MENEZES, M. de C.; SOUZA, M. M. S. de; BOTELHO, R. P.

AVALIAO IN VITRO DA ATIVIDADE ANTIMICROBIANA DE EXTRATOS DE PLANTAS BRASILEIRAS SOBRE BACTRIAS ISOLADAS DA CAVIDADE ORAL DE CES
MARCIO DE CASTRO MENEZES1 MILIANE MOREIRA SOARES DE SOUZA2 ROSANA PINHEIRO BOTELHO2
1. Discente do Curso de Ps-Graduao em Medicina Veterinria; 2. Professor Adjunto IV/ UFRuralRJ

RESUMO: MENEZES, M. de C.; SOUZA, M. M. S. de e BOTELHO, R. P. Avaliao in vitro da atividade antimicrobiana de extratos de plantas brasileiras sobre bactrias isoladas da cavidade oral de ces. Revista Universidade Rural: Srie Cincias da Vida, Seropdica, RJ: EDUR, v. 24, n.2, p. 141-144, jul.dez., 2004. A busca por novas alternativas teraputicas, que venham a minimizar o impacto da resistncia desenvolvida pelos microrganismos frente a drogas, motiva a avaliao da possvel atividade antimicrobiana de toterpicos. O presente trabalho avalia a atividade de extratos comerciais de plantas brasileiras que possuem indicao antibacteriana bem como o extrato da planta Psidium guava contra bactrias da cavidade oral. Palavras Chaves: antimicrobianos, plantas, bactrias, oral. ABSTRACT: MENEZES, M. de C.; SOUZA, M. M. S. de and BOTELHO, R. P. In vitro evaluation of antimicrobial activity of brazilian plants extracts on bactria isolated from oral cavity of dogs. Revista Universidade Rural: Srie Cincias da Vida, Seropdica, RJ: EDUR, v. 24, n.2, p. 141-144, jul.-dez., 2004. The search for new alternatives in therapy in order to diminish the impact of antimicrobial resistance to drugs, led to the evaluation of a possible antimicrobial activity of natural compounds. The present work has evaluated the activity of Brazilian plants commercial extracts with antimicrobial use indication, and also the extract of Psidium guava against bacteria from oral cavity. Key Words: antimicrobials, plants, bacteria, oral cavity.

INTRODUO H muitos anos, se usam plantas como uma terapia alternativa ou adjuvante de processos patolgicos infecciosos com o intuito de desfrutar de seus efeitos antimicrobianos e o estudo sobre aquelas espcies que apresentam efeito antimicrobiano progride em grande velocidade. Vrios trabalhos abordam espcies brasileiras (LOPES, 1991; PERES et al., 1997; GNAN e DEMELLO, 1999 e BIAVATTI et al., 2001), denindose, na maior parte deles, as substncias responsveis por este efeito. Os estudos da ao antimicrobiana desses compostos naturais so de extrema importncia, pois o surgimento de cepas bacterianas resistentes aos mais diversos tipos de antibiticos cada vez maior, alm da

ocorrncia de efeitos colaterais como diarrias, vmitos e o aparecimento de manchas dentrias. Com isso, o uso desses extratos naturais pode ser de grande ajuda para combater infeces arresponsivas a esses antibiticos. Em humanos, muitas plantas so utilizadas no tratamento de desordens periodontais e higiene oral atravs de enxges orais ou at mesmo com a mastigao rotineira de gravetos ou outras partes dessas plantas, como feito em alguns pases (ADERINOKUN et al, 1999). A atividade antibacteriana de uma planta da espcie Drosera peltata, por exemplo, foi estudada por Didry et al. (1998), pois as folhas dessa planta so normalmente usadas para higiene oral de nativos franceses. Atravs dos resultados, os autores puderam concluir que a planta pode

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ser usada no tratamento de infeces orais, pois o extrato inibiu o crescimento de bactrias cariognicas tais como Streptococcus mutans, Streptococcus sobrinus e Streptococcus rattus. As quatro espcies bacterianas utilizadas neste trabalho, Staphylococcus aureus, Streptococcus mitis, Streptococcus oralis e Streptococcus mutans, podem ser isoladas da cavidade oral, fazendo parte da microbiota normal dos ces, ou causando srias leses orais como lceras, gengivites, formao de placas e clculos dentrios, cries, etc. Alm disso, algumas dessas bactrias podem invadir a circulao sangunea atravs das leses da mucosa oral, causando srios danos a rgos como rim, fgado, corao, crebro, alm de poder causar leses steo-articulares. A gravidade dessas alteraes varia de acordo com a imunidade do animal e com as barreiras locais de defesa, pois a ao antimicrobiana da saliva e um excelente suprimento sangneo oral, constituem essas barreiras naturais de defesa local. A idade, cuidados dentrios, e os fatores genticos e raciais tambm predispem ao desenvolvimento de doenas periodontais. O objetivo deste trabalho foi avaliar a sensibilidade de espcies bacterianas normalmente encontradas na cavidade oral, frente a extratos comerciais de plantas brasileiras, que so usadas normalmente pela populao e que possuem indicao para uso oral em infeces de garganta, gengivites, dor de dente, amidalite, etc. Foi avaliado tambm o extrato aquoso da folha da goiabeira (Psidium guava), pois de acordo com Gnan e Demello (1999), essa planta possui propriedades antimicrobianas.

MATERIAL E MTODOS Cepas Bacterianas Padro. Para a avaliao da atividade antimicrobiana, foram utilizadas cepas padro de quatro

espcies bacterianas: Staphylococcus aureus (ATCC 25923), Streptococcus mitis (ATCC 903), Streptococcus oralis (ATCC 10557) e Streptococcus mutans (ATCC 25175). Cepas bacterianas isoladas. Atravs de swabs da cavidade oral de ces, foram isoladas duas cepas bacterianas aps cultura em gar sangue e gar Azida. Com a utilizao dos mtodos bioqumicos pertinentes, as bactrias isoladas foram identicadas como Streptococcus oralis e Streptococcus mitis. Difuso em disco. Para determinao da suscetibilidade das amostras bacterianas frente aos extratos fitoterpicos ser utilizada metodologia recomendada pelo National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). As suspenses das bactrias a serem testadas sero preparadas atravs de lavagem e diluio na concentrao do tubo 0,5 da escala de Mc Farland, equivalente a 1,5 x 106 clulas/ml, distribuindo-se 0,5ml sobre as placas em meio slido (gar Mueller Hinton). Os extratos sero distribudos em discos de papel de ltro estreis e dispostos na superfcie do gar previamente inoculado. Aps incubao por 24 horas a 360C, os dimetros da zona de inibio ao redor do depsito do frmaco sero observados e medidos. Alm disso, sero feitos dois tipos de controles: o positivo e o negativo. Nos controles positivos, sero utilizados discos de penicilina para Streptococcus spp e discos de vancomicina para Staphylococcus aureus. E nos controles negativos, os discos sero impregnados com soluo salina estril. Extratos. foram avaliados o extrato de rom, um extrato composto de mel, prpolis e gengibre, outro composto por mel, prpolis e gengibre e rom, alm dos extratos de alho (Allium sativum), espinheira santa (Maytenus ilicifolia), da folha da goiabeira (Psidium guava) e o leo de copaba (Copaifera ofcinalis). O solvente utilizado para o extrato de Psidium guava foi gua destilada estril, enquanto que para os outros extratos,

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utilizou-se soluo hidro-alcolica a 40% previamente avaliado quanto a uma possvel atividade inibitria, o que no foi detectado. RESULTADOS Detectou-se halo de inibio para o extrato de alho, a espinheira santa e o leo de copaba frente ao S. aureus (ATCC 25923), em torno de 11mm, 13mm e 35mm, respectivamente. Em relao s cepas de Streptococcus spp, no foi possvel avaliar, pois as bactrias no cresceram em gar Mueller Hinton, mesmo aps 48h em estufa a 37C. Um resultado positivo tambm foi encontrado quando se testou o extrato de Psidium guava, apresentando halo em torno de 25mm para S. aureus (ATCC 25923). Para o teste de sensibilidade para os estreptococos, utilizaram-se as cepas bacterianas isoladas diretamente da cavidade oral de ces, no lugar das cepas padro, vericando-se um halo de inibio em torno de 20mm para Streptococcus oralis e Streptococcus mitis. Entretanto, em relao aos extratos comerciais compostos por mel, prpolis, gengibre e rom, no se observou nenhuma atividade antibacteriana frente s cepas isoladas nem frente cepa de S. aureus (ATCC 25923).

Como se observou no teste de difuso em disco, no houve crescimento das cepas padro de Streptococcus spp em gar Mueller Hinton. Como a tcnica proposta pelo NCCLS no faz restries ao meio de cultura quanto ao gnero ou espcie bacteriana a ser avaliada (sendo portando um meio padro), ao testarmos as cepas padro Streptococcus mitis (ATCC 903), Streptococcus oralis (ATCC 10557) e Streptococcus mutans (ATCC 25175), deveremos utilizar um meio seletivo para estreptococos tal como gar Azida ou um meio enriquecido como o gar sangue, com o objetivo de termos um crescimento adequado das bactrias, tornando o teste vivel. Como no se observou nenhuma atividade antibacteriana dos extratos comerciais testados, presume-se que eles tenham efeito em outras espcies bacterianas ou ainda que possuam outros tipos de aes tais como antiinamatria, antihistamnica, etc. Com o aumento significativo da resistncia bacteriana aos antibiticos, o uso dessas substancias naturais com efeito antibacteriano comprovado, tornase de grande importncia na medicina veterinria e humana, principalmente nos tratamentos tpicos de infeces ou em enxges orais.

CONCLUSO DISCUSSO De acordo com Didry et al. (1998), o extrato da folha de Psidium guava foi capaz de inibir o crescimento bacteriano de S. aureus (ATCC 25923), onde, alm disso, podemos observar tambm, uma atividade antibacteriana contra Streptococcus oralis e Streptococcus mitis, indicando, portanto, um maior espectro de ao desse extrato. Futuros testes devero ser feitos com o objetivo de observar se o extrato da folha da goiabeira pode inibir ou no outras espcies bacterianas. Os resultados demonstraram que os extratos de alho, espinheira santa, Psidium guava e o leo de copaba inibiram o crescimento bacteriano frente s cepas testadas, enquanto que os extratos contendo mel, prpolis, gengibre e rom no foram capazes de inibir o crescimento bacteriano.

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REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS ADERINOKUN, G. A.; LAWOYIN, J. O. and ONYEASO, C. O. Effect of two common Nigerian chewing sticks on gingival health and oral hygiene. Odontostomatol Trop, v.22, n.87, p.13-8, 1999. BIAVATTI, M. W.; VIEIRA, P. C.; SILVA, M. F. G.; FERNANDES, J. B.; ALBUQUERQUE, S.; MAGALHES, C. M. and PAGNOCCA, F. C. Chemistry and bioactivity of Raulinoa echinata Cowan, an endemic Brazilian Rutaceae species. Phytomedicine, v.8, n.2, p.121-4, 2001 DIDRY, N.; DUBREUIL, L.; TROTIN, F. and PINKAS, M. Antimicrobial activity of aerial parts of Drosera peltata Smith on oral bacteria. Journal of Ethnopharmacology, v.60, p.91-96, 1998. GNAN, S. O. and DEMELLO, M. T. Inhibition of Staphylococcus aureus by aqueous Goiaba extracts. Journal of Ethnopharmacology, v.15, n.68, p.1038,1999. LOPES, J. L. Sesquiterpene lactones from Vernonia. Mem Inst Oswaldo Cruz, n.86, Suppl 2, p.227-30, 1991. NATIONAL COMMITTEE FOR CLINICAL LABORATORY STANDARDS. 1997. Performance standards for antimicrobial disk susceptibility tests. Approved standards. NCCLS document M2-A3. National Committee for Clinical Laboratory Standards, Wayne, Pa.

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