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9 BIORREMEDIACION DE LA CONTAMINACION PETROLERA MARINA

El ambiente marino posee una pobre capacidad de respuesta al impacto de los hidrocarburos petrolferos, tanto por la baja concentracin de nutrientes disponibles (nitrgeno y fsforo), como por la baja frecuencia de aparicin de bacterias hidrocarbonoclastas. Teniendo en cuenta la posibilidad que ofrecen las clulas inmovilizadas de transformar los hidrocarburos del petrleo sin que ocurra duplicacin celular, en este trabajo se realiz un estudio de la necesidad o no de aadir nutrientes al BIO-IL (producto hidrocarbonoclasta a partir de clulas inmovilizadas). Se demostr por Cromatografa Gaseosa de Alta Resolucin, que no es necesario aadir nutrientes al agua de mar para que ocurra una degradacin eficiente de los hidrocarburos del petrleo por parte del BIOIL y que la accin de este producto no se inhibe por altas concentraciones de hidrocarburos (hasta el 8 %). En las ltimas dcadas, paralela al desarrollo de la industria petrolera, ha aumentado la contaminacin en los ecosistemas marinos. El vertimiento de petrleo crudo y sus derivados provocan efectos negativos a corto, mediano y largo plazo. La eliminacin natural de los contaminantes puede tardar aos, e incluso no ocurrir. Para acelerar este proceso y garantizar la reparacin del ecosistema daado, se emplean tcnicas de biorremediacin. Esta variante emergente de la biotecnologa ambiental, se basa en el empleo de la actividad metablica microbiana (bacterias, hongos, levaduras, algas y tapetes microbianos) para degradar los hidrocarburos del petrleo. Su aplicacin tiene dos propsitos esenciales: la bioestimulacin de la poblacin autctona viable, y la bioaumentacin (introduccin de poblaciones microbianas viables). Su seleccin requiere el anlisis de factores abiticos y biticos, que influyen en el proceso de biodegradacin. Los primeros incluyen los relacionados con el contaminante y las condiciones medioambientales; y los biticos, lo referente a la poblacin microbiana. En el desarrollo de esta tecnologa, se han formulado varios productos comercializables para la limpieza de desastres: fertilizantes construidos por nutrientes con funciones bioestimuladoras; bioproductos conformados por microorganismos; y productos qumicos con la funcin de aumentar o estimular la poblacin microbiana que interviene en el proceso de biodegradacin. Hoy da trasiegan por los mares cerca de 2 mil millones de toneladas de petrleo crudo. Su descarga accidental y a gran escala constituye una importante causa de contaminacin de las aguas marinas. La mayor responsabilidad de la contaminacin por crudos suele ser de los barcos superpetroleros que lo transportan (responsables del 22% del total); aunque el vertimiento de otros barcos y la explotacin de las plataformas petrolferas marinas, tambin son una importante aportacin de vertidos. Se estima que de cada milln de toneladas de crudo embarcadas, se vierte una tonelada. De ellas, solo el 10% del petrleo que va al mar proviene de accidentes marinos. La atmsfera, la ltracin natural, los ros, las escorrentas urbanas, las reneras de petrleo situadas en la costa, las descargas operativas de los petroleros, son fuentes de contaminacin. DIVERSIDAD DE ORGANISMOS QUE DEGRADAN PETROLEO Se ha estudiado la diversidad de microorganismos con capacidad de degradar componentes del petrleo tanto por: a) Mtodos clsicos: cultivos de enriquecimiento en medios sintticos con hidrocarburos. Inconveniente: no selecciona los microorganismos con mejores capacidades sino aquellos que mejor crecen en el medio diseado. En suelos se han aislado bacterias de los gneros Pseudomonas, Burkholderia, Acinetobacter,Sphingomonas y diversos hongos. En muestras de agua marina, bacterias de los gneros Alcanivorax,Cycloclasticus, Oleiphilus, Oleispira, Neptunomonas, Planococcus, Marinobacter, Vibrio,Pseudoalteromonas, Marinomonas o Halomonas. Tcnicas moleculares: p.ej., clonacin de los genes de ARNr 16S. Ha ampliado mucho el conocimiento sobre el espectro de bacterias presentes en ambientes contaminados con petrleo, pero esta tcnica no evidencia cules estn degradando hidrocarburos. Recientemente se ha ideado una tcnica que consiste en suministrar (en una pequea zona controlada) un hidrocarburo marcado con 13C: las bacterias que lo asimilen incorporarn en su ADN el C radioactivo. Tras un perodo adecuado de crecimiento, se asla directamente el ADN de la muestra contaminada y se separa el ADN radioactivo del que no lo es en funcin de su diferente densidad. A partir del ADN radioactivo,

b)

se amplifican y clonan los genes de ARNr 16S que correspondern nicamente a las bacterias que estn asimilando los hidrocarburos. Es una tcnica muy laboriosa, slo al alcance de unos pocos laboratorios.