Albúmina

AA
Método colorimétrico para la determinación de albúmi-
na en suero

SIGNIFICACION CLINICA c) Sustancias interferentes conocidas: no se observan in-

Las proteínas son compuestos orgánicos macromoleculares, terferencias por bilirrubina hasta 200 mg/l, triglicéridos hasta
ampliamente distribuidos en el organismo. La albúmina es el 9 g/l y hemoglobina hasta 0,70 g/dl.
principal contribuyente de las proteínas totales plasmáticas. Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
Entre sus múltiples funciones se pueden mencionar: drogas en el presente método.
- transporte de una amplia variedad de sustancias como hor- d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: si no
monas esteroides, ácidos grasos, bilirrubina, catecolami- se procesa inmediatamente el suero puede conservarse 3 días
nas, que en forma libre son insolubles en medio acuoso; en refrigerador (2-10oC) o una semana en congelador (-4oC).
- mantenimiento de la presión coloidosmótica, que estaría rela-
cionado con su bajo peso molecular y su gran carga neta. MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
Los aumentos anormales de albúmina son ocasionales y se - Espectrofotómetro o fotocolorímetro.
relacionan casi siempre con la deshidratación que provoca la - Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados.
reducción en el contenido del agua plasmática. - Tubos de fotocolorímetro o cubetas espectrofotométricas
La hipoalbuminemia ocurre en condiciones patológicas tales de caras paralelas.
como pérdida excesiva de proteínas en el síndrome nefrótico, - Reloj o timer.
desnutrición, infecciones prolongadas, quemaduras severas.
Otras causas son disminución en la síntesis por una dieta CONDICIONES DE REACCION
deficiente, enfermedad hepática o malabsorción. - Longitud de onda: 625 nm en espectrofotómetro o en foto-
colorímetro con filtro rojo (620-650 nm)
FUNDAMENTOS DEL METODO - Temperatura de reacción: 15-28oC
La albúmina reacciona específicamente (sin separación pre- - Tiempo de reacción: 10 minutos
via) con la forma aniónica de la 3,3',5,5'-tetrabromo cresolsul- - Volumen de muestra: 10 ul
fon ftaleína (BCF), en presencia de un exceso de colorante, - Volumen de Reactivo: 2,5 ml
en medio tamponado a pH 3,9. El aumento de absorbancia a - Volumen final de reacción: 2,51 ml
625 nm respecto del Blanco de reactivo, es proporcional a la
cantidad de albúmina presente en la muestra.
PROCEDIMIENTO
REACTIVOS PROVISTOS En tres tubos de fotocolorímetro marcados B (Blanco), S
Reactivo: solución de BCF 0,3 mmol/l (en polioxietilén lauril éter). (Standard) y D (Desconocido), colocar:
B S D
REACTIVOS NO PROVISTOS
Suero Patrón provisto separadamente por Wiener lab. Suero Patrón - 10 ul -
Muestra - - 10 ul
INSTRUCCIONES PARA SU USO
Reactivo 2,5 ml 2,5 ml 2,5 ml
Reactivo Provisto: listo para usar.
Mezclar con varilla. Mantener los tubos entre 15 y 28oC
PRECAUCIONES durante 10 minutos. Leer en espectrofotómetro a 625 nm
El reactivo es para uso diagnóstico "in vitro". o en fotocolorímetro con filtro rojo (620-650 nm) llevando a
cero con el Blanco de Reactivo.
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
ALMACENAMIENTO
Reactivo Provisto: es estable a temperatura ambiente has- ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL
ta la fecha de vencimiento indicada en la caja. El color es estable 20 minutos por lo que la absorbancia debe
ser leída dentro de ese lapso.
MUESTRA
Suero CALCULO DE LOS RESULTADOS
a) Recolección: debe obtenerse suero libre de hemólisis. Empleando el Suero Patrón tal como se indica en PROCEDI-
b) Aditivos: no se requieren. MIENTO, los cálculos se realizan como sigue:

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 Albúmina (g/dl) Dirección de la reacción ........................................ aumenta
Albúmina (g/dl) = D x f f= Temperatura de reacción .............................................. 37oC
S
Relación muestra/reactivo .......................................... 1:150
Albúmina (g/dl) Tiempo de equilibrio ........................................... 3 segundos
Relación A/G = Tiempo de retardo ............................................ 60 segundos
Prot. tot. (g/dl) - Alb. (g/dl) Tiempo de lectura ......................................... 5-20 segundos
Absorbancia del blanco .................................... < 0,450 D.O
METODO DE CONTROL DE CALIDAD Límite de absorbancia ...................................... < 2,000 D.O
Standatrol S-E 2 niveles. Linealidad .......................................................... 0,5-7,0 g/dl
Cuando la determinación se lleve a cabo en un analizador Para las instrucciones de programación consulte el manual
automático, deberán procesarse 2 niveles de un material de del usuario del analizador en uso.
control de calidad (Standatrol S-E 2 niveles) con concentra-
ciones conocidas de albúmina, con cada determinación. PRESENTACION
- 6 x 60 ml (Cód. 1009300).
VALORES DE REFERENCIA - 6 x 120 ml (Cód. 1690008).
Se determinó el contenido de albúmina en suero de personas
sanas, de ambos sexos, con alimentación mixta normal y BIBLIOGRAFIA
edades entre 17 y 40 años. - Doumas, B.T.; Watson, W.A. & Biggs, H.G. - Clin. Chim.
Se obtuvieron los siguientes rangos: Acta 31/1:87 (1971).
Albúmina: 3,5 a 4,8 g/dl - Pastewka, J.W. & Ness, A.T. - Clin. Chim. Acta 12:523 (1965).
Relación A/G: 1,2 a 2,2 - Rodkey, F.L. - Clin. Chem. 11/4:478 (1965).
Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios - Watson, D. & Nankiville D.D. - Clin. Chim. Acta 9/4:359
valores de referencia. (1964).
- Kachmar, J.F. - “Fundamentals of Clinical Chemistry”. Tietz,
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO Saunders, pág. 210 (1970).
Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA. - Rojkín, M.L.; Olguín de Mariani, M.C.; Drappo, G.A. y Sosa,
El sistema debe estandarizarse con el Suero Patrón provisto C.F. - Bioq. Clin. VIII/4:241 (1974).
separadamente por Wiener lab., ya que los standards liofili- - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
zados y pools de sueros responden de distinta forma. AACC Press, 4th ed., 2001.
- Webster, D.- Clin. Chim. Acta 53/1:109 (1974).
PERFORMANCE - NCCLS document "Evaluation of Precision Performance of
a) Reproducibilidad: procesando de acuerdo al documento Clinical Chemistry Devices", EP5-A (1999).
EP5A del NCCLS (National Committee on Clinical Laboratory
Standards), se obtuvo lo siguiente:
Precisión intraensayo (n = 20)
Nivel D.S. C.V.
3,47 g/dl ± 0,073 g/dl 2,10 %
2,70 g/dl ± 0,067 g/dl 2,48 %
5,23 g/dl ± 0,117 g/dl 2,23 %
Precisión total (n = 20)
Nivel D.S. C.V.
3,43 g/dl ± 0,137 g/dl 3,99 %
2,80 g/dl ± 0,100 g/dl 3,57 %
b) Recuperación: agregando cantidades conocidas de albú-
mina a distintas muestras se obtuvo una recuperación entre
98 y 100 %.
c) Límite de detección: depende del fotómetro empleado y
de la longitud de onda. De acuerdo con la sensibilidad reque-
rida para un ∆A mínimo de 0,001, el menor cambio de con-
centración detectable será de 0,01 g/dl.
d) Linealidad: la reacción es lineal hasta 8 g/dl.
Elaborado por:
PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS Wiener Laboratorios S.A.I.C.
Riobamba 2944
Longitud de onda primaria ....................................... 600 nm 2000 - Rosario - Argentina
http://www.wiener-lab.com.ar
Longitud de onda secundaria ................................... 540 nm
Tipo de reacción .................................................. punto final
Dir. Téc.: Viviana E. Cétola
Bioquímica
Producto Inscripto M.S.
Disp. Nº: 4361/96 - 6850/01
Wiener lab.
Cert. Nº: 1623/96 2000 Rosario - Argentina
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