berikut dilakukan pada dibius dengan 10-12 ml diintubasi anjing surital **. Semua gigi diradiografi, skala, dan dipoles sebelum isolasi karet bendungan. Dua puluh karies gigi bebas di setiap anjing yang digunakan. Teknik steril digunakan endodontik seluruh percobaan. Operatif wilayah itu digosok dengan Mercresin 5% selama lima menit sebelum membuat akses ke pulpa ruang dengan bur bulat (angka 4) dalam handpiece kecepatan tinggi. Jaringan pulpa adalah extirpated dengan bros endodontik. Pendarahan pulp itu dikendalikan oleh kapas pelet. Lapisan tebal dari kapas ditempatkan di atas pulp dan pembukaan akses itu disegel dengan IRM semen * * *. Setiap anjing diberikan intramuskular suntikan 500 mg. penisilin dan 250 mg. streptomisin segera setelah operasi dan tiga kali sehari selama berikutnya tiga hari. Jaringan pulpa telah dihapus dari 20 gigi setiap binatang. Setiap jaringan binatang itu secara terpisah dikumpulkan, homogen, dan dibagi menjadi sama bagian dari 50 mg. Satu setengah dari pooled pulp dari setiap anjing segera dibekukan pada suhu 4 C dalam 10 ml larutan saline steril yang normal. Dalam tiga anjing, setengah lainnya diinkubasi dengan N2, dicuci, disentrifugasi, terkonsentrasi, dicampur dengan 4 ml. dari yang tidak lengkap Freund adju* Bubuk: Titanium Dioksida 4.0%, 6.50o Paraformaldehyde, Bismuth Subcarbonate 9,0% o, Phenylmercuric Borat 0,09%, Zinc Oxide 610o, Barium Sulfat 3.007o, Bismuth Subnitrate 4,0%, Lead tetroksida l lo, Hidrokortison 1,2%, Prednisolon .21%. Cair: Rose Oil 8,0% o, 92,0% Eugenol. ** Taman Davis dan Co, Detroit, Michigan * L. D. mendempol Co, Milford, Delaware * Amicon Filter, Lexington, Mass vant dan emulsi. Empat 1 ml. Aliquot ini Campuran 4 ml masing-masing disuntikkan secara intramuskuler di wilayah dari serviks kanan dan kiri kelenjar getah bening dan popliteal kanan dan kiri node. Ini dilakukan imunisasi dasar pada masing-masing dari 3 anjing segera setelah pulpa pemusnahan dan persiapan bahan. Setiap anjing disuntik dengan hanya pulpa sendiri jaringan yang sebelumnya telah extirpated dan diobati. Pada interval tujuh hari selama 28 berikutnya hari, kanal akar gigi lima di masing-masing dari hewan yang telah pulp mereka extirpated sebelumnya telah diinstrumentasi dan diisi dengan

N2. Pada setiap dari empat interval berikutnya imunisasi melalui saluran akar, protokol yang sama dimanfaatkan dalam pengelolaan hewan dan jaringan antigen dalam imunisasi dasar ketat diikuti. Namun, pada setiap kesempatan, sebelum mengisi lima gigi, nekrotik pulpa yang tetap tinggal setelah pemusnahan awal telah dihapus, dan disimpan dalam 10 ml normal steril larutan garam dan dibekukan untuk in vitro pengujian. Dengan dua anjing kontrol, prosedur yang digunakan adalah sama seperti diuraikan di atas kecuali bahwa dalam satu, solusi hewan yang normal salin steril adalah digunakan sebagai pengganti bahan percobaan, dan di anjing lain, larutan 10% dari domba eritrosit disuntikkan untuk menguji kelangsungan hidup saluran akar untuk bertindak sebagai jalur untuk imunisasi. Antigen PERSIAPAN UNTUK dalam pengujian in vitro: -Dalam setiap anjing eksperimental dan garam kontrol anjing sampel awal pulp dikumpulkan yang telah dibekukan dalam 10 ml saline dibagi menjadi dua 25 mg. porsi. Satu porsi pada anjing masing-masing dilayani sebagai kontrol, yaitu, itu tidak diinkubasi dengan N2 tersebut. Dalam percobaan tiga anjing, mg 25 lainnya. Bagian ini diinkubasi dengan N2 selama 48 jam, dicuci, disentrifugasi, disonikasi, dan terkonsentrasi dengan Amicon Filter ****. Antigen ini sekarang akan ditunjuk sebagai pulp beku telah diubah oleh bahan (FPM). Pulp nekrotik yang tetap tinggal di semua 20 gigi di setiap eksperimental anjing setelah pemusnahan awal, telah dihapus dari masing-masing dari lima gigi sebelum obturasi pada masing-masing 7 - interval, dan 28-hari -, 14 -, 21 dan diproses dengan cara yang sama. Jaringan ini selanjutnya akan disebut sebagai pulp nekrotik diubah oleh materi (NPM). Ini pulp nekrotik diinkubasi dan diobati dengan cara yang sama seperti jaringan pulpa beku (FPM). Jumlah protein antigen dianalisis dengan uji biuret dan 2,5 mg. per 1 ml. saline digunakan dalam pengujian in vitro. Dalam

kasus anjing garam kontrol, 50 seluruh mg. sebagian diinkubasi dengan normal steril garam selama 48 jam, dicuci, disentrifugasi, dan terkonsentrasi dengan Filter Amicon. para nekrotik pulpa yang tetap tinggal di semua 20 gigi di anjing garam kontrol setelah pemusnahan awal, juga dihapus dari masing-masing dari lima gigi sebelum obturasi pada masing-masing 7 -, 14 -, 21 dan 28-hari interval.

Titer selama 35 hari dari antigen berikut: pulp beku (FPM) dan pulp nekrotik (NPM) diinkubasi dengan garam, eritrosit domba (SRBC), pulp beku (FPM) dan pulp nekrotik (NPM) diinkubasi dengan pasta N2. Pada (SO) 0 imunisasi hari utama dilakukan I. M. Pada (S1-S4) hari Saluran akar gigi yang 7,14,21,28 5 yang obturated dengan N2 paste untuk bertindak sebagai imunisasi sekunder. Segitiga padat mewakili pulp beku (FPM) diinkubasi dengan garam yang memiliki titer antibodi 1 / 4 setelah imunisasi primer dan naik ke 1 / 8 setelah imunisasi melalui saluran akar. Pola ini identik dalam jaringan pulpa beku yang diambil dari N2 yang hewan yang dianalisis sebelum inkubasi dengan pasta N2 dan pulp beku yang diambil dari independen garam kontrol anjing. Buka segitiga mewakili pulp nekrotik (NPM) diinkubasi dengan garam yang memiliki titer antibodi 1 / 16 setelah imunisasi dasar IM dan 1 / 32 setelah imunisasi melalui saluran akar. Pattem ini identik dalam jaringan pulpa nekrotik diambil dari N2 hewan yang dianalisis sebelum inkubasi dengan pasta N2 dan pulp nekrotik diambil dari independen garam kontrol anjing. Kotak yang solid merupakan eritrosit domba yang memiliki titer antibodi dari 1 / 16 setelah imunisasi primer I.M. dan 1 / 64 setelah imunisasi melalui saluran akar. Buka lingkaran mewakili jaringan pulpa beku yang telah telah diinkubasi dalam pasta N2 dan dicuci (PPM). Setelah imunisasi dasar IM titer antibodi adalah 1 / 64 yang naik menjadi 1 / 160 setelah imunisasi melalui saluran akar. Jaringan pulpa beku yang diambil dari sama anjing yang belum diinkubasi dengan N2, tapi garam, memberikan titer antibodi 1/4-1/8 (padat segitiga). Peningkatan titer secara statistik signifikan pada p <0,001. Lingkaran yang solid merupakan jaringan nekrotik yang puip telah diinkubasi dalam pasta N2 dan dicuci (NPM). Setelah imunisasi dasar I.M. antibodi Titer adalah 1 / 160 yang naik menjadi 1 / 320 setelah imunisasi melalui saluran akar. Pulp nekrotik jaringan yang diambil dari anjing yang sama yang belum diinkubasi dengan N2, tapi garam, memberikan titer antibodi dari 1/16-1 / 32 (segitiga terbuka). Peningkatan titer secara statistik signifikan pada p <0,001 Gambar. 3. - Bar padat merupakan jumlah radioaktif disintegrasi per satu menit PHA. Ada aktivitas stimulasi limfosit kuat yang menunjukkan

dan kontrol positif yang baik. Dotted bar mewakili disintegrasi radioaktif per satu menit dari pulp beku dan nekrotik dari garam 1 kontrol anjing dan pulp dengan 3 anjing eksperimental 'sebelum inkubasi dengan bahan N2. Radioaktivitas diabaikan dari pulp sebelum inkubasi dengan N2 pasta mengindikasikan kurangnya proliferasi limfosit. Crosshatched bar mewakili disintegrasi radioaktif PENGUKURAN antibodi: - Preextirpation (SO), 7 (SI), 14 (S2), 21 (S3), 28 (S4), dan 35 Tingkat hari (S5) antibodi tercatat dari serum sampel masing-masing anjing. Ini sera yang diukur dengan hemaglutinasi sel darah merah kecokelatan teknik yang dijelaskan oleh Stavitsky (1954) 22. Domba sel darah merah yang digunakan untuk penyamakan dan serum janin anak sapi dimanfaatkan sebagai pengencer. Kebalikan dari pengenceran tertinggi dari aglutinasi dari sel-sel peka adalah desain diinkubasi hanya garam diinkubasi dengan N2 pasta kontrol positif per satu menit setelah pulp beku dan nekrotik dari pulp tiga anjing eksperimental 'telah diinkubasi dalam N2 pasta dan dicuci. Ada ditandai peningkatan radioaktivitas jaringan ini setelah pengobatan dengan bahan ini. Oleh karena itu, dengan membandingkan serapan radioaktif tingkat beku dan nekrotik pulp sebelum dan setelah inkubasi dengan pasta N2, jelas bahwa ada peningkatan ditandai dalam limfosit proliferasi. Data-data secara statistik signifikan pada p <0,002. terkontaminasi sebagai titer antibodi. Pada terendah dan tertinggi titer antibodi hemaglutinasi inhibisi yang Tes dilakukan untuk mengevaluasi antibodi spesifisitas. PENGUKURAN SEL KEKEBALAN Mediated TANGGAPAN: - Sebuah teknik standar yang digunakan untuk mengukur respon imun diperantarai sel adalah stimulasi limfosit reaction23-25. Dengan pelabelan limfosit dengan timidin tritiated adalah mungkin untuk mengukur sintesis DNA dan

dengan demikian menghitung respon limfosit untuk antigen spesifik. Pada preextirpation (S0) dan hari ke-35 (S5) seluruh darah diambil dari jugularis eksternal vena pada masing-masing 5 anjing dan defibrinated dengan berputar-putar dengan manik-manik kaca untuk sepuluh menit. Darah diencerkan 1:1 dengan normal saline, berlapis atas ficoll-Hypaque (sp. gr = 1,074.) gradient23-25 dan disentrifugasi pada 400 g selama 40 menit. Band limfosit-murni pada antarmuka

itu disedot, dicuci sekali dengan Hank BSS dan konsentrasi sel ditentukan (5 x 105 sel per dinding). Budaya yang ditetapkan di piring Limbro menggunakan media TC-199 dilengkapi dengan 100 A-units/ml penisilin, 100 ju-gm/ml. streptomisin dan 100 Lglutamine it-mo/e/ml ditambah 20% serum anak sapi janin. Lima puluh itliters antigen masing-masing digunakan dalam budaya masing-masing. Antigen berikut digunakan untuk analisis: dari 3 anjing eksperimental beku dan nekrotik pulp diubah oleh N2 (FPM, NPM); beku dan pulp nekrotik diinkubasi dalam garam ini sama 3 anjing N2 eksperimental sebelum pulp mereka diobati dengan pasta N2; beku dan nekrotik pulp diinkubasi dengan garam dari anjing 4 yang merupakan kontrol yang independen; phytohemagglutinin (PHA) dimanfaatkan sebagai positif kontrol dan budaya tanpa antigen (saline) digunakan sebagai kontrol negatif. Semua antigen sampel diuji pada pengenceran berikut untuk limfosit rangsangan: 1:1, 1:2, 1:5, 1:10, 1:25, 1:50, 1:100, 1:250, 1:500, 1:1000 dan 1:1500. Pelat diinkubasi CO2 di atmosfer 95% pada 37 C selama enam hari dan 2 u-curie dari tritiated timidin (sp. UU = 1,9.) ditambahkan ke setiap kebudayaan. Budaya limfosit murni diinkubasi selama dua puluh jam tambahan dan dipanen pada Whatman CF / C fiber glass kertas filter menggunakan harvester2 otomatis *****. Filter ditempatkan di kilau Cair Botol kaca counter, scintillant ditambahkan (3,8 toluena + 0,0379 + 22,74 gm gm POPOP POP) dan botol dihitung selama sepuluh menit dalam sebuah proton kilau counter Cair memantau * * * * * *. Disintegrasi per menit dihitung dan analisis statistik standar dilakukan. Hasil: 1. TANGGAPAN humoral. - Tingkat tertinggi dari hemaglutinasi sel darah merah kecokelatan titer diilustrasikan sepanjang hari berbagai percobaan ditunjukkan pada Gambar 1. Nilai-nilai mewakili aglutinasi antibodi yang dihasilkan ***** Otto Hiller Perusahaan, Midson, Wisconsin ***** Packard Isocap 300, Downers Grove, Illinois hadir dalam N2 anjing percobaan, kontrol anjing memanfaatkan eritrosit domba sebagai dikenal antigen, dan anjing kontrol menggunakan garam sebagai bahan mengerami. Sebagai tambahan kontrol, bagian 25 mg pulp beku dan pulp nekrotik dari 3 hewan N2 yang diuji untuk stimulasi antibodi sebelum inkubasi dengan bahan N2. Ini aglutinasi antibodi titers nilai yang sama diperoleh sebagai yang dihasilkan oleh kontrol independen pulp anjing diinkubasi dengan garam. Para nekrotik

bahan pulp (NPM) dan bahan bubur kertas beku (FPM) data rata-rata pengenceran titer N2 anjing memiliki diulang serum analisis pada tiga kesempatan terpisah. NPM yang Data menunjukkan bahwa titer antibodi lebih tinggi Titer hadir (1 / 320) dibandingkan dengan FPM yang (1 / 160) pada anjing N2. Dalam eksperimental anjing dengan membandingkan garam yang diinkubasi untuk N2 yang diinkubasi, kenaikan titer antibodi signifikan secara statistik pada p <0,001. Spesifik penghambatan tes yang dilakukan pada sera awal (Jadi) dan akhir (S5) menunjukkan antibodi kekhususan untuk jaringan pulpa diubah oleh N2 material pada 1 / 250. Dalam percobaan 3 Anjing N2 yang diinkubasi pulp dalam air garam sebelum inkubasi dengan pasta N2 dan di kontrol independen anjing, di mana pulp itu diinkubasi dengan garam, titer antibodi ditampilkan oleh antigen NPM naik dari 1 / 16 dilusi setelah imunisasi primer intramuskular untuk 1 / 32 dilusi melalui saluran akar. Dengan antigen FPM diinkubasi dalam garam injeksi intramuskular memberikan pengenceran 1 / 4 sedangkan melalui saluran akar titer adalah 1 / 8. Eritrosit domba antigen ketika disuntikkan pada imunisasi dasar intramuskuler memberikan titer antibodi dari 1 / 16 yang naik menjadi 1 / 64 dengan imunisasi sekunder melalui saluran akar. 2. SEL dimediasi TANGGAPAN - The radioaktif berlabel limfosit data Gambar 3 diambil dari darah seluruh anjing di hari (S5) ke-35 dari jadwal imunisasi. Data kontrol di (Jadi) hari awal percobaan menunjukkan tidak ada aktivitas. Tertinggi tingkat stimulasi limfosit ditemukan terjadi pada pengenceran 1:10 antigen baik di beku dan nekrotik pulp diubah oleh materi N2 (NPM, FPM). Data (Gambar 2) mewakili radioaktivitas penyerapan DNA dalam limfosit dalam perubahan dalam disintegrasi per satu menit setelah aktivitas latar belakang dari kontrol saline telah dikurangi. Data ini menunjukkan bahwa pulp beku antigen sebelum inkubasi dengan N2 memiliki aktivitas rata-rata 982 distintegrations per satu menit sedangkan antigen pulp nekrotik dipamerkan 522 disintegrasi per menit.
Namun, ketika pulp telah diubah oleh N2 yang antigen dan dicuci radioaktivitas naik menjadi 2887 untuk pulp beku (FPM antigen) dan 1928 untuk pulp nekrotik (NPM). Dalam eksperimental anjing dengan membandingkan garam yang diinkubasi ke N2 diubah pulp peningkatan radioaktivitas proliferasi limfosit secara statistik signifikan pada p <0,002. Yang sesuai

kontrol positif PHA yang memberikan satu menit disintegrasi dari 4502 untuk FPM yang dan 2982 untuk NPM menunjukkan limfosit yang kuat proliferasi. Untuk lebih memverifikasi data ini pulp beku dan jaringan nekrotik antigen anjing kontrol independen diinkubasi dalam garam dan diuji untuk aktivitas limfosit (Gambar 2). Dalam hewan ini radioaktivitas satu menit disintegrasi untuk dibekukan dan nekrotik pulp diperlakukan dengan garam adalah 774 dan 941 masing-masing. Dengan membandingkan informasi ini untuk satu menit disintegrasi eksperimental pulp anjing 'beku dan nekrotik, yang telah diinkubasi dalam air garam, hasilnya statistik tidak signifikan. Diskusi Salah satu kontroversi besar di Endodontik hari adalah penggunaan pasta * N2 sebagai bahan pengisi. Sejumlah penelitian pada hewan telah dilakukan pada jaringan rats26 "284142 guinea pigS29, 30,41,42 rabbits3132, dogs33, miniatur babi dan monyet teeth28'41'42 Umumnya sedang sampai reaksi jaringan yang parah telah reported261 Studi Jaringan 33,41.42 budaya telah menunjukkan N2 menjadi sangat cytotoxic34374 42 Penelitian pada manusia telah mengklaim miskin yang sangat baik hasil dengan N2 mengisi materials28 38 40. Histologik menindaklanjuti gigi manusia diobati dengan N2 sisipkan oleh Zerosi et al (1 959) 38 dan Nicholls (1963) 39 diklaim hasil yang dapat diterima. Meskipun ini Iten (1958) 40 dan Langeland41'42 menunjukkan parah peradangan dan nekrosis jaringan periapikal dalam menanggapi pasta N2. Meskipun bukti yang menunjukkan toksisitas dan iritasi, tidak ada satu untuk saat ini menunjukkan respon imun spesifik untuk pasta N2 atau ke jaringan diubah oleh bahan ini. Landsteiner, 1243-45 serta peneliti lainnya, 13-15,46-48 telah menunjukkan imunologi yang bagus kekhususan untuk molekul kecil yang disebut haptens yang melekat pada molekul yang lebih besar seperti pembawa protein yang disebut dengan akibat dari perubahan spesifisitas imunologi. Hipotesis dari percobaan ini adalah bahwa N2 adalah jaringan hapten dan pulp, pembawa protein, yang bila dikombinasikan dalam cara yang cocok akan menyebabkan jaringan pulpa diubah menjadi suatu imunogen. Data pada Gambar 1 menunjukkan bahwa dalam N2 eksperimental tiga anjing yang pulp yang diuji untuk antibodi spesifik sebelum inkubasi

dengan bahan * N2 dan pada anjing yang pulp diobati dengan garam ada yang sangat titer antibodi rendah 1 / 8 FPM dan 1 / 32 NPM. Namun, ketika porsi yang berbeda dari ini sama pulp dari anjing N2 telah diubah oleh * N2 pasta, ada peningkatan signifikan dalam antibodi titer 1 / 160 untuk FPM dan 1 / 320 untuk NPM. Dalam anjing ini eksperimental, dengan membandingkan garam diinkubasi ke N2 diinkubasi pulp kenaikan titer secara statistik signifikan pada p <0,001. Selain itu, tingkat rendah antibodi untuk kedua pulp beku dan nekrotik diperlakukan dengan garam telah dikonfirmasi dalam sebuah independen kontrol anjing. Oleh karena itu, ini menegaskan kemampuan dari campuran N2 kita dimanfaatkan untuk mengubah tuan jaringan pulpa dan membuat itu antigen aktif. Dengan mengubah komposisi N2 yang paste atau menguji efek dari berbagai komponen adalah mungkin bahwa jaringan host tidak mungkin diubah. Namun, ini tampaknya sangat mungkin karena kita telah terpisah dan pasti menunjukkan antibodi sistemik beredar titer untuk jaringan pulpa diubah oleh paraformaldehyde dan eugenol49. Your kerjasama antara sel-B (antibodi memproduksi sel) dan sel T helper-(peka limfosit yang terlibat dalam imunitas sel dimediasi) ini juga diakui sebagai suatu proses sangat penting dalam antibodi production50 ". Selain itu, berbagai investigators56 "64 telah menunjukkan peran kunci dari makrofag dan mungkin IGT faktor dalam interaksi kooperatif. Dari bukti-bukti kita (Gambar 2) terlihat bahwa ketika kedua beku dan jaringan pulpa nekrotik antigen dari 3 anjing N2 eksperimental dan 1 anjing kontrol independen diinkubasi dengan garam radioaktif serapan-proliferasi limfosit tidak signifikan. Namun, ketika sebagian dari pulp beku dan nekrotik yang sama dari 3 anjing eksperimental telah diubah oleh N2 pasta dan diuji untuk potensi antigen nya, ditandai proliferasi limfosit menghasilkan. Di dalam hewan percobaan, dengan membandingkan diinkubasi dengan garam untuk pulp N2 yang peningkatan proliferasi limfosit radioaktivitas secara statistik signifikan pada p <0,002. Oleh karena itu, temuan ini sebagian setuju dengan Eleazor itu et al (1975) 21 hasil yang menunjukkan kurangnya stimulasi limfosit untuk diobati saluran akar produk sampingan. Namun, ketika pulpa

antigen jaringan yang diubah seperti dengan inkubasi dengan N2 pasta proliferasi limfosit dapat terjadi Pentingnya respon histologis untuk N2 paste dengan kehadiran morfologinya limfosit, makrofag dan sel plasma dalam jaringan periapikal seperti yang ditunjukkan oleh Langeland41t42 tentu menyediakan substansial bukti bahwa sel-sel imunokompeten memang tertarik dan aktif di daerah ini. Dasar fungsi sel-sel inflamasi dikenal dan ini penyelidikan ini immunoserologic Data sangat memperkuat Langeland's4'142 pengamatan morfologi. Sebagai terapis itu penting kita mempertanyakan komentar-komentar baru-baru dinyatakan oleh Artz (1976) 65 tahun yang merasionalisasi yang "N2" teknik dengan menyatakan tidak ada gunanya menetapkan bahwa bahan pengisi RC2B diekstrusi luar apeks atau ditanamkan dalam tabung percobaan hewan mempromosikan jumlah yang lebih besar neutrophilic leukosit dan makrofag dari beberapa bahan mengisi. Jenis berpikir jelas menunjukkan kurangnya pemahaman luar biasa dari inflamasi dan kekebalan tubuh respon mekanisme dan mengabaikan untuk biologis kompatibilitas bahan endodontik digunakan dalam terapi. Ada beberapa fitur membatasi ini studi yang harus diakui. Yang pertama adalah hewan atau variabilitas respon kekebalan host. Meskipun toksisitas N2 adalah juga documented26142 respon kekebalan tubuh dan penyembuhan potensi untuk bahan endodontik dapat bervariasi nyata dari hewan ke hewan. Oleh karena itu, sulit untuk ekstrapolasi data ini untuk semua hewan atau manusia mana yang jauh lebih kompleks dan respon kekebalan tubuh yang canggih mekanisme hadir. Selain itu, pulp jaringan dalam lingkungan alam host (akar kanal) mungkin tidak menjadi antigen diubah karena faktor interrelating banyak. Beberapa dari ini mungkin mekanisme pertahanan tuan rumah konsentrasi, kualitas, kuantitas dan jenis pulp dan / atau bahan yang tersisa di saluran akar. Namun demikian, studi ini menunjukkan bahwa pulp dapat menjadi antigen diubah, diakui oleh host dan bahwa humoral spesifik dan sel respon imun dimediasi mungkin diproduksi. Dalam mengevaluasi respon kuantisasi, kekebalan dari jumlah yang tepat N2 * materi

digunakan dalam obturasi saluran akar adalah penting. Namun, sebelum hal ini dapat dicapai suatu teknik yang memadai untuk mengontrol penempatan mengisi materi harus diperoleh. Karena N2 * paste adalah sulit untuk tepat mengontrol, telah telah ditunjukkan untuk hadir dalam berbagai organs6668 sistemik, sangat iritan dan cytotoxic266442, dan karena sekarang telah ditunjukkan untuk mengubah jaringan host, dan membuat itu