Vous êtes sur la page 1sur 8

Artigo Cincias Exatas

ANLISE QUANTITATIVA DE CIDO ASCRBICO (VITAMINA C) EM FRMACOS RODRIGUES ELSHOLZ, TEREZA CRISTINA1, ELSHOLZ, OLAF2, MOREIRA PENNA, MARIA CRISTINA3.

RESUMO: Este trabalho envolve o estudo e desenvolvimento de mtodo analtico para determinao espectrofotomtrica de cido ascrbico (vitamina C) em frmacos. As medidas foram efetuadas com fotmetro LED de luz vermelha e comparadas com espectrofotmetro comercial. Os resultados obtidos a 580nm no espectrofotmetro comercial mostram a seguinte equao: A = 0,2089 C + 0,0001, onde A refere-se ao valor da absorbncia obtida pela equao Absorbncia = - logaritmo (I/I0), e o desvio padro R = 0,998. O mtodo envolve utilizao de equipamentos simples, de baixo custo e de fcil manuseio e pode ser utilizado para a determinao quantitativa de espcies qumicas de interesse em anlises farmacuticas. Palavras-chave: Espectrofotometria, Fotmetro LED, cido Ascrbico, Vitamina C.

ABSTRAT: QUANTITATIVE ANALYSIS OF ACID ASCRBICO (VITAMINA C) IN FRMACOS: Summary: This work involves the study and development of analytical method for spectrophotometric determination of ascorbic acid (vitamin C) in pharmaceutical. The measures were made using red photometer and compared with commercial spectrophotometer. The results obtained at 580nm in a spectrophotometer had the following equation A= 0,2089 C + 0.0001, where A refers to the absorbance value obtained by the equation Absorbance = - log (I/I0), and the standard R = 0,9998. The method involves use of simple equipment, low cost and easy to handle and can be used for the quantitative determination of chemical species of interest in pharmaceutical analysis.

Key Words: Spectrophotometry, Photometer LED, Ascorbic Acid, Vitamin C.

Revista Cientfica IntercursosVol. 8 jan-jun 2009

54

INTRODUO O cido ascrbico (Vitamina C) uma das 13 principais vitaminas que fazem parte de um grupo de substncias qumicas complexas necessrias para o funcionamento adequado do organismo. um slido cristalino de cor branca, Existem diversas tcnicas propostas na

literatura para a identificao, caracterizao e quantificao de cido ascrbico (PALOMO; BALLESTEROS; FRUTOS, 1999). Segundo a European Pharmacopoeia (2001) a identificao pode ser realizada atravs da espectroscopia no infravermelho ou por cromatografia em camada delgada comparando-se o tempo de reteno empregando-se amostras padres. J para anlise quantitativa emprega-se a cromatografia lquida de alta eficincia com detector de UV

inodoro, hidrossolvel e solventes orgnicos

pouco solvel em (KOROLKOVAS;

BURCKHALTER, 1982). O cido ascrbico (ascorbato C6H8O6, quando na forma ionizada) uma molcula usada na hidroxilao de vrias outras em

reaes bioqumicas nas clulas. A sua principal funo a hidroxilao que d paredes do colgeno, resistncia dos vasos

(ultravioleta). Recentes trabalhos apresentam a determinao de impurezas em formulaes de cido ascrbico atravs MOORE; de polarografia MOHAMMADI, (KAZEMIFARD; 2002). J a

a protena fibrilar

aos ossos, dentes, tendes e

sanguneos. Alm disso, cido ascrbico tornouse popular em virtude do seu papel como antioxidante, com potencial de oferecer proteo contra algumas doenas e contra os aspectos degenerativos do envelhecimento. sendo usado um para

determinao quantitativa tem sido proposta com detector de massas por cromatografia lquida de alta eficincia acoplado a espectrmetro de massa (MAYER et al., 2003) e por regresso multivariada empregando espectrofotometria UV (SENA et al., 2004). Apesar destas metodologias serem adequadas e recomendadas, em sua maior parte trata-se de mtodos que apresentam longo tempo de anlise. Neste sentido, a avaliao da qualidade dos medicamentos na Indstria

poderoso antioxidante,

transformar os radicais livres de oxignio em formas inertes. tambm usado na sntese de algumas molculas que servem como

hormnios ou neurotransmissores COX, M. M.,2005).

(NELSON;

A melhor maneira de se obter a quantidade necessria desta vitamina atravs da

Farmacutica representa uma etapa indispensvel para a sua comercializao. O presente trabalho prope o desenvolvimento de mtodo analtico utilizando anlises

alimentao. Da a importncia de se fazer uma anlise descritiva quantitativa, por proporcionar uma completa descrio de todas as propriedades sensoriais de um produto.

espectrofotomtricas de baixo custo (DIAS, R. F, et al. 2007; ELSHOLZ; RODRIGUES, 2005) 55

Revista Cientfica IntercursosVol. 8 jan-jun 2009

para quantificar propriedades medicamentos., principalmente

qumicas

em

de luz monocromtica e um foto detector (fotodiodo - IC) como sensor da luz, ambos necessitam apenas de um resistor com limite de corrente. O fotmetro possui um visor digital que mostra as medidas de corrente indicadas pelo fotodiodo IC. Calibrao do fotmetro LED: Utilizou-se a soluo padro de Azul de Bromotimol (ABT) 1,0 g/L. Preparo da soluo estoque de azul de

programar

possveis aes de controle da utilizao desses compostos envolvendo equipamentos simples e de fcil manuseio. O referido trabalho tambm tem sido realizado em cooperao dos estudantes de Engenharia Ambiental da Hochschule fur Angewandte Wissenschafgten Hamburg HAW Hamburg, sob orientao do professor Dr. Olaf Elsholz e dos estudantes de engenharia eltrica e biologia da FEIT/UEMG sob orientao da profa. Dra. Tereza Cristina Rodrigues Elsholz. So realizados minicursos para alunos e professores de ensino mdio, no laboratrio de qumica instrumental da HAW Hamburg campus Bergedorf. Os minicursos envolvem a construo de Fotmetros LED pelos estudantes de ensino e aplicao da metodologia para identificao de frmacos (AAS vitamina), biomolculas (albumina) e ons (amnia, nitrito, fosfato). Os resultados obtidos pelos estudantes da HAW Hamburg tem sido comparados com os obtidos pelos estudantes da FEIT/UEMG (RODRIGUES; ELSHOLZ, 2009). MATERIAL E MTODOS Calibrao Dos Espectrofotmetros: Os fotmetros LED modelo Elsholz de luz monocromtica verde de nmeros de srie PM01FC-108 e PM01-FC-109 foram utilizados para as anlises. O fotmetro LED consiste de uma fonte Company.

bromotimol 1,0 g/L: Pesou-se 100,0 mg do indicador azul de bromotimol e dissolveu-se em 30,0 mL de etanol. Transferiu-se para um balo volumtrico de 100,0 mL e completou-se o volume com gua deionizada. As solues padres de ABT foram preparadas diluindo a soluo estoque nas seguintes concentraes: 0,01; 0,03; 0,05; 0,07; 0,09; 0,10; 0,15 e 0,20 g/L. Mediu-se a transmitncia de cada soluo no fotmetro LED e calculou-se a absorbncia segundo Lambert e Beer (Abs. = - log (I/I0)), usando diretamente os valores das correntes eltricas medidas. Este procedimento foi aplicado com a hiptese que a corrente da luz diretamente proporcional corrente eltrica, usando o valor de gua como branco. A partir disto, obteve-se o grfico da curva de calibrao, elaborado no software Microsoft Enterprise Excel 2007 da Windows Preparo da soluo estoque de cido ascrbico: pesou-se cerca de 3,0 g de cido 56

Revista Cientfica IntercursosVol. 8 jan-jun 2009

ascrbico puro diluiu-se p.A.

(C6H8O6)[Sigmagua deionizada.

As determinaes de cido ascrbico foram realizadas em triplicata, utilizando-se soluo de cromato de potssio KCrO4 1,5% como reagente, que produz um complexo colorido verde. Para a construo da curva de calibrao adicionou-se diretamente na cubeta, as solues com os

Aldrich A4403], em gua e completou o volume para 100,0 mL com

Posteriormente diluiu-se 1,0 mL da soluo estoque em 100,0 mL de gua deionizada.

ENSAIOS COM MEDICAMENTOS A BASE DE CIDO ASCRBICO Os medicamentos foram adquiridos em farmcias e drogarias de Ituiutaba, de diferentes fabricantes. Soluo estoque: A soluo estoque foi preparada pesando o medicamento de cido

respectivos volumes, de acordo com a tabela 1. ascrbico em comprimidos, cerca de 3,204 g, e diluindo-se em 100,0 mL de gua deionizada O rtulo indica que o comprimido possui 240,0 mg de vitamina C e 400,0 mg de cido acetil saliclico. Esta soluo foi utilizada para as anlises espectrofotomtricas.

Tabela 1: quantidade de solues adicionadas nas cubetas para determinao de cido ascrbico. Tubo N 0 1 2 3 4 5 6 7 cido ascrbico 2,0 mL 1,8 mL 1,4mL 1,2 mL 1,0 mL 0,5 mL 0,0 mL 2,0 mL medicamento gua deionizada 1,0 mL 1,2 mL 1,6 mL 1,8 mL 2,0 mL 2,5 mL 3,0 mL 1,0 mL Cromato de potssio 0,1 mL 0,1 mL 0,1 mL 0,1 mL 0,1 mL 0,1 mL 0,1 mL 0,1 mL

As absorbncias foram calculadas segundo Lambert e Beer. A partir disto, se poder obter o grfico da curva de calibrao, elaborado no software Microsoft Enterprise Excel 2007 da Windows Company. Determinao de Acidez total Titulvel e pH: As determinaes de acidez total titulvel e pH foram realizadas de acordo com a AOAC.

Em cooperao Brasil e Alemanha entre UEMG/FEIT e HAW Hamburg, vrios

experimentos tem sido feito em cooperacao entre estudantes e professores da FEIT/UEMG (Dra. Tereza Cristina Rodrigues Elsholz) e HAW Hamburg (Dr. Olaf Elsholz) e do projeto para construo e aplicao de fotometros LED por estudantes de ensimo mdio. Figuras 1a, 1b, e 1c. 57

Revista Cientfica IntercursosVol. 8 jan-jun 2009

Figura 1a

Figura 1b

Figura 1c

RESULTADOS E DISCUSSO: Em cooperao Brasil e Alemanha entre UEMG/FEIT e HAW Hamburg, vrios

O clculo da absorbncia desenvolvido utilizando o valor da corrente (I) e a corrente da linha base (I0) pela frmula: Absorbncia = logaritmo fotmetros comparados (I/I0). LED com Os valores obtidos nos foram modelo o Elsholz

experimentos tem sido feito em cooperacao entre estudantes e professores da FEIT/UEMG (Dra. Tereza Cristina Rodrigues Elsholz) e HAW Hamburg (Dr. Olaf Elsholz) e do projeto para construo e aplicao de fotometros LED por estudantes de ensimo mdio. Figuras 1a, 1b, 1c. Figura 01a: Fotmetros LED construdos por estudantes do ensino mdio de Hamburgo (Alemanha), Figura 01b: Prof. Dr. Olaf Elsholz e Profa. Dra. Tereza Cristina Rodrigues Elsholz no laboratrio de eletrnica em construo dos fotmetros LED.

espectrofotmetro

comercial. As anlises foram realizadas no Laboratrio de Bioqumica da Fundao

Educacional de Ituiutaba FEIT / Universidade do Estado de Minas Gerais UEMG

(FEIT/UEMG). A determinao de vitamina foi obtida utilizando diferentes concentraes de vitamina C na presena de cromato de potssio 1,5%, (figura 2) e a absorbncia foi medida utilizando

Figura 01c: Grupo de estudantes de graduao e o fotmetro comercial (figura 3). professores do projeto de aplicao de fotometria em escolas do ensino mdio, no laboratrio de qumica instrumental fur da HAW Hamburg,

Hochschule

Angewandte

Wissenschafgten

Hamburg HAW Hamburg.

Revista Cientfica IntercursosVol. 8 jan-jun 2009

58

Figura 2. Cubetas contendo as solues de diferentes concentraes da soluo de cido ascrbico e soluo de cromato de potssio 1,5%.

Figura 3. Curva de calibrao com os valores de absorbncia para as diferentes concentraes da soluo de vitamina C, obtidos pelo fotmetro LED. Figura 3. Curva de calibrao com os valores de absorbncia para as diferentes concentraes da soluo de vitamina C, obtidos pelo fotmetro LED

Os

resultados

obtidos

580nm

no Para o fotmetro LED de luz vermelha, obteve-se

espectrofotmetro comercial mostram a seguinte uma curava de calibrao A = 0,1286C + 0,0023 equao: A = 0,2089 C + 0,0001, onde A refere-se e desvio padro de R = 0,9977. Figura 4. ao valor da absorbncia obtida pela equao A soluo preparada com 2,5 mL do

Absorbncia = - logaritmo (I/I0), e o desvio padro medicamento apresentou pH igual a 6.2. R = 0,998. Comparou-se os resultados comercial e obtidos os Para o comprimido analisado, encontrou-se pelo uma massa de 239,5 g de cido ascrbico para

espectrofotmetro

resultados medidas realizadas com o espectrofotmetro

obtidos pelo fotmetro LED. Os resultados obti comercial e 242,0 g para medidas realizadas dos. Os resultados obtidos pelo fotmetro LED com o fotmetro LED. esto representados pela figura 05.

Revista Cientfica IntercursosVol. 8 jan-jun 2009

59

Figura 4: Curva de calibrao com os valores de absorbncia para as diferentes concentraes da soluo de vitamina C, obtidos pelo espectrofotmetro comercial.

CONCLUSO Os resultados obtidos mostram que o

ferramenta para aplicao no ensino em aulas prticas de qumica e bioqumica. Esta metodologia pode ser aplicada como uma nova ferramenta de ensino aprendizagem. A metodologia emprega instrumentos de fcil aplicao e manuseio, utiliza metodologias interdisciplinares com emprego de conceitos de fsica e qumica.

procedimento da anlise bem aplicvel na faixa de 500 a 600 nm, e em concentraes entre 20 at 250 mg /L para anlises da Vitamina C. As medidas feitas com LED, mostram concordncia com os resultados obtidos pelo espectrofotmetro comercial. Assim, a construo e aplicao de fotmetros LED de grande valia e pode ser uma interessante

REFERNCIA DIAS, R. F.; RODRIGUES, T. C.; ELSHOLZ, O.; QUEIROZ JUNIOR, C. A.; TUBINO, M. Construo de equipamentos analticos e para determinao de matrizes no meio ambiente. In: IX SEMINRIO DE INICIAO CIENTFICA, 2007. ELSHOLZ, O.; RODRIGUES, T. C. Von LED-Photometer zum Photosensor. GIT-Fachzeitschrift fr Labor, Alemanha, v. 49, n. 6, 2005. EUROPEAN PHARMACOPOIA, Strasbourg: Council of Europe, 4. ed., p. 1030 - 1031, 2001 KAZEMIFARD, A.G.; MOORE, D.E.; MOHAMMADI, A. Polarographic determination of benzaldehyde in benzyl alcohol and sodium diclofenac injection formulations. J. Pharm. Biomed. Anal., Amsterdam, v. 30, n. 2, p. 257-262, 2002.

Revista Cientfica IntercursosVol. 8 jan-jun 2009

60

KOROLKOVAS e J. H. BURCKHALTER; Qumica Farmacutica, Ttulo do original em ingls: Essentials of Medicinal Chemistry, Editora Guanabara Dois S. A., v.1, 783 p., 1982. MAYER, B.X.; NAMIRANIAN, K.; DEHGHANYAR, P.; STROH, R.; MASCHER, H.; MULLER, M. Comparison of UV and tandem mass spectrometric detection for the high-performance liquid chromatographic determination of diclofenac in microdialysis samples. J. Pharm. Biomed. Anal., Amsterdam, v. 33, n. 4, p. 745-754, 2003. NELSON, D. L., COX, M. M., Lehninger Principles of Biochemistry, 4. ed. W. H. Freeman, 2005. PALOMO, M.E.; BALLESTEROS, M.P.; FRUTOS P. Analysis of diclofenac sodium and derivates. J. Pharm. Biomed. Anal., Amsterdam, v. 21, n. 1, p. 83-94, 1999. RODRIGUES, T.C., ELSHOLZ, O., Ein Photosensor macht schule, eignungstests eines LEDPhotosensor-Bausatzes, GIT-Laborfachzeitschrift, Alemanha, v.53, n. 2, p. 76-77, 2009. SENA, M.M.; CHAUDHRY, Z.F.; COLLINS, C.H.; POPPI, J.R. Direct determination of diclofenac in pharmaceutical formulations containing B vitamins by UV spectrophotometry and partial least squares regression. J. Pharm. Biomed. Anal., Amsterdam, v. 36, n. 4, p. 743-749, 2004.

REFERNCIA DOS AUTORES Tereza Cristina Rodrigues Elsholz Ps-doutora em Qumica Analtica pela Universit Degli Studi di Bologna, Itlia, Ps doutora em Qumica Analtica pela Universita delles IIes Balerares, Plama Mallorca, Espanha e Ps-doutora pela Hochschule fur Angewandte Wissenschafgten Hamburg HAW Hamburg, Hamburgo, Alemanha. docente do curso de Cincias Biolgicas da UEMG/FEIT, campus de Ituiutaba MG, e-mail: cristinatc.rodrigues@googlemail.com Olaf Elsholz Doutor em Qumica Analtica pela Technische Universitat Berlin TUB, Alemanha. docente da Hochschule fur Angewandte Wissenschafgten Hamburg HAW Hamburg, Hamburgo, Alemanha, e-mail: olaf.elsholz@rzbd.haw-hamburg.de Maria Cristina Moreira Penna: acadmico do curso de Tecnologia em Gestao Ambiental da UEMG/FEIT, campus de Ituiutaba MG, e-mail: cricapen@gmail.com

Revista Cientfica IntercursosVol. 8 jan-jun 2009

61