Resumen: T-043

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL NORDEST E Comunicaciones Cientficas y Tecnolgicas 2004

Determinacin de parmetros fisicoqumicos de cidos orgnicos presentes en miel utilizando diseos computacionales
Baez, Margarita - Tauguinas, Alicia L. - Avallone, Carmen M. - Cravzov, Alicia L. Facultad de Agroindustrias UNNE. Cte. Fernndez 755- (3700) Pcia. Roque Saenz Pea- Chaco- Argentina.Tel./Fax (03732) 420137 E-mail: mbaez@fai.unne.edu.ar. ANTECEDENTES Los cidos orgnicos presentes en la miel son los responsables de la acidez de la misma, su pH se sita entre (3,6 4,2). Algunos de estos cidos provienen de los vegetales, producidos por el ciclo de oxidacin biolgico de Krebs, encontrndose finalmente en el nctar. La miel posee propiedades antibacterianas que son atribuibles a la accin combinada de los azcares y los cidos orgnicos presentes en ella. Una actividad plenamente reconocida es su poder antisptico, que unido a su poder demulcente hace que la miel sea un excelente cicatrizante y protector de la piel, siendo muy empleada en forma tpica en quemaduras, heridas y grietas con excelentes resultados en ciruga hospitalaria en Cuba, Rumania, Rusia y Polonia. Teniendo en cuenta que la actividad biolgica de un determinado compuesto qumico es funcin de tres factores: fisicoqumicos, estructurales y tericos, se ha hecho un creciente nfasis sobre la importancia de las propiedades fisicoquimicas de un compuesto o principio activo y la relacin de tales propiedades con la accin del mismo. El trmino fisicoqumico se emplea para designar a la vez las propiedades fsicas y qumicas de la molcula de un compuesto que puedan tener algn papel en el efecto biolgico. Algunas de estas propiedades son: solubilidad, coeficiente de reparto, grado de ionizacin, tensin superficial etc. Por lo tanto para la discusin de diversos aspectos de la accin global de estos compuestos es fundamental la consideracin de dichas propiedades. Es imprescindible que el principio activo alcance aquellos lugares en los que realiza la accin y en la mayor parte de los casos, antes de ejercerla, deben atravesar diversas membranas e interaccionar con mezclas de fluidos y biopolmeros inter e intracelulares. En estas condiciones las propiedades fisicoqumicas de los compuestos deben ser tales que contribuyan favorablemente a la absorcin y distribucin del mismo. Las molculas que no posean propiedades fisicoqumicas requeridas para el acceso al lugar de accin solo podrn tener una accin biolgica mnima. En los ltimos aos y gracias al gran desarrollo de la informtica, los mtodos que plantean las relaciones estructura actividad (SAR), de diferentes compuestos, han adquirido un gran auge. La qumica computacional o terica, representa las estructuras moleculares como modelo numrico y simula su comportamiento con las ecuaciones de la qumica y fsica clsica. Los programas disponibles permiten generar y presentar fcilmente datos moleculares incluyendo la energa en funcin de su geometra, denominado optimizacin que se obtiene por mtodos numricos. Utilizando algoritmos de mecnica cuntica se obtienen otros resultados como por ejemplo los que detectan dispersin y transferencia de carga, obtenidos por la extensin de la teora de Huckel de orbitales moleculares como Homo y Lumo y diferencias entre ambos. La metodologa para saber qu parmetro se correlaciona con la actividad biolgica (AB), son muy diversas. El anlisis de regresin lineal mltiple, consiste en encontrar por el mtodo del los mnimos cuadrados los coeficientes a, b, c, ....n. de una ecuacin que represente mejor la variable independiente. En el presente trabajo se determinaron los parmetros fisicoqumicos, y electrnicos de una serie de cidos orgnicos presentes en miel, mediante los mtodos de Mecnica Molecular, Mecnica Cuntica, para aproximar una ecuacin multiparamtrica, (QSAR) del tipo Y= a.x 1 + bx2 +.........+n MATERIALES Y METODOS Se trabajo con un total de 14 compuestos, como se muestra en las tablas 1 y 2. Se construyeron dichas molculas mediante las herramientas de dibujo del programa Hyperchem V. 5.0, obtenindose el confrmero de mnima energa de cada una de ellas. Para calcular las propiedades se utilizaron dos programas de diseo el Hyperchem V.5.0 y Dragon V5.0 ambos corrido en PC. Las propiedades que fueron calculadas por mtodos de Mecnica Molecular y Mecnica Cuntica utilizando mtodos semiempricos AM1 y Polak -Rivieri son: Calor de Formacin, Carga Puntual (ejes x, y, z), Orbitales Moleculares (Homo- Lumo), y Dipolo ( tabla 1) Las propiedades moleculares como: Refractividad Molar, Lipofilicidad, Factor hidrofbico, Log P2 fueron obtenidos del sofware DRAGON V.5.0 (tabla2). Los resultados obtenidos fueron analizados por medio del sofware estadstico Statgraphics plus V.4.0 (tabla 3)

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UNIVERSIDAD NACIONAL DEL NORDEST E Comunicaciones Cientficas y Tecnolgicas 2004 DISCUSION Y RESULTADOS Tabla 1: Propiedades calculadas con el programa Hyperchem V.4.0 corrido en PC Acidos Org. Calor Form. Ac.glucnico Ac.ascrbico Ac.oxlilco Ac.lctico Ac.ctrico Ac.mlico Ac.frmico Ac.glutmico Ac.actico Ac.succnico Ac.butrico Paba Benzoico Prolina (aa) -342.9106 -221.4029 -172.69942 -143.02652 -328.4584 -240.0382 -90.00172 -198.3822 -103.0718 -199.68017 -115.6178 -70.95357 -68.1324 -98.26942 Homo -11.0544 -0.1355 -0.66878 -11.5563 -11.5558 -11.4881 -11.5033 -10.4707 -11.6251 -11.7996 -11.4494 -0.1217 -0.4683 -9.8399 Lumo 1.2838 0.4548 0.7052 0.9297 0.3419 0.3907 1.0088 0.791 0.97002 0.7135 1.0231 0.39102 0.1567 1.14485 Carga puntual eje x eje y eje z 0.622 4.166 0.912 0.429 -1.755 -0.755 -2.316 0 0 2.135 2.069 0.909 1.179 1.006 2.981 0.672 0.155 2.073 -1.315 -2.864 0 -2.519 1.227 1.574 -1.213 -1.958 0 0 0 0 1.467 -2.073 0 -4.35 -1.132 0 1.664 2.312 0 0.359 -0.17 2.482

Tabla 2: Propiedades calculadas con el programa DRAGON V 5.0 corrido en PC Acidos Org. Lipofilicidad R.M. Ac.glucnico c.ascrbico Ac.oxlico. c.lctico Ac.ctrico Ac.mlico Ac.frmico Ac.glutmico Ac.actico Ac.succnico Ac.butrico Paba Benzoico Prolina -2.589 -2.33 -1.325 -1.222 -1.169 -1.141 -1.028 -0.731 -0.386 -0.353 0.586 1.132 1.7 -0576 38.346 34.945 14.439 14.346 35.429 24.778 4.553 31.287 12.644 23.537 21.872 37.517 32.816 22.352 Log.P2 Factor Hidrofbico 6.703 3.69 5.43 0.767 1.756 -0.307 1.493 0.526 1.367 0.106 1.301 0.226 1.056 -2.264 0.535 0.953 0.149 -0.431 0.125 -0.473 0.344 -0.614 1.282 0.761 2.89 -0.742 0.332 0.989

Para llevar a cabo el anlisis estadstico, fueron seleccionadas las siguientes propiedades: Calor de formacin, Homo, Lumo y R.M, teniendo en cuenta los valores de los coeficientes de correlacin. Conociendo los valores de lipofilicidad de cada compuesto se tomo a esta como variable dependiente. En la tabla 3, se muestran los resultados obtenidos en el anlisis estadstico. La ecuacin multiparamtrica del modelo ajustado es la siguiente Y= 0.5298 +0.01439.Calor de form. 0.1065. Homo 1.4113. Lumo + 0.05754. RM Y: Lipofilicidad. Dado que el P-valor en el ANOVA correspondiente, es menor que 0.01, existe una correlacin lineal estadsticamente significativa entre las variables a un nivel de confianza de 99%. El valor de R2 del modelo ajustado explica el 82.75% de los parmetros seleccionados en el rango de respuesta. Mientras que el R2 ajustado el cual es mas adecuado para compara modelos con diferentes parmetros es 75.09%. Dado que el valor del estadstico Durbin-Watson es mayor que 1.4 existe la probabilidad de que ningn error se autocorrelacione.

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UNIVERSIDAD NACIONAL DEL NORDEST E Comunicaciones Cientficas y Tecnolgicas 2004 En determinaciones usando un modelo simplificado se observa que el alto P-valor es 0.0456 corresponda a la variable Lumo, pero al ser menor que 0.05 el mismo es estadsticamente significativo al 95% de confianza. En el grfico1 se muestra la correlacin lineal entre la lipofilicidad en funcin del calor de formacin. Tabla 3: Resultados estadsticos calculados con el programa Statgraphics Plus V 4.0

Grfico 1: Correlacin para lipofilicidad

CONCLUSION Si bien el calor de formacin es el parmetro que ms se ajusta al modelo, no debe descartarse ninguna de las otras variables analizadas al 95% de confianza, por lo tanto dichos parmetros son indicativos para predecir la actividad biolgica de los diferentes cidos orgnicos estudiados. BIBLIOGRAFA * Valor teraputico de la miel. www.mieles.com. * Garcia Valn, Luis, Introduccin al modelado Molecular, www.unav.es., Dept. Qca. Orgnica y Farm. Universidad de navarra. 1999 * Foye, William O. Ph. D. Principios de Qumica Farmacutica 1998, Ed. Revert, S.A. Barcelona- Buenos Aires 1 ed. pp: 8-11 * Avendao, Carmen M. 1993, Introduccin a la Qumica Farmacutica. Espaa. Ed. Mc Graw-Hill. Interamericana. 1 ed. pp: 73-87 y 110-119. * The Merck Index . 1996. An Encyclopedia of Chemicals, drugs and biologicals. USA. Published by Merck CO. Inc. 12 ed. * United States Pharmacopeia 23 and National Formulary 18. 1995. Inc. Rockville: United States Pharmacopeial Convention * Hyperchem Release 2 for Windows. Reference manual .Hipercube Inc., Canada 1992