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Practica de laboratorio: IDENTIFICAR LA PRESENCIA DE LA ENZIMA CATALASA EN EL TEJIDO HEPATICO

1.- Antecedentes La catalasa es una enzima que se encarga de degradar el perxido de hidrogeno, producto toxico generado por el metabolismo de la clula, transformndolo en oxigeno y agua. Esta enzima se encuentra ampliamente distribuida en los tejidos corporales, siendo ms abundante en aquellos encargados de la detoxificacion del cuerpo, como el hgado y los riones. Como todas las enzimas, la catalasa acta en condiciones de temperatura y pH especficos, por lo que cualquier variacin de estos podra alterar su funcin. 2.- Problema de Investigacin La accin especfica de la catalasa es degradar H2O2 para evitar la intoxicacin celular y la aparicin de trastornos en diferentes sistemas fisiolgicos. Basndonos en estos antecedentes, nos podramos preguntar: Cmo detectar la accin de la catalasa en los tejidos animales? O Cmo se puede comprobar que efectivamente se libera O2 producto de su accin? O Qu ocurre si varia la temperatura del medio en el que esta enzima se encuentra actuando?. Analicen las preguntas 3.- Planteamiento de la Hiptesis Luego de escoger el problema de investigacin, planteen una hiptesis que les permita dar una respuesta tentativa. Identifiquen las variables que participan y relacionen el sustrato que degrada la catalasa y los productos que se originan en la reaccin qumica. Tomen en cuenta que, si vara la temperatura de accin, tambin se altera la accin enzimtica. 4.- Materiales 50 mL de perxido de hidrogeno (H2O2) Hgado de pollo crudo Hgado de pollo cocido (para evidenciar el efecto del aumento de temperatura) Cinco tubos de ensayo Gotero Mortero Esptula

Cronometro

5.- Procedimiento 1. Etiqueten cada tubo de ensayo con una letra (A, B, C,D y E) 2. Corten dos cubos de hgado crudo de 1 cm de lado, aproximadamente, y dos cubos similares de hgado cocido. 3. Pongan las muestras de hgado, una en cada tubo, como se indica a continuacin: Tubo A: trozo de hgado crudo Tubo B: trozo de hgado cocido Tubo C: trozo de hgado crudo triturado Tubo D: trozo de hgado cocido triturado Tubo E: control sin hgado

4. Con la ayuda de un gotero, coloquen en cada tubo de ensayo 10 mL de H2O2. Observen anoten y registren el tiempo de reaccin hasta que se detecten cambios significativos en cada tubo. 5. Completen la tabla, clasificando el grado de efervescencia observada en cada tubo de ensayo como alta, media y baja. Tabla de registro: tiempo de reaccin y efervescencia en tejido heptico MUESTRAS Tubo A Tubo B Tubo C Tubo D Tubo E 6.- Anlisis e Interpretacin de Evidencias Debatan los resultados obtenidos. Recuerden que deben tomar en cuenta que las enzimas no se degradan, ni se altera su naturaleza qumica durante la reaccin, excepto cuando varan aspectos fundamentales para su actividad (como la temperatura y el pH). Apoyen su anlisis respondiendo las siguientes preguntas: a) Cul es el principal indicador de la presencia de la catalasa en el tejido heptico? TIEMPO DE REACCIN (seg) EFERVESCENCIA

b) Por qu la temperatura afecta la capacidad del tejido heptico para descomponer el H2O2? c) Cmo explicaras las variaciones en la efervescencia de los tubos con hgado entero y triturado? d) Contrasten su hiptesis planteada con la informacin obtenida mediante el procedimiento cientfico. Comenten en las conclusiones si la hiptesis se acepta o se rechaza, y por que. e) Realicen una lista que les permite detectar las principales dificultades que se le presentaron al momento de registrar los datos y discutan algunas soluciones para mejorar este aspecto y aplicarlas en las siguientes practicas de laboratorio. 7.- Conclusiones Elaboren al menos dos conclusiones basadas en el anlisis del experimento y la interpretacin de las evidencias obtenidas.