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2012

MICROSOPIA

JANNER SALCEDO

MICROSCOPIA

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ALUMNOS: ARCINIEGAS URBINA CARLOS ANDRES GALEANO KELLY TATIANA NIEVES LOPERENA DIDI ALEXANDER OROZCO SALCEDO MANUEL RIOS MARIA PAULA SIERRA RANGEL ENRIQUE VILLA STEFANY MARIA

PROFESOR: Lic. JANNER SALCEDO

UNIVERSIDAD POPULAR DEL CESAR INGENIERIA AGROINDUSTRIAL BIOLOGIA VALLEDUPAR / CESAR 2012

MICROSCOPIA

MICROSCOPIA I

EL MICROSCOPIO Es un instrumento de ptica que permite ver de cerca y aumentados objetos pequeos y detalles estructurales imperceptibles a simple vista. El microscopio ptico est formado por tres sistemas: a) El sistema mecnico: pie o base, tubo, revolver, columna, platina, carro, tornillo micromtrico y tornillo micromtrico. b) El sistema ptico: oculares y objetivos (secos y de inmersin).

c) El sistema de iluminacin: condensador, diafragma, filtro y fuente de luz.

CLASES DE MICROSCOPIO EL MICROSCOPIO SIMPLE O LUPA: esta compuesto por una sola lente o un sistema de lentes, que dan una imagen aumentada derecha virtual. MICROSCOPIO COMPUESTO: esta compuesto por lentes o sistema de lentes dispuestas en el mismo eje ptico. As el objetivo va a producir una imagen real,

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invertida y mayor.

PODERES DEL MICROSCOPIO a) Aumento: nos permite magnificar, agrandar el tamao de un objeto que a simple vista no se observa. b) Resolucin: es la distancia mnima entre dos puntos prximos que pueden verse separados. c) Definicin: nos permite formar imgenes claras con contornos definidos. d) De foco a campo: nos permite observar varios planos en un solo enfoque.

PRE-LABORATORIO 1) Investigar los tipos de microscopio Microscopio estereoscpico o de diseccin: El diseo de este instrumento es distinto al del diagrama de ms arriba y su utilidad es diferente, pues se utiliza para ofrecer una imagen estereoscpica (3D) de la muestra. Para ello, y como ocurre en la visin binocular convencional, es necesario que los dos ojos observen la imagen con ngulos ligeramente distintos. Obviamente todos los microscopios estereoscpicos, por definicin, deben ser binoculares (con un ocular para cada ojo), por lo que a veces se confunden ambos trminos. Existen dos tipos de diseo, denominados respectivamente convergente (o Greenough) y de objetivo comn (o Galileo).

Microscopio

compuesto:

Un

microscopio

compuesto

es

un

microscopio ptico que tiene ms de una lente de objetivo. Los

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microscopios compuestos se utilizan especialmente para examinar objetos transparentes, o cortados en lminas tan finas que se transparentan. Se emplea para aumentar o ampliar las imgenes de objetos y organismos no visibles a simple vista.

Microscopio de contraste de fase: permite observar clulas sin colorear y resulta especialmente til para clulas vivas. Este aprovecha las pequeas diferencias de los ndices de refraccin en las distintas partes de una clula y en distintas partes de una muestra de tejido. La luz que pasa por regiones de mayor ndice de refraccin experimenta una deflexin y queda fuera de fase con respecto al haz principal de ondas de luz que pasaron la muestra. Aparea otras longitudes de onda fuera de fase por medio de una serie de anillos pticos del objetivo y del condensador, anula la amplitud de la porcin fuera de fase inicial del haz de luz y produce un contraste til sobre la imagen. Las partes oscuras de la imagen corresponden a las porciones densas del espcimen; las partes claras de la imagen corresponden a porciones menos densas. Por lo tanto estos microscopios se utilizan para observar clulas vivas, tejidos vivos y cortes semifinos no coloreados.

Microscopio

electrnico:

Un

microscopio

electrnico es aqul que utiliza electrones en lugar de fotones o luz visible para formar imgenes de objetos diminutos. Los microscopios electrnicos permiten alcanzar una capacidad de aumento muy superior a los microscopios convencionales (hasta 2 aumentos comparados con los de los mejores microscopios pticos) debido a que la longitud de onda de los electrones es mucho menor que la de los fotones "visibles". Microscopio de campo luminoso: imgenes oscuras frente al campo luminoso. Permite el estudio de las estructuras internas de la muestra, para lo cual sta debe ser dispuesta en una fina capa que puede ser atravesada por la luz.

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Microscopio de luz ultravioleta: La imagen en el microscopio de luz ultravioleta depende de la absorcin de esa luz por las molculas de la muestra. La fuente de luz ultravioleta tiene una longitud de onda de 200 nm, por lo tanto puede alcanzar una resolucin de 100 nm. La microscopia ultravioleta no es muy diferente del funcionamiento de un espectrofotmetro pero sus resultados son registrados en fotografas. La muestra no se puede observar directamente a travs del ocular porque la luz ultravioleta puede daar la retina. El mtodo sirve para detectar cidos nucleicos, protenas que contienen determinados aminocidos. Mediante longitudes de ondas especficas para la iluminacin se puede obtener mediciones espectrofotomtricas para cuantificar el DNA y el RNA de cada clula. El microscopio de luz ultravioleta utiliza el rango ultravioleta del espectro luminoso en lugar del rango visible, bien para aumentar la resolucin con una longitud de onda menor o para mejorar el detalle absorbiendo selectivamente distintas longitudes de onda de la banda ultravioleta. Dado que el vidrio no transmite las longitudes de onda ms cortas de la luz ultravioleta, los elementos pticos de estos microscopios estn hechos con cuarzo, fluorita o sistemas de espejos aluminizados. Adems, dado que la radiacin ultravioleta es invisible, la imagen se muestra con fosforescencia en fotografa o con un escner electrnico. El microscopio de luz ultravioleta se utiliza en la investigacin cientfica.

Microscopio de fluorescencia: es una variacin del microscopio de luz ultravioleta en el que los objetos son iluminados por rayos de una determinada longitud de onda. La imagen observada es el resultado de la radiacin electromagntica emitida por las molculas que han absorbido la excitacin primaria y reemitido una luz con mayor longitud de onda. Para dejar

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pasar slo la emisin secundaria deseada, se deben colocar filtros apropiados debajo del condensador y encima del objetivo. Se usa para detectar sustancias con autofluorescencia (vitamina A) o sustancias marcadas con fluorocromos. Microscopio de campo oscuro: utiliza un haz enfocado de luz muy intensa en forma de un cono hueco concentrado sobre el espcimen. El objeto iluminado dispersa la luz y se hace as visible contra el fondo oscuro que tiene detrs, como las partculas de polvo iluminadas por un rayo de sol que se cuela en una habitacin cerrada. Por ello las porciones transparentes del espcimen quedan oscuras, mientras que las superficies y partculas se ven brillantes, por la luz que reciben y dispersan en todas las direcciones, incluida la del eje ptico que conecta el espcimen con la pupila del observador. Esta forma de iluminacin se utiliza para analizar elementos biolgicos transparentes y sin pigmentar, invisibles con iluminacin normal, sin fijar la muestra, es decir, sin matarla. Tambin es bastante utilizado en la observacin de muestras metalogrficas para la observacin de detalles en superficies con alta reflectancia. El objetivo recibe la luz dispersa o refractada por las estructuras del espcimen. Para lograrlo, el microscopio de campo oscuro est equipado con un condensador especial que ilumina la muestra con luz fuerte indirecta. En consecuencia el campo visual se observa detrs de la muestra como un fondo oscuro sobre el cual aparecen pequeas partculas brillantes de la muestra que reflejan parte de la luz hacia el objetivo. El efecto es similar a las partculas de polvo que se ven en el haz de luz emanado de un proyector de diapositivas en una habitacin oscura. La luz reflejada por las partculas de polvo llegan hasta la retina del ojo, lo que las hace visibles. La luz dispersa permite incluso distinguir partculas ms pequeas que el poder separador del sistema ptico usado por transparencia. Los condensadores que se emplean en Microscopa de campo oscuro son de dos tipos: del tipo paraboloide (tiene una superficie espejada), y los del tipo cardioide, con dos superficies espejadas. El empleo de uno u otro es indistinto, mediante cualquiera de ambos, la luz no incide

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directamente en el objetivo (este es el objetivo de estos condensadores), sino que incide con una apertura numrica mayor al del objetivo.

2) Realice un cuadro comparativo que indique las ventajas y desventajas de utilizar un microscopio fotonico y un electrnico. TIPOS DE VENTAJAS DESVENTAJAS MICROSCOPIOS Aumenta hasta No se pueden 2OOOX los observar detalles objetos y detalles ms pequeos que el ojo humano como los no puede ver. organelos FOTONICO celulares. Algunos no consumen energa. Es de fcil traslado. Permite ver muestras vivas. ELECTRONICO Aumenta hasta 100.000X un objeto. Podemos observar estructuras como los organelos celulares. No permite observar muestras vivas. Difcil traslado del equipo.

3) Defina que es un lente cncavo y convexo y cul es su utilidad en microscopa. Las lentes convergentes o positivas: stas se reconocen por ser ms gruesas en el centro que en los bordes, razn por la cual tambin se les llama convexas. Cuando una serie de rayos paralelos pasan a travs de una lente de superficies convexas

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(lentes convergentes), los rayos convergen todos hacia un punto denominado foco. Es fcil entender ste fenmeno si se toma en cuenta el principio de refraccin ( que es el cambio de direccin un rayo de luz o una radiacin cualquiera que pasa oblicuamente de un medio a otro de diferente densidad). Ntese que cualquier superficie curva puede considerarse constituida por infinidad de planos diminutos; de modo que al pasar la luz por el lente, slo el rayo central incide perpendicularmente a la superficie de la lente y se transmite en lnea recta, mientras que todos los otros rayos caen oblicuamente y, en consecuencia , sufren refraccin. El hecho de que la oblicuidad sea ms pronunciada en los extremos de la lente, hace que en sta parte los rayos sufran una mayor desviacin. Debido a que la luz viaja con menor velocidad en vidrio que en el aire, la porcin de ondas que atraviesa las partes ms gruesas de la lente se retarda en relacin con la que pasa por las partes ms delgadas. En consecuencia, las ondas sufren una curvatura. El que la lente converja los rayos de luz hace que se forme una imagen del objeto en una pantalla situada al otro lado de la lente. La imagen est enfocada si la pantalla se coloca a una distancia determinada, que depende de la distancia del objeto y del foco de la lente. La lente del ojo humano es convexa, y adems puede cambiar de forma para enfocar objetos a distintas distancias. La lente se hace ms gruesa al mirar objetos cercanos y ms delgados al mirar objetos lejanos. A veces, los msculos del ojo no pueden enfocar la luz sobre la retina, la pantalla del globo ocular. Si la imagen de los objetos cercanos se forma detrs de la retina, se dice que existe hipermetropa. Las lentes divergentes o negativas: stas son ms delgadas en el centro que en los bordes, y por ste motivo se les denomina tambin cncavas. Cuando la luz pasa a travs de una lente de caras cncavas (lente divergente), los rayos experimentan una desviacin que los aleja del rayo central. Al ser sta lente ms delgada en el centro que en los extremos, la parte central de la onda atraviesa ms rpidamente el centro de la lente y se hace curva hacia delante. A diferencia de las lentes convexas, que producen imgenes reales, las cncavas slo producen imgenes virtuales, es decir, imgenes de las que parecen proceder los rayos de luz. En este caso es una imagen ms pequea situada delante del objeto (el trbol). En las gafas o anteojos para miopes, las lentes cncavas hacen que los ojos formen una imagen ntida en la retina y no delante de ella.

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La utilidad de los lentes cncavos y convexos en microscopa es que el microscopio est basado en lentes pticos. Este uso de una nica lente convexa se conoce como microscopio simple, en el que se incluye la lupa, entre otros aparatos pticos. 4) Que funcin realiza el aceite de inmersin en la microscopa ptica. La funcin del aceite de inmersin es restringir el movimiento de la muestra, adems de evitar el rozamiento entre el cubre objetos y el objetivo. INFORME DE MICROSCOPIA I Primero nos familiarizamos con el laboratorio, luego el profesor nos mostr el microscopio y sus partes, nos explic cada una de las funciones del microscopio y las funciones de cada una de sus partes. Aprendimos la importancia del microscopio y de lo maravilloso que es usar este equipo. Tambin aprendimos las diferencias entre el microscopio simple y el compuesto y sus respectivas ventajas y desventajas. MATERIALES Microscopio

CONCLUSION El microscopio es una herramienta que nos permite ampliar imgenes para ver detalles que para nuestra vista son imperceptibles.