Facultad de Qumica y Farmacia Departamento De Control Qumico

Laboratorio Farmacognosia II CQ-412

Practica N 6

Tubrculo de Dioscorea, Extraccin y purificacin de las saponinas utilizando mtodos Cualitativos y cuantitativos.

Catedrtico: Dra. Mara Mercedes Arriola Instructor: Dr. Mario J. Castillo Padilla Grupo N 2 Integrantes Br. Roberto I. Esponda Velsquez Br. Rossana Mara Hernndez Reyes Cta. 20041011007 20021003780

Seccin: Lunes 1300 1400 Feche: Feche 16 de Mayo de 2011

Tegucigalpa M.D.C. Francisco Morazn Ciudad Universitaria

SAPONINAS Los vegetales que contienen saponinas se han utilizado profusamente en muchas partes del mundo por sus propiedades detergentes. En Europa, por ejemplo, la raz de Saponaria officinalis (familia Caryophyllaceae), y en Amrica del sur, la corteza de Quillaia saponaria (familia Rosaceae). Estas plantas contiene un elevado porcentaje de hetersidos llamados saponinas (latn sapo, jabn), que se caracteriza por sus propiedades de producir una solucin acuosa espumosa. Tambin posee propiedades hemolticas y, si se inyectan en el torrente sanguneo, son muy toxicas. El hecho de que una planta contenga sustancias hemolticas no prueba que contenga saponinas y de las especies examinadas por Wall (1961), tan slo aproximadamente la mitad de las que posean sustancias hemolticas contenan saponinas. Por via oral, las saponinas son prcticamente inactivas. La zarzaparrilla, es, por ejemplo, rica en saponinas y, sin embargo, tambin utilizada en la preparacin de bebidas no alcohlicas. Las saponinas tiene elevado peso molecular y su aislamiento en estado puro ofrece ciertas dificultades. Como hetersidos que son, se hidrolizan por cidos, dando una genina (sapogenina) y diversos azucares y acido urnicos relacionados. Segn la estructura de la genina o sapogenina, se conocen dos grupos de saponinas; los tipo esteroide (generalmente triterpenoides tetracclicos) y los triterpenoides pentacclicos.

OBJETIVOS GENERALES Extraer la saponina presente en una droga. Purificar la saponina extrada de una droga.

OBJETIVOS ESPECFICOS Determinar cualitativamente las saponinas presentes en una droga. Determinar cunticamente las saponinas presentes en una droga.

ESPRRAGO Nombre cientfico: Asparagus officinalis Asparagaceae Parte utilizada: La raz, el rizoma y los turiones (brotes jvenes). Inulina, fructosanas; saponsidos: asparagsido; flavonoides: rutsido, trazas de antociansidos; taninos; sales de potasio.

Principios activos:

Accin farmacolgica:

Las fructosanas, las sales potsicas y los saponsidos le confieren una accin diurtica. La abundante fibra de los esprragos produce un efecto laxante. Popularmente se considera depurativo.

Intoxicacin/Precauciones: Los saponsidos pueden provocar irritacin del endotelio renal. La toma accidental de los frutos puede producir una irritacin del endotelio renal. El uso de diurticos en presencia de urolitiasis, hipertensin o cardiopatas, solo debe hacerse por prescripcin y bajo control medico, dada la posibilidad de paricin de una descompensacin tensional o, si la eliminacin de potasio es considerable, una potenciacin del efecto de los cardiotnicos. Tener en cuenta el contenido alcohlico del extracto fluido, de la tintura y del jarabe. Evaluar la conveniencia de la administracin de las formas de dosificacin de las formas de dosificacin con contenido alcohlico (extracto fluido, tintura) durante el embarazo, lactancia, a nios pequeos o personas con gastritis, ulceras gastroduodenales, sndrome del intestino irritable o colitis ulcerosa durante los procesos de deshabituacin etlica.

ZARZAPARRILLA Nombre cientfico: Smilax aspera Smilacaceae Parte utilizada: Principios activos: La raz. Saponsidos triterpnicos: sarsasapogenina, esmilagenina. Aceite esencial. Almidn. Colina. Sales minerales, sobre todo potsicas. Taninos. Fitosteroles: estigmasterol, -sitosterol.

Accin farmacolgica:

Diurtico uricosrico y clororico, sudorfico, laxante suave, hipolipeniante, expectorante, antifngico.

Intoxicacin/Precauciones: A dosis elevadas, puede provocar gastroenteritis. Debido a la presencia de saponsidos con accin hemoltica (aunque solo se ha comprobado experimentalmente in vitro y en animales tras su administracin parenteral), recomendamos prescribir en forma discontinua. Tener en cuenta el contenido alcohlico del extracto fluido y de la tintura. Su uso como diurtico en presencia de hipertensin, cardiopatas o insuficiencias renal moderada o grave, solo debe hacerse por prescripcin y bajo control medico, ante el peligro que puede suponer el aporte incontrolado de lquidos, la posibilidad de que se produzca una descompensacin tensional.

YUCA Nombre cientfico: Manihot esculenta Euphorbiaceae Parte utilizada: Principios activos: El tubrculo y las hojas. La hoja contiene cido cianhdrico (0.10.21 mg/g); cidos orgnicos: oxlico, flavonoides: amentoflavona, podocarpus-flavona, derivados de quercetina. La raz ha sido ampliamente estudiada y contiene, entre otros componentes, diterpenos, cumarinas, cidos orgnicos, glicsidos cianognicos.

Accin farmacolgica:

Cefaleas, aplicacin dermatolgica, antipruriginosa, antiinflamatoria Articular, antiinflamatorio, analgsico, hipotensor, hipolipemiante.

Intoxicacin/Precauciones: No se dispone de datos de la toxicidad de hoja en aplicacin externa. El consumo de planta entera en estado fresco es txico para el ser humano. La coccin permite destruir la enzima -glucosidasa encargada de hidrolizar los glucsidos cianogeneticos en cido cianhdrico. La decoccin de hoja fresca administrada oralmente en dosis variable no mostr toxicidad general en humano adulto. No se dispone de informacin que documente la seguridad de su uso medicinal en nios, durante el embarazo o la lactancia.

Na2CO3
CARBONATO DE SODIO Sinnimos: Sinnimos Carbonato sdico anhidro, barrilla, natrn, soda Solvay, E-500, cristal de soda, ceniza de soda, xoda lavada, sosa calcinada, soda ash y sosa Numero CAS: 497-19-8 Estado de agregacin: Solido Apariencia: Es una sal blanca y translcida 2540 kg/m3; 2,54 g/cm3 Densidad: Punto de Ebullicin: 1873 K (1600 C) Punto de Fusin: 1124 K (851 C) agua: Solubilidad en agua: 10,9 g por cada 100 g de agua Usos: El carbonato de sodio es usado para tostar (calentar bajo una rfaga de aire) el cromo y otros extractos y disminuye el contenido de azufre y fsforo de la fundicin y del acero. En la fabricacin de detergentes, el carbonato de sodio es indispensable en las formulaciones al objeto de asegurar el correcto funcionamiento del resto de sustancias que lo componen, enzimas, tensoactivo, etc. durante las diferentes fases del lavado. No es de menos importancia el empleo del carbonato de sodio en aquellos procesos en los que hay que regular el pH de diferentes soluciones, nos referimos al tratamiento de aguas de la industria, as como en los procesos de flotacin. Cermica, jabones, limpiadores, ablandador de aguas duras, refinacin de petrleos, produccin de aluminio, textiles, pulpa y papel. Procesamiento metalrgico, preparacin de farmacuticos, soda custica, bicarbonato de sodio, nitrato de sodio y varios otros usos. El carbonato de sodio y sus derivados se usan para bajar el punto de fusin del silicio y poder trabajarlo mejor, tambin aporta el slido necesario para formar la red. Medidas primeros auxilios Inhalacin: Retirar al afectado a un lugar fresco. Mantener caliente y en reposos. Contacto con la piel: Despojarse de la ropa contaminada inmediatamente. Lavar con abundantes agua por 15 minutos. Lavar la ropa contaminada antes de reutilizar. Contacto con los ojos: Lavar los ojos con abundante agua, manteniendo los parpados abiertos (por lo menos 15 min.), avisar inmediatamente al oftalmlogo. Puede hallarse en la naturaleza u obtenerse artificialmente, gracias a un proceso ideado y patentado en 1791 por el mdico y qumico francs Nicols Leblanc. El mtodo Leblanc implicaba las siguientes reacciones qumicas: 1. Reaccin de la sal comn con el cido sulfrico: Na2SO4 + 2 HCl 2 NaCl + H2SO4 2. Reaccin de calcinacin del Na2SO4 con caliza y carbn: Na2SO4 + CaCO3 + 2 C Na2CO3 + CaS + 2 CO2

Fehling A Cu2SO4/H2Od Fehling B KNaC4H4O64H2O + NaOH/H2Od REACTIVO DE FEHLING Identificacin de peligros Peligros que presenta la sustancia segn las directivas europeas: Txico para los organismos acuticos. Primeros auxilios Inhalacin: Tomar aire fresco. Llamar al mdico si prosigue el malestar. Ingestin: Beber abundante agua, provocar vmitos. Llamar al mdico si prosigue el malestar. Contacto con la piel: Aclarar con abundante agua. Quitar la ropa contaminada. Contacto con los ojos: Aclarar con abundante agua, con los prpados bien abiertos. Si no desaparecen las molestias, llamar al oftalmlogo. Manipulacin y almacenamiento Manipulacin: Sin ms exigencias. Almacenamiento: Almacenar bien cerrado, en lugar bien ventilado. Almacenar entre +15C y +25C. Propiedades fsicas y qumicas Informacin general: Aspecto: lquido Color: azul Olor: caracterstico Densidad (20 C): 1,04 g/cm3 Solubilidad en agua: miscible Informacin reglamentaria Clasificacin CE: Este producto no est includo en el ndice de sustancias peligrosas con su nmero de ndice CE correspondiente, por lo que ha sido clasificado siguiendo el anexo VI de la directiva 2001/59/CE. Pictograma: Frases R: 51 Txico para los organismos acuticos. Frases S: 24/25-61 Evtese el contacto con los ojos y la piel. Evtese su liberacin al medio ambiente.

ETER DE PETROLEO

Sinnimos: Sinnimos

Nafta, ligroine, espiritus del petroleo, nafta de petrleo, petrleo, bencina. Numero CAS: 8032-32-4 Estado de agregacin: Liquido Apariencia: Liquido claro incoloro y olor a gasolina Densidad relativa: 0.64 ( Agua=1) a 15.6 C Punto de Ebullicin: 37 - 56 C Punto de Fusin: No aplica agua: Solubilidad en agua: despreciable 1 Gm/100ml a 15C Propiedades: Lquido transparente, incoloro, no fluorescente, voltil y sumamente inflamable. Desde el punto de vista qumico no es un ter sino una mezcla de hidrocarburos de bajo peso molecular. Usos: Se emplea como disolvente o eluyente para diferentes usos de laboratorio, anlisis, investigacin y qumica fina.

C6H14
HEXANO Sinnimos: Sinnimos n-hexano, hidruro de hexilo. Numero CAS: 110-54-3 Estado de agregacin: Lquido Apariencia: Liquido claro incoloro con olor suave a gasolina Densidad relativa: 0.6548 g/cm Punto de Ebullicin: 342 K (68,85 C) Punto de Fusin: 178 K (-95,15 C) agua: Solubilidad en agua: 6,1 mg/L Usos: La mayor parte del hexano usado en industria se mezcla con sustancias qumicas similares llamadas solventes. El uso principal de los solventes que contienen hexano es en la extraccin de aceites vegetales de cosechas. Tambin se usa en los laboratorios. Estos solventes tambin se usan como agentes para limpiar en imprentas, en industrias textiles, de muebles y de calzado. Ciertos tipos de pegamentos especiales usados en industrias de techado y de zapatos y cueros tambin contienen hexano. Varios productos de consumo tales como gasolina, pegamentos de secado rpido usados y cemento para pegar contienen hexano.

ESQUEMATIZACIN PRE-TRATAMIENTO
450g Droga + H2Od

Colocar la droga licuada molde de aluminio

cubrir con una bolsa negra y dejar reposar por 3 dias a una temperatura inferior a 40 C

PROCEDIMIENTO
HCl hasta obtener una solucin aproximada a 4N Hidrolisis acida T= 80 90 C por 1:30 2 H

Se deja enfriar un momento

Residuo del filtrado

agrega agua para aumentar pH

Sil el pH no sube agregar buffer (Na2CO3)

dejar reposar 5 min

Residuo

Filtrado

FILTRADO

agregar a un tubo ensayo

agregar gotas del reactivo de Fehling

RESIDUO

12 horas

70-80 C

pulverizar

2-5gDx

MONTAJE DE SOXHLET

Papel filtro

formar un cilindro cada lado debe tocarse

grapar ambos extremos

2-5g Dx

agua

agua

60mL Eter de petrleo 40mL Hexano

Sembrar extracto
*si se posee menos de solvente extractor completar con hexano frio

CROMATOGRAFA DE CAPA FINA

Preparacin de la placa cromatogrfico 20x20cm

Activar placa 20 min a 110 C

Hacer una marca paralela al bordeen de la placa

2cm

Marcara cada punto de sembrado

*Las marcas deben estar x distante entre si

FASES MVILES 1. Hexano/Acetato de etilo 4:1 2. Ciclohexano/Acetato de metilo/Agua 6:4:1 3. Cloroformo/Acetona 4:1

PREPARA LA CUBA
Tapar la cuba Fase mvil hasta nivel adecuado

1cm

MONTAJE DE CROMATOGRAFA CROMATOGR

Tapar la cuba

*el eluyente no debe sobre pasar la lnea del sembrado

4horas

RESULTADOS PRUEBA DE FEHLING La prueba de Fehling arrojo un resultado negativo

CROMATOGRAFA CAPA FINA *No fue realizada

OBSERVACIONES

La prueba de Fehling realizada al esparrago arrojo un resultado negativo.

La fermentacin del esparrago es mucho mas intensa que la de la yuca o de la zarzaparrilla.

Si la fase mvil del soxhlet nos indica fuga en el montaje.

CONCLUSIONES El mtodo se soxhlet nos permite obtener una extraccin eficaz y con un alto grado de pureza sin necesidad de procedimientos posteriores para eliminar impurezas.

La prueba de Fehling nos permite afirmar con seguridad que la muestra utilizada no posee o en muy poca cantidad azucares reductores.

El esparrago contiene saponinas esteroideas.

ANEXOS Se realizo las pruebas siguientes para la identificacin de saponinas. Prueba de espuma: 2ml del extracto ms agua destilada en un tubo de ensayo, agitar vigorosamente por 1 min y dejar reposar 5 min, si hay presencia de espumas la prueba ser positivo. Determinacin de saponinas triterpnicos o esferoidales: En 2 tubos de ensayo del mismo tamao y dimetro aadir. Tubo A: 2ml de extracto ms 2ml de HCl 0,1N Tubo B: 2ml de extracto ms 2ml de NaOH 0,1N Agitar vigorosamente ambos tubos, al mismo tiempo por 1 min. Dejar reposar por 5 min. Y observar resultados. Si la cantidad de espuma del tubo B es superior a la del A se tratara de SAPONINAS ESTEROIDALES. Si ambos tubos presentan la misma cantidad de espuma, entonces se tratara de SAPONINAS TRITERPENICAS.

RESULTADOS PRUEBA Prueba de espuma Saponinas esteroidales Saponinas triterpnicos RESULTADO Positiva (+) Negativa (-) Positiva (+)

INVESTIGACIONES BUFFER CIDOS Y BSICOS Un tampn, buffer, solucin amortiguadora o solucin reguladora es la mezcla en concentraciones relativamente elevadas de un cido dbil y su base conjugada, es decir, sales hidrolticamente activas. Tienen la propiedad de mantener estable el pH de una disolucin frente a la adicin de cantidades relativamente pequeas de cidos o bases fuertes. Se puede entender esta propiedad como consecuencia del efecto ion comn y las diferentes constantes de acidez o basicidad: una pequea cantidad de cido o base desplaza levemente el equilibrio cido-base dbil, lo cual tiene una consecuencia menor sobre el pH. Cada sistema buffer tiene su propio rango efectivo de pH, el cual depender de la constante de equilibrio del cido o base empleado. Son importantes en el laboratorio y en la industria, y tambin en la qumica de la vida. Tampones tpicos son el par amonaco-catin amonio, cido actico-anin acetato, anin carbonato-anin bicarbonato, cido ctrico-anin citrato o alguno de los pares en la disociacin del cido fosfrico. 3,6BUFFER DE ACETATO (0,1 M; pH 3,6-5,6) Solucin A (cido actico 0,2M): disolver 11,55 ml de cido actico glacial en agua destilada completando 1 litro. Solucin B (acetato de sodio 0,2 M): disolver 27,2 g de acetato de sodio (3 H2O) en agua destilada completando 1 litro. Solucin A (ml) 463 440 410 368 305 255 200 148 105 88 48 Solucin B (ml) 37 60 90 132 195 245 300 352 395 412 452 Agua destilada (ml) 500 500 500 500 500 500 500 500 500 500 500 pH 3.6 3.8 4 4.2 4.4 4.6 4.8 5 5.2 5.4 5.6

Si se desea obtener SN buffer de acetato 0,2 M, se elimina el agua destilada de la mezcla.

8,1BUFFER DE BORATO CLORURO (borato 0,1 M; cloruro 0,1 M, pH 8,1-10) Solucin A (H3BO3 0,2 m, KCl 0,2 M): disolver 12,4 g de H3BO3 en 400 ml de agua destilada, completando luego a 500 ml. En otro recipiente disolver 14,91 g de KCl en 400 ml de agua destilada, llevando a un volumen de 500 ml. Mezclar ambas soluciones. Solucin B (NaOH 0,2 N): disolver 0,8 g de NaOH en 500 ml de agua destilada, completando a un litro. Controlar la normalidad con solucin valorada de HCl. Solucin A (ml) 500 500 500 500 500 500 500 500 500 500 500 500 500 500 500 500 500 500 500 500 Solucin B (ml) 49 60 72 86 101 118 137 158 181 208 236 264 293 321 346 369 389 406 422 437 Agua destilada (ml) pH 451 8.1 440 8.2 428 8.3 414 8.4 399 8.5 382 8.6 363 8.7 342 8.8 319 8.9 292 9 264 9.1 236 9.2 207 9.3 179 9.4 154 9.5 131 9.6 111 9.7 94 9.8 78 9.9 63 10

9BUFFER DE CARBONATO (pH 9-10.8 fuerza inica 0,1) Solucin A (bicarbonato de sodio 0,1 M): disolver 84 g de NaHCO3 en suficiente cantidad de agua destilado completando 1 litro. Solucin B (carbonato de sodio 0,1 M): 106 g de Na2CO3 anhidro se disuelven en agua destilada completando 1 litro. Solucin A (ml) 76.8 67.6 56.8 45.3 34.3 24.6 17 11.2 7.1 4.1 Solucin B (ml) 7.7 10.8 14.4 18.2 21.9 25.1 27.6 29.5 30.8 31.7 Agua destilada (ml) 915.5 921.6 928.4 936.5 943.8 950.3 955.4 959.3 962.1 964.2 pH 9 9.2 9.4 9.6 9.8 10 10.2 10.4 10.6 10.8

BUFFER DE GLICINA Glicina HCl (glicina 0.1 M, pH 2.2-3.6): Solucin A (glicina 1M): disolver 75.07 g de glicina en cantidad suficiente de agua destilada, completando un litro. Solucin B: HCl 1 N. Solucin A (ml) 100 100 100 100 100 100 100 100 Solucin B (ml) 88 64.8 48.4 33.6 22.8 16.4 12.8 10 Agua destilada (ml) pH 812 2.2 835.2 2.4 851.6 2.6 866.4 2.8 877.2 3 883.6 3.2 887.2 3.4 890 3.6

Glicina NaOH (glicina 0,1 M, pH 8.6-10.4) Solucin A (glicina 1 M): disolver 75,07 g de glicina en 1 litro de agua. Solucin B (NaOH 1 N): disolver 40 g de NaOH en agua destilada llevando a 1 litro. Verificar normalidad con SN valorada de HCl. Solucin A (ml) Solucin B (ml) Agua destilada (ml) pH 100 8 892 8.6 100 12 888 8.8 100 17.6 882.4 9 100 24 876 9.2 100 33.6 866.4 9.4 100 44.8 855.2 9.6 100 54.4 845.6 9.8 100 64 836 10 100 77.2 822.8 10.2 100 91 809 10.4 Para preparar SN buffer de glicina- cloruro a diferentes pH, se incorpora a las SN A indicadas, NaCl a una molaridad 10 veces superior a la deseada.

BUFFER FOSFATOS (fosfatos 0,1 M, pH 7.5) Solucin A (NaH2PO4 0,2 M): disolver 27.6 g de NaH2PO4 H2O en agua destilada, completando un litro. Solucin B (Na2HPO4 0,2 M): 53.65 g de Na2HPO4 7 H2O se disuelven en agua destilada, llevando el volumen final a 1 litro. Si se desea molaridad 0,2 se suprime el agua destilada. Solucin A (ml) 467.5 460 450 438.5 425 407.5 387.5 367.5 342.5 312.5 282.5 255 225 195 165 140 115 95 80 65 52.5 42.5 35 26.5 Solucin B (ml) 32.5 40 50 61.5 75 92.5 112.5 132.5 157.5 187.5 217.5 245 275 305 335 360 385 405 420 435 447.5 457.5 465.473.5 Agua destilada (ml) pH 500 5.7 500 5.8 500 5.9 500 6 500 6.1 500 6.2 500 6.3 500 6.4 500 6.5 500 6.6 500 6.7 500 6.8 500 6.9 500 7 500 7.1 500 7.2 500 7.3 500 7.4 500 7.5 500 7.6 500 7.7 500 7.8 500 7.9 500 8

hidroximetil-aminometano) 7.2BUFFER DE TRIS (tris hidroximetil-aminometano) HCl (tris 0,05 M, pH 7.2-9) Solucin A (tris 0,2 M): se obtiene disolviendo 24.23 g de Tris en agua destilada, llevando a volumen de un litro. Solucin B: HCl 1 N Solucin A (ml) 250 250 250 250 250 250 250 250 250 250 Solucin B (ml) 44.2 41.4 38.4 32.5 26.8 21.9 16.5 12.2 8.1 5 Agua destilada (ml) pH 705.8 7.2 708.6 7.4 711.6 7.6 717.5 7.8 723.2 8 728.1 8.2 733.5 8.4 737.8 8.6 741.9 8.8 745 9

BUFFER VERONAL Veronal veronal sdico cloruro sdico (pH 7.4-8.9 fuerza inica 0,1): Solucin A (veronal 0,025 M): se prepara disolviendo 4,605 g de veronal en agua destilada llevando a un litro. Solucin B (veronal sdico 0,05 M): disolver 10,309 g de veronal sdico en agua destilada llevndolo a un litro. Solucin C (cloruro de sodio 0,5 M): 29.2 g de NaCl se disuelven en agua destilada hasta 1 litro. Solucin A (ml) 639 403 636 401 506 639 403 509 321 Solucin B (ml) 10 10 25 25 50 100 100 200 200 Solucin C (ml) Agua destilada (ml) pH 190 161 7.4 190 397 7.6 175 164 7.8 175 399 8 150 294 8.2 100 161 8.4 100 397 8.6 0 291 8.8 0 479 8.9

Veronal sdico HCl (pH 6.8-9.6 fuerza inica 0,1): Solucin A (veronal sdico 0,5 M): 103.09 g de veronal sdico en agua destilada y completar 1 litro. Solucin B: HCl 1 N Solucin A (ml) 104.2 107.2 110.8 116.2 123.2 132.4 143.2 153.8 164.7 174.2 181.2 187.2 190.4 194.8 197 Solucin B (ml) 47.8 46.4 44.6 41.9 38.5 33.8 28.4 23.1 17.8 12.9 9.2 6.4 4.8 2.6 1.5 Agua destilada (ml) pH 848 6.8 846.4 7 844.6 7.2 841.9 7.4 838.3 7.6 833.8 7.8 828.4 8 823.1 8.2 817.5 8.4 812.9 8.6 809.6 8.8 806.4 9 804.8 9.2 802.6 9.4 801.5 9.6

Soluciones Veronal Veronal sdico para electroforesis (fuerza inica 0,1): Veronal (g) 4.90 3.41 2.34 Veronal sdico (g) 17.4 18.95 20.62 Agua destilada Hasta 1 litro Hasta 1 litro Hasta 1 litro pH 8.4 8.6 8.8

BUFFER PARA COMPLEMENTO Debe guardarse en la heladera. En el momento de usar se diluye al 1/5 en agua destilada. NaCl cido cido dietilbarbitrico (veronal cido) Dietilbarbiturato de sodio (veronal sdico) CaCl2 anhidro MgCl2 . H2O H2O destilada, c.s.p. 42.5 g 2.875 g 1.875 g 0.2 g 1.0 g 1000 ml

Disolver el veronal cido en aproximadamente 500 ml de agua caliente. Disolver el veronal sdico en agua fra y agregarle en fro, manteniendo el orden, los siguientes componentes: NaCl, CaCl2 y MgCl2. Mezclar con la solucin de veronal sdico y medir el pH, el que debe oscilar entre 7,3 7,4. Si fuera necesario ajustar con HCl o NaOH de normalidad adecuada. Completar a un litro con agua destilada.

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