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HISTRICO DA MICROBIOLOGIA

Microbiologia: HISTRICO
A possibilidade da existncia de entidades vivas invisveis ao olho humano e que seriam a causa das doenas infeciosas remonta Antiguidade. Em 1546, o monge e mdico italiano Girolamo Fracastoro (1483-1553) publica o livro "De contagione et contagionis" no qual especulava que doenas contagiosas eram causadas por "germes vivos" que se eram transmitidos, de alguma forma, de pessoa a pessoa.

"Eu chamo de fomites [do latim, fomes -- material usado para iniciar o fogo] tais coisas como roupas, lenois, etc., que apesar de no serem corrompidos por si prprios, podem entretanto lanar as sementes essenciais do contgio e assim causar a infeco.
Fonte: http://pt.wikipedia.org/wiki/Girolamo_Fracastoro

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Tendo em vista que era evidente a necessidade do contato fsico entre pessoas para a disseminao de determinadas doenas, como a sfilis, que requeria contato sexual para se transmitir, a entidade transmissora das doenas infecciosas permaneceu objeto de meras especulaes at a segunda metade do sculo XIX. A primeira pessoa a relatar a observao de micrbios com um microscpio foi o ingls Robert Hooke em 1665. Utilizando um microscpio rudimentar ele observou estruturas celulares de plantas e de fungos.

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ANTONI VAN LEEUWENHOEK (1632-1723): - dono de armazm, comerciante de tecidos, zelador da prefeitura - Incio da microbiologia - Polia lentes e construa microscpios constitudos de uma nica lente de alta qualidade que usava para observar materiais diversos e analisar a qualidade dos tecidos que comercializava. - Embora de baixa resoluo, as lentes de Leeuwenhoek, que atingiam o aumento de 300 a 500 vezes - observou algas, protozorios, leveduras e bactrias maiores em guas de rios, de poas, infuses de pimenta, saliva, fezes, esperma, .....

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ANTONI VAN LEEUWENHOEK: Pequenos animlculos - Suas observaes, publicadas com desenhos entre 1673 e 1723, no importante meio cientfico da poca - Philosophical Transactions da Royal Society of London. - Em 1683, este peridico publicou um desenho de Leeuwenhoek com a primeira representao de uma bactria. - Surpreendeu o mundo cientfico declarando que os microrganismos que observava eram vivos por apresentarem movimento ativo e intenso.

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ANTONI VAN LEEUWENHOEK: Fez mais de 250 microscpios Observou que o fermento consistia de partculas globulares diminutas, as leveduras. Descreveu pela primeira vez o parasita intestinal Giardia lamblia que isolou de suas prprias fezes em um episdio de diarria. Durante os 150 anos seguintes, a Microbiologia teve um desenvolvimento muito lento em relao s outras cincias biolgicas, limitando-se a simples descries morfolgicas, ao acmulo de observaes e s primeiras tentativas de classificao taxonmica.

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O progresso da Microbiologia ficou vinculado ao desenvolvimento de instrumentos e tcnicas pertinentes ao seu estudo, tais como microscpios com maior poder de resoluo e tcnicas de cultivo e colorao de estruturas celulares. No sculo XVIII, a Europa enfrentava uma grande pandemia de varola que matava at 40% dos doentes e deixando nos sobreviventes marcas indelveis por toda a vida.

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Na China, desde a Antigidade, era reconhecido o fato de que pessoas que se recuperavam de varola tornavam-se imunes a novas infeces. Tendo observado o fato, algum, historicamente no identificado, teve a idia de coletar material de crostas secas de leses de varola e inocul-lo em uma pessoa sadia afim de imuniz-la.

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Aparentemente, a tcnica foi, pelo menos em certa extenso, bem sucedida e repetida por outros at que atingiu a ndia e, a partir da, a Europa, no sculo XVII, onde se tornou prtica comum. O problema era que as crostas retiradas dos doentes continham o vrus virulento capaz de produzir a forma clnica da doena. Assim, enquanto uma pessoa inoculada com material de uma crosta desenvolvia um caso brando e se tornava imune varola, outras desenvolviam a forma clnica grave e eventualmente morriam. Por outro lado, aqueles que apenas desenvolviam a forma branda da doena podiam disseminar o vrus, iniciando uma epidemia local.

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Edward Jenner (1749-1823), foi informado por uma ordenhadora de vacas que elas no contraam varola por usualmente contrarem a varola bovina, uma doena crnica branda que ocorria na forma de leses na pele das mos. Mais tarde, aps ter-se tornado um mdico rural descobriu que os homens do campo aconselhavam o casamento com mulheres ordenhadoras de vacas para quem quisesse evitar ter uma esposa que viesse a contrair a varola.

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Por volta do ano de 1796 ele, convencido de que o fato era verdadeiro, inoculou um menino de oito anos com material proveniente de leses de varola bovina e oito semanas mais tarde inoculou o mesmo menino com pus de uma leso de varola humana. O menino no manifestou nenhum sintoma da varola humana e Jenner repetiu o experimento.

Fonte: http://www.nlm.nih.gov/exhibition/smallpox/sp_vaccination.html

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O caso ficou famoso e outros comearam a testar a nova tcnica. Pelo ano de 1803, a tcnica de Jenner j estava estabelecida como procedimento mdico na Inglaterra.

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Nos Estados Unidos, Benjamin Franklin (1706 1790) encorajou os mdicos americanos a adotar o novo procedimento. O sucesso da tcnica de imunizao desenvolvida por Jenner livrou todo o mundo da terrveis pandemias de varola e funcionou como modelo para o posterior desenvolvimento das vacinas modernas. A Microbiologia como Cincia comea a ter um verdadeiro avano a partir de meados do sculo XIX, com o desenvolvimento de microscpios de alta qualidade juntamente com o aperfeioamento de tcnicas de esterilizao, cultivo de microrganismos e tcnicas citolgicas.

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O qumico francs Louis Pasteur (1822-1895) e o mdico alemo Robert Koch (1834-1910) desenvolveram estudos que conduziram ao estabelecimento das bases da Microbiologia como cincia experimental estruturada e especializada. A Microbiologia deixa de ser uma cincia meramente descritiva para centrar-se no estudo da complexidade estrutural, fisiolgica, gentica e ecolgica dos microrganismos, bem como das inmeras atividades por eles desempenhadas.

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Desdobramento da Microbiologia em disciplinas especializadas como a Bacteriologia, a Micologia, a Parasitologia, a Virologia e a Imunologia. Em 1857, Pasteur, a pedido de Napoleo III, descobriu a existncia de microrganismos que contaminavam e deterioravam o vinho destinado s tripulaes dos navios da Marinha francesa, tornando-o imprprio para consumo

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Aquecimento do vinho at uma temperatura que no afetasse seu sabor e que, ao mesmo tempo, matasse os microrganismos contaminantes PASTEURIZAO. Pasteur tambm descobriu que as leveduras presentes no vinho eram as responsveis pela produo do contedo alcolico da bebida. Pasteur foi o fundador da imunologia moderna ao verificar que galinhas tornavamse imunes a uma doena bacteriana se inoculadas com a forma no virulenta de uma bactria patognica.

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Ao investigar a clera aviria, ele inoculou galinhas com uma cultura velha do patgeno. Vendo que as aves no morreram ele deduziu que as bactrias da cultura velha no eram mais patognicas, talvez porque no fossem mais viveis. Repetindo o experimento, inoculou as mesmas galinhas com doses letais de uma cultura fresca do patgeno e, novamente, as galinhas no morreram. Pasteur deduziu que as culturas bacterianas velhas tinham imunizado as galinhas e concluiu que bactrias mantidas sob condies adversas podem perder sua capacidade de causar doena mas retm a capacidade de imunizar um hospedeiro. Partindo desse princpio, Pasteur comeou a produzir vacinas contra doenas tais como o carbnculo causado pela bactria Bacillus anthracis e a raiva causada pelo vrus da raiva.

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Vacinas modernas so desenvolvidas com base no mesmo princpio geral, descoberto por Pasteur. Com o advento da biologia molecular novos metodologias para produo de vacinas e imunizao esto sendo desenvolvidos. No final da dcada de 1870, Koch, sendo um mdico rural, interessou-se pelo carbnculo, uma doena comum em fazendeiros e em seus animais. Analisando sangue de vtimas do carbnculo ao microscpio, Koch observou a presena de uma bactria de grandes dimenses. Ele sups que este poderia ser o agente causador da doena. Em um laboratrio improvisado e desenvolvendo tcnicas microbiolgicas medida em que procedia a seus estudos, Koch conseguiu isolar a bactria. Animais sadios inoculados com a bactria purificada apresentavam os sintomas clssicos do carbnculo.

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A partir do sangue destes animais, Koch re-isolou mesma bactria. Ele repetiu o experimento, sempre re-isolando a bactria dos animais experimentalmente infectados at que tivesse certeza que tinha encontrado o agente da doena. Koch tornou-se famoso e conseguiu seu prprio instituto de pesquisas. Os cientistas do grupo de Koch e os do grupo de Pasteur, desenvolveram as tcnicas bsicas de microbiologia, ainda hoje em uso, tais como: tcnicas de esterilizao de material e meios de cultura utilizao de culturas microbianas puras o uso de placas de Petri, agulhas de inoculao, o uso de gar para a gelificao de meios de cultura, tcnicas de colorao de bactrias

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Koch tambm descobriu os agentes etiolgicos da clera e da tuberculose, as bactrias Vibrio cholerae e Mycobacterium tuberculosis (bacilo de Koch), respectivamente.

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A teoria do Germe (Koch + Pasteur) Em 1877, Koch formulou um conjunto de quatro postulados os quais afirmava deveriam ser adotados para que se aceitasse uma relao entre um microrganismo em particular e uma doena Postulados de Koch: a bactria deve ser encontrada em todas as pessoas com a doena; a bactria ou seus produtos devem ser encontrados nas partes do corpo afetados pela doena. a bactria deve ser isolada de leses de uma pessoa infectada e mantida em culturas puras. a cultura pura quando inoculada em voluntrio humano susceptvel ou animal experimental deve produzir os sintomas da doena. a mesma bactria deve ser re-isolada em cultura pura dos indivduos intencionalmente infectados.

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Postulados primeiras abordagens que forneceram bases cientficas para o estudo das doenas infecciosas. Entretanto, apresentam limitaes: 1. Os postulados de Koch implicam que a virulncia uma caracterstica exclusiva das bactrias e independente do hospedeiro. Na realidade, a susceptibilidade do hospedeiro to ou mais importante que as caractersticas de virulncia da bactria. 2. O segundo postulado enfatiza a obteno de culturas puras do patgeno. H algumas doenas cujo agente causativo no pode ser cultivado em meios de laboratrio ou cujo meio adequando no , ainda, disponvel.

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Postulados primeiras abordagens que forneceram bases cientficas para o estudo das doenas infecciosas. Entretanto, apresentam limitaes: 3. Os segundo e quarto postulados consideram que todos os membros de uma espcie bacteriana so igualmente virulentos e que somente uma nica espcie causa uma determinada doena. 4. O terceiro postulado requer que a bactria seja reinoculada em um voluntrio humano ou em um animal experimental e que a reinoculao cause os sintomas da doena.

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Robert Koch, 1870s: Proof that microorganisms can cause disease -germ theory of disease

(Madigan et al., Fig. 1.12)

Anthrax, caused by Bacillus anthracis Organism present in the blood of all diseased animals - cause or result of the disease?

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Pure culture

(Madigan et al., Fig. 1.12)

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(Madigan et al., Fig. 1.12)

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(Madigan et al., Fig. 1.12)

Conclusion - specific organisms cause specific disease Kochs postulates can be extended beyond disease-causing organisms

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Em 1881, o mdico alemo Walther Hesse juntou-se ao grupo de Koch para estudar questes relacionadas sade pblica e ao metabolismo bacteriano tendo como assistente sua esposa Fanny Angelina Eilshemius Hesse. A gelatina ento utilizada para gelificar meios de cultura ou era consumida pelos prprios microrganismos ou derretia-se em dias quentes, prejudicando os experimentos que requeriam meios de cultura slidos. Angelina contou a seu marido que usava uma gelatina chamada de gargar para conservar seus doces slidos em dias quentes. O gar-gar tem sido usado como agente gelificante na culinria asitica h sculos. Hesse passou a utilizar com sucesso o gar-gar para fazer meios de cultura slidos e essa prtica permanece nos dias de hoje.

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O gar-gar, atualmente denominado simplesmente de gar, um polissacardeo complexo e indigervel pelo menos pela grande maioria dos microrganismos, o que tornou universal seu uso em microbiologia para o crescimento de microrganismos em meio slido. Atualmente, o gar empregado em microbiologia produzido pela indstria especializada na manufatura de meios de cultura e disponvel em vrios graus de pureza. No preparo de meios de cultura slido, o gar , via de regra, adicionado na concentrao de 15 gramas por litro de meio lquido. As caractersticas gerais do gar so: - no-txico (para a maioria dos microrganismos e humanos), - derrete somente a 100C, mas solidifica-se a cerca de 45C (dependendo da concentrao), - mantm-se estvel mesmo sob temperaturas de esterilizao (120C) e fisiologicamente inerte (muito poucas bactrias expressam enzimas capazes de digeri-lo).

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