ESTUDIO ECOLGICO COMPARATIVO DE LA LMINA FOLIAR DE Tabebuia impetiginosa (Mart. ex DC.) Standl.

1936, EN MUESTRAS PROCEDENTES DE TRES ECORREGIONES DE BOLIVIA1.

Landvar, G; De Urioste, S; Ortuste, E2.

RESUMEN
El objetivo del presente estudio fue realizar una comparacin, a nivel anatmico, de las hojas del tajibo morado o lapacho morado- (Tabebuia impetiginosa) que habita en ecorregiones diferentes en Bolivia, para determinar caracteres anatmicos adaptativos a su ambiente. Se obtuvieron muestras a partir de individuos creciendo en tres ecorregiones distintas (Gran Chaco, Bosque Seco Chiquitano, Bosque Amaznico), de las cuales se herboriz una parte de ellas; el resto fue conservado en FAA para su estudio anatmico. Las lminas histolgicas se prepararon a mano alzada y teidas con azul de astra y safranina, y sometidas a pruebas histoqumicas para almidones y aceites con Lugol y Sudn III. Se realiz tambin conteo de tricomas usando una cmara de retculo brillante; para ste y la medicin de cutcula se emple un programa estadstico que indic una media aproximada de ambos tems. Los resultados obtenidos indicaron que las diferencias entre los especmenes estudiados se reflejan en la cantidad de tricomas y grosor de la cutcula, siendo los individuos procedentes de la ecorregin del Gran Chaco los que mostraron el mayor nmero de tricomas peltados en la superficie adaxial de la lmina foliar, adems de poseer una capa de cutcula mucho ms gruesa en comparacin de las otras ecorregiones, seguidos de los especmenes del Bosque Amaznico y del Bosque Seco Chiquitano. Palabras clave: anatoma ecolgica, hoja, Tabebuia impetiginosa, ecorregiones, Bolivia.

1. Introduccin La familia Bignoniaceae, compuesta por rboles, arbustos, lianas y en algunos casos- hierbas, est integrada por 113 gneros, 850 especies. Se distribuye en las regiones tropical y sub-tropical, encontrndose mayormente en la regin sudamericana (Fergusson et al., 2010). En Bolivia, esta familia bsicamente se halla distribuida en las regiones brasileo-paranense y chaquea (Navarro, 1997). Uno de los gneros ms importantes, dentro de la familia Bignoniaceae, con 16 especies (Justiniano et al, 2000) es el gnero Tabebuia, por su importancia maderable, ornamental, ecolgica, melfera e incluso medicinal (Daz, et al., s/a). Se puede afirmar que, en relacin con el gnero Tabebuia, los estudios realizados se han dirigido a la descripcin de la madera (Len, 2007), anatoma foliar (Dousseau et al., 2007) y morfo-anatoma foliar desde el punto de vista medicinal (Arambarri et al., 2009); aunque tambin se han realizado
1

Trabajo extra clase de investigacin formativa, para la asignatura de Anatoma Vegetal. Docente: Msc. Mercy Lpez M. semestre I 2011. 2 Estudiantes de 5to. semestre de la carrera de Biologa. Universidad Autnoma Gabriel Ren Moreno, Facultad de Ciencias Agrcolas.

investigaciones acerca de los nectarios extranupciales (Rivera, 2000), reordenamiento taxonmico (Zapater et al., 2009) y su empleo como material biolgico en la enseanza de la anatoma vegetal en centros de estudio (Freitas et al., s/a), por citar algunos. Sobre T. impetiginosa, los trabajos son escasos, principalmente los relacionados con la anatoma foliar, an siendo una especie de importancia tanto maderable como ornamental. Es de mencionar el estudio hecho por Moratelli et al. (2007) acerca del efecto de la intensidad de luz y la saturacin del agua en esta especie. A su vez, Prez et al. (2010) describieron preliminarmente la anatoma de la hoja de T. impetiginosa, mencionando algunos detalles de la estructura interna de la especie en estudio. Por tanto, se hace necesario un estudio de la anatoma foliar de esta especie, ms an considerando que la misma puede ser encontrada creciendo en las regiones del Chaco, Amazonia beniana y en el Bosque Seco Chiquitano (Ibisch et al., 2003), demostrando aparentes diferencias morfolgicas en la hoja, tomando en cuenta las caractersticas climatolgicas y ecolgicas de cada una de las zonas citadas. 2. Objetivos 2.1. Objetivo General

Realizar un estudio comparativo de la anatoma foliar de Tabebuia impetiginosa, familia Bignoniaceae, creciendo en tres ecorregiones de Bolivia, para determinar caractersticas adaptativas de la misma. 2.2. Objetivos Especficos

Describir las caractersticas anatmicas distintivas de la hoja de T. impetiginosa, procedente del bosque seco chiquitano, bosque amaznico de Beni y del Gran Chaco. Comparar los examinadas. resultados obtenidos, a partir de las muestras

3. Metodologa 3.1. rea de estudio

Las muestras estudiadas proceden de tres ecorregiones distintas de Bolivia, las cuales, segn Ibisch et al. (2003) se clasifican en: Bosques amaznicos de Beni y Santa Cruz.- Se obtuvieron muestras procedentes de San Rafael de Velasco. Bosque seco chiquitano.- donde se incluye a la ciudad de Santa Cruz de la Sierra.

Gran Chaco.- Muestras colectadas en Villamontes. (ver figura 1).

Figura 1: Ecoregiones, segn Ibisch et al (2003).

3.2.

Metodologa

Para el presente trabajo se emplearon muestras de hojas de tajibo morado (T. impetiginosa) colectadas en tres ecorregiones del pas; todas ellas obtenidas a partir del 4 hasta el 6 nudo de cada individuo. Algunas de fueron prensadas, secadas, montadas, etiquetadas e identificadas para su conservacin en el Herbario del Laboratorio de Botnica de la Facultad de Ciencias Agrcolas, de la Universidad Gabriel Ren Moreno. Las dems fueron conservadas en FAA para realizarles cortes anatmicos, tanto transversales como paradermales. Se realizaron cortes transversales en la regin del limbo, abarcando la nervadura central, los bordes y el peciolulo de los foliolos centrales. Para los cortes paradermales, se tom la regin internerval del limbo; para ello se dejaron algunos cortes de diferentes zonas de la hoja en hipoclorito de sodio al 50 %, por el lapso de tres das. Se clarificaron los cortes transversales en hipoclorito de sodio al 50 % en agua destilada; luego fueron coloreados empleando azul de astra y safranina, para luego montarlos con gelatina glicerinada (Johansen, 1940). Posteriormente, las lminas preparadas se observaron en microscopio ptico, marca Olimpus CX31, del laboratorio de Botnica de la Facultad de Ciencias Agrcolas (U.A.G.R.M) y fotografiadas con cmara digital marca Sony (12.1 megapixels).

Se efectuaron, adems, pruebas histoqumicas especficas, empleando Lugol (Roth, 1974) para la deteccin de granos de almidn y Sudan III para lpidos y cutina (Johansen, 1940). Para el conteo de tricomas se emple una cmara con retculo brillante Neubauer. Tambin se hizo una comparacin del espesor de la cutcula, tomando las muestras tenidas con Sudn III, utilizndose para ello un microscopio marca Leica DME, con software LAS EZ, para medicin de tejidos. Los datos obtenidos fueron procesados con el programa Infostat, obtenindose una estadstica descriptiva bsica. 4. Resultados 4.1. Epidermis (adaxial y abaxial)

La epidermis, en vista frontal, est constituida por clulas tpicas epidrmicas, con paredes anticlinales de forma recta. Presenta tricomas peltados en ambas epidermis y estomas anomociticos en la epidermis abaxial. (Ver figuras. 2 a 7). 4.2. Regin internerval

En los cortes transversales de la regin internerval de cada muestra se puede apreciar una epidermis adaxial pluriestratificada con clulas de forma rectangular, una epidermis abaxial monoestratificada, con estomas; tricomas peltados en ambas epidermis. El mesfilo, compuesto por 2 capas de parnquima en empalizada y 3 o 4 capas de parnquima lagunar. Haces vasculares de mediano porte son visibles, rodeados por grupos esclerenquimticos sobre el xilema y el floema, con una extensin esclerenquimtica que llega a la epidermis adaxial. Adems, rodeados por la vaina parenquimtica que llega a ambas epidermis. (Figuras 12 a 14). 4.3. Nervadura principal

En cortes transversales de la nervadura principal, se aprecia la forma biconvexa que presenta sta, con un mayor pronunciamiento en la epidermis abaxial. Tanto la epidermis adaxial como la abaxial son ms pequeas que las clulas tpicas epidrmicas, y ambas son de tipo uniestratificada. Adems de contar con colnquima (en posicin sub epidrmica, ad y abaxial); al igual que grupos esclerenquimticos perifloemticos rodeando al sistema vascular. Parnquima fundamental en el centro de haz vascular (figuras 15 a 17). 4.4. Borde

En el borde, la epidermis es de tipo monoestratificada, donde las clulas se tornan papilosas, y con una cutcula mas engorsada. Bajo la epideremis existe colnquima y haces vasculares de pequeo porte sobre el cual se observan

grupos esclerenquimaticos, tanto sobre el floema como el xilema. (Figuras 18 a 20). 4.5. Peciolulo

El peciolulo de forma cilndrica y acanalada, presenta una epidermis uniestratificada. Las clulas epidrmicas se tornan papilosas y con una capa gruesa de cutcula sobre la misma. Bajo la epidermis se puede observar 3 o 4 capas de colnquima, seguidas por parnquima fundamental (2 o 3 capas). Adems de un tejido conductor formado por un cilindro vascular compuesto por xilema2 y floema2. Tambin se observa grupos de clulas esclerenquimaticas en posicin perifloematica. Adems, presenta parnquima medular de tipo fundamental.(figuras 21 a 23).

cte

tp

cte

Figuras 2 7. Epidermis adaxial de T. impetiginosa, corte paradermal. (tp) tricomas peltados, (cte) clulas tpicas epidrmicas. Figs. 5, 6 y 7: detalles de tricomas. 5-6, corte transversal. 7, paradermal, vista frontal

tp

st

st tp ca st tp 10 11

Figuras 8 11: epidermis abaxial de la hoja de T. impetiginosa (corte paradermal). 8, Gran Chaco. 9, Bosque Seco. 10, Bosque Amaznico. 11, detalle de los estomas (st), clulas adyacentes (ca) y tricomas peltados (tp).

12

13

14

15
14

16

17
Figuras 12 -17: corte transversal de limbo (regin internerval) y nervadura central de tajibo morado. (es) epidermis adaxial, (pe) parnquima en empalizada, (pf) parnquima fundamental (hv) haces vasculares, (pl) parnquima lagunar, (ei) epidermis abaxial (cl) colnquima (ec) esclerenquima.

18

19

20
Figuras 18 20, cortes transversales del borde. (ep) epidermis, (cl) colnquima, (ec) esclernquima, (hv) haces vasculares

21

22
21

23
Figuras 21 -23: corte transversal de peciolulo de T. impetiginosa. (ep) epidermis, (cl) colnquima, (pf) parnquima fundamental, (zl) zilema, (fl) floema, (ec) esclernquima.

4.6.

Comparacin de los resultados obtenidos, segn pruebas estadsticas

Cuatro 1: Conteo de tricomas y grosor de la cutcula entre los especmenes de las tres ecoregiones en estudio ZONAS GRAN CHACO ITEM Grosor de cutcula nervadura superior (en micras) Grosor de cutcula nervadura inferior (en micras) Nmero de tricomas (media) BOSQUE AMAZONICO BOSQUE SECO

40.86

36.16

23.88

42.13

32.75

25.37

25.6

16

8.3

Desviacin estndar = 2.260781 Variacin estndar, C.V. = 13.5647 % Nivel de significancia = 0.01.
Comparacin de las diferencias detectadas entre las muestras empleadas, por el nmero de tricomas que presentan o por la variacin del grosor de la cutcula (figuras 30 32)

Figura 30: comparacin de las diferencias detectadas, en cuanto a nmero de tricomas.

Figura 31: comparacion acerca del grosor de la cuticula de la nervadura superior

Figura 32: comparacion del grosor de la cuticula de la nervadura inferior Cutcula inferior. ZONAS San Rafael Villamontes Santa Cruz Cutcula superior ZONAS San Rafael Villamontes Santa Cruz MEDIAS 40.86 36.15 23.88 N 5 5 5 A A B MEDIAS 42.13 32.75 25.37 N 5 5 5 A A B B

5. Conclusiones De acuerdo con los resultados obtenidos, se concluye que: La lmina foliar de Tabebuia impetiginosa es de tipo dorsiventral, anfiestomatica y pilosa; presentan tricomas peltados en mayor nmero en la epidermis adaxial en comparacin con la epidermis abaxial. La epidermis adaxial es multiseriada y la abaxial uniseriada. Los haces vasculares poseen grupos de esclernquima sobre el xilema y el floema, adems de una vaina de parnquima que la rodea y se extiende hasta ambas epidermis. En la regin del borde la epidermis es uniestratificada, con clulas papilosas y un grupo de colnquima como tejido de sostn. El nmero de tricomas es variable de acuerdo a las condiciones climticas de la ecorregin en la que se desarrolla la especie estudiada: a mayor temperatura o grado de estrs hdrico, mayor es el nmero de tricomas en la epidermis adaxial. Corroborndose eso con los resultados obtenidos en la presente investigacin: las muestras procedentes de la ecorregin del Gran Chaco muestran un mayor nmero de tricomas peltados sobre la epidermis adaxial en comparacin con las muestras colectadas de las otras ecoregiones. En cuanto al grosor de la cutcula abaxial sta es mayor en las muestras provenientes de la regin del Bosque Amaznico de Beni y Santa Cruz, en comparacin con las del Gran Chaco y el Bosque Seco. Todos los puntos anteriormente citados, sirven como gua de identificacin anatmica para T. impetiginosa. 6. Recomendaciones Se recomienda: Realizar estudios ecolgico-comparativos, entre T. impetiginosa versus otras especies del mismo gnero, para determinar caractersticas adaptativas al medio y/o otras que distingan a cada una de las especies como nicas y representativas ecolgicamente. Complementar el presente estudio realizando una comparacin, entre las mismas muestras, a nivel de densidad estomtica.

7. Bibliografa ARRAMBARI, A. M. et al. 2009. Morfoanatoma foliar de rboles medicinales de la Provincia Biogeogrfica de las Yungas (Argentina). Boletn Latinoamericano y del Caribe de Plantas Medicinales y Aromticas. Documento en formato PDF. Internet. BOLFOR; Justiniano, M.J.; Fredericksen, T. S.; Nash, D. 2000. Ecologa y Silvicultura de Especies Menos Conocidas Tajibos o Lapachos: Tabebuia spp. Gomes ex A.P. de Candolle, Bignoniaceae. Santa Cruz, Bolivia. Documento en PDF. Internet. DIAZ, D. & MENVIELLE, M. F. (s/a) Lista de rboles y arbustos recomendados para el Ao Palmar, provincia Entre Ros Argentina. Administracin de Parques Nacionales (Argentina), INTA EEA Concordia y Fundacin Vida Silvestre Argentina. Documento en formato PDF. Internet. DOUSSEAU, S.; et al. 2007. Anatoma foliar de Tabebuia serratifolia (Vahl) Nich. (Bignoniaceae) propagadas in vitro, in vivo e durante a aclimatizao. Departamento de Biologa, Universidade Federal de Lavras Brasil. Documento en formato PDF. Internet. FERGUSSON, M. & LOPEZ M. 2010. Texto gua, Sistemtica Vegetal II. U.A.G.R.M. F.C.A. Carrera de Biologa. 56 p. FREITAS, T. S., et al. (s/a). Uso de espcies nativas no ensino de Anatoma vegetal: famlia Bignoniaceae. Universidad Federal de Gois - campus Jata (UFG/CAJ). Internet. IBISCH, P.L. & MERIDA, G. (eds.). 2003. Biodiversidad: la riqueza de Bolivia. Estado de conocimiento y conservacin. Ministerio de Desarrollo Sostenible. Editorial FAN, Santa Cruz de la Sierra Bolivia. JOHANSEN, D.A. 1940. Micro tcnica de plantas. Msc. Graw-Hill. New York. LEON, W. 2007. Anatoma del xilema secundario de diez especies de la familia Bignoniaceae de Venezuela. Fundacin Instituto Botnico de Venezuela Dr. Tobas Lasser. Caracas, Venezuela. Documento en formato PDF. Internet.

LOPEZ, M. 2011. Instructivo de trabajos extra-clase en grupos cooperativos. Universidad Autnoma Gabriel Ren Moreno. Facultad de Ciencias Agrcolas, carrera de Biologa. MORATELLI, M. E. et al. 2007. Efeito da disponibilidade de gua e de luz na colonizao micorrzica e no crescimento de Tabebuia avellanedae Lorentz ex Griseb. (Bignoniaceae). Sociedade de Investigaes Florestais, Brasil. Documento en formato PDF. Internet. N.N. (s/a) Tabebuia impetiginosa, T. avellanedae (Bignoniaceae). Usos medicinales y farmacolgicos del lapacho. Documento en formato PDF. Internet. NAVARRO, G. 1997. Contribucin a la clasificacin ecolgica y florstica de los bosques de Bolivia. Revista Boliviana de Ecologa y Conservacin Ambiental. Fundacin Simn I. Patino. Documento en formato PDF. Internet. PEREZ, A. S., et al. 2010. Estudio de la anatoma foliar del tajibo rosado. Trabajo de investigacin formativo-acadmica. Carrera de Ingeniera Forestal, U.A.G.R.M. F.C.A. Biblioteca sectorial, Laboratorio de Botnica. RIVERA, G. L. 2000. Nectarios extranupciales florales en especies de Bignoniaceae en Argentina. Instituto de Botnica Darwinion. Buenos Aires, Argentina. Documento en PDF. Internet. ROTH, I. 1960. Micro tcnica vegetal. Universidad Nacional de Caracas, Venezuela. ROIC, L. D. & VILLAVERDE, A. A. 1998. rboles y arbustos cultivados en la ciudad de Santiago del Estero. Jardn Botnico, Facultad de Ciencias Forestales. Universidad Nacional de Santiago del Estero Argentina. Documento en PDF. Internet. SALINAS, J. C. et al. (s/a). Memoria descriptiva: Comunidad Bella Vista. Plan de Ordenamiento Predial Comunal. Documento en PDF. Internet. ZAPATER, M. A. et al. 2009. Las especies nativas de Tabebuia y Handroanthus (Tecomeae, Bignoniaceae) en Argentina. Facultad de Ciencias Naturales, Universidad Nacional de Salta. Argentina. Documento en PDF. Internet.