Recuento De Coliformes En Alimentos.

Count Of Coliform In Food.

Angarita Bautista Leidy Yudith Código: 02171043, Eulegelo Osorio Yulie

Astrith
Código: 03172027, Parada Cardenas Geisel Yelene Código: 04172026,
Porras Manrique ana patricia Código: 03172011

RESUMEN

Los jugos de frutas que se venden en las calles, poseen fuerte potencialidad para la
transmisión de enfermedades gastrointestinales debido a que son alimentos
extensamente manipulados. Los coliformes son microorganismos que se utilizan como
índice de contaminación fecal al encontrarse principalmente en el intestino del hombre
y animales de sangre caliente. En algunos alimentos se requiere la investigación de la
presencia o ausencia de estos microorganismos, por exigencias de disposiciones
legislativas porque en dichos productos la presencia es indicadora de mala calidad
microbiológica. La metodología es basada en sembrar en el Agar Chromocult y caldo
Lauryl Sulfato de la cantidad de muestra en la que se quiera conocer la presencia o
ausencia de coliformes totales y fecales, y posterior incubación a 37 ºC durante 48
horas. Las colonias sospechosas se confirman con las pruebas IMVIC y emisión de
fluorescencia.

Palabras Claves: Coliformes, NMP (numero más probable), Recuento, Vertido en

placa, E. coli.

ABSTRACT

The fruit juices sold on the streets are good vehicle to transmit gastrointestind diseases
to consumers because they are highly manipulated. The coliform organisms that are
used as an indicator of fecal contamination to be found primarily in the intestines of
humans and warm-blooded animals. In some foods is required investigating the
presence or absence of these microorganisms, either because of legislative
requirements well in those products that the presence is indicative of poor
microbiological quality. The methodology is based in sow in the Chromocult Agar and
Lauryl Sulfate Broth of the amount of shows in which they want to know the presence
or absence of fecal and total coliform, and after incubation at 37 °C for 48 hours. The
suspect colonies are confirmed with evidence IMVIC and issuance of fluorescence.

Key Word: Coliform, MPN (most probable number), Count, Landfill plate, E. coli.
INTRODUCCION
* Tipo de muestras: Jugo casero
La venta de alimentos en la calle Fecha de preparación: 19/08/08
constituye un factor positivo por su Hora: 4:00 p. m.
posibilidad de generar empleos, Sabor: Guayaba en agua.
Procedimiento Salmonella spp.
movilizar gran cantidad de recursos y
satisfacer la obtención de obtener 1. Fase PRE- enriquecimiento en ½
comidas rapidas, entre otras líquido no selectivo
ventajas; pero la frecuente
presentación de malas condiciones Pesar 25 gr. De la carne cruda
higienicas en el procesamiento y asépticamente
oferta señalan la importancia de Adicionar y Homogenizar
mantener el control sanitario a esta 25 gr. de carne cruda
actividad.
255 ml Agua peptona
Los microorganismos patógenos que
Dilución 10-1
se han detectado en alimentos
vendidos en la calle no difieren de Incubar a 37ºC por 18-24 horas
los encontrados en las comidas
2. Fase Enriquecimiento no selectivo
preparadas y servidas en
establecimientos cerrados, aunque Adicionar
los problemas potenciales son 1ml
mayores y más frecuentes. En este
sentido se reconoce la necesidad de
Dilución 10-1 caldo
mejorar los programas de protección
Selenito
de los consumidores de alimentos Cisteína
que se venden en las calles. Dilución
10-2
MATERIALES
Incubar a 42ºC en Baño María, por 18
* 4 cajas de petri estériles horas
* 9 tubos estéries con campana de
durman y caldo Lauryl Sulfato. 3. Fase Aislamiento diferencial en ½
* 2 pipetas estériles de 10ml selectivos
* 2 pipetas estériles de 1ml
* 1 pipeteador
* 1 gradilla
* 2 fiolas con caldo peptona estériles

METODO Sembrar por

Aislamiento
* Tipo de muestra: Jugo pasteurizado Dilución 10-2 Agar S-S
Fecha vencimiento: 18/03/09 Caldo Selenito Cisteína
Lote: 31701 salmonella-shigella
Sabor: Fresa
Marca: Alpina Incubar a 37ºC, por 24 horas a 48 horas
 Oxidasa a las colonias típicas
Observar la presencia de colonias
negras con un alo rosado, realizar
Gram a las colonias típicas, Si hay
bacilos Gram Negativos realizar
bioquímica
Catalasa a las colonias típicas

A partir de las colonias del Gram. Que

sean bacilos cortos gram positivos,
Procedimiento Listeria catalasa positiva oxidasa negativa
monocytogenes:
Se les realiza identificación:
1. Fase PRE- enriquecimiento en ½
líquido no selectivo

Tomar 25 ml. De la avena en leche

casera, Adicionar agua peptona y Agar Sangre
Homogenizar
25 ml. de avena en
leche casera

255 ml Agua peptona

Dilución 10-1
Incubar a 37ºC por 18-24 horas en la
incubadora

2 Fase siembra en medios

diferenciales:
Glucosa sacarosa VP-RM TSI
movilidad

Dilución 10-1 Sembrar por Agar

Sangre
RESUMEN
Aislamiento
Todos los coliformes son lactosa
Incubar a 37ºC, por 24 horas
positiva, pero se diferencian en el agar
chromocult por reacciones bioquímicas.
3. Fase Identificación
Los colifomes totales tienen la B-
galactosidasa, este complejo activa el
Realizar coloración de Gram. a las
compuesto cromógeno alfa –GAL que
colonias típicas
produce un color azul violeta.
Los coliformes son habitantes de tracto
gastrointestinal tanto del hombre como
de los animales. El mas representativo
del grupo es la E. coli, La presencia http://www.ainia.es/pdf/laboratorios/fich
de coliformes en cualquier alimento as/ColiformesTotalesFecalesyE_coli(Inv)(
nos indica una mala calidad higiénica 110086).pdf
de los manipuladores. Estos son uno
de los grupos indicadores
determinados en la industria de
alimentos para el control de calidad,
mas que todo la importancia radica
en la presencia de coliformes fecales
que es indeseable por que no dice la
mala manipulación e higiene de
quien procesa el alimento y también
indicándonos contaminaciones
cruzadas

El alimento analizado en esta

práctica fue el jugo casero y el
pasteurizado, Resultando el jugo
casero con un recuento en la siembra
NMP de 330 con 240 bac/100ml
indicando la presencia de coliformes
totales, se realizo la prueba de
fluorescencia a cada tubo dando
negativa.
En la siembra en placa se
encontraron 27 colonias de color rojo
en la dilución 10-3 y 7 colonias en la
dilución 10-4,
El en la siembra en placa del jugo
pasteurizado, no hubo ningún
crecimiento demostrando que en el
procedimiento se cumplió con las
normas exigidas para el análisis y
que cumple con los parámetros
admisibles para el consumo humano.

BIBLIOGRAFÍA

http://www.javeriana.edu.co/biblos/te
sis/ciencias/tesis105.

http://www.uprm.edu/biology/profs/m
assol/manual/p4-
nmpenumeracion.pdf

http://usuarios.lycos.es/zandoli/web3/
Tabla%20NMP.htm