UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA UFBA INSTITUTO MULTIDISCIPLINAR DE SADE IMS BIOQUMICA I

Profa. Ms. Danila Souza Oliveira Coqueiro Roteiro de Aula Prtica: pH e efeito tampo A concentrao de ons H+ e OH- nos fluidos biolgicos tem grande influncia sobre as biomolculas presentes nas clulas. A presena desses ons pode modificar a estrutura tridimensional dessas molculas atravs do rompimento das interaes existentes e formao de outras novas interaes, alterando suas propriedades biolgicas. As clulas podem perceber variaes de pH de at 0,2 unidades. Sendo assim, a regulao da manuteno do pH dos fluidos e tecidos dos organismos vivos so de extrema importncia. Esse controle do pH nos organismos vivos obtido com o auxlio de solues compostas por uma mistura de cido fraco (HA) e sua base conjugada (A-), chamadas de soluo-tampo. Os cidos podem ser definidos como compostos capazes de doar prtons hidrognios (H+) e bases so capazes de aceitar tais prtons. O mecanismo de atuao de uma soluo-tampo simples: quando adicionamos ons H + em uma soluo-tampo a base conjugada da mistura (A-) captura dos prtons H+, impedindo a sua interao com as biomolculas da soluo. Da mesma forma, quando adicionamos uma base forte soluo, os prtons H+ da mistura-tampo capturam os ons OH- da base, formando H2O. Portanto, um tampo permite s solues resistirem a grandes mudanas de pH quando adicionadas pequenas quantidades de H+. O conhecimento do pH de fluidos biolgicos e de solues de laboratrio de importncia primordial. Existem aparelhos especiais, os pHmetros, para determinaes precisas, mas o uso de indicadores de pH indispensvel na prtica. OBJETIVO Reconhecer a importncia da manuteno da concentrao hidrogeninica constante nos sistemas biolgicos; Utilizar indicadores e papis indicadores universais para determinao do pH; Verificar os fatores que determinam a eficincia ou capacidade de uma soluo tamponada MATERIAIS E REAGENTES Materiais Vidro de relgio Conta gotas Bureta Pipetas Erlenmeyer Tubos de ensaio Reagentes Soluo de fenolftalena 1% Soluo de metiorange 1% Tiras de papel indicador universal Soluo de NaOH 0,1 M Soluo de HCl 0,1 M Tampo acetato 0,1 M, pH 5,9 Amostras Vinagre Leite Soluo detergente gua sanitria

(0,390ml de ac. actico+7,6g de acetato de sdio-completar para 1L com gua destilada, verificar o pH)

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PROCEDIMENTOS EXPERIMENTAIS PARTE A: INDICADORES CIDOS/BASES PARA DETERMINAO DO pH

1. Identifique dois conjuntos de tubos de ensaio e coloque 3 ml de cada amostra nos dois conjuntos de

tubos;
2. Mergulhe uma tira de papel indicador em cada soluo de um dos conjuntos e compare a cor

desenvolvida com as cores presentes na caixa que relaciona essa cor com o pH. Anote o valor.
3. Pingue duas gotas da soluo de fenolftalena em cada tudo de ensaio de um dos conjuntos e anote a

colorao resultante;
4. No segundo conjunto de tubos, contendo as mesmas amostras que o primeiro, goteje duas gotas do

indicador metilorange em cada tudo. Anote a colorao resultante. PARTE B: EFEITO TAMPO
1. Colocar em um erlenmeyer de 200 ml: 20 ml de gua destilada, 20 ml de soluo de HCl 0,1 M e duas

gotas de fenolftalena; 2. Com auxlio de uma bureta, verter soluo de NaOH 0,1 M at a viragem do indicador. Anote o volume gasto;
3. Em outro erlenmeyer, coloque 20 ml de tampo acetato 0,1 M pH 5,9 no lugar da gua destilada, 20 ml

de HCl 0,1 M, e 2 gotas de fenolftalena;

4. Repita o item 2 e anote o volume gasto

AVALIAO Ser avaliada a participao dos alunos nas atividades propostas e a habilidade na elaborao do relatrio. QUESTES 1. Pesquise os pH de viragem dos indicadores utilizados neste experimento e classifique-os como cido, bsico ou neutro; 2. O que so indicadores cido-base? REFERNCIAS: NARDY, M. B. C. et al. Prticas de laboratrio de bioqumica e biofsica: uma viso integrada. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2009 MASTROENI, M. F.; GERN, R. M. M. Bioqumica: prticas adaptadas. So Paulo: Editora Atheneu, 2008 PETKOWICZ, C. L. O. et al. Bioqumica: aulas prticas. Curitiba: Editora UFPR, 2007.