Capitulo 15 compartimientos y transporte intracelular Conjunto de orgnulos: El nucleo est envuelto por una membrana doble denominada envoltura

nuclear, y comunica con el citosol a travs de poros nucleares que perforan la envoltura. La membrana nuclear externa se comunica con la membrana del retculo endoplasmtico (es el sitio principal de sntesis de membrana nueva). El aparato de golgi, recibe protenas y lpidos del RE, los modifica y luego los enva a otras partes de la celula. Los lisosomas degradan los orgnulos agotados, las macromolculas, y partculas capturadas por la clula mediante endocitocis. Antes de llegar al lisosoma los materiales endocitados pasan a travs de los endosomas(distribuyen las molculas ingeridas y las recirculan a la membrana plasmtica). Las mitocondrias y los cloroplastos poseen membranas altamente especializadas en la produccin de ATP, en las mitocondrias ocurre la fosforilzacin oxidativa y en los cloroplastos la fotosntesis. La mayora de estos orgnulos se sostienen en sus localizaciones por su adherencia a los microtbulos. Los filamentos del citoesqueleto permiten el desplazamiento de los orgnulos y dirigen el trnsito de vesculas entre ellos. El rea de la membrana del retculo endoplasmatico es de 20 a 30 veces mayor que el de la membrana plasmtica. Antes de que una clula se divida en 2 debe duplicar sus orgnulos, la mayora de ellos se forman a partir de otros preexistentes, que crecen y se dividen. A medida que crece la clula los orgnulos crecen por la incorporacin de molculas, luego se dividen y durante la divisin celular se distribuyen en las 2 clulas hijas. Este crecimiento requiere lpidos y protenas (tanto de membrana como las que estarn en el interior del orgnulo), las protenas se producen en forma continua y estas protenas recin sintetizadas deben ser dirigidas hacia los orgnulos para que se puedan dividir y crecer. En el caso de las mitocondrias, cloroplastos, peroxisomas, y el nucleo, las protenas se envan directamente desde el citosol. Pero en el caso del Aparato de G, los lisosomas, los endosomas y membranas nucleares, se envan las protenas y lpidos por vas indirectas a travs del RE(donde se sintetizan). Las protenas ingresan en el RE desde el citosol, y luego se transportan por medio de vesculas al aparato de G y luego a otros orgnulos o a la membrana plasmtica. Mecanismos de ingreso de protenas a los orgnulos: La sntesis de casi todas las protenas ocurre en los ribosomas del citosol. El destino de las protenas sintetizadas en el citosol depende de su secuencia de a.a, que puede contener una seal de distribucin que dirige la protena al orgnulo q la necesita. Las protenas que no poseen esta seal se quedan en el citosol, y las que la poseen se mueven desde el citosol hacia el orgnulo. Pero como un orgnulo puede importar protenas a travs de membranas que son impermeables a molculas hidrofilicas? Esta se cumple de manera distinta en cada orgnulo, pero todos los mecanismos requieren el ingreso de energa. 1. Transporte a travs de poros nucleares: las protenas que se mueven desde el citosol hacia el ncleo, se transportan a travs de poros que penetran las membranas nucleares.

2. Transporte a travs de membrana: las protenas que van desde el citosol hacia, el RE, mitocondrias, cloroplasto o peroxisomas, atraviesan la membrana por medio de traslocadores proteicos. 3. Transporte por vesculas: Las protenas que se mueven desde el RE hacia los orgnulos, se transportan por medio de vesculas de transporte. L a seal de distribucin de las protenas es un tramo continuo de a.a por lo general de 15-60 a.a, estos cdigos seales son necesarios para dirigir una protena a un orgnulo. Los cdigos seal que especifican el mismo destino pueden variar en gran medida. Las protenas ingresan en el ncleo a travs de los poros nucleares: La envoltura nuclear circunda el ADN y define el compartimiento nuclear. La envoltura nuclear est perforada en todas las clulas por poros nucleares, que forman puertas a travs de las que todas las molculas entran o salen del ncleo. Las protenas recin sintetizadas y destinadas al ncleo ingresan desde el citosol, las molculas de ARN y las subunidades ribosmicas sintetizadas en el ncleo, se exportan. Un poro nuclear est compuesto por 100 protenas diferentes, cada poro tiene canales de agua a travs de los cuales pueden pasar molculas pequeas hidrosolubles de manera no selectiva. Las molculas ms grandes como las protenas y el ARN no pueden pasar a travs de los poros a menos que lleven una seal de distribucin. El cdigo seal que dirige una protena hacia el ncleo(seal de localizacin nuclear),consiste en una o 2 secuencias cortas que contienen lisinas o argininas con carga positiva. La interaccin de una protena nuclear recin sintetizada con un poro, requiere la ayuda de protenas citosolicas (receptores de transporte nuclear), las cuales se unen con la seal de localizacin nuclear y ayudan a dirigir la protena hacia el poro, al interactuar con las fibrillas del poro. La protena se transporta de forma activa por medio de un proceso que utiliza la energa de la hidrlisis del GTP. Una estructura en el centro del poro funciona abrindose la cantidad suficiente para permitir el paso del complejo receptor-protena al ncleo, los receptores luego regresan al citosol para ser reutilizados. Los poros transportan protenas completamente plegadas. En cambio en el transporte proteico hacia otros orgnulos, las protenas deben desdoblarse durante su transporte. Las protenas se despliegan para entrar en los cloroplastos y en las mitocondrias: Ambos orgnulos contienen genomas propios y fabrican protenas, pero la mayora de sus protenas son importadas desde el citosol. Estas protenas tienen un cdigo seal en su terminal que les permite ingresar a la mitocondria o al cloroplasto. Las protenas para cada orgnulo se translocan a travs de la membrana interna y externa en sitios especializados donde las dos membranas se encuentran en contacto, cada protena se despliega a medida que se transporta y se desprende del cdigo seal despus de completar la translocacin. Un receptor en la membrana mitocondrial externa reconoce el cdigo seal. El complejo del receptor y la protena adherida se difunde lateralmente (se mueve) en la membrana hacia un sitio de contacto (la membrana externa e interna en contacto), donde pasa al interior de la mitocondria a travs de las membranas externa e interna por medio de una protena

translocadora(despliega a la protena). En el interior del orgnulo una peptidasa corta el cdigo seal. Las protenas chaperonas dentro de los orgnulos ayudan a atraer a la protena a travs de las 2 membranas y replegarlas una vez adentro. El RE es el sistema de membranas ms extenso en una clula eucarionte, este sirve como punto de entrada para las protenas destinadas al aparato de G, a los desmosomas y a los lisosomas, como tambin las destinadas a la superficie celular, ingresan primero en el RE desde el citosol, cuando las protenas estn dentro del RE no vuelven a reingresar en el citosol. Sern transferidas por medio de vesculas de transporte de orgnulo a otro y en algunos casos desde un orgnulo a la membrana plasmtica. Dos tipos de protenas se transfieren desde el citosol al RE. 1) Las protenas hidrosolubles son translocadas por completo a travs de la membrana del RE y se liberan en su luz, 2) las futuras protenas transmembrana son translocadas solo en parte y quedan encajadas en la membrana del RE. Las protenas hidrosolubles se destinan para secrecin o para la luz de un orgnulo, las protenas transmembrana se destinan para estar en la membrana del RE, en la de otro orgnulo o la plasmtica. Estas protenas son dirigidas al RE por un cdigo seal de 8 o ms a.a hidrfobos, que est comprometido en el proceso de translocacin a travs de membrana. Las protenas que entran en el RE comienzan a ser formadas a travs de la membrana del RE antes de completar la sntesis de la cadena polipeptidica, esto requiere que el ribosoma que sintetiza la protena se encuentre adherido a la membrana del RE. Existen por lo tanto dos tipos de ribosomas en el citosol, los unidos a la membrana del RE que elaboran protenas que son translocadas dentro del RE y los ribosomas libres que no estn adheridos a ninguna membrana y que producen las dems protenas codificadas por el ADN nuclear. Estos se diferencian por el tipo de protenas que producen. Las protenas solubles se liberan dentro de la luz del RE: El cdigo seal de RE es guiado hacia la membrana del RE con la ayuda de dos componentes, una partcula de reconocimiento de seales(PRS), que se une al cdigo de seal de RE cuando es expuesto sobre el ribosoma, y un receptor de PRS, ubicado en la membrana del RE que reconoce la partcula. La unin de una PRS a un cdigo seal retrasa la sntesis proteica por parte del ribosoma, hasta que el ribosoma y la PRS adherida se fijen a un receptor PRS, luego de esta unin con el receptor, se libera la PRS y la sntesis recomienza y el polipptido entra en la luz del RE por medio de un canal de translocacin de membrana. El cdigo seal que para protenas solubles est en el Nterminal, funciona abriendo el canal de translocacin, el pptido seal permanece unido al canal mientras el resto de la cadena proteica es formada a travs de la membrana. Una peptidasa seal desprende el cdigo seal, se libera el pptido seal del canal de translocacin y una vez que el C terminal de la protena pas a travs de la membrana se libera la protena en la luz del RE. Protenas transmembranas y RE: Algunas protenas permanecen encajadas en la membrana como protenas transmembrana. Una protena se integra en la membrana del RE, un cdigo seal N-terminal para RE inicia la translocacin igual que para una protena soluble, pero esta

protena contiene una segunda secuencia hidrfoba (secuencia de detencin de transferencia), este 2 codigo se libera del canal de translocacin y se junta en la bicapa lipidica donde forma un segmento alfa-helicoidal que ancla la protena en la membrana. Como resultado la protena translocada finaliza como una protena transmembrana insertada en la membrana con una orientacin definida el N-terminal sobre el lado luminal de la bicapa y el Cterminal sobre el lado citosolico. Una protena de pase doble emplea una secuencia de comienzo de transferencia interna para integrarse en la membrana del RE. Un cdigo seal interno del RE acta como una seal de comienzo de transferencia iniciando la transferencia de la cadena polipetidica, cuando en el canal de translocacin llega una secuencia de detencin de transferencia, el canal descarga ambas secuencias dentro de la bicapa lipidica, no se secciona la secuencia de detencin de transferencia ni la de comienzo de transferencia y la cadena entera permanece anclada a la membrana como una protena transmembrana de paso doble. Transporte vesicular: El transporte desde el RE hacia el aparato de G y desde este hacia otros orgnulos, se realiza por medio del brote continuo y la fusin de vesculas de transporte. Las vesculas de transporte conducen protenas solubles y de membrana entre los compartimientos. Las vesculas que brotan de las membranas tienen una cubierta proteica en su superficie y por esto se llaman vesculas recubiertas. Las clulas producen distintos tipos de vesculas recubiertas, la cubierta de la vescula cumple 2 funciones, darle forma de brote a la membrana y ayudar a capturar molculas para el transporte. Las vesculas recubiertas con la protena clatrina emergen del aparato de G en su va secretora hacia el exterior y a partir de la membrana plasmtica en su camino endocitico hacia el interior. En la membrana plasmtica cada vescula comienza como una fosa recubierta con clatrina, ests forman una especie de canasta sobre la superficie citosolica de la membrana, una protena unida al GTP llamada dinamina, se ajusta como un anillo alrededor del cuello de cada fosa y junto con otras protenas produce la constriccin del anillo y se desprende la vescula de la membrana. Existe otra cubierta proteica llamadas adaptinas, que ayudan a seleccionar las molculas que las vesculas deben cargar para su transporte. Las adaptinas ayudan a capturar molculas de carga especfica atrapando a los receptores a los que se unen, en la luz de las vesculas recubiertas por clatrina existen dos clases de adaptinas las que se unen a la los receptores de membrana plasmtica son diferentes que de las que se unen a receptores de carga en el aparato de G. Las vesculas de recubierta CUP se relacionan en el transporte de molculas entre el RE y el aparato de G. Especificidad del acoplamiento celular: La vescula debe encontrar el camino a su destino para entregar su contenido. Cuando esta llega a su destino la vescula debe reconocer y acoplarse con el orgnulo. Las vesculas despliegan sobre su superficie marcadores que la identifican respecto de su origen y carga. Receptores complementarios presentes en las membranas deben reconocerla. Se cree que este reconocimiento tiene que ver con las protenas SNARE, las Snare de las vesculas son reconocidas por las Snare complementarias de la membrana diana. Cada orgnulo y cada vescula lleva una nica snare y las interacciones

entre las snare complementarias garantizan la fusin solo con las membranas adecuadas. Luego del reconocimiento la vescula se debe acoplar a la membrana y fusionarse para entregar la carga, la fusin no solo entrega la carga sino que adiciona la membrana de la vesicula a la del orgnulo. Exocitosis: Los lpidos, protenas y carbohidratos se envan desde el RE por el aparato de Golgi hasta la superficie extracelular, por medio de vesculas que se fusionan con la membrana plasmtica en un proceso llamado exocitosis. Protenas modificadas en el RE: los puentes disulfuro se forman por la oxidacin de pares de cadenas laterales de cistena, reaccin catalizada por enzima del RE, lo que permite mayor estabilidad de la protena. Muchas protenas que entran en el RE se convierten en glucoproteinas por la unin a oligosacaridos de cadena corta, esta unin permite proteger a la protena de la degradacin. La mayora de las protenas que ingresan en el RE estn destinadas a otras localizaciones, son empaquetas en vesculas de transporte que brotan del RE y se fusionan con el aparato de G. Las protenas que se pliegan en forma incorrecta que no logran ensamblarse en forma adecuada, se retienen en el RE por medio de la unin con las protenas chaperonas, las protenas chaperonas mantienen a las protenas all hasta que se produzca su correcto plegamiento. El RE controla la calidad de protenas que exporta al aparato de G. Muchos de los grupos de oligosacaridos que se agregan a las protenas en el RE, sufren modificaciones en el aparato de G, en algunas protenas se crean cadenas complejas de oligosacaridos a travs de un proceso ordenado en el que se agregan y quitan azucares por medio de una serie de enzimas, las enzimas que actan mas rpido son las cercanas a la cara cis( adyacente al RE) y las ms lentas ubicadas en la cara trans(apunta a la membrana). En todas las clulas hay una corriente de vesculas que brota desde la red trans del golgi y se fusionan con la membrana plasmtica. Esta via constitutiva de exocitosis opera en forma continua. Y lleva protenas y lpidos recin sintetizados, para que se liberen en el exterior o se unan a la membrana plasmtica. Vas endocticas: las clulas captan lquidos, molculas grandes y pequeas por medio de la endocitocis. Una porcin de la membrana plasmtica encierra el material para ingerir,

invaginndose y luego desprendindose para formar una vescula. Luego el material ingerido pasa a los lisosomas para que los digiera y la clula utilice los metabolitos. Exiten 2 tipos de endocitocis, la pinocitocis que implica la ingestin de liquido y molculas pequeas por medio de vesculas pequeas, y la otra es la fagocitosis que implica la ingestin de molculas grandes por medio de vesculas grandes (fagosomas). Las clulas fagociticas(macrfagos) nos defienden de infeccin al ingerir microorganismos invasores. Para que un macrfago sea capaz de capturar una particula esta debe unirse a los receptores de la celula fagocitica y activar receptores de superficie. Las clulas fagociticas tambin depuran clulas daadas y muertas.

Endocitocis mediada por receptores: es un mecanismo efectivo de concentracin que aumenta la eficiencia para la internalizar macromolculas. Ejemplo la captacin de colesterol para elaborar nuevas membranas, tambin se utiliza para captar vitamina B12 y el hierro. El material captado por pinocitocis se transfiere rpidamente a los endosomas, existen 2 tipos de endosomas, los endosomas tempranos (por debajo de la membrana) y los endosomas tardos cerca del ncleo, el interior de los endosomas se mantiene acido por la accin de una bomba de h+ impulsada por ATP. El compartimiento endosomico acta como la principal estacin de distribucin de la va endocitica hacia el interior. El ambiente acido del endosoma desempea un papel crucial en el proceso de distribucin porque permite que muchos receptores liberen su carga. Los receptores pueden tomar caminos diferente de acuerdo con el tipo de receptor: 1) la mayora regresa al mismo dominio de la membrana plasmtica del que procede,2)algunos viajan al lisosoma donde se degradan 3) algunos se dirigen hacia un dominio diferente de la membrana plasmtica, donde transfieren sus molculas de carga de un lugar a otro, proceso llamado transcitosis.