UNIVERSIDADE FEDERAL DE SANTA MARIA CENTRO DE EDUCAO SUPERIOR NORTE DO RIO GRANDE DO SUL ENGENHARIA FLORESTAL PROF. DR.

ADRIANA TOURINHO SALAMONI

APOSTILA DE AULAS TERICAS DE BIOQUMICA VEGETAL

Frederico Westphalen, RS 2012

CAPTULO 1. INTRODUO BIOQUMICA:

Os seres vivos so constitudos de molculas desprovidas de vida. Molculas que tm comportamento descrito tambm pela matria inanimada. Mas, estes apresentam atributos peculiares que no so encontrados nos aglomerados de matria inanimada. Caractersticas identificadoras da matria viva: 1 atributo e que melhor define seres vivos so complexos e altamente organizados. Possuem clulas com estruturas contendo muitos tipos de molculas complexas. Grande variedade de espcies diferentes. 2 cada parte do organismo vivo parece ter objetivo ou funo especficas. No s em relao a estruturas macroscpicas visveis (flores, folhas, asas...), mas tambm as estruturas intracelulares (ncleo, membrana plasmtica). Tambm os compostos qumicos individualizados na clula (lipdeos, protenas e cidos nucleicos) tm funes especficas. 3 organismo vivo tem capacidade de extrair e transformar a energia do ambiente e usar para construir e manter suas intrincadas estruturas, a partir de materiais primrios simples. O atributo mais importante da matria viva a capacidade de auto-replicao precisa. A fidelidade da replicao quase perfeita, e no ocorre s 1 ou 2 vezes, o que j seria bastante notvel, mas por centenas e milhares de geraes. Todas as coisas vivas so feitas de clulas." Clulas so pequenas unidades limitadas por membranas, preenchidas por uma soluo aquosa com qumicos com a capacidade de criar cpias delas mesmas. So as principais unidades da vida. Visualizar estrutura interna da clula difcil, tanto porque as partes so pequenas, como tambm porque so transparentes e na maioria das vezes incolores cora-se com agentes que coram componentes particulares de formas diferentes. Todas as formas de vida so constitudas por molculas que consistem de tomos. Estes so divididos em componentes ainda menores prtons, nutrons e eltrons. Toda mudana na estrutura molecular/atmica das substncias corpreas deve agir sobre os fenmenos vitais do organismo e todos os fenmenos fisiolgicos so atribudos a fenmenos bioqumicos e biofsicos. Se quisermos compreender um organismo verdadeiramente: dimenso molecular ou atmica.

Biomolculas: Maioria dos componentes qumicos dos organismos vivos de natureza orgnica, formados por compostos de carbono (C) - onde ele relativamente reduzido ou hidrogenado. Muitas biomolculas orgnicas tambm tm Nitrognio (N). Os componentes de C e N no so abundantes na matria inanimada. Tambm na atmosfera e na crosta terrestre ocorrem em formas inorgnicas simples CO2, nitrognio molecular, carbonatos e nitratos. Compostos orgnicos da matria viva aparecem numa imensa variedade e muitos so bem complexos. Ex.: A bactria E. coli 5000 compostos orgnicos diferentes. Plantas e animais superiores tm nmero ainda maior. Maior parte da matria orgnica das clulas vivas constituda de macromolculas com pesos moleculares elevados, incluindo as protenas, cidos nuclicos e substncias polimricas como amido e celulose. Macromolculas celulares compostas de muitas molculas simples, pequenas monmeros primrios (= blocos construtivos) unem-se uns aos outros em longas cadeias amido/celulose: longas tiras de molculas de glicose ligadas covalentemente. Protenas cadeias de aminocidos ligados covalentemente. cidos nuclicos (DNA e RNA) feitos a partir dos nucleotdeos. As poucas molculas monomricas primrias, das quais todas as macromolculas so constitudas, tm outra caracterstica marcante desempenham mais de uma funo na clula. Algumas podem ser bem versteis e desempenhar vrios papis: Aminocidos alm de formar as protenas, so precursores de hormnios, alcalides, pigmentos e outras biomolculas. Nucleotdeos alm dos cidos nuclicos podem atuar como coenzimas e molculas que transportam energia. O que se sabe que os organismos vivos atuais no possuem normalmente compostos sem funo, ainda que no se conhea a funo exata de muitas biomolculas. Clulas vivas: Divididas em dois grandes grupos, dependendo do tipo de energia que elas obtm de seu meio ambiente: CLULAS AUTOTRFICAS usam energia solar como principal fonte de energia energia radiante absorvida por um pigmento e transformada em energia qumica. CLULAS HETEROTRFICAS usam a energia de molculas orgnicas ricas em energia, altamente reduzidas (como a glicose), obtidas do meio ambiente. Maioria das clulas animais. 3

Mesmo que estas duas classes de organismos obtenham energia em formas diferentes, ambas transformam-na em energia qumica, na forma de uma molcula especfica, o ATP (adenosina trifosfato). Biomolculas e clulas: Elementos qumicos NO esto distribudos nos organismos vivos na mesma proporo que na crosta terrestre. A composio elementar do corpo vegetal (matria seca) formada basicamente de C, O, H, N, S e P, que aparecem principalmente na forma de compostos orgnicos e parte como ons. Presena de um elemento no representa prova de que ele efetivamente necessrio vida. H elementos caractersticos de espcies adaptadas a ambientes especiais (Ex. sdio para plantas salinas) e aqueles que constituem apenas peso morto, sem ter funo especfica no metabolismo. Necessidade de um elemento para a planta s pode ser verificada em condies de cultura rigorosamente controladas. TABELA: Os bioelementos essenciais na nutrio de uma ou mais espcies, mas nem todos essenciais a todas
Elementos formadores de M.O. O C N H P S ons monoatmicos Na+ K+ Mg2+ Ca2+ ClOligoelementos Mn, Se Fe, F Co, Cr Cu, Ni Zn, Sn B, Si Al, I V, Mo

Importncia do carbono (C): elemento que prepondera, em quantidade e importncia. origem dessa posio especial propriedade do tomo de C de formar cadeias ou anis com ligaes opostas, nenhum outro elemento conhecido possui esta caracterstica. Permite a formao de molculas maiores, o que condio indispensvel para o surgimento de um nmero ilimitado de materiais durante a evoluo. tomos de carbono tm outra propriedade capacidade de se ligarem entre si. Como o C tambm forma ligaes covalentes com O, H, N e S muitas espcies diferentes de grupos funcionais podem ser introduzidas na estrutura das molculas orgnicas.

 Em todas as ligaes C comporta-se como tetravalente 1 tomo de C pode se ligar a 4 tomos monovalentes. A hierarquia de organizao molecular das clulas: Todas as biomolculas orgnicas derivam de PRECURSORES muito simples, de baixo peso molecular, obtidos do meio ambiente CO2, H2O e N atmosfrico. Precursores convertidos pela matria viva atravs de seqncias de INTERMEDIRIOS METABLICOS nas BIOMOLCULAS MONOMRICAS PRIMRIAS (BLOCOS CONSTRUTIVOS), compostos orgnicos de peso molecular maior. Os blocos construtivos unidos por ligao covalente formam as MACROMOLCULAS, que tm peso molecular relativamente elevado. Aminocidos so blocos construtivos de protenas; nucleotdeos dos cidos nuclicos; monossacardeos dos polissacardeos e cidos graxos da maioria dos lipdeos. No nvel imediatamente superior de organizao das clulas, classes diferentes de macromolculas se associam para formar SISTEMAS SUPRAMOLECULARES como as LIPOPROTENAS (lipdeos e protenas), os ribossomos (cidos nuclicos e protenas). Finalmente, muitos complexos e sistemas supramoleculares so ordenados em ORGANELAS CELULARES (ncleo, mitocndria, cloroplastos...), o mais alto nvel de organizao da hierarquia da estrutura celular (figura). Todas as clulas vivas possuem mais ou menos a mesma proporo das principais classes de biomolculas (Tabela). FIGURA: Hierarquia de organizao molecular nas clulas
CLULA ORGANELAS ESTRUTURAS SUPRAMOLECULARES (Peso de partculas = 106-109) Ncleo, Mitocndrias, Cloroplastos, Aparelho de golgi Ribossomas Complexos enzimticos Sistemas contrteis Microtbulos c nucleicos Protenas Polissacardeos Lipdeos Nucleotdeos Aminocidos Monossacardeos cidos graxos/ Glicerol Piruvato Citrato Malato Gliceraldedo-3-P CO2, H2O, Amnia, N.

MACROMOLCULAS (P.M. = 103-109)

BLOCOS CONSTRUTIVOS (P.M. = 100-350)

INTERMEDIRIOS METABLICOS (P.M. = 50-250)

PRECURSORES DO MEIO AMBIENTE (P.M. = 18-44)

TABELA: Principais componentes moleculares de uma clula de E. coli

Componente gua protenas cidos nucleicos DNA RNA carboidratos lipdeos Molculas monomricas 1rias e intermedirias ons inorgnicos % do peso total 70 15 1 6 3 2 2 1 N aproximado de cada tipo 1 3000 1 1000 50 40 500 12

As classes principais de biomolculas tm funes idnticas em todas as espcies de cls: cidos nuclicos armazenam e transmitem informao gentica; Protenas produtos diretos e efetuadores da ao gentica. Algumas tm atividade cataltica, so enzimas, outras so elementos estruturais. Polissacardeos e lipdeos armazenamento ou elementos estruturais. Diferena importante entre as classes cidos Nuclicos e protenas so elementos INFORMACIONAIS. Polissacardeos e lipdeos no transmitem informao. Os mais importantes componentes moleculares: A qualificao dos compostos estudados depende de agrupamentos atmicos, que tm capacidade para determinadas reaes e so chamados GRUPOS FUNCIONAIS: GRUPO HIDROXILA - OH (R CH2 OH) dos LCOOIS. Quando solitrio lcoois MONOVALENTES. Se mais de um estiver presente lcoois POLIVALENTES. GRUPO OXO = O contido nas ligaes com carbonila, sob a forma do grupo carbonila C=O: pertencem os ALDEDOS (ex. gliceraldedo) e as CETONAS (ex. diidrociacetona). GRUPO OXO e GRUPO HIDROXILA so grupos funcionais dos CARBOIDRATOS. Nas ALDOSES grupo OXO se liga ao tomo do C1 do acar (forma aldedo) D-glicose, D-galactose, D-manose. Nas CETOSES, se liga ao tomo do C2 D-frutose. GRUPO CARBOXILA OH - C = O grupo funcional dos CIDOS ORGNICOS. Com 1, 2 e 3 grupos carboxilas C. MONO, DI E TRICARBOXLICOS. Grupo carboxila pode aparecer na mesma molcula ao lado de outros grupos funcionais, como com AMINO nos AA. GRUPO AMINO - NH2 tm carter bsico. Caracterstico das AMINAS. Aparece nos sistemas em anel que servem de base a muitas substncias naturais PIRIMIDINA serve TIMINA (T), CITOSINA (C) e URACIL (U) e o sistema em anel PURINA que serve de base a ADENINA (A) e GUANINA (G). GRUPO CARBOXILA e GRUPO AMINO so grupos funcionais dos AMINOCIDOS.

As macromolculas: Formadas por grupo numericamente restrito de diferentes componentes moleculares, na maioria relativamente simples; sendo possvel um nmero ilimitado de combinaes (tanto pela mudana do nmero de componentes na molcula, quanto pela mudana na seqncia). FUNES: portam informaes e so elementos estruturais dos seres vivos. Isto possvel porque elas tm elementos alongados, fibrilares e entrelaam-se em retculo. Importante especialmente para as fortes exigncias mecnicas do corpo vegetativo das plantas superiores. QUEM SO? Tipos de macromolculas que esto amplamente distribudas so as protenas, os cidos nuclicos, os lipdeos e os polissacardeos. H outros tipos com funes especficas e que aparecem em certos grupos de plantas. PROTENAS: Constitudas de molculas de aminocidos unidos entre si por LIGAES PEPTDICAS (reao do grupo amino de um aminocido com grupo carboxila do outro, por condensao). De acordo com o nmero de elos de aminocidos formam-se di, tri, oligo (at 10) ou POLIPETDEOS (muitos). H um nmero ilimitado de ligaes com cerca de apenas 20 componentes. Assim, cada espcie animal ou vegetal tem suas protenas especficas. CIDOS NUCLEICOS: Seus elementos estruturais so os NUCLEOTDEOS CIDO FOSFRICO + ACAR (PENTOSE) + BASES (PURINAS e PIRIMIDINAS). 2 tipos diferena est no seu componente de ACAR e na COMPOSIO DAS BASES: CIDO DESOXIRRIBONUCLEICO acar a D-desoxirribose e as bases so Timina, Citosina, Adenina ou Guanina. CIDO RIBONUCLEICO acar a D-ribose e as bases so Uracila, Citosina, Adenina ou Guanina. CARBOIDRATOS: Tm terminao ANO GLUCANO quando formados de GLICOSE e GALACTANO quando de GALACTOSE. Sua VARIABILIDADE est no emprego de diferentes molculas de acar como elementos constituintes, no tipo de ligao dos elos e no comprimento da cadeia. Usados pelas plantas, principalmente, como elemento de sustentao e reserva: 7

-CELULOSE: -(14) - glucano substncia da parede celular, podendo compreender mais de 1000 molculas de glicose. -AMIDO -(14) e -(16) - glucano. Devido estrutura da molcula, no apropriado como substncia de sustentao. Mas possibilita o transporte da glicose, por isso a substncia de reserva vegetal mais difundida. LIPDEOS: Formados por glicerol e cidos graxos. Concluso: Objetivos da Bioqumica: relacionar as estruturas e funes de cada tipo de biomolcula com estrutura e funo dos diferentes componentes celulares. Alm disso, importante saber onde cada evento bioqumico ocorre. Mostrar as diferenas entre as clulas fotossintetizantes e no fotossintetizantes. A BIOQUMICA a cincia que estuda principalmente a qumica dos processos biolgicos que ocorrem em todos os seres vivos. Usa ferramentas e conceitos da qumica, particularmente da orgnica e fsicoqumica para elucidao do sistema vivo. Voltada principalmente para o estudo da estrutura e funo de componentes celulares como protenas, carboidratos, lipdeos, cidos nuclicos e outras biomolculas.

CAPTULO 2: GLICDEOS/CARBOIDRATOS
CONCEITO: Compostos aldedicos ou cetnicos com mltiplas hidroxilas. Contm fundamentalmente C, O e H. Comumente chamados ACARES ou HIDRATOS DE CARBONO. Estrutura bsica monossacardeo. Fisiologicamente a GLICOSE o monossacardeo mais importante. FUNES: Constituem a maior parte da matria orgnica na terra devido s suas mltiplas funes em todas as formas de vida. Servem de reserva energtica, alimento energtico e so intermedirios metablicos: GLICOGNIO milhares de molculas de glicose unidas entre si maneira que animais usam para depositar glicdio. 8

AMIDO molculas de glicose forma que vegetais usam para depsito. SACAROSE (cana, beterraba) e LACTOSE (leite) estruturas intermedirias com poucas unidades monossacardicas. As OSES RIBOSE e DESOXIRRIBOSE formam parte de arcabouo estrutural do DNA e do RNA. Importncia fisiolgica marcante Elementos estruturais nas PC de bactrias e plantas e exoesqueletos de artrpodes. Ligados a muitas protenas e lipdeos. Participantes importantes nos processos de reconhecimento clula-clula. CLASSIFICAO DOS MONOSSACARDEOS (=oses ou acares simples): So os carboidratos mais simples, dos quais derivam todas as outras classes. Frmula geral: (CH2O)n. Quimicamente Aldedos ou cetonas com duas ou mais hidroxilas So polihidroxialdedos (ou aldoses) ou polihidroxicetonas (ou cetoses). Os monossacardeos mais simples so compostos com no mnimo 3 carbonos (n=3):

O Gliceraldedo A Di-hidroxiacetona

1. Monossacardeos classificados segundo o GRUPO FUNCIONAL em ALDOSES e CETOSES. 2. O nmero de carbonos de suas molculas tambm critrio de classificao: Trioses (3). Tetroses (4). Pentoses (5). Hexoses (6). 3. Quanto quantidade de monossacardeos que formam o composto glicdico: DISSACARDEO; TRISSACARDEO; OLIGOSSACARDEO; POLISSACARDEO. 4. Quanto variabilidade dos monossacardeos constituintes: HOMOPOLISSACARDEO formado por um tipo de monossacardeo. HETEROPOLISSACARDEO com mais de um tipo de monossacardeo. 9

PROPRIEDADES: 1. ISOMERIA TICA: FISCHER estudou muito os acares. Fez testes para observar as propriedades do gliceraldedo e observou que de um dia para o outro os resultados obtidos no eram os mesmos: aps 1 noite de repouso o gliceraldedo se modificava, mudava a orientao da hidroxila de seu carbono e com isso alterava muitas das suas propriedades. O gliceraldedo se ISOMERIZAVA. Para distinguir um composto do outro usa-se: D para a triose que tem a hidroxila para a direita e L para a triose com a hidroxila para a esquerda. Todos os outros monossacardeos e por extenso, todos os outros carboidratos possuem centros de assimetria (ou quirais), e fazem isomeria ptica. Para as OSES com mais de 1 C assimtrico, D e L referem-se configurao absoluta do C assimtrico mais distante do grupamento aldedo ou cetona (carbonila). Geral: molcula com n centros assimtricos e nenhum plano de simetria tem 2 n formas de estereoismeros: Aldotriose n=1 2 estereo-ismeros so enantimeros = imagens ao espelho um do outro. Aldotetroses n=2 4 estereo-ismeros As OSES que diferem na configurao em um s centro de simetria so EPMERAS D-glicose e D-manose epmeras no C-2; D-glicose e D-galactose so epmeras no C-4. 2. MONOSSACARDEOS EM SOLUO AQUOSA: So muito solveis em gua HIDROFLICOS. Os monossacardeos em soluo aquosa esto presentes na sua forma aberta em uma proporo de apenas 0,02%. O restante das molculas (aqueles com 4 carbonos ou mais) est ciclizada na forma de um anel hemi(a)cetal de 5 ou de 6 vrtices imitam os ncleos do furano e do pirano. O anel de 5 vrtices chamado de anel furanosdico. O anel de 6 vrtices chamado de anel piranosdico. O carbono onde ocorre a formao do hemi(a)cetal denominado "Carbono Anomrico" (o que tem a funo aldedo ou cetona) que se une a hidroxila da mesma estrutura formando um anel de 5 ou 6 lados. LIGAO HEMI(A)CETAL ligao interna, que serve para fixar o anel. Feita entre um aldedo ou uma cetona e um lcool da mesma estrutura (HEMIACETAL para aldedo e HEMICETAL para cetona). Quando ele se compe, o monossacardeo passa a ter um C assimtrico a mais pela transformao da carbonila em hidroxila. Aldedo em C-1 na forma em cadeia aberta da glicose reage com a hidroxila em C-5 hemiacetal intramolecular. Anel resultante de 6 membros chamado PIRANOSE 10

PIRANO. Grupo cetnico em C-2 na forma em cadeia aberta da frutose pode reagir com o OH em C-5 hemicetal intramolecular. Anel com 5 membros chamado FURANOSE FURANO. Configurao: OH direita para baixo do plano do anel. OH esquerda para cima do plano do anel e sua hidroxila pode assumir 2 formas:

Alfa () Quando ela fica para baixo do plano do anel Beta () Quando ela fica para cima do plano do anel

O que define a posio da hidroxila na forma cclica a relao de simetria entre o grupamento que constitui o C anmero e aquele que fornecer a hidroxila. 3. MONOSSACARDEOS EPMEROS:
o

So aqueles que diferem entre si na posio de apenas uma hidroxila. Ex:

Glicose e Galactose so epmeros em C4 Glicose e Manose so epmeros em C2

4. AS LIGAES GLICOSDICAS: Monossacardeos precisam se unir para formar di, tri, polissacardeos: A ligao chamada GLICOSDICA e ocorre entre o carbono anomrico de um monossacardeo com qualquer outro carbono do monossacardeo vizinho, atravs de suas hidroxilas e com perda de gua (figura). O tipo de ligao glicosdica definido pelos carbonos envolvidos e pelas configuraes de suas hidroxilas.

Figura. Dissacardeos e ligaes glicosdicas.

MONO-OH + HO-MONO MONO-O-MONO + H2O

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Dissacardeos: So formados a partir da ligao de 2 monossacardeos atravs de ligaes OGlicosdicas. Os mais importantes e mais comuns so: sacarose, lactose e maltose. Oses ligam-se a lcoois e aminas por ligaes glicosdicas: Os glicosdeos podem ser formados tambm pela ligao de um carboidrato a uma estrutura no-carboidrato, como uma protena, por exemplo. O carbono anmero de uma OSE pode ser ligado ao tomo de nitrognio de uma amina por uma ligao Nglicosdica importante nas biomolculas centrais como nucleotdeos, DNA e RNA, ATP.

5. DIGESTO: Consiste na hidrlise das ligaes glicosdicas. Processo catalisado por um grupo de enzimas hidrolticas. A digesto dos carboidratos tem o objetivo de transform-los em monossacardeos. Processo encerrado quando todas as ligaes glicosdicas dos carboidratos foram hidrolisadas (figura). Sacarose sacarose invertase glicose + frutose Lactose lactase (seres humanos) ou -galactosidase (bactrias) glicose + galactose Maltose maltase glicose + glicose

Figura. Hidrlise e condensao de dissacardeos

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6. OSES FOSFORILADAS: Uma das estratgias da gliclise formar intermedirios com 3 carbonos que possam transferir seus grupamentos fosfato para o ADP para conseguir balano lquido de sntese de ATP (figura). A fosforilao tambm serve para tornar as OSES aninicas: grupamento pode ter fortes interaes com o centro ativo de enzimas. Carga negativa tambm evita que essas OSES atravessem espontaneamente a dupla camada lipdica das membranas. A fosforilao tambm cria intermedirios reativos para formao de ligaes O- e Nglicosdicas.

Figura. Incio da gliclise.

7. CARBOIDRATOS COMPLEXOS: AMINOGLICANOS OU GLICOSAMINOGLICANOS: cadeias de polissacardeos aninicos formados por unidades dissacardicas repetidas. Aparece na superfcie celular e na matriz extracelular dos invertebrados. Os glicosaminoglicanos possuem vrias propriedades: so polinions; tm forte comportamento hidroflico. GLICOPROTENAS: com resduos de carboidratos alm da cadeia polipeptdica. O membro mais bem caracterizado o PROTEOGLICANO da matriz extracelular da cartilagem. PEPTDEOGLICANOS: so cadeias de glicanos enlaadas por pontes com D e L aminocidos. GLICOLPIDEOS: so os componentes principais da membrana externa das bactrias gram-negativas. 13

8. POLISSACARDEOS DE RESERVA E ESTRUTURAIS: So macromolculas formadas por milhares de unidades monossacardicas ligadas entre si por ligaes glicosdicas. Os polissacardeos mais importantes so os formados pela polimerizao da glicose: O Amido: o polissacardeo de reserva da clula vegetal. Mais da metade dos glicdeos ingeridos pelo ser humano amido. Formado por molculas de glicose ligadas entre si atravs de numerosas ligaes -(1,4) (formam a AMILOSE) e poucas ligaes -(1,6) (formam a AMILOPECTINA) (figura), ou "pontos de ramificao" da cadeia. A ramificao ocorre a cada 30 unidades de -D-glicopiranose. 20% de amilose + 80% de amilopectina. Sua molcula muito linear, e forma hlice em soluo aquosa. O Glicognio: o polissacardeo de reserva da clula animal. Polmero bem grande e ramificado de radicais de glicose (maioria ligadas -1,4, as -1,6 aparecem a cada 10 unidades). Ramificaes servem para aumentar a solubilidade do glicognio e tornam suas unidades de OSES mais facilmente mobilizveis. Muito semelhante ao amido, mas possui um nmero bem maior de ligaes -(1,6), o que confere um alto grau de ramificao sua molcula. Os vrios pontos de ramificao constituem um importante impedimento a formao de uma estrutura em hlice.

Figura. Os dois polissacardeos do amido: amilose e amilopectina.

A Celulose: o carboidrato mais abundante na natureza. exclusivo dos vegetais. So sintetizados e degradados/ano na terra cerca de 1015 Kg de celulose. Possui funo estrutural na clula vegetal, como um componente importante da parede celular. Semelhante ao amido (figura) e ao glicognio em composio, a celulose tambm um polmero de glicose, mas formada por ligaes tipo -(1,4) e sem ramificao. A configurao permite que se formem cadeias retas bem longas, o que timo para a construo de fibras com alta fora de tenso. 14

A Quitina: aparece no exoesqueleto de insetos e crustceos. Formada por radicais de Nacetilglicosamina com ligaes -1,4. Forma longas cadeias retas, com papel estrutural. Semelhante celulose, exceto quanto substituio no C-2 por um grupo amina acetilado, em vez de OH (figura).

Figura. Comparativo entre a estrutura da celulose e do amido.

Figura. Um segmento curto de quitina.

CAPTULO 3: AMINOCIDOS E PROTENAS

INTRODUO Protenas so construdas a partir de 20 aminocidos, cuja FRMULA GERAL R - CH (NH3+) COO- onde R um radical orgnico (figura). No aminocido glicina o radical o elemento H. O carbono ligado ao radical R denominado carbono 2 ou . Uma cadeia formada por dois alfa aminocidos um dipeptdeo, at 100 alfa-aminocidos um polipeptdeo, mais de 100, uma protena. 15

PROPRIEDADES DOS AMINOCIDOS: Organolpticas: Incolores. A maioria de sabor adocicado. Fsicas: Slidos com solubilidade varivel em gua. Apresentam atividade ptica por apresentarem carbono assimtrico, em geral, na forma levgira. A glicina solvel em gua e no apresenta atividade ptica. Qumicas: O grupo carboxlico (-COOH) na molcula confere ao aminocido uma caracterstica cida e o grupo amino (-NH2) uma caracterstica bsica. Por isso, os aminocidos apresentam um carter anftero, ou seja, reagem tanto com cidos como com bases formando sais orgnicos. Isomeria: Todos os aminocidos (salvo glicina) possuem um tomo de carbono assimtrico (no mnimo) ou quiral aquele ligado a quatro grupos diferentes: -NH3+, -COO-, -H e R tm atividade tica (figura). Na glicina, este carbono no assimtrico porque o grupo R constitudo por -H. A configurao do carbono assimtrico dos aminocidos de ocorrncia natural igual configurao deste carbono no Lgliceraldedo. Certos aminocidos, presentes em antibiticos e nos componentes da parede de algumas bactrias aparecem com a configurao relacionada ao D-gliceraldedo. Em geral, os aminocidos naturais so representados como a srie de L e os aminocidos antinaturais como a srie de D. Todas as protenas encontradas nos seres vivos so formadas por L-aminocidos. Os prefixos L e D so usados para os aminocidos da mesma maneira que eles so para os acares (figura).

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Ionizao: Em soluo em pH neutro, os AA so predominantemente IONTES DIPOLARES em vez de molculas no ionizadas. Na forma dipolar: amina protonada - NH3+, carboxila dissociada -COO-. O estado de ionizao do AA varia com o pH: em soluo cida carboxila sem ionizao (-COOH) e amina ionizada (-NH3+). Em soluo alcalina carboxila ionizada (-COO-) e amina no (-NH2). Em soluo essas duas formas esto em equilbrio protnico (figura). Assim, dependendo do meio, os aminocidos podem atuar como cidos (protonado, podendo doar prtons), neutros (a forma protonada e a forma receptora de prtons em equilbrio) e base (base conjugada do cido correspondente, ou seja, perdeu prtons, e agora receptora deles).
NH2 H C COOH R NH3+ H C COOR forma em ionte dipolar de 1 AA forma no ionizada de 1 AA

TIPOS DE AMINOCIDOS:

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So 20 tipos diferentes de cadeias laterais, variando em tamanho, forma, carga, capacidade de formao de pontes de hidrognio e reatividade qumica encontradas nos aminocidos. Aminocidos naturais (no-essenciais): podem ser produzidos pelo corpo humano: Glicina, Alanina, Serina, Cistena, Tirosina, cido asprtico, cido glutmico, Histidina, Asparagina, Glutamina e Prolina. Aminocidos essenciais: no podem ser produzidos pelo corpo humano. Dessa forma, somente podemos adquiri-los pela ingesto de alimentos: Fenilalanina, Isoleucina, Leucina, Lisina, Metionina, Treonina, Triptofano, Arginina e Valina. CLASSIFICAO: Aminocidos apolares (no polares): com radicais de hidrocarbonetos apolares, exceto a glicina. So hidrfobos.

Aminocidos aromticos: com anel aromtico no radical R.

Aminocidos polares neutros: Apresentam radicais que tendem a formar pontes de hidrognio. 18

Aminocidos cidos: Apresentam radicais com grupo carboxlico, quase sempre tm cargas negativas no pH fisiolgico. So hidrfilos. cido asprtico: aspartato. cido glutmico: glutamato.

Aminocidos bsicos: Apresentam radicais com grupo amino, tm cadeias laterais muito polares. So hidrfilos.

SIMBOLOGIA E NOMENCLATURA: 19

Na nomenclatura dos aminocidos, a numerao dos carbonos da cadeia principal iniciada a partir do carbono da carboxila. Os aminocidos so designados por abreviaes com 3 letras ou smbolo com uma letra para facilitar a comunicao.
Nome Glicina Alanina Leucina Valina Isoleucina Prolina Fenilalanina Serina Treonina Cisteina Tirosina Asparagina Glutamina Aspartato ou cido asprtico Glutamato ou cido glutmico Arginina Lisina Histidina Triptofano Metionina Smbolo Gli Ala Leu Val Ile Pro Fen Ser Tre Cis Tir Asn Gln Asp Glu Arg Lis His Trp Met Abreviao G A L V I P F S T C Y N Q D E R K H W M Nomenclatura cido 2-aminoactico ou cido 2-amino-etanico cido 2-aminopropinico ou cido 2-amino-propanico cido 2-aminoisocaprico ou cido 2-amino-4-metil-pentanico cido 2-aminovalrico ou cido 2-amino-3-metil-butanico cido 2-amino-3-metil-n-valrico ou cido 2-amino-3-metil-pentanico cido pirrolidino-2-carboxlco cido 2-amino-3-fenil-propinico ou cido 2-amino-3-fenil-propanico cido 2-amino-3-hidroxi-propinico ou cido 2-amino-3-hidroxi-propanico cido 2-amino-3-hidroxi-n-butrico cido 2-bis-(2-amino-propinico)-3-dissulfeto ou cido 3-tiol-2-aminopropanico cido 2-amino-3-(p-hidroxifenil)propinico ou paraidroxifenilalanina cido 2-aminossuccionmico cido 2-aminoglutarmico cido 2-aminossuccnico ou cido 2-amino-butanodiico cido 2-aminoglutrico cido 2-amino-4-guanidina-n-valrico cido 2,6-diaminocaprico ou cido 2, 6-diaminoexanico cido 2-amino-3-imidazolpropinico cido 2-amino-3-indolpropinico cido 2-amino-3-metiltio-n-butrico

ESTRUTURA: Estrutura Tridimensional SNTESE: Todos os aminocidos so derivados de intermedirios da gliclise, do ciclo do cido ctrico ou da via das pentoses. O nitrognio entra nessas vias atravs do glutamato. H uma grande variao no nvel de complexidade das vias, sendo que alguns aminocidos esto a apenas alguns passos enzimticos dos seus precursores e em outros as vias so complexas, como no caso dos aminocidos aromticos. As principais famlias so: 1. A do alfa-cetoglutarato que origina o glutamato, a glutamina, a prolina e a arginina. 2. A do 3-fosfoglicerato de onde so derivados a serina, a glicina e a cistena. 3. O oxalacetato d origem ao aspartato, que vai originar a asparagina, a metionina, a treonina e a lisina. 4. O piruvato dar origem a alanina, a valina, a leucina e a isoleucina.

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OBTENO: So obtidos a partir da hidrlise de protenas. As protenas so molculas que podem ser formadas por milhares de aminocidos unidos por ligaes peptdicas (entre a carboxila de um aminocido e o grupo amino de outro). Essas ligaes podem ser quebradas por hidrlise, produzindo uma mistura complexa de aminocidos (figura). Muitos AA unidos por ligaes peptdicas formam uma CADEIA PEPTDICA ou POLIPEPTDICA NO RAMIFICADA. A cadeia peptdica tem SENTIDO (j que seus componentes tm extremidades diferentes amino e carboxila), por conveno a ponta amnica considerada como sendo o incio da cadeia peptdica. A seqncia de AA em uma cadeia peptdica escrita comeando no aminocido AMINO TERMINAL (figura). Algumas protenas tm pontes dissulfeto, ou seja, as interligaes entre as cadeias ou entre partes de uma cadeia so formadas pela oxidao de radicais de cisteina. O dissulfeto resultante chamado CISTINA.

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GENES ESPECIFICAM A SEQNCIA DE AA DE UMA PROTENA: Cada protena tem uma seqncia definida de aminocidos estabelecida com preciso. A seqncia de AA das protenas determinada geneticamente: nucleotdeos do DNA seqncia complementar de nucleotdeos no RNA seqncia de AA da protena cada um dos 20 AA codificado por uma ou mais seqncias especficas de 3 nucleotdeos. Conhecer a seqncia de uma protena til porque esclarece seu mecanismo de ao. A determinao da seqncia proteica faz parte da patologia molecular, sua alterao pode produzir funo anormal e doena. Alm disso, a seqncia de uma protena revela muito de sua histria evolutiva dos organismos. INTRODUO S PROTENAS Proteos: primordial, primeira, principal. Conceito: So macromolculas resultantes da polimerizao de aminocidos, unidos por uma ligao chamada "ligao peptdica". A ligao se faz entre a carboxila de um aminocido e a amina de outro. Funes: As protenas exercem papis cruciais em todos os processos biolgicos: 1. catlise enzimtica quase todas reaes qumicas em sistemas biolgicos so catalisadas por macromolculas especficas as enzimas (com enorme poder cataltico aumentam a velocidade das reaes de pelo menos 1 milho de vezes). 2. transporte e armazenamento muitas molculas so transportadas por protenas especficas: hemoglobina transporta oxignio nas hemcias; mioglobina transporta oxignio nos msculos. 3. movimento coordenado protenas so principal componente do msculo contrao muscular acontece pelo movimento deslizante de dois tipos de filamentos proteicos. 4. sustentao mecnica alta fora de tenso da pele e do osso devida presena do colgeno, uma protena fibrosa.

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5. proteo imunitria anticorpos so protenas altamente especficas que reconhecem e se combinam com substncias estranhas como vrus, bactrias e clulas de outros organismos distinguem o prprio do no prprio. 6. gerao e transmisso de impulsos nervosos resposta das clulas nervosas a estmulos especficos feita atravs de protenas receptoras. 7. controle do crescimento e diferenciao so os fatores proticos do crescimento. Atividades de diferentes clulas em organismos multicelulares so coordenadas por hormnios. A insulina e o hormnio estimulante da tireide so protenas. Protenas executam atividades mais especializadas, tendo papel estrutural e funcional. No tm funo energtica. Exemplos: Colgeno, matriz ssea, tendes, cartilagem, hemoglobina, mioglobina, enzimas, hormnios, etc. Classificao dos Peptdeos: Podem ser oligo- ou polipepptdeos. Protenas so polipeptdeos de elevado peso molecular. N= 2 a 10 oligopeptdeo N=11-100 polipeptdeo N > 100 PROTENA. Nomenclatura: peptdeos menores so designados de acordo com os AA que os constituem substitui-se terminao INA/ICO IL nome comea pelo N-terminal e o C-terminal mantm nome inalterado. Quando nmero de AA grande, o nome da protena muitas vezes dado de acordo com a funo que ela desempenha. CLASSIFICAO: existem vrias. De acordo com a composio: simples e conjugadas. De acordo com a conformao da molcula: Protenas fibrosas e globulares. De acordo com o nmero de cadeias: monomricas e oligomricas. PROPRIEDADES: 1. Desnaturao: As protenas podem desnaturar. Isto acontece quando, por ao de substncias qumicas ou do calor, sofrem alterao da estrutura terciria ou a quebra das ligaes no covalentes da estrutura quaternria. H perda da conformao original (NATIVA) e, conseqentemente, da sua funcionalidade. A desnaturao pode ser: reversvel ou irreversvel. Renaturao: Dependendo da forma pela qual a protena foi desnaturada, sua conformao nativa pode ser recuperada (renaturao) retirando-se lentamente o agente desnaturante. 2. Solubilidade em gua: Depende da funo desempenhada importante para aquelas que precisam se movimentar no meio aquoso para atingir seu substrato especfico. 23

ESTRUTURA DAS PROTENAS: As protenas diferem umas das outras porque elas tm um nmero e uma seqncia de resduos de aminocidos que so diferentes entre si.

A estrutura tridimensional de uma protena determinada por sua seqncia de aminocidos.

A funo biolgica de uma protena depende da sua estrutura tridimensional. Conformao de uma protena o arranjo espacial dos tomos dos aminocidos que a constituem. 1. Primria: Nmero, tipos e seqncia de aminocidos. 2. Secundria: hlice e a conformao . ALFA HLICE: o arranjo mais simples que a cadeia polipeptdica pode assumir. Nesta estrutura o esqueleto polipeptdico est enrolado ao longo do maior eixo da molcula e os grupos R dos resduos dos aminocidos projetam-se para fora do esqueleto helicoidal. As voltas da hlice tm geralmente um sentido orientado direita. A estrutura estabilizada por pontes de H entre o tomo de H ligado ao N de cada ligao peptdica e o O do grupo carboxila do quarto aminocido no lado do resduo amino terminal da hlice. CONFORMAO BETA: Nesta estrutura o esqueleto das cadeias polipeptdicas estendido em ziguezague. Na conformao beta as pontes de H podem ser intracadeias e intercadeias. As cadeias polipeptdicas adjacentes podem ser paralelas ou antiparalelas. 3. Terciria: Refere-se ao relacionamento espacial entre todos os aminocidos em um polipeptdio, ou seja, a estrutura tridimensional completa do polipeptdio. A estrutura terciria conferida pelas interaes entre os aminocidos situados a uma longa distncia entre si. Formam estruturas muito compactas. 4. Quaternria: existem protenas que conseguem desempenhar toda sua funo quando atingem o nvel tercirio, outras s conseguem executar suas funes associando-se a outras, tambm j organizadas em nvel tercirio. Elas podem se estruturar em nvel 4rio no momento da atividade e quando no esto mais atuando retornam forma 3ria. FUNO BIOLGICA: Enzimtica: so substncias capazes de acelerar as reaes bioqumicas. So catalisadores biolgicos. Todas as reaes qumicas nas quais participam as biomolculas orgnicas das clulas so catalisadas por enzimas. So altamente especficas: cada enzima capaz de catalisar um tipo de reao qumica diferente. Protenas transportadoras: hemoglobina. Protenas nutrientes e de armazenamento: ovoalbumina, casena, ferritina. Protenas contrteis ou de motilidade: actina, tubulina. Protenas estruturais ou plsticas: colgeno, elastina. Protenas de defesa: anticorpos, fibrinognio. 24

Protenas reguladoras: insulina. Protenas de membrana.

CAPTULO 4: ENZIMAS
Dentro do citoplasma celular, existem centenas de substncias que devem ser transformadas, a fim de permitir ao organismo realizar suas funes normais, funo desempenhada pelas ENZIMAS. Nenhuma reao importante, em qualquer ser vivo, ocorre sem a participao das enzimas. DEFINIO: Enzimas so um grupo de substncias orgnicas de natureza protica, com atividade celular, que tm funo catalisadora, catalisando reaes qumicas que, sem a sua presena, dificilmente aconteceriam. Isto conseguido atravs do aumento da velocidade das reaes qumicas, possibilitando o metabolismo dos seres vivos. A+BC+D Se a reao for reversvel, a enzima faz a acelerao nos 2 sentidos! O ramo da Bioqumica que trata do estudo das reaes enzimticas a Enzimologia. HISTRIA Era j sabido, entre o final do sculo XVII e incio do sculo XVIII, que secrees estomacais eram capazes de digerir a carne; era tambm conhecida a converso de amido a acares pela saliva e extratos vegetais. O mecanismo envolvido nessas transformaes no era, no entanto, conhecido. As enzimas foram descobertas no sculo XIX, aparentemente por Pasteur, que concluiu que a fermentao do acar em lcool pela levedura era catalisada por fermentos. Ele postulou que esses fermentos (as enzimas) eram inseparveis da estrutura das clulas vivas do levedo. Pasteur declarou que "a fermentao alcolica um ato correlacionado com a vida e com a organizao das clulas do fermento, e no com a sua morte ou putrefao". Em 1878, Wilhelm Khne empregou pela primeira vez o termo "enzima" para descrever este fermento, usando a palavra grega , que significa "levedar". O termo passou a ser mais tarde usado apenas para

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as protenas com capacidade cataltica, enquanto que o termo "fermento" se refere atividade exercida por organismos vivos. Em 1897, Eduard Buchner descobriu que os extratos de levedo podiam fermentar o acar at lcool e provou que as enzimas envolvidas na fermentao continuavam funcionando mesmo quando removidas das clulas vivas. Esta descoberta valeu-lhe o Prmio Nobel de Qumica em 1907. Em 1926, James Sumner isolou e cristalisou a urease, demonstrou que os cristais de urease consistiam inteiramente de protena e postulou que todas as enzimas so protenas, mas esta idia permaneceu controversa por algum tempo. Na dcada de 1930, John Northrop e seus colegas cristalisaram a pepsina e a tripsina bovinas e descobriram que essas molculas tambm eram protenas. J.B.S. Haldane escreveu um tratado intitulado Enzimas, onde continha a notvel sugesto de que as interaes por ligaes fracas entre a enzima e seu substrato, poderiam ser usadas para distorcer a molcula do substrato e catalisar a reao. CARACTERSTICAS GERAIS: Tm alto grau de especificidade. Para manter a ordem fisiolgica, uma enzima deve agir somente sobre um substrato especfico, isso garante a possibilidade da ocorrncia simultnea, no meio celular, de centenas de reaes qumicas diferentes, sem que uma interfira no andamento da outra; So produtos naturais biolgicos; Reaes baratas e seguras; Altamente eficientes, acelerando a velocidade das reaes (na sua presena, as reaes ficam 10 8 a 1011 vezes mais rpidas); So econmicas, reduzem a energia de ativao; No so txicas. NOMENCLATURA E CLASSIFICAO: A determinao do nome das enzimas normatizada por um comit especializado, o Nomenclature Committee of the International Union of Biochemistry and Molecular Biology (NC-IUBMB).

Cada enzima cdigo com 4 dgitos que caracteriza o tipo de reao catalisada:

1 dgito - classe

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2 dgito - subclasse 3 dgito - sub-subclasse 4 dgito - indica o substrato

Como norma geral, tm seu nome determinado pelo SUFIXO ASE, precedido pelo nome do substrato sobre o qual atuam. Ex:

amido - amilase, carboidrato - carboidrase, lipdio - lipase, sacarose - sacarase, protena - protease, lactose - lactase, maltose - maltase

Ex. Hidrlise do ATP catalisada pela ATPase, a que catalisa uma ligao peptdica a Peptidase, uma ligao glicosdica, glicosidase. CLASSES DE ENZIMAS A classificao explicita o nome da classe a que cada enzima pertence, seu nmero de cdigo e a reao que catalisa. Resumo da classificao.
CLASSE EC1 oxirredutases EC2 transferases EC3 hidrolases EC4 liases EC5 isomerases EC6 - ligases FUNO Reaes de oxirreduo Transferncia de grupamentos qumicos Reaes de hidrlise Adio a ligaes duplas Reaes de isomerizao Reaes de agregao, c/ energia do ATP EXEMPLO Isocitrato-desidrogenase fosfofrutoquinase Glicosidases Citrato-liase Fosfotriose-isomerase Acil Co A - sintetase

FUNO: Catalisam as centenas de reaes que ocorrem nas vias metablicas. Atuam na degradao das molculas dos nutrientes, onde a energia qumica liberada conservada na forma de ATP. Atuam na sntese de macromolculas a partir de unidades precursoras simples.

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 ESTRUTURA Todas as enzimas so protenas, mas nem toda protena uma enzima. Poucas so as enzimas formadas por uma s molcula protica, estas so chamadas ENZIMAS MONOMRICAS e tm peso molecular baixo. Atuam em nvel tercirio. As ENZIMAS OLIGOMRICAS so formadas pela associao de mais de duas cadeias polipeptdicas (em geral, o nmero par). Estas cadeias podem ser iguais ou no e possuem estrutura quaternria. Muitas vezes, para que a enzima tenha funo, precisa se associar a uma estrutura no formada por aminocidos, ou seja, um grupo prosttico formam a maioria das enzimas. MECANISMO DE AO ENZIMTICA - catalisadores: Aceleram reaes qumicas. No so consumidas na reao. Atuam em pequenas concentraes. No alteram o estado de equilbrio. As enzimas convertem uma substncia, chamada de substrato (grande variedade de natureza qumica), noutra denominada produto, e so extremamente especficas para a reao que catalisam. Isto significa que, em geral, uma enzima catalisa um nico tipo de reao qumica. Conseqentemente, o tipo de enzima encontrado numa clula determina o tipo de metabolismo que a clula efetua. E+SES E + produto Aps a formao do complexo ativado (ES), a enzima se regenera, liberando os produtos. A velocidade da reao catalisada por uma enzima aumentada devido diminuio da energia das reaes qumicas da qual participa (energia de ativao) necessria para converter o substrato no produto. O aceleramento da reao pode ser da ordem dos milhes de vezes. Como so catalisadores, as enzimas no so consumidas na reao e no alteram o equilbrio qumico da mesma. A atividade enzimtica pode depender da presena de determinadas molculas, genericamente chamadas cofatores. A natureza qumica dos cofatores muito varivel, podendo ser, por exemplo, um ou mais ons metlicos (como o ferro), ou uma molcula orgnica (como a vitamina B12). Estes cofatores podem participar ou no diretamente na reao enzimtica. Cofatores, Coenzimas e Grupos prostticos: Quando um grupo no-protico se liga fortemente cadeia de aminocidos, chamado GRUPO PROSTTICO. Se ele est preso fracamente, chama-se COENZIMA. Tanto um quanto o outro so 28

indispensveis correta atividade enzimtica. Ex. Vitamina B2 faz parte de um grupo prosttico. Vitamina B5 faz parte de uma coenzima. Aqui a vitamina aparece servindo como auxiliar de uma enzima. Os COFATORES so ons metlicos (microelementos) com cargas opostas que fazem a aproximao. Isto importante quando a enzima tem um saldo geral negativo de cargas e o composto que ela deve transformar tambm. Eles intermedeiam a interao do substrato com a enzima. Em outros casos ajudam a estrutura 3ria/4ria das enzimas a cumprir seu papel. Ex.
MICROELEMENTO Ca++ Mg++ ClK+ Cu++ ENZIMA Desmolase Hexoquinase -amilase Fosfofrutoquinase Citocromo-oxidase FUNO Sntese de hormnios Oxidao da glicose Hidrlise do amido Gliclise Sntese de ATP

Uma enzima muitas vezes maior que o substrato sobre o qual ela atua. Baseados nisso Michaelis e Menten estabeleceram a clssica imagem da CHAVE E DA FECHADURA. A fechadura tem seu centro ativo e a chave o substrato. Deduz-se que o substrato envolvido pelo centro ativo e o envolvimento origina reaes entre enzima e substrato. Essas interaes afrouxam o substrato que depois se estabiliza na formao dos produtos. Centro ativo e centro alostrico: Uma enzima usa somente uma parte da sua estrutura para se ligar ao seu substrato esta parte chamada CENTRO ATIVO ou STIO ATIVO. Uma regio da enzima, que no faz parte do centro ativo, mas que, ao se modificar, modifica tambm a forma do centro ativo o CENTRO ALOSTRICO. Os compostos que atuam sobre o centro alostrico, melhorando a atuao do centro ativo so os EFETORES ALOSTRICOS POSITIVOS. Os que fazem o contrrio so os NEGATIVOS. Os efetores agem diretamente sobre a enzima, aumentando ou diminuindo sua atividade. O centro alostrico no existe em todas as enzimas, por isso h as enzimas alostricas e as no-alostricas. As alostricas controlam a transformao de um substrato e, quando ele precisa ser gasto, elas atuam bem. Quando o objetivo foi alcanado (gastar o substrato) aparece um efetor negativo que freia o processo. As enzimas no-alostricas funcionam sempre com a mesma eficincia, dependendo da concentrao do substrato ou do produto, quer dizer, obedecem as leis do equilbrio dinmico. Quanto mais substrato existe, mais eficientemente ele transformado em produto, quanto mais produto existe, menos a enzima gasta o substrato para gerar o mesmo produto.

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 ATIVIDADE ENZIMTICA: A rapidez com que uma enzima efetua a reao que lhe cabe que justifica sua existncia num certo organismo. A capacidade que a enzima tem de transformar o substrato em produto dentro de certo tempo chamada de atividade enzimtica, maior atividade mais rapidamente ocorre a reao. Como se mede a velocidade de uma reao enzimtica? Pela quantidade de desaparecimento do substrato ou pela quantidade de aparecimento do produto em uma unidade de tempo. Fatores que alteram a velocidade das reaes enzimticas: - efeito de sais e solventes: a concentrao de sais como NaCl, MgSO4 ... Pode influenciar na conformao final de uma enzima. Num meio aquoso, h interao da gua com sais e enzimas. Essa interao resulta na forma final da enzima, quando ela est pronta para atuar sobre o substrato. Se alterar a concentrao de sais, o equilbrio entre os constituintes alterado e vai alterar a conformao da enzima. - pH: como os resduos de aminocidos ionizveis situados no stio ativo se comportam como cidos e bases, o pH do meio influencia na ao enzimtica. - temperatura: para que a transformao qumica ocorra imprescindvel que a enzima e o substrato se encontrem, a probabilidade aumenta com o aumento da temperatura. Se o meio aquecido, este absorver calor e aumentar a energia cintica do conjunto, as molculas presentes comeam a se movimentar mais e os choques entre uma enzima e seu substrato vo ser cada vez mais provveis. Mas temperaturas acima dos 40C podem provocar desnaturao das enzimas.
atividade

temperatura Temperatura tima da enzima

- concentrao da enzima: quanto maior a concentrao da enzima, mais rapidamente ela se encontra com seu respectivo substrato e mais rapidamente o transforma em produto.

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Desvios da linearidade ocorrem devido : Presena de inibidores na soluo; Presena de substncias txicas; Presena de um ativador que dissocia a enzima; Limitaes impostas pelo mtodo de anlise. Assim, recomenda-se: Enzimas com alto grau de pureza; Substratos puros.
atividade

[enzima]

- concentrao do substrato: varia durante o curso da reao medida que o substrato convertido em produto. - presena de inibidores. CINTICA ENZIMTICA: Determinar afinidade do substrato e dos inibidores; Conhecer as condies timas da catlise; Ajudar a elucidar os mecanismos da reao; Determinar a funo de uma determinada enzima em uma rota metablica. INIBIO ENZIMTICA: Determinadas substncias, como algumas drogas, toxinas e outros venenos, podem inibir a atividade de algumas enzimas, diminuindo-a ou eliminando-a totalmente. Um exemplo encontra-se na intoxicao de mamferos por monxido de carbono que liga-se fortemente ao ferro da hemoglobina, formando carboxihemoglobina e impedindo a ligao do oxignio molecular. A este tipo de substncias chama-se inibidor enzimtico. Da mesma forma, no combate s plantas daninhas ou parasitas de animais e plantas, possvel inibir temporria ou definitivamente a atividade de uma ou mais enzimas dos agentes deletrios, inviabilizando a vida desses agressores. CONCEITO: inibidor enzimtico qualquer substncia que possa diminuir a velocidade de uma reao catalisada por uma enzima. TIPOS: REVERSVEL E IRREVERSVEL TIPOS DE INIBIO REVERSVEL: 31

- competitiva: inibidor (I) e substrato (S) tm analogia estrutural, disputando o mesmo centro ativo. Quando I se coloca no centro ativo, no forma produto. E + S ES E + produtos E + I EI zero A velocidade da reao vai depender das concentraes de I e de S. Aumentando a concentrao de S, aumenta a velocidade da formao de P e, aumentando a de I, a velocidade diminui. A ocupao do centro ativo vai depender da quantidade maior de substrato ou de inibidor, cada vez que o centro ativo ficar disponvel. Quer dizer, a inibio competitiva pode ser revertida pelo acrscimo de mais substrato. - no-competitiva: se caracteriza pela ausncia de analogia estrutural entre a enzima e o inibidor. Desse modo, um mesmo inibidor pode afetar vrias enzimas diferentes. A intensidade de inibio vai depender s da concentrao do inibidor: quando a reao do complexo E-S vem para a esquerda, o centro ativo ficar livre e se combinar com o inibidor na proporo da sua quantidade no meio e da no sair. E + S ES E + P E + I EI zero APLICAES Alm de serem utilizadas em investigao laboratorial, as enzimas so usadas comercialmente. Uma aplicao industrial a produo de antibiticos em larga escala. Encontram-se tambm determinados tipos de enzimas em produtos de limpeza, para ajudar a digerir gorduras e protenas presentes. E + I + S E-S-I zero

CAPTULO 5: LIPDEOS
CONCEITO Os lipdeos definem um conjunto de substncias qumicas que, ao contrrio das outras classes de compostos orgnicos, no so caracterizadas por apresentar algum grupo funcional comum e sim pela sua alta solubilidade em solventes orgnicos e baixa solubilidade em gua. Fazem parte de um grupo conhecido como biomolculas. Os lipdeos se encontram distribudos em todos os tecidos, principalmente nas membranas celulares e nas clulas de gordura. A maioria dos lipdeos derivada ou possui na sua estrutura os cidos graxos (a maioria de cadeia longa, com mais de 12 carbonos). Algumas substncias classificadas 32

entre os lipdeos possuem intensa atividade biolgica; elas incluem algumas das vitaminas e hormnios. Embora os lipdeos sejam uma classe distinta de biomolculas, eles geralmente ocorrem combinados, seja covalentemente ou atravs de ligaes fracas, com membros de outras classes de biomolculas, para produzir molculas tais como glicolipdeos, que contm tanto carboidratos quanto grupos lipdicos e lipoprotenas, que contm tanto lipdeos como protenas. Em tais biomolculas, as distintas propriedades qumicas e fsicas de seus componentes esto combinadas para preencher funes biolgicas especializadas. Existem diversos tipos de molculas diferentes que pertencem classe dos lipdeos. Embora no apresentem nenhuma caracterstica estrutural comum, todas elas possuem muito mais ligaes carbono-hidrognio do que as outras biomolculas. Uma das leis clssicas da qumica diz que "o semelhante dissolve o semelhante", da a razo para estas molculas serem fracamente solveis em gua ou etanol (solventes polares) e altamente solveis em solventes orgnicos (geralmente apolares como o clorofrmio, ter, acetona e benzeno). Ao contrrio das demais biomolculas, os lipdeos no so polmeros, isto , no so repeties de uma unidade bsica. Embora possam apresentar uma estrutura qumica relativamente simples, as funes dos lipdeos so complexas e diversas, atuando em muitas etapas cruciais do metabolismo e na definio das estruturas celulares. FUNO Desempenham vrias funes biolgicas importantes no organismo, entre elas: - Reserva de energia em animais e sementes oleaginosas, sendo a principal forma de armazenamento os triacilgliceris (triglicerdeos); Gorduras so compostos mais reduzidos que acares e protenas, ou seja, tm mais hidrognio (e menos oxignio). por isso que fornecem mais do dobro da energia (9 kcal/g) que acares (4 kcal/g) e protenas (4 kcal/g). As gorduras fornecem, na prtica, nove vezes mais energia metablica que o mesmo peso de glicognio hidratado. - So molculas que podem funcionar como combustvel alternativo glicose, pois so os compostos bioqumicos mais calricos para gerao de energia metablica atravs da oxidao de cidos graxos.

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As gorduras (triacilgliceris), devido funo como substncia de reserva, so acumuladas principalmente no tecido adiposo, para ocasies em que h alimentao insuficiente. A reserva sob a forma de gordura muito favorvel clula por dois motivos: em primeiro lugar, as gorduras so insolveis na gua e, portanto, no contribuem para a presso osmtica dentro da clula, e em segundo lugar, as gorduras so ricas em energia. - Armazenamento e transporte de combustvel metablico; - Componente estrutural das membranas biolgicas; - Oferecem isolamento trmico, eltrico e mecnico para proteo de clulas, rgos e para todo o organismo, o qual ajuda a dar a forma esttica caracterstica; - Do origem a molculas mensageiras. HIDRLISE: A hidrlise cida dos triacilglicerdeos leva aos correspondentes cidos carboxlicos - conhecidos como cidos graxos. Este o grupo mais abundante de lipdeos nos seres vivos e so compostos derivados dos cidos carboxlicos (so cidos monocarboxlicos). Diferenciam-se pelo nmero de carbonos (em geral par) e pelo nmero e localizao das insaturaes (quando tm). Os cidos graxos tambm podem ser classificados como saturados ou insaturados: cidos graxos saturados:
o o o

No possuem duplas ligaes (CARBONO-CARBONO) So geralmente slidos temperatura ambiente Gorduras de origem animal so geralmente ricas em cidos graxos saturados

cidos graxos insaturados: o Possuem uma ou mais duplas ligaes so mono ou poliinsaturados o So geralmente lquidos temperatura ambiente. o Os leos de origem vegetal so ricos em AG insaturados. o Quando existe mais de uma dupla ligao, estas so sempre separadas por pelo menos 3 carbonos, nunca so adjacentes nem conjugadas. 34

o Halogenao: Podem ser acrescentados bromo, cloro, iodo ou cloreto de iodo s duplas ligaes dos cidos graxos no saturados.

Hidrogenao Os cidos graxos insaturados podem ser convertidos a saturados atravs de hidrogenao. Isso ocorre facilmente nas frituras. Fritar alimentos com azeite de oliva (que um leo composto, sobretudo, por cidos graxos insaturados, como oleico, linoleico e linolnico) resulta em sua transformao em cido esterico. por esse mecanismo que o leo, aps resfriamento, solidifica, pois passou a ser uma gordura formada por cidos graxos saturados de cadeia longa. CLASSIFICAO DOS LIPDEOS 1. Lipdeos simples (lcool + cido graxo) 2. Lipdeos Complexos (lcool + cido graxo + genina) 3. Precursores e derivados de lipdeos Lipdeos Simples Os lipdeos simples so steres de cidos graxos com um lcool. Quando o lcool o glicerol, temos os glicerdeos (leos e gorduras). Quando o lcool possui peso molecular elevado (como o lcool olico ou a esfingosina), o composto chamado de cerdeo, "cera" ou "graxa". A caracterstica fundamental que distingue os lipdeos simples das demais categorias que sua hidrlise libera apenas lcool + cido graxo. Os lipdeos simples podem ser glicerdeos (glicerol + cido graxo) ou cerdeos (cidos graxos + lcool de elevado peso molecular). Os glicerdeos podem ser divididos em leos e gorduras, de acordo com o ponto de fuso: gorduras so slidas temperatura ambiente, leos so lquidos. No organismo, tanto os leos como as gorduras podem ser hidrolisados pelo auxlio de enzimas especficas, as lipases, que permitem a digesto destas substncias. 35

Gorduras Neutras: As gorduras neutras so steres de glicerol, sendo portanto glicerdeos. Os triglicerdeos, as gorduras neutras mais abundantes, tm uma estrutura na qual todos os grupos hidroxila do glicerol so esterificados com cidos graxos. Monoacilgliceris tm apenas um acil ligado ao glicerol. Diacilgliceris tm dois cidos graxos ligados ao glicerol. Os triacilgliceris (triglicerdeos) so lipdeos formados pela ligao de 3 molculas de cidos graxos com o glicerol, um trilcool de 3 carbonos, atravs de ligaes do tipo ster. Triacilgliceris: Os triacilgliceris so lipdeos formados pela ligao de 3 molculas de cidos graxos com o glicerol, um trilcool de 3 carbonos, atravs de ligaes do tipo ster. So tambm chamados de "Gorduras Neutras", ou triglicerdeos. Os cidos graxos que participam da estrutura de um triacilglicerol so geralmente diferentes entre si. A principal funo dos triacilgliceris a de reserva de energia, sendo, principalmente, armazenados nas clulas do tecido adiposo. So armazenados em uma forma desidratada quase pura, fornecendo, por grama, aproximadamente o dobro da energia fornecida por carboidratos. Cada ligao C-H um stio potencial para reaes de oxidao, um processo que libera muita energia. Existem ainda os mono e diacilgliceris, derivados do glicerol, com 1 ou 2 AG esterificados, respectivamente. Ceras e Graxas: Graxas so misturas complexas de steres de cidos graxos com lcoois de cadeia longa. As ceras revestem certas plantas e animais oferecendo uma cobertura protetora. Nas plantas so mais concentradas nos caules, folhas e frutos. Em animais, so comuns em plos, penas, pele, ouvidos. Ceras como a cera de abelha, cera de carnaba, leo de lanolina, so difundidas na natureza. O cerotato de miricila o principal componente da cera de carnaba, um produto brasileiro (da rvore da carnaba), muito usado como cera de assoalho e de automveis. Lipdeos Complexos: Os lipdeos complexos liberam, por hidrlise, uma genina alm do lcool e do cido graxo. Quando a genina uma protena, temos as lipoprotenas. Quando a genina inclui cido fosfrico, temos os fosfolipdeos. Quando carboidrato, temos glicolipdeos e assim por diante. Os fosfolipdeos podem ser steres de cido graxo com glicerol (fosfoglicerolipdeos) ou com esfingosina (esfingolipdeos, como a esfingomielina). FOSFOLIPDEOS: ou "Lipdeos Polares", so lipdeos que contm fosfato na sua estrutura. Os fosfoglicerdeos desempenham importante funo na estrutura e funo das membranas biolgicas. Podem ser fosfoacilgliceris ou esfingofosfolipdeos. Os mais importantes so derivados do glicerol fosfoglicerdeos - o qual est ligado por uma ponte tipo fosfodister geralmente a uma base nitrogenada, como por exemplo: Colina Fosfatidilcolina ou Lecitina; Serina Fosfatidilserina; Etanolamina 36

Fosfatidiletanolamina. Os fosfolipdeos ocorrem em praticamente todos os seres vivos. Ordenam-se em bicamadas, formando vesculas. Estas estruturas so importantes para conter substncias hidrossolveis em um sistema aquoso - como no caso das membranas celulares. Envolvidos nestas bicamadas encontram-se outros compostos, como protenas, acares e colesterol. As membranas celulares so elsticas e resistentes graas s fortes interaes hidrofbicas entre os grupos apolares dos fosfolipdeos. Estas membranas formam vesculas que separam os componentes celulares do meio intercelular. ESFINGOLIPDEOS: So lipdeos importantes tambm na estrutura das membranas biolgicas. Formados por uma molcula de lcool de cadeia longa, a esfingosina, no contm glicerol. ESTERIDES: So lipdeos que no possuem cidos graxos em sua estrutura. Derivam do anel orgnico do ciclopentanoperidrofenantreno. Os esteris - esterides com funo alcolica - so a principal subclasse dos esterides. Destes, o principal exemplo o Colesterol. O colesterol um esteride importante na estrutura das membranas biolgicas, e atua como precursor na biossntese dos esterides biologicamente ativos, como os hormnios esterides e os cidos e sais biliares. O colesterol, alm da atividade hormonal, tambm desempenha um papel estrutural - habita a pseudofase orgnica nas membranas celulares. LIPOPROTENAS: So associaes entre protenas e lipdeos. Encontradas na corrente sangunea. Tem como funo transportar e regular o metabolismo dos lipdeos no plasma. A frao protica das lipoprotenas denomina-se apoprotena, e se divide em 5 classes principais - Apo A, B, C, D e E - e vrias subclasses. A frao lipdica das lipoprotenas muito varivel, e permite a classificao das mesmas em grupos, de acordo com sua densidade e mobilidade. Precursores e Derivados: Entre os precursores e derivados dos lipdeos encontram-se lcoois, como o colesterol, os prprios cidos graxos, os hormnios esterides, cidos e sais biliares, vitaminas lipossolveis, etc.

CAPTULO 6: MEMBRANAS BIOLGICAS

Clulas e organelas internas possuem membrana plasmtica. A membrana citoplasmtica uma barreira fsica, porm permite a troca de solvente (gua) e de partculas entre o compartimento extra e intracelular. Isto garante que as respectivas composies e osmolaridade sejam precisamente reguladas. Todas as

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membranas citoplasmticas compartilham entre si propriedades fundamentais, mas de acordo com o tipo de clula, possuiro atividade biolgica especfica. Entre essas propriedades destaca-se:

Regulao da composio dos fluidos intracelular e extracelular; Regulao do volume celular; Regulao do metabolismo intracelular determinando a concentrao de cofatores enzimticos e de substratos; Regulao da atividade metablica processada por enzimas presentes na membrana; Decodificao de sinais qumicos e fsicos por meio de molculas receptoras e reguladoras presentes na membrana; Gerao e propagao de sinais eltricos. A membrana plasmtica constituda de um mosaico de molculas proticas incrustadas em uma

bicamada de fosfolipdeos de consistncia fludica. Esse modelo da membrana citoplasmtica conhecido como mosaico fluido. Os fosfolipdeos so molculas que possuem uma cabea polar (hidroflica) e outra apolar (hidrofbica). Na presena de gua, as molculas de fosfolipdeos se organizam espontaneamente de modo que os componentes hidrofbicos voltam-se para dentro da bicamada (cauda) e os hidroflicos, para a gua (cabea). Na bicamada esto espalhados vrios tipos de protenas com as mais variadas propriedades funcionais. PROCESSOS DE TRANSPORTE ATRAVS DA MEMBRANA Transporte Passivo ou Difuso Difuso o processo de movimento aleatrio e espontneo de partculas suspensas ou dissolvidas em soluo, cuja disperso ocorre de uma regio de maior concentrao para outra de menor concentrao, ou seja, a favor do gradiente de concentrao. A difuso pode ser simples (molcula movese diretamente, sem interao) ou difuso facilitada (molcula transportada ligada a uma protena carregadora). Partculas lipossolveis: atravessam diretamente a bicamada lipdica. Partculas no-lipossolveis: necessitam de um corredor aquoso como os canais inicos ou transportadores especiais. Alguns solutos como as macromolculas proticas so completamente impermeveis.

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Transporte Ativo: At agora descrevemos os mecanismos em que as partculas so transportadas passivamente utilizando apenas a energia livre do prprio sistema. Muitas partculas precisam ser transportadas contra o seu potencial de difuso e, para isso, ser necessrio consumir energia externa ao sistema como aquela originada do metabolismo celular. Por isso, esse tipo de transporte chamado transporte ativo. H dois tipos de transporte ativo. Transporte ativo primrio. O transporte da partcula se realiza com a hidrlise de ATP. Transporte ativo secundrio (ou acoplado). A partcula transportada contra o seu gradiente e utiliza a energia livre do gradiente de concentrao de outro soluto. Se o movimento da partcula que pega carona ocorre no mesmo sentido daquele que forneceu a energia denominado de simporte, se no sentido contrrio, antiporte. Observe que tanto no transporte primrio e secundrio h consumo de energia; a diferena est na fonte de energia.

CAPTULO 7: METABOLISMO
INTRODUO: Os organismos vivos requerem continuamente energia. So sistemas estveis que retiram e perdem energia do meio ambiente, em busca de equilbrio dinmico. A regulao da perda e ganho de energia est relacionada ao metabolismo. CONCEITO: conjunto de reaes qumicas catalisadas por enzimas e que ocorrem nas clulas, permitindo que as mesmas mantenham-se vivas, cresam e se dividam. CATABOLISMO: obteno de energia e poder redutor a partir dos nutrientes. ANABOLISMO: produo de novos componentes celulares, em processos que geralmente utilizam a energia e o poder redutor obtidos pelo catabolismo de nutrientes. Nutrientes oxidados:

Parte dos compostos de carbono CO2. Perda de prtons e eltrons. Coenzimas oxidadas reduzidas NAD NADH FAD FADH2

Reoxidao de coenzimas: Transferncia destes prtons e eltrons para oxignio H2O.

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ALGUMAS ROTAS DO METABOLISMO:

GLICLISE: oxidao da glicose a fim de obter ATP. CICLO DE KREBS: oxidao do acetil-coA a fim de obter energia. FOSFORILAO OXIDATIVA: eliminao dos eltrons liberados na oxidao da glicose e do acetil-coA. Grande parte da energia liberada neste processo pode ser armazenada na clula sob a forma de ATP.

VIA DAS PENTOSES FOSFATO: sntese de pentoses e obteno de poder redutor para reaes anablicas. -OXIDAO DOS CIDOS GRAXOS: transformao de cidos graxos em acetil-coA, para posterior utilizao pelo Ciclo de Krebs. GLICONEOGNESE: sntese de glicose a partir de molculas menores, para posterior produo de ATP. O ATP: Objetivo do metabolismo catablico: Transformao (atravs da oxidao) dos compostos

carbonados em energia aproveitvel pelas clulas. Esta energia o ATP. ATP: energia para promover processos biolgicos. De que modo a energia liberada na oxidao dos nutrientes captada e utilizada? Ela no pode ser usada diretamente. Tem que ser transformada em energia qumica de fcil acesso, os compostos contendo P ATP. Na fosforilao do ADP ATP h necessidade de energia, esta fornecida pela oxidao dos nutrientes. Esta oxidao ocorre quando o organismo requer energia (gerada pela hidrlise do ATP). A energia qumica normalmente armazenada sob a forma de sacardeos ou gorduras. Como feito o aproveitamento da energia do ATP? Pela retirada do grupo fosfato associado a processos que requerem energia. H regulao enzimtica do processo. 1. METABOLISMO DOS CARBOIDRATOS Substrato: glicose. Etapas: GLICLISE. ROTA DAS PENTOSES FOSFATO. CICLO DE KREBS. CADEIA DE TRANSPORTE DE ELTRONS. FERMENTAO (figuras). Onde? Citoplasma ou plastdeos.

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Figura. Gliclise e Gluconeognese.

Figura. Fermentao.

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Figura. Rota das Pentoses.

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Figura: Ciclo de Krebs

2. METABOLISMO DOS CIDOS GRAXOS cidos graxos SO MOLCULAS FORNECEDORAS DE ENERGIA, armazenados na forma de triacilgliceris (figura).

Figura. Formao de um triacilglicerol

O evento inicial da utilizao da gordura como fonte de energia a hidrlise dos triacilgliceris por lipases. H liberao de glicerol e de cidos graxos, o glicerol pode entrar na via glicoltica, os cidos graxos sofrem oxidao. DEGRADAO OXIDATIVA DE CIDOS GRAXOS: - OXIDAO Conceito: Via catablica de degradao de cidos graxos para produo de energia. Ocorre na matriz mitocondrial, aps a ativao e a entrada dos cidos graxos na mitocndria. Pode ser dividida em 3 fases: A ativao do cido graxo; A -oxidao propriamente dita; A respirao celular. 43

a) Ativao Dos cidos Graxos o A ativao dos cidos graxos consiste na entrada destes na matriz mitocondrial, na forma de acil-CoA. O que ? Na presena de ATP, incorporada uma coenzima-A ao cido graxo e o mesmo convertido em acil-CoA. O processo depende: 1. Da ligao do cido graxo com a Coenzima A, formando o Acil-CoA. A reao catalisada pela enzima Acil-CoA Sintetase, localizada na membrana mitocondrial externa: CH3-(CH2)n-COOH + ATP + CoA-SH CH3-(CH2)n-CO-S-CoA (Acil-S-CoA) + AMP + PPi 2. Do transporte do radical acila atravs da Membrana Mitocondrial Interna (MMI), do citosol para a matriz, mediado por um carreador especfico, porque o Acil-S-CoA no consegue atravessar a MMI sozinho. No caso de cidos graxos de cadeia mdia e longa, este carreador a Carnitina. A transferncia do radical acila da CoA para a carnitina catalisada pela enzima Carnitina-AcilTransferase I (localizada na face citoplasmtica da MMI): Acil-S-CoA + Carnitina Acil-Carnitina + CoA-SH 3. Do lado da matriz mitocondrial ocorre a reao inversa, a carnitina doa novamente o radical acila

para a CoA, regenerando o Acil-S-CoA no interior da mitocndria. A reao catalisada pela CarnitinaAcil-Transferase II, localizada na face interna da MMI. O resultado lquido a presena do cido graxo ativado dentro da mitocndria, pronto para ser desdobrado. b) Oxidao do cido Graxo:
o

Consiste na quebra por oxidao do cido graxo sempre em seu carbono , o cido graxo vai perdendo seus carbonos, de 2 em 2, at desaparecer. O processo repetitivo e libera a cada quebra:

1 NADH + H+ 1 FADH2 1 Acetil-CoA

So 4 as enzimas envolvidas em cada etapa de oxidao da via. c) Respirao Celular:

A sntese de ATP acoplada - Oxidao vem:

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Do transporte de eltrons do NADH e do FADH2 formados no processo pela cadeia respiratria; Da oxidao dos radicais acetil dos Acetil-CoAs no ciclo de Krebs. Regulao da - Oxidao: A regulao da via feita pela enzima reguladora Carnitina-Acil-Transferase I, que regula a velocidade de entrada do cido graxo na mitocndria e, desta forma, a velocidade de sua degradao. Esta enzima inibida por MALONIL-CoA, um intermedirio cuja concentrao aumenta na clula quando esta tem carboidrato disponvel, e que funciona como precursor na biossntese de cido graxo. Oxidao de cidos Graxos Insaturados: Se o cido graxo a ser oxidado for insaturado, o processo tem dois passos enzimticos adicionais: A converso do ismero "cis" em "trans". A saturao da dupla ligao pela adio de gua. Uma vez o cido graxo saturado, ele pode seguir com o processo normal de oxidao. Oxidao de cidos Graxos com Nmero mpar de Carbonos: A oxidao de um cido graxo com nmero de carbonos mpar leva formao de um resduo de PROPIONIL-CoA, que atravs de uma seqncia de reaes enzimticas e com gasto de energia (1 ATP hidrolisado para cada propionil-CoA convertido), convertido em SUCCINIL-CoA, que entra no ciclo de Krebs para ser oxidado. 3. METABOLISMO DE AMINOCIDOS E NITROGNIO

3.1. Introduo: A formao de aminocidos depende do fluxo do nitrognio e sua incorporao em esqueletos de carbono. Do conjunto bsico de 20 aminocidos, 11 so sintetizados a partir de intermedirios do ciclo do cido ctrico e de outras vias metablicas, por reaes bem simples. As vias de biossntese de aminocidos so diversas, mas tm uma caracterstica comum: seus esqueletos carbonados vm de intermedirios da gliclise, da via das pentoses ou do ciclo do cido ctrico. Apesar de abundante na atmosfera, as plantas no conseguem absorver nitrognio molecular, elas o obtm pela associao simbitica com bactrias ou pela adubao nitrogenada. As plantas tambm aproveitam o

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nitrognio combinado na matria orgnica, a partir da sua decomposio, por microorganismos presentes no solo. Microorganismos fixadores de nitrognio reduzem N2 a NH3, numa das mais importantes transformaes qumicas ocorridas na biosfera. A nitrogenase dos microorganismos executa com presteza esta reao indispensvel. O NH4+ ento assimilado em aminocidos atravs de glutamato e glutamina, duas molculas essenciais no metabolismo do nitrognio. As principais enzimas que controlam a entrada do nitrognio em aminocidos so a glutamato desidrogenase e a glutamina sintetase. O nitrognio absorvido pelas plantas na forma de NO3- (principal) e NH4+. O suprimento de N no solo limitado, assim, as plantas competem com os microorganismos pelo elemento. 3.2. Nitrognio no ambiente: Existe cerca de 78% de nitrognio na atmosfera, que aparece na forma de NN (N2) e deve ser transformado, ou seja, reduzido. Reaes de fixao do N: processos industriais ou naturais. - fixao industrial: N2 + 3H2 2NH3 500C alta presso Produo: 80x1012 g/ano de fertilizante nitrogenado. - fixao natural: 190x1012 g/ano de N. A mais importante, que contribui com cerca de 90% do nitrognio fixado a fixao biolgica, onde atua a enzima Nitrogenase: N2 NH4+. 3.3. A sntese de aminocidos: acares de reserva respirao esqueletos de carbono energia aminao NO346 NH4+ aminocidos enzimas, protenas produtos da fotossntese

O nitrato absorvido pelas razes e acumulado ou reduzido nas clulas da raiz ou translocado para as folhas, sendo acumulado e reduzido. 3.4. Obteno do nitrognio da matria orgnica do solo: mineralizao Norg bact amonificadoras NH4+ + 3/2 O2 Nitrossomonas NO2- + O2 Nitrobacter Desnitrificao: NO3- ou NO2Bact anaerbicas 3.5. Obteno do nitrognio da associao com procariontes: fixao biolgica do nitrognio Organismos fixadores do N2: So aqueles que apresentam o complexo nitrogenase. N2O, N2 NO3NO2- + H2O + 2H+ nitrificao N-mineral (NH4+)

Fixao simbitica do N2: Bactrias fixadoras: N2 + 8 H+ + 8 e- + 16 ATP 2 NH3 + H2 + 16 ADP + 16 Pi NH3 + H+ NH4+ Nitrogenase: com 2 subunidades proteicas: Fe-protena e Mo-Fe-protena. Precisa eltrons e ATP para fixar o N2. Precisa de proteo ao O2 leghemoglobina. Reao de fixao e infeco pela bactria: Formao dos ndulos (bacteriide): bactria e leghemoglobina. 3.6. Reduo do NO3-: 1a etapa: citoplasma NO3- + NAD(P)H + H+ + 2e- NO2- + NAD(P)+ + H2O 47

 enzima catalisadora a nitrato redutase. dependente de NAD(P)H. localizao celular. induzida por substrato. 2a etapa: cloroplastos (folhas) ou plastdeos (razes) NO2- + 6 Fdred + 8 H+ + 6 e- NH4+ + 6 Fdox + 2 H2O enzima catalisadora a nitrito redutase. 3.7. Assimilao do NH4+ em aminocidos: Principais vias: glutamina sintetase, glutamato desidrogenase e glutamato sintase. TRANSAMINAO: a partir de GLUTAMINA e GLUTAMATO, pela ao de AMINOTRANSFERASES, formam-se os outros aminocidos. REGULAO DA SNTESE DE AA: Disponibilidade de esqueletos de carbono. Inibio pelo produto final. 3.8. Transporte de compostos nitrogenados: Via xilema das razes at as folhas na forma de NO3- e aminocidos. Via floema das folhas at os rgos de consumo na forma de aminocidos.

Figura: Ciclo do Nitrognio

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CAPTULO 8: Referncias Bibliogrficas

CAMPBELL, M K. Bioqumica. 3ed. Porto Alegre: Artmed Editora, 2000. LEHNINGER, A.L. Princpios de Bioqumica. 4ed. So Paulo: Sarvier, 2006. MARZZOCO, A.; TORRES, B.B. Bioqumica Bsica. Rio de Janeiro: Editora Guanabara Koogan, 2007. RIEGEL, R.E. Bioqumica. 4ed. So Leopoldo: Editora Unisinos, 2006. STRYER, L. Bioqumica. 4ed. Rio de Janeiro: Editora Guanabara Koogan, 1995.

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