LABORATORIO N 5 DIVISIN CELULAR: mitosis OBJETIVOS

Visualizar la Mitosis como mecanismo de crecimiento y reproduccin asexual. Comprender los principales acontecimientos que caracterizan las fases del Ciclo Celular de clulas eucariticas. Analizar las principales caractersticas de la Mitosis. Realizar preparados de mitosis utilizando meristema apical de Allium cepa (cebolla). Identificar las fases de la mitosis. Determinar el tiempo que las clulas pasan en cada fase del ciclo celular. Investigar sobre la importancia biolgica de la mitosis.

TEMARIO QUE EL ALUMNO DEBE CONOCER Ciclo Celular. Descripcin general de la mitosis. Caractersticas de cada fase. Importancia biolgica de la mitosis. PARTE PRCTICA Materiales: Microscopio Meristema apical de cebolla Alcohol cido actico Colorante carmn actico Portaobjetos y cubreobjetos ACTIVIDADES
1. Realizacin de preparados de mitosis.

Pinzas de madera Vasos de precipitacin de 10 ml. Papel de filtro Mechero, trpode, tela de amianto Pinzas y tijeras

Tcnica Los pices de las races se obtienen sumergiendo los bulbos de cebolla en agua, de modo que sta cubra la zona de donde emergern las nuevas raicillas. Al cabo de tres das

las races comienzan a crecer; cuando alcanzan una longitud aproximada de 1 cm pueden ser cortadas. a. Corte el pice de las raicillas y colquelas en un vaso de precipitacin con fijador de Carnoy ( 3 partes de alcohol, 1 parte de cido actico), cuidando que estn totalmente sumergidas. Caliente el vaso durante 5 minutos. Retire las raicillas y colquelas en otro vaso con el colorante. Caliente 5 minutos, moviendo lentamente para evitar ebullicin. Extraiga las raicillas y coloque de a una en un portaobjetos, agregue una gota de colorante y cubra con un cubreobjetos. Coloque sobre el cubreobjetos un papel de filtro varias veces plegado y presione tratando de lograr una buena dispersin y disociacin de los tejidos. Observe al microscopio con objetivo de 40X e identifique las fases de la mitosis en su preparado comparndolas con las de la siguiente figura.

b. c. d. e. f.
g.

2. Determinacin del tiempo que las clulas pasan en las distintas etapas del

ciclo celular (Interfase y Divisin).

a) Coloque el preparado obtenido en la actividad I en el microscopio y con objetivo de 40X

recorra el preparado y cuente el nmero de clulas que se encuentran en interfase y en cada una de las fases de la mitosis. El nmero total de clulas contadas debe ser el mximo posible (no menos de 30) para que la muestra sea representativa. Nota: Cuando recorra el preparado para contar las clulas evite realizarlo en campos ya recorridos. Una forma de hacerlo es comenzar en el extremo superior izquierdo y desplazarse hacia la derecha, cuando llegue al otro extremo del preparado bajar y hacer el recorrido en sentido inverso. b) Determine el tiempo que las clulas pasan en interfase y en cada fase de la mitosis usando la siguiente frmula: Tf = Nfase 720 min Ntotal

Donde: Tf es el tiempo requerido para la fase, Nfase es N total de clulas en la fase, Ntotal es el N total de clulas contadas y 720 minutos es el tiempo de duracin del ciclo celular en clulas de cebolla. c) Calcule los porcentajes en cada fase teniendo en cuenta que el nmero total de clulas contadas por Ud. representa el 100 %. d) Ubique los datos en el cuadro siguiente: Porcentaje de clulas en cada estado % % % % % 100 %

Interfase y Mitosis Interfase Profase Metafase Anafase Telofase N clulas totales

Nmero de clulas