Universidade Federal do Esprito Santo Centro de Cincias Exatas Departamento de Qumica

Comparao de tcnicas analticas para determinao de elementos trao em solues de amostras ambientais

Caio de Sousa Ceotto

Monografia apresentada ao Curso de Qumica da Universidade Federal do Esprito Santo, como requisito parcial para a obteno do ttulo de Bacharel em Qumica.

Vitria-ES 2009/2

Universidade Federal do Esprito Santo Centro de Cincias Exatas Departamento de Qumica

Comparao de tcnicas analticas para determinao de elementos trao em solues de amostras ambientais

Caio de Sousa Ceotto

Monografia de Concluso de curso

Orientador: Prof. Dr. Honrio Coutinho de Jesus

Vitria-ES 2009/2

Universidade Federal do Esprito Santo Centro de Cincias Exatas Departamento de Qumica

Caio de Sousa Ceotto

Comparao de tcnicas analticas para determinao de elementos trao em solues de amostras ambientais

Aprovada em _____ de ___________ de 2009

Comisso Avaliadora
_____________________________________________ Prof. Dr. Honrio Coutinho de Jesus Orientador -Depto de Qumica CCE - UFES

_____________________________________________ Prof. Dr. Maria de Ftima Fontes Lelis Depto de Qumica CCE - UFES

_____________________________________________ Prof. Dr. Eloi Alves da Silva Filho Depto de Qumica CCE - UFES

Vitria-ES 2009/2

AGRADECIMENTOS toda minha famlia; em especial minha me Mnica. Aos meus amigos e pessoas queridas. Ao professor Honrio Coutinho de Jesus, pela oportunidade de crescimento acadmico, junto a toda equipe do Laboratrio de Qumica Analtica e os demais professores do curso. FAPES, ARACRUZ e UFES pelo apoio financeiro e Antnio Carlos Oliveira pelo auxlio nas anlises por ICP-OES. todos que de alguma forma contriburam para este trabalho.

LISTA DE ABREVIAES E SIGLAS AAS - Atomic Absorption Spectrometry - Espectrometria de Absoro Atmica; DQUI-UFES - Departamento de Qumica UFES; F-AAS - Flame Atomic Absorption Spectrometry - Espectrometria de absoro atmica com chama; FAPES - Fundao de Apoio Cincia e Tecnologia do Esprito Santo; GF-AAS - Graphite Furnace Atomic Absorption Spectrometry - Espectrometria de absoro atmica com forno de grafite; HG-AAS - Hydride Generation Atomic Absorption Spectrometry - Espectrometria de absoro atmica com gerao de hidretos; ICP-OES - Inductively Coupled Plasma Atomic Espectrometria de emisso com plasma indutivo; Emission Spectrometry -

ICP-MS - Inductively Coupled Plasma Mass Spectrometry Espectrometria de massa acoplada a plasma indutivo; LABPETRO - Laboratrio de Pesquisa e Desenvolvimento de Metodologias para Anlises de Petrleos; LACAR - Laboratrio de Caracterizao Ambiental de Resduos LD - Limite de Deteco; LQ - Limite de Quantificao; LQA - Laboratrio de Qumica Analtica; NRCC - National Research Council Canad Conselho nacional de pesquisa Canad; PPB - Partes por bilho; PPM - Parte por milho; UFES - Universidade Federal do Esprito Santo; USEPA - United States Environmental Protection Agency Agncia Americana de Proteo Ambiental.

SUMRIO 1. 2. INTRODUO ...................................................................................................10 REVISO DA LITERATURA .............................................................................11 2.1. Metais pesados e o meio ambiente ..............................................................11 2.2. Tcnicas de quantificao de metais............................................................12 2.2.1. Espectrometria de Absoro Atmica: .................................................14 2.2.2. Espectrometria de Emisso Atmica:...................................................15 OBJETIVOS.......................................................................................................17 3.1. Objetivo Geral...............................................................................................17 3.2. Objetivos especficos....................................................................................17 4. 5. CARACTERIZAO DA REA DE ESTUDO ..................................................18 MATERIAIS E MTODOS .................................................................................20 5.1. Procedimentos de amostragem....................................................................20 5.2. Processamento das amostras ......................................................................22 5.3. Controle de impurezas..................................................................................22 5.4. Tcnicas e aparelhagem para anlise de metais .........................................23 5.4.1. Espectrometria de AA com Forno de Grafite........................................23 5.4.2. Espectrometria de AA com Chama ......................................................24 5.4.3. Espectrometria de EA com Plasma indutivo ........................................24 RESULTADOS E DISCUSSO .........................................................................25 6.1. Espectrometria de AA com forno de grafite ..................................................25 6.2. Espectrometria de EA com plasma indutivamente acoplado........................27 6.3. Arsnio .........................................................................................................29 6.4. Cdmio .........................................................................................................29 6.5. Cobre............................................................................................................30 6.6. Chumbo ........................................................................................................32 6.7. Zinco.............................................................................................................32 7. 8. CONCLUSES..................................................................................................34 REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS..................................................................35

3.

6.

ANEXO 1...................................................................................................................37 ANEXO 2...................................................................................................................40 ANEXO 3...................................................................................................................42

NDICE DE FIGURAS Figura 1: Capacidade analtica de alguns mtodos .................................................13 Figura 2: Mapa da bacia de drenagem do sistema estuariano dos rios Piraqu-au e Piraqu-mirim. Imagem modificada de .....................................................................19 Figura 3: Foto do sistema estuarino dos Rios Piraqu-Ac e Piraqu-mirim localizado no municpio de Aracruz...........................................................................19 Figura 4: Localizao dos pontos amostrais no sistema estuarino dos Rios PiraquA e Piraqu-Mirim. Figura modificada de ..............................................................20 Figura 5: Coleta de ostras. .......................................................................................21 Figura 6: Coleta de sedimentos................................................................................21 Figura 7:Picos de emisso da curva de calibrao em ICP-OES, concentrao dos picos de 2,5 ppm. ......................................................................................................27 Figura 8:Picos de emisso da amostra de ostra do ponto SCa por ICP-OES..........27 Figura 9: Curva analtica para cobre em GF-AAS (faixa tima de trabalho 50 ppb).30 Figura 10: Curva analtica para cobre pelo mtodo das adies padro por GF-AAS. ..................................................................................................................................30 Figura 11: Pico de emisso por ICP-OES para sedimento do ponto PM3a. ............31 Figura 12: Programa de forno para chumbo no aparelho de GF-AAS .....................32 Figura 13: Picos de absoro em diferentes temperaturas de pirlise e atomizao em GF-AAS. ..............................................................................................................32

NDICE DE TABELAS Tabela 1: Condies instrumentais timas para o espectrmetro de absoro e emisso (Zn) atmica................................................................................................25 Tabela 2: Resultados da certificao analtica para materiais de referncia por GFAAS. ..........................................................................................................................26 Tabela 3: Condies instrumentais analticas para o aparelho de ICP-OES............27 Tabela 4: Limites de deteco obtidos para o aparelho de ICP-OES. ......................28 Tabela 5: Resultados de certificao analtica para matrias de referncia por ICPOES...........................................................................................................................28 Tabela 6: Concentrao de Cobre nas amostras de ostras (O) e sedimentos (S) para as diferentes tcnicas analticas utilizadas................................................................31 Tabela 7:Concentrao de Zinco nas amostras de ostras (O) e sedimentos (S) para as diferentes tcnicas analticas utilizadas................................................................33

RESUMO Uma das grandes preocupaes ecolgicas atuais refere-se ao impacto ambiental causado pela liberao antrpica de elementos trao, muitos deles de relevante toxicidade ambiental, nos diversos ambientes naturais e, de maior importncia, naqueles de maior interao com populaes humanas. A e Piraqu-Mirim no municpio de Aracruz-ES. Para avaliao de metais nos sedimentos utilizou-se o mtodo de abertura de amostra adaptado USEPA 3050B (Agncia Americana de Proteo Ambiental), para extrao dos metais nas ostras utilizou-se o mtodo adaptado USEPA 3051. As solues obtidas foram analisadas em relao aos elementos trao: arsnio (As), cdmio (Cd), cobre (Cu), chumbo (Pb) e zinco (Zn) pelas tcnicas de espectrometria de absoro atmica com chama (F-AAS) e forno de grafite (GF-AAS). Para efeito de comparao interlaboratorial, as solues analticas conservadas em meio cido foram reanalisadas pela tcnica de espectrometria de emisso atmica com plasma indutivo (ICP-OES). As anlises das ostras foram certificadas com os materiais de referncia internacionais NIST 2976 e DORM-2 e MESS-3 para sedimentos. Neste trabalho obteve-se em geral boa certificao para os materiais de referncia estudados pela tcnica de GF-AAS e F-AAS e certificao de cobre e zinco em sedimentos pela tcnica de ICP-OES. A comparao direta de resultados analticos pelas tcnicas utilizadas foi possvel somente para cobre e zinco, visto que os demais elementos apresentavam-se em baixas concentraes e assim, abaixo do limite de deteco do aparelho de ICPOES. Em geral os valores obtidos pela tcnica de ICP-OES foram menores do que os obtidos por GF-AAS e F-AAS. Essas diferenas foram notadas devido s baixas concentraes dos elementos nas amostras e complexidade das matrizes estudadas. Neste trabalho, foram analisadas amostras de ostras e sedimentos coletados no esturio dos rios Piraqu-

10 1. INTRODUO O presente trabalho de monografia se prope discutir detalhadamente os dados levantados em projetos de pesquisa j realizados, com a participao na condio de aluno de iniciao cientfica, do ponto de vista acadmico, com reavaliao de alguns dados analticos. A fonte de dados e conhecimento acadmico esto inseridos nos relatrios finais dos projetos de pesquisa Avaliao da poluio ambiental dos rios Piraqu-Au e Piraqu-Mirim (Santa Cruz-ES) atravs da anlise de guas, biomonitores e sedimentos (Projeto Aracruz, 2009) e Estudo comparativo da qualidade de guas, biomonitores e sedimentos de trs ecossistemas aquticos do estado do ES (Projeto FAPES, 2008). Nos trabalhos citados, as amostras ambientais de ostras e sedimentos foram avaliadas em relao aos elementos trao: arsnio (As), cdmio (Cd), cobre (Cu), chumbo (Pb) e zinco (Zn) utilizando-se as tcnicas de absoro atmica com forno de grafite e com chama. Posteriormente as solues analticas, preservadas em meio cido, foram re-analisadas pela tcnica de espectrometria de emisso com plasma indutivo (ICP-OES) para efeito de intercomparao laboratorial e confirmao dos dados anteriormente obtidos. A importncia deste trabalho consiste na contribuio para atestar a qualidade qumica dos compartimentos biticos do esturio dos rios Piraqu-Au e PiraquMirim, favorecendo a sustentabilidade das comunidades locais, principalmente a de Santa Cruz e indgenas j que uma das grandes preocupaes da sociedade em geral a liberao antrpica de elementos trao no meio ambiente que aumenta a cada dia e deve ento ser mais estudada.

11 2. REVISO DA LITERATURA Uma das grandes preocupaes ecolgicas atuais refere-se ao impacto ambiental causado pela liberao antrpica de elementos trao, muito deles de relevante toxicidade ambiental, nos diversos ambientes naturais e, de maior importncia, naqueles de maior interao com populaes humanas. Tanto guas, materiais particulados, sedimentos como organismos aquticos tm sido utilizados nesta avaliao, sendo que os trs ltimos compartimentos biticos so preferveis devido s facilidades de coleta, estocagem e tratamento das amostras (minimizao de contaminao ou perdas), e s maiores concentraes encontradas, dispensando tarefas de pr-concentrao e facilitando os procedimentos de anlise (PHILIPS, 1977). 2.1. Metais pesados e o meio ambiente Os metais pesados so poluentes conservativos, isto , poluentes que dificilmente sofrem degradao por ataque bacteriano. Esses contaminantes podem ter origem por meio de processos naturais tais como vulcanismo terrestre e depsitos naturais, ou antropognicos, efluentes domsticos e industriais, emisses atmosfricas e processos industriais (GREGORI et al., 1996; SALOMONS et al., 1984). No entanto, alguns metais, como por exemplo, Fe, Cu e Zn, possuem importncia na fisiologia de seres vivos atuando como constituintes de pigmentos respiratrios, formao de metaloprotenas, ativadores de complexos enzimticos, etc (PHILLIPS 1991). Ao contrrio, existem outros que no so requeridos em nenhuma atividade metablica e por isso so txicos para as clulas mesmo em pequenas concentraes, como por exemplo, Hg, Pb, Cd (CLARCK, 1997 e BOWEN, 1979).

No ambiente aqutico, metais trao so distribudos entre a fase aquosa da coluna de gua, gua intersticial dos sedimentos, fase slida suspensa e sedimentada, organismos aquticos e plantas. Devido ao fato desses metais poderem ser adsorvidos ao sedimento ou acumulados nos organismos bentnicos em nveis txicos (ALLEN et al., 1993; SILVRIO, 2003), a sua biodisponibilidade e a subseqente toxicidade tm se tornado um dos mais freqentes tpicos de estudos associados aos substratos lamosos dessas zonas.

12 A quantificao de metais em ostras e outros bivalves alm de ser importante por se tratar de alimentos utilizados pelo homem, tambm uma ferramenta para a avaliao da qualidade ambiental. Esses organismos so timos biomonitores, uma vez que apresentam uma ampla distribuio nos ambientes costeiros, alm de serem abundantes, de fcil coleta, so ssseis podendo indicar a poluio de uma determinada rea (COIMBRA, 2003; PHILLIPS, 1991).

As substncias que adentram o corpo dgua sofrem transformaes qumicas (ex. mudanas de potencial redox, reaes com outros compostos, reaes microbianas) e fsicas (ex. soro e adsoro). Quando a corrente de gua diminui de velocidade, o material em suspenso gradualmente depositado (FRSTNER, 1981), sendo os sedimentos o destino final dessas substncias (CHAPMAN et al., 1996). 2.2. Tcnicas de quantificao de metais Os mtodos analticos utilizados na caracterizao qumica de amostras ambientais so variados. Os mtodos clssicos, como a gravimetria, a volumetria e outros, exigem tempos e recursos humanos intensivos, e os seus limites de deteco no respondem s exigncias impostas na atualidade. Assim, estes mtodos foram sendo substitudos por mtodos instrumentais como a espectrometria de absoro atmica com chama (F-AAS), com forno de grafite (GF-AAS) e com gerao de hidretos (GF-AAS), a espectrometria de emisso com plasma indutivo (ICP-OES), a espectrometria de massa acoplada a plasma indutivo (ICP-MS), entre outros, Figura 1. Os mtodos instrumentais, apesar de exigirem um forte investimento em equipamento de custo elevado, o qual compensado pela poupana em recursos humanos (devido automatizao) e reagentes, permitem alargar a escala de concentrao dos elementos at nveis da ordem de grandeza dos ppm, ppb ou mesmo ppt (RIBEIRO, 2006).

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Figura 1: Capacidade analtica de alguns mtodos (RIBEIRO, 2006)

A escolha do mtodo analtico depende de vrios fatores a serem determinados antes do comeo das anlises, entre eles: qual a exatido e preciso necessrias, qual a quantidade de amostra disponvel, qual a faixa de concentrao do analito, quais so as propriedades fsicas e qumicas das amostras, quais componentes iro causar interferncias e qual a aparelhagem e disponibilidade financeira para realizao de tais anlises, sendo o ltimo fator muitas vezes determinante. Para toda seqncia de abertura de amostras realizadas, devem ser igualmente processados brancos de preparao (soluo isenta de amostra que sofre todos os processos envolvidos no procedimento de preparo e possui todos os reagentes que so utilizados) para que seja possvel detectar uma contaminao dos reagentes e no procedimento de abertura. (SKOOG et al., 2006). As tcnicas de espectroscopia atmica utilizam a radiao eletromagntica que absorvida ou emitida pelos tomos da amostra, assim possvel obter informaes das amostras em estudo, quer a nvel qualitativo, quer a nvel quantitativo.

14 A informao qualitativa fornecida pelo comprimento de onda no qual a radiao absorvida ou emitida e a informao quantitativa fornecida pela quantidade de radiao eletromagntica que absorvida ou emitida (BOSS & FREDEEN, 1989; CSUROS & CSUROS, 2000). 2.2.1. Espectrometria de Absoro Atmica: A radiao de comprimento de onda caracterstico do elemento em estudo emitida atravs do vapor atmico. Os tomos do elemento absorvem alguma parte desta radiao. A quantidade de radiao absorvida por estes tomos medida e usada para determinar a concentrao do elemento na amostra em estudo (BOSS & FREDEEN, 1989; CSUROS & CSUROS, 2000). O desenvolvimento de um mtodo de anlise por absoro atmica com forno de grafite inicia-se, habitualmente, pelo estudo do programa de forno. Este consiste no tratamento da amostra a diferentes temperaturas de secagem, calcinao ou pirlise, atomizao e limpeza do tubo devendo ser estudado para cada metal nas diferentes matrizes. Utiliza-se modificador qumico para estabilizar o analito para altas temperaturas e tornar possvel a remoo dos interferentes antes da fase de atomizao do analito. A escola do modificador deve ser feita de maneira a atender a maior parte dos requisitos exigidos: (i) ser efetivo para um grande nmero de analitos, (ii) exibir ou causar baixa absoro de fundo, (iii) no reduzir o tempo de vida dos tubos de grafite, (iv) ter elevada pureza, (v) ter baixa toxicidade, (vi) ter robustez de ao, (vii) ser eficaz no programa de temperatura escolhido (SKOOG et al., 2006) Em seguida, enunciam-se algumas vantagens e alguns dos problemas mais comuns associados ao mtodo de GF- AAS (RIDDLE, 1993; TYLER, 1995) Vantagens: Permite a determinao da maioria dos elementos, ao nvel de g/L, diretamente sobre as amostras; Limites de deteco muito baixos; Necessita de volumes mnimos de amostra.

15 Desvantagens: Interferncias de matriz; Interferncias de background; Faixa de concentrao de trabalho muito restrita; Altamente vulnervel a efeitos de contaminao. 2.2.2. Espectrometria de Emisso Atmica: A amostra submetida a altas temperaturas, causando no s a dissociao dos tomos, mas tambm, uma quantidade de colises, que provocam a excitao (ou ionizao) dos tomos da amostra. Uma vez que os tomos se encontram em estados de energia superiores (estados excitados), a tendncia voltar a estados de mais baixa energia, emitindo energia. A intensidade da radiao, emitida num comprimento de onda especfico, medida e usada para determinar a concentrao do elemento em estudo (BOSS & FREDEEN, 1989; CSUROS & CSUROS, 2000).

Na tcnica de emisso por chama, utilizam-se gases comuns como oxignio e acetileno gerando temperaturas de atomizao entre 1.700-3.150 No processo C. por plasma acoplado indutivamente (ICP-OES) estas temperaturas esto entre 6.000-8.000 sendo geradas a partir do gs argnio. (SKOOG et al, 2006). C O ICP-OES dispe de um sistema de deteco de radiao que permite determinar, numa s amostra e rapidamente, um elevado nmero de elementos. Os limites de deteco que se conseguem atingir so da ordem de grandeza um pouco inferiores aos conseguidos por F- AAS, mas mais elevados do que os alcanados com GFAAS (TYLER 1995). Podemos afirmar que o ICP-OES tem vantagens reais sobre a as demais tcnicas espectroscopia de absoro atmica (AAS) quando existe um processamento de grande nmero de amostras e determinao de vrios elementos em cada amostra. Alm disso, o ICP-OES tem ainda sobre a F-AAS a vantagem de permitir a obteno de melhores limites de deteco para elementos refractrios (por exemplo: alumnio, titnio,zircnio). Em seguida, enunciam-se algumas vantagens e alguns dos problemas mais comuns associados ao mtodo de ICP-OES (RIDDLE, 1993; TYLER, 1995)

16 Vantagens: Existncia de vrias linhas espectrais intensas para quase todos os elementos; Baixos limites de deteco devido a razes pico/fundo geralmente favorveis; Interferncias de matriz geralmente fracas para solues diludas; Relaes lineares para uma ampla gama de concentraes, sendo possvel determinar elementos principais e vestigiais a partir da mesma soluo de amostra; Boa repetibilidade para todos os elementos (0,5-5 %); Permite anlises rpidas multi-elementares. Desvantagens: Interferncias espectrais; Interferncias fsicas causadas por variaes de viscosidade e de tenso superficial; Interferncias qumicas causadas por formao de compostos moleculares, efeitos de ionizao e efeitos termoqumicos associados vaporizao e atomizao da amostra no plasma; Limites de deteco demasiado altos para algumas aplicaes; No o mtodo adequado para anlise de solues com mineralizaes superiores a 1,5 g/L, com concentraes de cido iguais ou superiores a 10 %, ou em meio orgnico.

17 3. OBJETIVOS 3.1. Objetivo Geral O objetivo deste trabalho discutir detalhadamente os resultados levantados no projeto de pesquisa (ARACRUZ 2009), no qual o autor deste trabalho foi bolsista de iniciao cientfica, do ponto de vista acadmico, detalhando as tcnicas analticas utilizadas, principalmente GF-AAS.

3.2. Objetivos especficos Levantar dados inditos pela tcnica de ICP-OES nas amostras ambientais estudadas com o intuito de complementar o projeto de pesquisa (ARACRUZ 2009.) Comparar os resultados das sub-amostras da primeira campanha de sedimento e terceira campanha de ostras bem como materiais de referncias, utilizando tcnicas de emisso atmica com plasma indutivamente acoplado e absoro atmica com forno de grafite e com chama.

18 4. CARACTERIZAO DA REA DE ESTUDO O Estado do Esprito Santo apresenta um clima quente e mido, de caracterstica seca nos perodos de abril a setembro (outono-inverno) e com maior precipitao pluviomtrica durante o perodo de outono a maro (primavera-vero). O clima pode ser classificado como pseudo-equatorial. Apresenta uma temperatura mdia anual de 22 variando geralmente entre a mxima de 28-30 e a mnima em torno de C, C 15 (BARROSO, 2004). C Com uma rea territorial de 1.427 Km, o municpio de Aracruz localiza-se na poro norte do litoral do ES, a uma latitude S 19 49 06 e longitude W 40 16' 37, com uma rea equivalente a 3,15% do territrio estadual. Limita-se ao norte com o municpio de Linhares; ao sul com Fundo; a leste com o Oceano Atlntico e a oeste com Ibirau e Joo Neiva, distando de Vitria cerca de 80 km (CALIMAN et al, 1997) Figura 2. Em Santa Cruz, o encontro das guas do Rio Piraqu-A e Piraqu-Mirim com as guas do mar, formam um grande complexo estuarino, margeado por uma extensa rea de manguezal com 12 km2 (BARROSO, 2004), de rara beleza e com uma rica biodiversidade Figura 3. O rio Piraqu-A (brao norte) a principal fonte de abastecimento de gua para a regio e dele dependem cerca de 140.000 pessoas. Este rio apresenta maior variao dos parmetros fsico-qumicos devido ao maior aporte continental, e possui uma rea de drenagem de 379 km2 (BARROSO, 2004), e pode estar mais contaminado devido a sua maior rea de influncia, recebendo efluentes domsticos e industriais a partir de seus tributrios montante (municpio de Joo Neiva e de Aracruz) e a juzante (sada da ETE de Coqueiral). J o rio Piraqu-Mirim (brao sul) possui uma pequena bacia de drenagem (69 km2) com caractersticas fsicoqumicas mais estveis, gerando padres pouco estratificados (BARROSO, 2004).

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Figura 2: Mapa da bacia de drenagem do sistema estuarino dos rios Piraqu-Au e Piraqu-Mirim. Imagem modificada de (BARROSO, 2004).

Figura 3: Foto do sistema estuarino dos Rios Piraqu-Ac e Piraqu-Mirim localizado no municpio de Aracruz

20 5. MATERIAIS E MTODOS 5.1. Procedimentos de amostragem Foram definidos 10 pontos de amostragem no sistema estuarino, conforme Figura 4, para avaliao espacial dos dados. O ponto SC refere-se a margem oposta sede de Santa Cruz, j sob forte influncia marinha e possuindo um resqucio de manguezal. O ponto PA1 est margem da reserva indgena Caeiras Velha, os pontos X e Y no fazem parte deste estudo. Foram realizadas trs campanhas de amostragem em 2008 (iniciadas em 25/03/08, 18/06/08 e 14/10/08) para avaliao temporal dos dados.

Figura 4: Localizao dos pontos amostrais no sistema estuarino dos Rios Piraqu-A e PiraquMirim. Figura modificada de (BARROSO, 2004).

O translado at os locais de coleta foi realizado por barco de alumnio. Todas as amostras coletadas foram conservadas em gelo at anlise no laboratrio de Qumica Analtica da UFES (LQA) para anlise de metais e posteriormente armazenadas em geladeira aps abertura por via mida.

21 Para cada ponto de amostragem, no projeto de pesquisa (ARACRUZ 2009), foram coletados, na mar baixa, duas sub-amostras de ostras (rplica a e b), cada uma contendo no mnimo 10 espcimes de ostras provenientes de uma rea de cerca de 20 m2. As ostras foram lavadas com gua do prprio local e acondicionados em sacos plsticos previamente descontaminados Figura 5.

Figura 5: Coleta de ostras.

Tambm foram coletadas, em sacos plsticos, duas sub-amostras de sedimento superficial (rplica a e b) numa profundidade de 20 cm, cada uma contendo pores de sedimento coletadas numa rea aproximadamente 20 m2 Figura 6.

Figura 6: Coleta de sedimentos.

A coleta de duas sub-amostras de ostras e sedimentos para cada ponto de amostragem (10 pontos, 20 amostras de laboratrio) teve como objetivo avaliar uma possvel variabilidade ambiental em cada ponto de amostragem (variabilidade dentro), para diferenciar daquela entre os pontos de amostragem (variabilidade entre) esta detalhada no projeto Aracruz 2009.

22 5.2. Processamento das amostras No laboratrio as ostras foram lavadas com gua destilada e abertas com uma faca de ao inox. Aps a remoo do excesso de gua dos tecidos dos animais, estes foram homogeneizados atravs de um processador de alimentos. Para extrao dos metais nas ostras utilizou-se o mtodo adaptado USEPA 3051 (USEPA, 2007b), que consiste na abertura de 3 g da amostra composta das ostras com 10 mL de HNO3 supra-puro (subdestilado em aparelho de quartzo) em bomba fechada de teflon, aquecida a 110 C por 2 h em bloco digestor. A soluo final foi diluda e filtrada em papel de filtro quantitativo para balo volumtrico de 50,0 mL, completada com gua destilada por osmose reversa. A amostra bruta de sedimento foi peneirada em tela de nylon com malha de 2 mm, para retirada de resduos maiores e razes. A frao < 2 mm foi seca em estufa a 60C por 48 horas, com posterior homogeneizao e armazenagem em dessecador. Para avaliao dos metais nos sedimentos utilizou-se o mtodo adaptado USEPA 3050B (USEPA, 2007a), que consiste na abertura de 0,5 g da amostra em chapa eltrica a temperatura mdia de 180 C, com 10 mL de HNO3 supra-puro por 45 minutos, com a posterior adio de 3 mL de HCl suprapuro por 15 minutos e 3 mL de H2O2 por 5 minutos. As solues finais foram diludas e filtradas em papel de filtro quantitativo para bales volumtricos de 50 mL, e completados com gua de osmose reversa.

5.3. Controle de impurezas No sentido de minimizar possveis contaminaes para as amostras processadas, todos os materiais utilizados foram descontaminados com HNO3 p.a. 5% v/v. Utilizou-se HNO3 suprapuro (sub-destilado em aparelho de quartzo) na abertura das amostras de ostras e sedimentos, alm de HCl na abertura de sedimentos. Em todos os trabalhos utilizou-se gua de osmose reversa de condutividade <0,1 S.cm-1.

23 5.4. Tcnicas e aparelhagem para anlise de metais As solues analticas obtidas foram analisadas pela espectrometria de absoro atmica com chama (F-AAS, espectrmetro A1275 da Varian) e forno de grafite (GFAAS, espectrmetro AAS5 EA da Carl Zeiss) utilizando-se as condies timas de trabalho (APHA, 2005). As anlises foram realizadas no Departamento de Qumica da UFES. Os resultados foram expressos em g/g. As anlises das ostras foram certificadas com os materiais de referncia NIST 2976 (EUA, tecido de mexilho) e DORM-2 (NRC-Canad, tecido de cao), enquanto que as anlises de sedimento foram certificadas com o material de referncia MESS-3 (NRC-Canad, sedimento marinho). As anlises por espectrometria de emisso atmica com plasma indutivamente acoplado (ICP-OES, 715 ES Varian) foram realizadas no LACAR Departamento de Engenharia Civil da UFES.

5.4.1. Espectrometria de AA com Forno de Grafite As otimizaes dos mtodos de anlise por GF-AAS para amostras ambientais foram realizadas e aperfeioadas com base nas informaes levantadas em outros projetos de pesquisa, j realizadas pela equipe do LQA-UFES, alm do objetivo desta pesquisa, podendo assim ser a tcnica analtica mais bem detalhada deste estudo. Os parmetros como comprimento de onda, tamanho da fenda, corrente da lmpada, tempo de integrao foram utilizados conforme recomendaes do fabricante. Quando necessrio, a fenda do monocromador do espectrmetro e a corrente da lmpada de catdo oco foram aumentadas para compensar o desgaste pelo uso de algumas lmpadas. O modo de integrao por rea foi escolhido para minimizar as variaes cinticas do processo de atomizao. Utilizou-se preferencialmente o tubo de grafite com plataforma para manter o ambiente de anlise temporalmente isotrmico, diminuir a atenuao de fundo (background) neste aparelho corrigido pela lmpada de deutrio. Neste tubo utiliza-se o volume mximo de 20 L de forma a garantir a maior sensibilidade analtica.

24 Para obteno dos valores reais das amostras foram descontados automaticamente pelo aparelho ou manualmente, quando se julgou necessrio devido a alguma contaminao pontual nos brancos, os valores dos brancos de preparao e rudo instrumental. No caso da obteno da curva analtica descontou-se o branco de calibrao (HNO3 0,2%).

5.4.2. Espectrometria de AA com Chama O metal Zn apresenta-se em grande quantidade nas amostras analisadas, o que torna imprprio o uso do GF-AAS para analis-lo (faixa tima de trabalho at 5 ppb). Considerando um alto background no branco de calibrao para zinco ao nvel de 5 pbb da curva de calibrao (mesmo utilizando-se gua purificada por osmose reversa), e o erro devido ao alto fator de diluio das amostras, optou-se assim pelo uso da tcnica de F-AAS para determinao desse metal. A mistura de gases utilizada para a determinao de Zn foi ar-acetileno, gerando temperaturas entre 2100-2400 C. Os valores dos brancos de preparao, branco instrumental e do branco de calibrao foram descontados manualmente dos valores de concentrao das amostras.

5.4.3. Espectrometria de EA com Plasma indutivo As anlises realizadas no aparelho de ICP-OES sero menos discutidas neste trabalho em comparao a GF-AAS, por se tratar de uma tcnica complementar presente pesquisa e ter sido realizada em laboratrio externo, com menor acessibilidade e alto custo financeiro. Os parmetros de anlises utilizados foram determinados seguindo as

recomendaes do fabricante do aparelho. No caso da escolha das linhas espectrais de anlise, optou-se por aquelas de maior intensidade e com menor interferncia nos picos de emisso vizinhos.

25 6. RESULTADOS E DISCUSSO 6.1. Espectrometria de AA com forno de grafite Foram inicialmente levantadas as condies timas de trabalho no espectrmetro com forno de grafite Tabela 1, estas condies foram determinadas conforme especificao do fabricante do aparelho e modificadas quando necessrio, sendo demonstradas para alguns metais.

Tabela 1: Condies instrumentais timas para o espectrmetro de absoro e emisso (Zn) atmica. Metal As Cd Cu Pb Zn Amostra Curva Fator dil. 1X 10X 1X 1X 10X 6X 1X 10X 10X 1X (nm) 193,7 228,8 324,8 217,0 213,9 Fenda Corrente (nm) (mA) 0,8 0,5 0,8 0,8 1,0 6 5 3 6 5 Tp ( C) 1200 600 1100 600 Ta ( C) 2400 1600 2200 1900 LD (g/L) 2 0,2 1 2 30

Ostra 100 ppb Sedimento 100 ppb Ostra Sedimento Ostra Sedimento Ostra Sedimento Ostra Sedimento 5 ppb 5 ppb 50 ppb 50 ppb 50 ppb 50 ppb 2 ppm 2 ppm

= comprimento de onda; Tp = temperatura de pirlise; Ta = temperatura de atomizao

No inicio dos trabalhos foi realizado um estudo de comparao interlaboratorial para a determinao de metais numa amostra teste de ostra e sedimento. A soluo analtica destas amostras foi enviada para dois laboratrios da empresa Aracruz Celulose (CPT e STI). Os resultados so apresentados no ANEXO 1. Em geral o laboratrio de qumica analtica da UFES (LQA), trabalhando com GF-AAS, teve boa certificao para os quatro metais (arsnio no foi determinado) nos dois tipos de amostras (tecido biolgico e sedimento), com erros relativos menores que 30%.

Durante a pesquisa foram utilizados materiais de referncia para garantir a exatido analtica do processo, cujos resultados referentes s tcnicas de GF-AAS e F-AAS so apresentados na Tabela 2. Nos ANEXO 2 e 3 so encontrados todos os valores para concentraes de metais obtidos na projeto de pesquisa (ARACRUZ 2009).

26
Tabela 2: Resultados da certificao analtica para materiais de referncia por GF-AAS.

Padro
Dorm-2*

Campanha
1 2 3

Cd (g/g)
0,0430,008 0,055 0,045 0,044 0,820,16 0,83 0,240,01 0,25 0,27 0,34

Cu (g/g)
2,340,16 1,84 2,31 2,32 4,020,33 3,49 33,91,6 22,9

G (g/g)
0,0650,007 Na 0,053 0,51 1,190,18 Na 21,10,7 14,1 17,9 14,9

Zn (g/g)
25,62,3 28 44 47 13713 160 1598 153 167 176

As (g/g)
18,01,1 n.a. 5,3 n.a. 13,31,8 na 21,21,1 na

Nist 2976 1 Mess-3* 1 2 3

19,7
22,6

17,4
21,2

n.a.= no analisado; em negrito concentraes apresentadas no certificado, as demais foram obtidas no laboratrio.*NRC-Canad.

Conforme Tabela 2, no foi obtida boa concordncia analtica para arsnio e chumbo nos materiais biolgicos certificados, devido aos baixos teores ( G) e efeitos de matriz (As) no resolvidos pela tcnica analtica utilizada (GF-AAS). Melhores certificaes foram obtidas para o material certificado de sedimento (Mess3). Alm do uso de materiais de referncia, a exatido do processo analtico foi avaliada com o uso da tcnica de reforo, ou fator de recuperao, onde uma amostra analisada sem e com adio de uma quantidade conhecida de padro. Em geral foram obtidos fatores de recuperao satisfatrios, entre 70% a 120%, para as amostras avaliadas, e consonantes com aqueles esperados para o nvel de concentrao de 10 ppb (NBR ISSO 17025: 2005). Inicialmente foi testado se a seqncia de abertura poderia causar diferenas nos teores dos metais nas solues analticas. O teste foi realizado para Cu, Zn e G numa amostra de sedimento, e utilizando-se a seqncia HNO3/HCl/H2O2 versus HNO3/H2O2/ HCl. Obteve-se tima concordncia para Cu e Zn (diferena relativa de 4%) e razovel para G (diferena relativa de 50%).

Um teste quanto ao tipo de abertura tambm foi realizado. O uso de HClO4 para dissoluo completa de uma amostra de sedimento no acarretou num aumento expressivo na concentrao dos metais.

27

6.2. Espectrometria de EA com plasma indutivamente acoplado As condies de trabalho no espectometro de emisso atmica com plasma indutivamente acoplado so apresentadas na Tabela 3
Tabela 3: Condies instrumentais analticas para o aparelho de ICP-OES. Pontncia Fluxo Fluxo Presso Tempo Radiofrequncia Plasma Auxiliar Nebulizador Replicata 1.2 Kw 15 L/Min 1.5 L/Min 180 KPa 5s Altura Leitura (nm) As (nm) Cd (nm) Cu (nm) Pb 10mm 188,980 214,439 214,439 220,353

Tempo Estabilizao 15 s (nm) Zn 213,857

No espectrmetro de emisso atmica com plasma indutivamente acoplado obtevese sempre uma excelente curva de calibrao com os ons em soluo aquosa, com picos de emisso muito bem definidos e pouca interferncia de fundo Figura 7, ampla faixa linear de trabalho (testado at 40 ppm) e fator R2 muito prximo de um ( > 0,9995). Porm isso no assegura uma boa qualidade das anlises, pois nas matrizes das amostras os picos no foram bem definidos para As e Pb Figura 8 tanto em ostras como em sedimentos, sendo discutidos mais adiante.

Figura 7:Picos de emisso da curva de calibrao em ICP-OES, concentrao dos picos de 2,5 ppm.

Figura 8:Picos de emisso da amostra de ostra do ponto SCa por ICP-OES.

28 Os limites de deteco para ICP-OES so de grande importncia para este trabalho, j que boa parte dos elementos encontra-se abaixo do limite de deteco do aparelho sendo impossvel sua quantificao.
Tabela 4: Limites de deteco obtidos para o aparelho de ICP-OES. LD na soluo LQ na soluo LQ no sedimento Elemento (mg/L) ppm (mg/L) ppm (mg/Kg) As 0,30 0,83 83 Cd 0,01 0,02 2,33 Cu 0,06 0,09 8,75 Pb 0,12 0,27 27 Zn 0,08 0,09 9,29

LQ na ostra (mg/Kg) 14 0,39 1,46 4,58 1,55

Na Tabela 5 so encontrados os valores obtidos para material de referncia, esses valores fora semelhantes aos encontrado em GF-AAS para cobre e zinco em sedimento (MESS-3). Para o material de referencia de ostras (DORM-2), no obteve-se certificao alguma pois as concentraes destes na soluo analtica eram muito baixas no havendo material disponvel para realizao de abertura com maior massa do analito.
Tabela 5:Resultados de certificao analtica para matrias de referncia por ICP-OES Padro Dorm-2* certificado analisado Mess-3* certificado analisado *NRC-Canad. Cd (g/g) 0,0430,008 <2,3 0,240,01 <2,3 Cu (g/g) 2,340,16 <8,75 33,91,6 23,7 Pb (g/g) 0,0650,007 <27 21,10,7 <27 Zn (g/g) 25,62,3 1598 157 As (g/g) 18,01,1 <83 21,21,1 <83

29 6.3. Arsnio Na tcnica de ICP-OES, apesar da boa qualidade da curva de calibrao analtica (R2=0,9999) contendo apenas o arsnio em soluo aquosa, no obteve-se boa definio de picos de emisso nas matrizes analisadas, tanto para ostras como em sedimentos, observado na Figura 8. Este comportamento era esperado, pelo fato da tcnica de ICP-OES ser menos adequada determinao de elementos mais volteis (como: arsnio, bismuto, germnio, ndio, chumbo, antimnio, selnio, estanho e telrio), sendo estes melhor analisados por espectrometria de absoro atmica com gerao de hidretos (HG-AAS). Nestas anlises foi o alto desvio padro relativo entre as replicatas (entre 10-110%), devido ao fato dos resultados estarem muito prximos ao limite de deteco do aparelho Tabela 4. Pela tcnica de GF-AAS no foi possvel obter sequer uma curva de calibrao razovel. Os resultados da pesquisa obtidos foram gerados pelo LabPetro-UFES, por tcnica de forno de grafite com corretor de atenuao de fundo Zeeman.

6.4. Cdmio Para este metal, pela tcnica de GF-AAS obteve-se certificao dos materiais de referencia utilizados e bons resultados para as matrizes analisadas. Apesar da radiao de fundo apresentar nveis elevados para anlises de sedimentos devido aos baixos valores de concentrao na soluo analtica (menores que 6 g/L) os resultados foram razoveis j que mesmo apresentando baixa absorbncia lquida obteve-se certificao dos materiais de referncia. Pela tcnica de ICP-OES os resultados foram todos abaixo do limite de deteco do aparelho (20 g/L).

30 6.5. Cobre A seguir so apresentadas como foram feitas anlises baseadas na curva com o mtodo das adies Figura 10, que consiste em adicionar quantidades especficas da soluo padro do metal sobre uma amostra a ser analisada, e a partir dos valores de absorbncia obtidos, construir a curva. Este mtodo garante uma menor interferncia de matriz nas anlises.

Figura 9: Curva analtica para cobre em GFAAS (faixa tima de trabalho 50 ppb).

Figura 10: Curva analtica para cobre pelo mtodo das adies padro por GF-AAS.

31 No houve diferenas significativas no clculo do teor de cobre a partir da curva analtica Figura 9 e da curva com o mtodo das adies padro, optando-se ento pela curva analtica pelo menor tempo de preparao. Contudo, alguns resultados referentes ao estudo do fator de diluio encontram-se fora do esperado (reduo de 60% do sinal de absorbncia quando amostra diluda duas vezes) para as amostras mais concentradas, apontando algum tipo de interferncia de matriz. Para a tcnica de ICP-OES esse tipo de estudo no foi realizado e no houve diluio das solues para anlise no aparelho. Os resultados comparativos esto na Tabela 6 Nas tcnicas de ICP-OES e GF-AAS obteve-se certificao do material de referncia para sedimentos, em ostras esse resultado no foi possvel para ICP-OES. Os picos de emisso para ICP em sedimentos apresentaram uma banda de alto valor prxima a banda de cobre Figura 11, podendo indicar a presena interferentes que falseiam o resultado obtido.

Figura 11: Pico de emisso por ICP-OES para sedimento do ponto PM3a. Tabela 6 Concentrao de Cobre nas amostras de ostras (O) e sedimentos (S) para as diferentes tcnicas analticas utilizadas. n.a.= no analisado. GF-AAS ICP-OES GF-AAS ICP-OES Amostra Amostra Ponto Ponto camp.1 camp.3 (g/g) (g/g) (g/g) (g/g) SCa S 16,05 9,03 SCa O 8,26 8,21 PM1a S 11,68 8,52 PM1a O 6,08 3,89 PM2a1 S 11,98 7,73 PM2a1 O n.a n.a PM2a2 S 10,55 7,56 PM2a2 O n.a n.a PM2a3 S 12,04 7,53 PM2a3 O 2,75 1,45 PM3a S 9,84 6,65 PM3a O 3,87 1,69 PM4a S 8,54 5,08 PM4a O 1,79 0,41 PA1a S 13,37 9,61 PA1a O 5,52 3,33 PA2a S 12,47 8,66 PA2a O 6,16 4,31 PA3a1 S 13,02 10,02 PA3a1 O 4,19 2,11 PA4a S 7,90 3,96 PA4a O 4,65 2,17 PA5a S 13,23 9,89 PA5a O 5,73 3,21

32 6.6. Chumbo Na Figura 12 e Figura 13 observa-se como foi feito, com o auxilio do software do aparelho de GF-AAS, o estudo do programa de forno para o metal chumbo. Em azul observa-se o sinal da absoro de fundo e em rosa a absoro lquida da amostra. A relao escolhida foi aquela que apresentava menor relao sinal rudo, que nesse caso foi de 600 pirlise e 1900 C C.

Figura 12: Programa de forno para chumbo no aparelho de GF-AAS

Figura 13: Picos de absoro em diferentes temperaturas de pirlise e atomizao em GF-AAS.

As anlises realizadas por ICP-OES no apresentaram bom resultados tanto para ostras como para sedimentos, com desvios relativos muito altos (maiores que 40%) e pssima resoluo de picos de emisso Figura 8, motivos semelhantes ao arsnio. 6.7. Zinco Em sedimentos, apesar de terem sido encontrados valores semelhantes para as concentraes de Zinco no material de referncia (MESS-3), para as duas tcnicas estudadas (F-AAS e GF-AAS), as concentraes das amostras no foram muito prximas conforme Tabela 7, sendo geralmente menores pela tcnica de ICP-OES, podendo ser explicadas pela interferncia de outros compostos presentes nesta matriz e no presentes no material de referncia, conforme sugerido abaixo.

33 As interferncias qumicas e os efeitos de matriz no so significativos devido s altas temperaturas alcanadas no plasma (4000-10000 K). Contudo, a emisso atmica com plasma (ICP-OES) no est isenta de interferncias de matriz. (FISTER, 1991) observou que a intensidade de emisso do zinco na presena de 0,05 mol L-1 de Na+, Mg2+, Fe2+, Ba2+ e Ti2+ foi 96%, 89%,88%, 82% e 77%, respectivamente, da intensidade observada na ausncia destes elementos.

Portanto, seria necessrio um estudo mais detalhado a respeito de possveis interferentes que so notados em uma tcnica e em outra no. Deve-se observar o fato de que as anlises por ICP-OES foram realizadas um ano aps as anlises de F-AAS, podendo ocasionar remobilizao inica nos componentes da matriz, gerando resultados diferentes.

Para ostras, no se obteve boa certificao do material de referncia DORM-2 pela tcnica de ICP-OES Tabela 5, contudo, os resultados das duas tcnicas foram mais prximos um do outro. Deve-se destacar nesse caso que as amostras para anlise em F-AAS foram diludas dez vezes e que em ICP-OES no houve diluio, reduzindo assim o possvel efeito de matriz e erro relativo diluio da amostras.

Tabela 7: Concentrao de Zinco nas amostras de ostras (O) e sedimentos (S) para as diferentes tcnicas analticas utilizadas. n.a.= no analisado F-AAS ICP-OES F-AAS ICP-OES Amostra Amostra Ponto Ponto camp.1 camp.3 (g/g) (g/g) (g/g) (g/g) SCa S 32 9 SCa O 259 271 PM1a S 63 34 PM1a O 201 176 PM2a1 S 57 34 PM2a1 O 155 107 PM2a2 S 57 34 PM2a2 O n.a n.a PM2a3 S 63 37 PM2a3 O n.a n.a PM3a S 51 30 PM3a O 167 133 PM4a S 45 21 PM4a O 346 334 PA1a S 60 39 PA1a O 200 174 PA2a S 57 33 PA2a O 270 292 PA3a1 S 61 44 PA3a1 O 167 145 PA4a S 43 19 PA4a O 289 286 PA5a S 62 46 PA5a O 190 160

34 7. CONCLUSES Foi observado neste trabalho o quanto importante a avaliao criteriosa de dados levantados em qualquer projeto de pesquisa, principalmente aqueles que tm como objetivo analtico amostras com matrizes ambientais, por serem bastante complexas e sujeitas a diversos tipos de interferncia no momento das anlises, sendo elas espectrais, fsicas, qumicas ou de ionizao, e sendo sujeitas tambm a todo tipo de contaminao em todo processo analtico devido s baixas concentraes analisadas (na ordem de at 10 ppb). Neste trabalho obteve-se em geral boa certificao para os materiais de referncia estudados pela tcnica de GF-AAS e certificao de Cobre e Zinco em sedimentos pela tcnica de ICP-OES. A comparao direta de resultados analticos foi possvel somente para cobre e zinco, visto que os demais elementos apresentavam-se em baixas concentraes e assim, abaixo do limite de deteco do aparelho de ICP-OES. Para zinco em sedimentos obteve-se resultados de concentrao menor quando comparados a GFAAS, j para ostras os resultados foram um pouco mais prximos. Para cobre esses resultados tambm foram menores na tcnica de ICP-OES nas duas matrizes. precipitado apontar qual das duas tcnicas mais exata para os dois metais comparados diretamente, necessitando maior detalhamento nas anlises de ICPOES e um estudo com leituras das amostras ao mesmo tempo, visto que as anlises por ICP-OES foram realizadas um ano aps as anlises por GF-AAS e o modo e tempo de conservao podem ter interferido nos resultados.

35 8. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS ALLEN, H.E.; FU, G. & DENG, B. 1993. Analysis of acid volatile sulfide (AVS) and simultaneously extracted metals (SEM) for the estimation of potential toxicity in aquatic sediments. Environ. Toxicol. Chem., 12: 1441 1453. APHA 2005 Standart Methods for the Examination of Water and Wastwater. 21th ed. Washinton, DC EUA: Ed. American Public Health Association. BARROSO, G. F. 2004. Development of an evaluation framework for sustainable bivalve aquaculture: a strategic plan approach in Espirito Santo, Brazil: Unpublished PhD Thesis (Geography), University of Victoria, Canada, 229 pp. BOSS, C.B. & FREDEEN, K.J. 1989 Concepts, instrumentation, and techniques in Inductively Coupled Plasma Atomic Emission Spectrometry. Perkin Elmer, USA, 104 p. BOWEN, J.J.M. 1979. Environmental chemistry of the elements. London. Academic Press. 333p. CALIMAN, A. Projeto de macrozoneamento costeiro do estado do Esprito Santo Litoral Norte. Vitria: Instituto Jones dos santos Neves. 147p. 1997. CLARCK, R.B. Marine Pollution. Clarendon Press. Oxford. 1997 CHAPMAN, P. M.; M. D. PAINE; A.D. ARTHUR; L.A. TAYLOR. 1996. A Triad study of sediment quality associated with a major, relatively untreated marine sewage discharge. Marine pollution Bulletin, v.32, n.1, p.47-64. CSUROS, M. & CSUROS, C. 2000 Environmental sampling and analysis for metals. Lewis Publishers, USA, 372 p. RIBEIRO, C. M. C. da Mata 2006. Estabelecimento de uma rotina laboratorial para anlise qumica de sedimentos e sua aplicao a sedimentos continentais do Minho (NW Portugal): contribuio para a reconstituio paleoambiental da regio. Disponvel em: http://hdl.handle.net/1822/7381. Acessado em: 23/11/2009. COIMBRA, A. G. 2003. Distribuio de metais pesados em moluscos e sedimentos nos manguezais de Coroa Grande e das Enseadas das Garas, Baa de Sepetiba, RJ. 2003. 72 f. Dissertao Mestrado em Geocincias - Universidade Federal Fluminense. Niteri. FISTER, J.C.; Olesik, J.W. 1991 "Vertical and Radial Emission Profiles and Ion-Atom Intensity Ratios in Inductively Coupled Plasmas: the Connection to Vaporizing Droplets" Spectrochimica Acta, 46B-869-883 FORSTNER, U. G.; Wittmann, G. T. W. 1981. Metal Pollution in the Aquatic Environmental, Springer-Verlag: Berlin.

36 JESUS, H.C.; Dias Carneiro, M.T.W.; Neto, R.R.; Cassini, S.T.; Santana, E.J.; Ceotto, C.S. e Silva, L.B. (FAPES 2008) Estudo comparativo da qualidade de guas, biomonitores e sedimentos de trs ecossistemas aquticos do estado do ES (Baa de Vitria, rio Piraqu-au/Aracruz e rio Peroco/Guarapari). Relatrio Tcnico-Projeto FAPES/ SECT-ES, Processo no 35.481.099/2006, 37 p. JESUS, H.C.; Santana, E.J.; Belo, M.J.; Silva, L.B.; Ceotto, C.S.; Castro Neves, D.M.; Castro, L.B .(ARACRUZ 2009) avaliao da poluio ambiental dos rios Piraqu-au e Piraqu-mirim (Santa Cruz ES) atravs da anlise de guas, biomonitores e sedimentos. Relatrio Tcnico- Projeto Aracruz Celulose, Processo UFES n 034373/2007-80. PHILLIPS, D.J.H. 1977. The use of biological indicator organisms to monitor trace metal pollution in marine and estuarine environments a review. Environ. Pollut., 13, 281-317. PHILLIPS, D. J. 1991. Selected trace elements and the use of biomonitors in subtropical and tropical marine ecosystems. Environ. Contam. Toxicol., 120, 105129. RIDDLE, C. 1993. Analysis of geological materials. Marcel Dekker, Inc., New York, 463 p. SALOMONS, W.; FRSTNER, U. 1984 Metals in the Hydrocycle, Ed. SpringerVerlag, Berlin. SILVRIO, P.F. 2003. Bases Tcnico-cientificas para derivao de valores - guias de qualidade de sedimentos para metais: experimentos de campo e laboratrio. Tese de Doutorado- Escola de engenharia So Carlos, Universidade de So Paulo, So Carlos. SKOOG, D.H. et al. 2006. Fundamentos de Qumica Analtica. 8. ed. So Paulo: Thomson,. 999p TYLER, G. 1995 ICP-MS or ICP-AES and AAS? A comparison. Spectroscopy Europe, 7,1: 14-22. USEPA 2007a Method 3050b: Acid digestion of sediments, sludges and soils. Disponvel em: http://www.epa.gov/sw-846/pdfs/3050b.pdf. Acessado em: 23/10/2006. USEPA 2007b Method 3051: Microwave assisted acid digestion of sediments, sludges, soils and oils. Disponvel em: http://www.epa.gov/epaoswer/hazwaste/test/pdfs/ 3051.pdf. Acessado em: 23/10/2006.

37 ANEXO 1
Dados de comparao interlaboratorial de resultados de anlise teste de ostra (O) e sedimento (S). Dados em amarelo escuro possuem erro relativo < 20% e em amarelo claro <30%.
Laboratrio CPT (Aracruz Celulose); Tcnica ICP-OES Amostra LD Branco O 1O 2O 3O Nist Dorm LD Branco S 1S 2S 3S Mess Amostra 1O 2O 3O Nist Dorm 1S 2S 3S Mess Nist-2976 certificado Dorm-2 certificado Mess-3 certificado erro relativo Cd (mg/L) 0 < 0,010 < 0,010 < 0,010 < 0,010 < 0,010 0 0,05 0,05 0,05 0,03 Cd (mg/Kg) 5,2 4,9 5,2 3,0 0,82 0,16 0,24 0,01 1158,6% Cu (mg/L) 0 0,16 0,16 0,15 0,03 0,02 0 0,13 0,11 0,12 0,29 2,6 2,6 2,8 4,1 2,2 12,2 11,9 12,2 29,6 4,02 0,33 33,9 1,6 1,5% -4,5% -12,7% Pb (mg/L) 0 0,01 < 0,010 < 0,010 0,01 < 0,010 0,01 0,11 0,1 0,13 0,13 0,18 1,7 10,9 10,7 13,3 13,1 1,19 0,18 21,1 0,7 46,9% -38,0% Zn (mg/L) 0,01 99,1 106,9 91,94 0,97 0,26 0,21 0,57 0,55 0,55 1,29 1612 1775 1656 141 26 55 57 56 130 137 13 25,6 2,3 159 8 3,3% 1,2% -18,1%

Cu (mg/Kg) Pb (mg/Kg) Zn (mg/Kg)

0,043 0,008 2,34 0,16 0,065 0,007

38 Continuao ANEXO 1

Laboratrio STI (Aracruz Celulose); Tcnicas F-AAS (Zn) e GF-AAS (Cd,Pb,Cu) Amostra Cd (mg/L) Cu (mg/L) Pb (mg/L) Zn (mg/L) LD Branco O 1O 2O 3O Nist Dorm LD Branco S 1S 2S 3S Mess Amostra 1O 2O 3O Nist Dorm 1S 2S 3S Mess Nist-2976 certificado Dorm-2 certificado Mess-3 certificado Erro relativo 0 0,01 0,0060 0 0,01 0 0 0,01 0,01 0,02 0,0070 Cd (mg/Kg) 0,085 0,095 0,077 1,49 0,22 0,60 0,59 1,52 0,63 0,82 0,16 0,24 0,01 81,2% 419,6% 164,3% 0 0,2201 0,22 0,22 0,05 0,03 Cu (mg/Kg) 3,50 3,65 3,81 6,73 2,51 4,02 0,33 33,9 1,6 67,4% 7,2% 1,19 0,18 21,1 0,7 89,8% 3040,7% 0,01 0,01 0,01 0,0080 0,02 0,03 Pb (mg/Kg 0,034 0,037 -0,002 2,26 2,04 0,01 0,03 78 88 78 0,98 0,28 0,22 0,76 0,75 0,76 1,51 Zn (mg/Kg) 1269 1461 1405 138 25 52 55 55 130 137 13 25,6 2,3 159 8 1,0% -0,8% -18,3%

0,043 0,008 2,34 0,16 0,065 0,007

39

Continuao ANEXO 1

Laboratrio LQA (UFES); Tcnicas (F-AAS (Zn) e GF-AAS (Cd,Pb,Cu) Amostra LD Branco O 1O 2O 3O Nist Dorm LD Branco S 1S 2S 3S Mess Amostra 1O 2O 3O Nist Dorm 1S 2S 3S Mess Nist-2976 certificado Dorm-2 certificado Mess-3 certificado Erro relativo Cd (mg/L) 0 0 0 0 0 0,01 0 0 0 0,0020 0 0,0010 0 Cd (mg/Kg) 0,041 0,042 0,041 0,83 0,041 0,174 0,084 0,093 0,283 0,82 0,16 0,24 0,01 1,3% -5,5% 17,9% Cu (mg/L) 0 0,15 0,17 0,17 0,02 0,02 0 0,12 0,15 0,12 0,23 Cu (mg/Kg) 2,47 2,81 2,99 3,21 1,73 11,09 15,28 12,59 22,96 4,02 0,33 33,9 1,6 -20,3% -26,2% -32,3% Pb (mg/L) 0 0,01 0,01 0,01 0,02 0 0,010 0,26 0,23 0,25 0,16 Pb (mg/Kg 0,11 0,10 0,10 2,61 0,05 23,92 23,39 25,80 16,31 1,19 0,18 21,1 0,7 119,1% -21,9% -22,7% Zn (mg/L) 0,02 0 99,5 104 95,6 1,10 0,27 0,02 0,00 0,76 0,79 0,76 1,52 Zn (mg/Kg) 1619 1727 1722 160 27,4 73 80 76 151 137 13 25,6 2,3 159 8 17,0% 7,1% -5,0%

0,043 0,008 2,34 0,16 0,065 0,007

40 ANEXO 2
Concentraes de metais em ostras (g/g peso mido) analisados por GF-AAS (Laboratrio de Qumica Analtica UFES).
Campanha 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 Ponto SC SC PM1 PM1 PM2 PM2 PM2 PM2 PM2 PM2 PM3 PM3 PM4 PM4 PA1 PA1 PA2 PA2 PA3 PA3 PA3 PA3 PA3 PA3 PA4 PA4 PA5 PA5 SC SC PM1 PM1 PM2 PM2 PM3 PM3 PM4 PM4 PA1 PA1 PA2 PA2 Sub amostra a b a b a a a b b b a b a b a b a b a a a b b b a b a b a b a b a b a b a b a b a b Replica Amostra 1 1 1 1 1 2 3 1 2 3 1 1 1 1 1 1 1 1 1 2 3 1 2 3 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O Cd 0,085 0,083 0,066 0,066 0,033 0,033 0,036 0,028 0,034 0,036 0,033 0,057 0,051 0,024 0,070 0,055 0,049 0,045 0,043 0,032 0,041 0,033 0,036 0,032 0,033 0,038 0,033 0,039 0,108 0,099 0,067 0,085 0,036 0,042 0,041 0,028 0,022 0,027 0,049 0,071 0,046 0,060 Cu 7,2 8,3 4,4 2,8 1,9 2,0 2,0 2,3 2,8 2,5 1,8 1,7 2,9 1,4 3,6 2,5 3,3 1,8 2,1 2,1 2,2 1,5 1,8 1,5 1,9 2,0 1,8 1,8 7,72 5,07 2,93 3,90 1,38 1,63 1,50 1,07 1,67 1,28 1,69 2,23 1,73 3,06 Pb 0,045 0,118 0,091 0,054 0,053 0,065 0,041 0,041 0,052 0,041 0,041 0,052 0,043 0,018 0,046 0,054 0,102 0,060 0,032 0,023 0,026 0,026 0,031 0,020 0,020 0,005 0,058 0,093 0,16 0,18 0,22 0,16 0,13 0,15 0,14 0,14 0,15 0,16 0,10 0,15 0,13 0,15 Zn 195 181 182 151 149 179 179 159 166 174 234 202 471 252 202 137 196 147 225 214 227 158 171 150 236 275 337 370 216 242 159 199 113 168 175 149 327 302 103 127 92 214 As

0,48 0,36 0,39 0,47 0,28 0,47 0,36

41 Continuao do ANEXO 2
Campanha 2 2 2 2 2 2 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 Ponto PA3 PA3 PA4 PA4 PA5 PA5 SC SC PM1 PM1 PM2 PM2 PM3 PM3 PM3 PM4 PM4 PA1 PA1 PA2 PA2 PA3 PA3 PA3 PA4 PA4 PA5 PA5 Sub amostra a b a b a b a b a b a b a b b a b a b a b a b b a a a b Replica Amostra 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 2 1 1 1 1 1 1 1 1 2 1 2 1 1 O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O O Cd 0,040 0,035 0,043 0,034 0,046 0,048 0,044 0,115 0,082 0,074 0,073 0,036 0,034 0,039 0,039 0,037 0,024 0,025 0,064 0,062 0,073 0,067 0,049 0,043 0,045 0,049 0,040 0,065 Cu 1,26 1,20 1,56 1,86 0,70 0,98 8,26 9,48 6,08 6,26 2,75 4,28 3,87 3,61 4,05 1,79 3,70 5,52 4,20 6,16 6,70 4,19 2,58 3,18 4,65 4,75 5,73 1,75 Pb 0,19 0,29 0,10 0,11 0,06 0,07 0,17 0,10 0,10 Zn 93 128 211 246 287 287 259 261 201 227 155 256 167 182 179 346 440 200 150 270 192 167 117 130 289 293 190 120 As 0,45 0,34 0,29

0,14 0,17 0,14 0,13 0,09 0,10 0,11 0,10 0,07 0,07 0,07 0,10 0,11 0,10 0,09

42 ANEXO 3
Concentraes de metais nos sedimentos (g/g peso seco) analisados por GF-AAS (Laboratrio de Qumica Analtica-UFES)
Campanha 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 Ponto SC SC PM1 PM1 PM2 PM2 PM2 PM2 PM2 PM2 PM3 PM3 PM4 PM4 PA1 PA1 PA2 PA2 PA3 PA3 PA3 PA3 PA3 PA3 PA4 PA4 PA5 PA5 SC SC PM1 PM1 PM2 PM2 PM3 PM3 PM4 PM4 PA1 PA1 PA2 PA2 Sub amostra a b a b a a a b b b a b a b a b a b a a a b b b a b a b a b a b a b a b a b a b a b Replica Amostra 1 1 1 1 1 2 3 1 2 3 1 1 1 1 1 1 1 1 1 2 3 1 2 3 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S Cd 0,047 0,063 0,075 0,050 0,055 0,051 0,134 0,069 0,070 0,047 0,089 0,138 0,193 0,059 0,180 0,059 0,040 0,039 0,064 0,138 0,079 0,046 0,047 0,046 0,025 0,054 0,042 0,037 0,053 0,052 0,042 0,041 0,073 0,078 0,051 0,045 0,051 0,039 0,046 0,039 0,062 0,046 Cu 16,1 10,0 11,7 11,6 12,0 10,6 12,0 10,8 11,3 11,0 9,8 11,1 8,5 9,3 13,4 13,2 12,5 13,1 13,0 11,0 11,6 12,0 12,4 13,6 7,9 5,4 13,2 15,0 6,6 5,8 8,6 7,5 7,9 8,5 7,3 5,3 4,9 4,5 8,6 8,0 7,6 8,5 Pb 16,3 18,2 15,6 14,0 15,9 13,2 15,4 13,8 13,3 12,5 13,0 16,3 15,0 15,3 16,7 15,4 22,2 19,4 12,4 15,3 16,3 27,3 13,5 18,4 8,2 6,0 15,1 11,8 16 16,6 20,3 20,4 18,0 19,1 16,8 19,2 14,6 13,3 20,8 19,1 16,4 27,1 Zn 32,1 49,7 62,5 62,4 57,1 57,4 63,5 57,2 59,0 56,7 51,1 53,8 45,3 47,1 60,4 60,4 57,4 60,3 61,1 60,4 58,5 68,2 63,8 61,7 42,6 24,3 61,8 60,1 70,0 88,0 75,0 78,0 94,0 62,0 42,0 44,0 67,0 63,0 60,0 64,0 As

44,5 41,7 35,2 25,4 19,4 39,0 29,2

43

Continuao do ANEXO 3
Campanha 2 2 2 2 2 2 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 Ponto PA3 PA3 PA4 PA4 PA5 PA5 SC SC PM1 PM1 PM2 PM2 PM3 PM3 PM4 PM4 PA1 PA1 PA2 PA2 PA3 PA3 PA4 PA4 PA5 PA5 PA5 Subamostra a b a b a b a b a b a b a b a b a b a b a b a b a a b Replica Amostra 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 2 1 S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S Cd 0,063 0,037 0,048 0,041 0,059 0,042 0,069 0,079 0,078 0,073 0,079 0,079 0,086 0,086 0,039 0,036 0,052 0,065 0,052 0,040 0,054 0,049 0,031 0,071 0,059 0,048 0,056 Cu 6,7 7,0 6,3 6,6 8,2 7,2 6,9 8,2 8,4 7,2 7,6 7,7 6,7 6,7 4,5 6,0 8,6 9,0 10,3 8,9 9,5 8,6 5,4 9,1 8,3 7,5 6,9 Pb 17,9 16,5 16,9 19,1 15,4 16,5 19,6 22,0 20,2 19,0 16,5 17,5 13,9 14,5 10,2 12,1 16,2 17,9 16,9 17,2 17,3 16,2 10,0 12,9 12,8 12,4 11,4 Zn 61,0 61,0 96,0 96,0 62,0 32,0 38,0 42,0 45,0 42,0 39,0 32,0 35,0 28,0 32,0 42,0 41,0 41,0 42,0 45,0 40,0 25,0 38,0 38,0 41,0 38,0 As 26,8 13,8 13,4 46,6 48,9 40,7 44,1 38,5 42,9 33,9 34,7 24,9 27,1 45,9 45,9 34,6 36,2 35,9 31,6 33,6 21,9 21,2 21,1 22,2