INSTITUTO TECNOLGICO SUPERIOR DE CALKINI EN EL ESTADO DE CAMPECHE. INGENIERA EN BIOSEPARACIONES. Tema: 1.1 Produccin de productos de origen biolgico.

Introduccin Un producto biolgico o biofrmaco es aquel que ha sido elaborado con materiales de partida de origen biolgico, tales como microorganismos, rganos y tejidos de origen vegetal o animal, clulas o fluidos de origen humano o animal y diseos celulares (sustratos celulares, sean o no recombinantes incluidas las clulas primarias) as como otros de origen biotecnolgico que se obtienen a partir de una protena o cido nucleico por tecnologa de ADN recombinante. Los productos biolgicos son extremadamente ms complejos que la mayora de los medicamentos convencionales (que tienen principios activos con molculas pequeas (1,2). En comparacin con estas pequeas molculas que constituyen el principio activo principal de los medicamentos sintetizados qumicamente, los productos biolgicos tienen un peso molecular mucho ms alto y una complejidad mayor; pueden ser mezclas de muchas especies moleculares que tienen perfiles de impureza nicos, los cuales invariablemente dependen del proceso de manufactura. Por otro lado, la respuesta de los productos biolgicos depende de los materiales con los que se haya comenzado su produccin; stos estn hechos a partir de sistemas vivos que inherentemente son variables. Cualquier cambio en el proceso de manufactura por menor que sea, conlleva a cambios en el producto que no necesariamente son detectables por la tecnologa actual, pero pueden tener impacto potencial en la calidad, seguridad, y/o eficacia del producto. Para asegurar la consistencia en las caractersticas de los productos finales as como en los perfiles de seguridad y eficacia, tanto la fuente del material como los procesos de manufactura, la formulacin y las condiciones de almacenaje deben ser cuidadosamente seguidos y controlados de acuerdo a las especificaciones que se necesitan para su aprobacin regulatoria (3). Desde 1982 cuando Eli Lilly fue declarado apto para fabricar el primer producto farmacutico de protena recombinante en los Estados Unidos - la insulina recombinante humana, Humulin - hasta el 2004, se estima que la FDA ha otorgado su voto aprobatorio para la comercializacin de 100 productos biolgicos. En ese sentido, se espera que para el ao 2012 los medicamentos biotecnolgicos representarn, aproximadamente, el 12% del total de las ventas mundiales de medicamentos de prescripcin.

Actualmente los productos biotecnolgicos aceptados para su comercializacin ya tratan o ayudan a prevenir: ataques cardiacos, infarto cerebral, esclerosis mltiple, leucemia, hepatitis, artritis reumatoide, cncer de mama, cncer de pulmn, linfomas, cncer renal, cncer de colon, diabetes mellitus, insuficiencia cardiaca, fibrosis qustica entre otras enfermedades. Por los motivos descritos en los prrafos anteriores, se puede inferir que para efectuar el registro de productos biolgicos/biotecnolgicos no deberan aplicarse los criterios estndares de Medicamentos Genricos (demostracin de bioequivalencia con un producto de referencia mediante estudios de biodisponibilidad adecuados) tal como se lo conoce en la normativa actual de diferentes pases; dichos criterios deben limitarse a los productos obtenidos por sntesis qumica. Aquellos que quisieran ser propuestos como Biosimilares o Similares Biolgicos deberan completar un ejercicio de similaridad con el producto de referencia tanto en aspectos de calidad, como de seguridad y eficacia tanto a niveles clnicos como no clnicos. Definicin y caractersticas de los productos biolgicos Son protenas de elevada actividad biolgica/teraputica, producidas en cultivos de clulas mediante la ingeniera gentica. Cuando las clulas sintetizan la cadena polipeptdica inmediatamente cambian a estructuras helicoidales alfa y eso determina que se representen las actividades biolgicas. Los productos biotecnolgicos se diferencian marcadamente de los medicamentos de sntesis qumica: son de gran tamao molecular, con pesos moleculares cien a mil veces mayores y una estructura que es notablemente ms compleja. Adicionalmente presentan diferencias an mayores: la flexibilidad de las molculas proteicas contrasta con la rigidez de las molculas de sntesis que no cambian su conformacin (como en el caso de la Aspirina ). De otro lado, las protenas pueden ser modificadas por los carbohidratos (en un proceso denominado glucosilacin) y por otro tipo de elementos. Los medicamentos biolgicos son fabricados por un organismo vivo: su principio activo son las protenas humanas obtenidas por tcnicas de ingeniera gentica que se estn utilizando con xito en diferentes patologas como la diabetes, la hepatitis y el cncer. A travs de la ingeniera gentica se logra que un gen humano fabrique sustancias humanas en otros soportes vivos, como bacterias, levaduras o clulas. Los productos biolgicos se diferencian de los medica-mentos sintticos (qumicos) por la complejidad de sus molculas y los diferentes procesos que se utilizan en su elaboracin. Otro elemento distintivo de los productos biolgicos es que en la mayora de casos son difciles de caracterizar. La protena ms sencilla es compleja en si misma e incluso existen estructuras moleculares de protenas que no pueden ser diferenciadas con la tecnologa disponible actualmente. Se debe mencionar

que las ms modestas alteraciones en el proceso de manufactura pueden llevar a cambios significativos en un producto no detectables necesariamente a nivel de calidad de producto pero si, en el sistema inmunolgico de algunos (4) individuos . Adicionalmente, existe un espectro de complejidad molecular entre los diversos productos (ADN recombnate, productos derivados de la sangre o el plasma, inmunolgicos, terapia gnica o celular). Parmetros como la estructura tridimensional, la cantidad de variantes cido base o modificaciones posteriores a la traslacin - como el perfil de glicosilacin - pueden resultar alteradas en grado significativo por cambios que en un principio se podran considerar menores dentro del proceso de manufactura (5) . Se puede mencionar, entonces, que el perfil de seguridad/eficacia de los productos biolgicos, depende en alto grado de la solidez y la vigilancia de aspectos relacionados con la calidad as como con los requerimientos especficos de esta industria. El desarrollo del genrico estndar - entendido como la demostracin de bioequivalencia con un producto medicinal de referencia por medio de los estudios de biodisponibilidad adecuados - se debe aplicar a productos medicinales derivados de procesos qumicos. En contraposicin a la complejidad que revisten los productos derivados de procesos biolgicos/biotecnolgicos - desde el punto de vista cientfico - un proceso de registro abreviado sin datos propios de seguridad y eficacia, no es el adecuado. Se tendr que adoptar un conjunto distinto de criterios clnicos para el desarrollo de un producto biosimilar (6,7). Los requisitos especficos para demostrar eficacia y seguridad sern diferentes para cada clase de productos; en consecuencia, el dossier de datos no clnicos/clnicos se determinar caso por caso, para aquellas situaciones en las cuales no se ha definido un lineamiento diferenciado para esta clase de productos. Debe reconocerse que por definicin, los productos medicinales biolgicos similares NO son productos medici- nales genricos porque se esperan diferencias entre los productos de distintos fabricantes o en comparacin con los productos de referencia, lo cual no puede evaluarse. Sin estudios clnicos en pacientes con el supuesto biosimilar no es posible predecir su actividad teraputica, eficacia, ni su seguridad, de ah que en un estudio de biosimila- ridad se debe asegurar la calidad, seguridad y eficacia del producto en una poblacin de pacientes con un nmero fijo para cada indicacin (que sea estadsticamente representativo y permita llegar a conclusiones). Esto debido a que la alteracin de un solo aminocido, un

radical, un enlace o una fraccin de la macromolcula del biofrmaco original, puede afectar la eficacia del producto y tornarlo INMUNOGNICO con serias consecuencias para el paciente que lo recibe - incluyendo la posibilidad no slo de perder su eficacia sino de poner en riesgo la salud y la vida del paciente . Dada la complejidad en la elaboracin de un frmaco biolgico, es prcticamente imposible que otro laboratorio repita exactamente ese mismo proceso. Tanto las caractersticas del proceso como las condiciones de elaboracin son patentadas y por lo tanto, de carcter reservado slo para la (8) compaa que lo fabrica . Como consecuencia, al no ser idnticos los procesos ni los organismos que los fabrican, el producto biolgico terminado NO puede ser idntico. Por esta razn, mientras los genricos de productos qumicos slo deben probar similitud qumica y bioequivalencia, los biosimilares deben probar a lo largo de ensayos clnicos que sus efectos teraputicos y condiciones de seguridad e inmunogenicidad son similares a los del producto original. Slo entonces podrn ser considerados biosimilares. Consideraciones clnicas Es importante conocer los problemas relacionados con la seguridad de algunos productos biotecnolgicos como la aparicin del sndrome de Mialgia Eosinoflica por triptfano producido por cambios en el proceso de obtencin biolgica de este aminocido. Hubo una impureza no reconocida que causaba este sndrome que afect a ms de 1,300 pacientes y hubo 38 muertes (1, 2). Otro caso est relacionado con la vacuna contra la encefalitis producida por picadura de garrapata. La remocin de ciertos excipientes de la formulacin de la vacuna, el tiomersal y la albmina, aumentaron marcadamente los efectos adversos de pirexia severa, escalofros y debilidad general. La inmunogenicidad de la protena trombopoyetina recombinante fue tan alta que provoc una trombocitopenia persistente en los pacientes que recibieron el producto, lo que determin que se abandonara su desarrollo. Otro ejemplo de inmunogenicidad ocurri tambin con el factor de colonias de granulocitos y macrfagos GM-CSF. En pacientes inmunosuprimidos fue imposible ver la inmuno-genicidad de la molcula pero al administrarla en pacientes que no estaban inmunosuprimidos, aparecieron anticuerpos contra el GM-CSF. Es importante resaltar que la inmunogenicidad no se da en todas las indicaciones y no se puede predecir. Un caso muy conocido - ocurrido en 1998 - fue la mayor incidencia de aparicin de aplasia de glbulos rojos puros (PRCA) por la administracin va subcutnea de la eritropoyetina EPREX dada la aparicin de anticuerpos neutralizantes a la eritropoyetina (EPO) que anularon su eficacia. Este fenmeno se ha explicado debido a cambios en la formulacin del EPREX , al eliminar la albmina

humana y reemplazarla por el Tween 80. Como consecuencia, se tuvo que retirar el producto del mercado (1). Los distintos perfiles de focos isoelctricos en lotes de diferentes EPOs desencadenaron muchas consecuencias, considerando que estos productos trataron de copiar la formulacin. Las diferencias en EPOs tienen como consecuen-cia, diferencias en el perfil farmacocintico y tambin un impacto en la seguridad y eficacia, ya que copiar estas presentaciones puede desencadenar reacciones adversas como inmunogenicidad. Biosimilares Los llamados biosimilares son segunda y posteriores versiones de productos biofarmacuticos originales. Estos productos intentan tener el mismo mecanismo de accin y buscan ser utilizados para la misma indicacin teraputica del biofrmaco original (9). En cambio, los biofrmacos originales pioneros, han sido desarrollados independientemente y aprobados mediante sus propios estudios clnicos de eficacia y seguridad. No existe la probabilidad que un biosimilar pueda ser un biogenrico por las siguientes razones: a) Un genrico es idntico al original. Tiene idntica estructura qumica, estabilidad, farmacocintica, farmacodin- mica, bio-disponibilidad y bioequivalencia que el frmaco original. De otro lado, dos productos biolgicos por tratarse de protenas muy complejas de gran tamao molecular y de manufactura difcil - con numerosos y complicados procesos - son imposibles de replicar (NO pueden ser idnticos). Por tanto, los biogenricos NO pueden existir. b) El tradicional anlisis qumico no es suficiente para demostrar que dos productos biolgicos son idnticos. Son muchas las alteraciones moleculares que pueden dar como resultado una prdida de la actividad biolgica:

Alteraciones en los enlaces no-covalentes. Alteraciones en los enlaces covalentes: hidrlisis, deamidacin, formacin de iminas (que ocasio de la protena con tomos que cambian la forma de la molcula). Racemizacin (formas tridimensionales diferentes) mediante una oxidacin, intercambio d (diferentes posiciones en el espacio) y foto descomposicin. El resultado es que se producirn sustancias de diferente calidad y diferente eficacia. Mas an, con diferentes perfiles inmunognicos. En la figura 1 se muestra las notables diferencias entre productos biolgicos supuestamente similares de las eritropoyetinas disponibles en Latino-Amrica, provenientes de Corea, Argentina y Cuba:

Figura 1. Heterogenicidad de Protenas Teraputicas: Anlisis mediante cromatografa de diferentes Eritropoyetinas similares en Amrica Latina (No son iguales). En el grfico se observa que la columna E representa el grupo Control mientras que las columnas con nmeros romanos que van de I al VIII se refieren a fabricantes independientes. Las letras que siguen a cada nmero romano se refieren a diferentes jornadas del mismo fabricante.

Aunque la principal preocupacin en los productos biolgicos es la seguridad, es importante que tanto en los estudios clnicos como en el seguimiento de frmaco vigilancia post-comercializacin se observen problemas potenciales como la inmunogenicidad y posterior falta de eficacia (10). Para un medicamento de sntesis qumica compuesto puede ser suficiente un estudio de bioequivalencia reducido de sujetos para demostrar su equivalencia producto biotecnolgico y biolgico complejo - es requiere mucho ms que eso. de una pequea molcula, que involucre un nmero teraputica; pero para un decir un biofrmaco - se

Para establecer con un razonable nivel de certeza, que las diferencias en los procesos de produccin del producto original y el similar no afectarn la seguridad y/o eficacia del producto para los pacientes, no es suficiente tener slo la experiencia en la elaboracin de dicho producto sino que se requieren los siguientes controles: Control durante el proceso de produccin (buenas prcticas de manufactura). Estudios de toxicidad, farmacocintica in vivo y estudios de farmacodinmica. Estudios de inmunogenicidad, ya que pequeas variaciones en la molcula pueden generar reacciones alrgicas severas y de consecuencias imprevisibles.

 Lo ms importante: estudios clnicos que demuestren la eficacia. Frmaco vigilancia para la deteccin de posibles eventos adversos que esta molcula pueda generar. Todo lo mencionado, muestra que no es posible producir un medicamento bigenrico. Bajo esa consideracin, existe una urgente e inmediata necesidad de establecer marcos legales que protejan a los pacientes a quienes se les administra un medicamento biolgico, biotecnolgico los llamados biosimilares. Inmunogenicidad Los problemas de inmunogenicidad son quiz, las razones ms convincentes para la imposicin de pruebas clnicas humanas en los llamados biosimilares (11) . Todas las protenas tienen un potencial inmunognico; esto implica la posible aparicin de anticuerpos dirigidos contra las molculas biolgicas con el fin de desactivarlas incluso, la produccin de anticuerpos que atacan el producto biolgico original. De igual forma, es posible la aparicin de una enfermedad autoinmune. La ruta de administracin, es un factor potencial en la provocacin de anticuerpos: la va intravenosa produce menos inmunogenicidad que la ruta subcutnea intramuscular. An el mismo producto elaborado en diferentes lugares, ocasiona considerables diferencias en la inmunogenicidad - sin mostrar diferencias en las caractersticas fsico-qumicas. La calidad del bioproducto influencia la inmunogenicidad: un producto con grumos induce a que las clulas B produzcan anticuerpos, mientras que un producto soluble de alta calidad mantiene la tolerancia. Los factores que afectan la inmunogenicidad estn bsicamente relacionados con el producto y son principalmente: la secuencia de aminocidos, glicosilacin, pureza, excipientes, estabilidad, dosis y vas de administracin, intervalo de dosis, sistema inmune del husped y el almacenaje, Se ha demostrado, por ejemplo, que impurezas y contaminantes son la causa principal de la inmunogenicidad en la hormona de crecimiento humano y en la insulina. Las caractersticas de los pacientes tambin son importantes. Aquellos que padecen de cncer tienen la inmunidad deprimida, por lo tanto, su organismo provee una menor formacin de anticuerpos respecto a los pacientes con infecciones virales por ejemplo. En los pacientes hemoflicos, el tipo de defecto gentico influencia en la frecuencia de inmu-nogenicidad.

La importancia de la inmunogenicidad La inmunogenicidad se refiere al proceso mediante el cual, el cuerpo humano se encarga de generar una respuesta a la introduccin de una protena u otra sustancia extraa. La respuesta humana en estos casos, es producir anticuerpos que se ligan a las protenas extraas, desactivndolas y formando un complejo antgeno-anticuerpo que puede llevar a serias compli- caciones y efectos adversos (11). La inmunogenicidad representa la preocupacin actual de seguridad ms importante relacionada con los productos biolgicos; principalmente se asume que es imposible de caracterizar, en ausencia de pruebas clnicas en humanos. El fabricante de un supuesto biosimilar no puede replicar jams con exactitud el proceso seguido por el productor del frmaco biolgico/biotecnolgico innovador dado que las diferencias en estos procesos pueden resultar en cambios en el producto as como en sus efectos clnicos (10). Entonces, se puede afirmar que la similaridad es ms difcil de establecer por los componentes bioactivos de los productos biolgicos/biotecnolgicos respecto a los productos obtenidos por sntesis qumica. Registro sanitario de productos llamados biosimilares Es importante precisar que se deben diferenciar las exigencias para el registro sanitario de sustancias de sntesis qumica respecto a las de origen biolgico (12). Las agencias regulatorias ms importantes del mundo actualmente se encuentran abocadas en la bsqueda de la mejor forma de normar los similares de productos biolgicos origi nales. En los casos de sustancias especficas - por lo general, obtenidas por tcnicas de sntesis qumica - no hay dificultad en acreditar la identidad y valoracin del principio activo y probar que stos sean idnticos al principio activo original de referencia. En cuanto al producto farmacutico que contiene la sustancia qumica, es posible determinar si sus efectos con respecto a eficacia y seguridad son esencialmente los mismos que los del producto qumico original. Para ello se usan los estudios de bioequivalencia que permiten conocer el grado de intercambiabilidad. Segn la OMS, un producto es intercambiable cuando es teraputicamente equivalente a un producto de referencia (generalmente respecto al original ya establecido por mucho tiempo en el mercado). En la regin latinoamericana, en general, an se maneja el registro de productos de sntesis qumica sin estudios de bioequivalencia.

En el caso de los productos biolgicos hay dificultad para acreditar identidad y valoracin del principio activo. stos y tambin los llamados biosimilares son producidos en seres vivos y son protenas o anticuerpos (ambos, molculas de altsima complejidad); por tanto, requieren validar su seguridad y eficacia en forma ms rigurosa que las terapias tradicionales de sntesis qumica. El perfil de seguridad/eficacia de estos productos se debe demostrar en cada caso, dependiendo adems de la solidez y vigilancia de su calidad - incluyendo, requerimientos de buenas prcticas de manufactura especficos para esta industria. De lo anteriormente expuesto podemos concluir que la similitud no puede establecerse basndose slo en datos analticos; es esencial, una rigurosa prueba de eficacia y seguridad con estudios clnicos y de farmacovigilancia, diseados adecuadamente. Pronunciamiento de las entidades encargadas de ilustrar el tema de la vigilancia sanitaria a elevados estndares OMS Excluye a los medicamentos biotecnolgicos de la regulacin de genricos. Seala que su intercambiabilidad no puede ser avalada por las exigencias de equivalencia teraputica bioequivalencia aplicable a genricos tradicionales. FDA (Agencia Americana para la Administracin de Frmacos). Seala que los mtodos analticos no pueden predecir las propiedades biolgicas de los biofrmacos - El sistema inmune puede detectar alteraciones en los productos, indetectables por mtodos analticos - De otro lado, la inmunogenicidad de los biofrmacos, puede tener serias consecuencias clnicas. En suma, la regulacin de biofrmacos no puede ser similar a la existente para las molculas de sntesis qumica; por ello, la demostracin in vivo de su seguridad y eficacia (a travs de ensayos clnicos) es indispensable. La FDA tiene una estructura propia para el registro de productos biolgicos y documentacin especifica - NO existe un procedimiento abreviado para el registro de biofrmacos;por lo tanto, no tienen un procedimiento normativo para el registro de medicamentos biolgicos similares. EMEA (Agencia Europea para Evaluacin de Productos Medicinales). Entidad avanzada en el establecimiento de estndares cientficos para aprobacin de este tipo de productos. Desde Octubre 2005 ha elaborado lineamientos sobre Productos medicinales Biolgicos similares. EMEA es muy estricta en sus guas para biosimilares y exige:

 Informacin completa sobre qumica, fabricacin y control de calidad. Extensos estudios de comparabilidad entre biosimilares y biofrmacos de referencia. Ensayos clnicos de extensin segn el producto (caso a caso). Investigacin clnica en cada nueva indicacin. Estudios clnicos que deben incluir diversas pruebas como la de inmunogenicidad y la de farmacovigilancia as como el compromiso postmarketing correspondiente. Algunos casos en latinoamrica En tres pases, se ha logrado un marco regulatorio diferenciado para el registro de Biofrmacos, as (2): Brasil: ANVISA (Agencia Nacional de Vigilancia Sanitaria) tiene una regulacin especfica para biolgicos que exige la presentacin de sus propios estudios clnicos. Venezuela: El INHRR (Instituto Nacional de Higiene Rafael Rangel), tiene una norma que regula la exigencia de ensayos clnicos para biolgicos/biotecnolgicos. Clasifica los productos en recombinantes y anticuerpos monoclonales. La norma hace nfasis en fabricacin y control. Chile: El ISP (El Instituto de Salud Pblica) recientemente ha regulado un sistema especial de registro de Biofrmacos que incluye ensayos clnicos de eficacia y seguridad asi como farmacovigilancia post marketing. Colombia: INVIMA (Instituto Nacional de Vigilancia de Medicamentos y Alimentos) no tiene una normativa especfica para registro de productos biolgicos, biotecnolgicos ni biosimilares; slo en casos excepcionales se han solicitado estudios clnicos propios con la molcula para aprobarla como biosimilar (eritropoyetina, inmunoglobulina, heparina, soma- totropina e insulina). Mxico: No existe una normatividad especfica para los productos biotecnolgicos. La industria farmacutica ha sugerido que en todos los casos se debera cumplir con pruebas clnicas para demostrar eficacia y seguridad en virtud que - debido a los estndares de produccin y/o fabricacin - no se pueden considerar los datos de prueba del producto original con el supuesto biosimilar. No obstante, se han otorgado registros de biogenricos sin existir una normativa especfica. En base a las experiencias anteriormente relatadas, se puede concluir que cualquier marco regulatorio para la aprobacin de biofrmacos debe:

Ser diferente de la regulacin que rige a los productos de sntesis qumica y sus equivalentes. Considerar el avanzado debate que se registra en Estados Unidos de Amrica, en la Unin E Regulatorias y de Armonizacin. Suspender el otorgamiento de registro sanitario a biosimilares mientras no se disponga de no OMS y otras agencias regulatorias conocidas por sus exigencias a nivel mundial. Tomar en cuenta la revisin de los registros ya otorgados. Si los productos estn en el mercado Conclusiones

Dado que el productor de un biosimilar no puede replicar con exactitud el proceso biolgico/biotecnolgico innovador y, porque las diferencias en estos procesos pueden resul producto como en sus efectos clnicos - la similaridad es ms difcil de establecer, por sus comp paracin con los productos obtenidos por sntesis. Los productos desarrollados como productos farma- cuticos biolgicos similares requieren un de calidad. La similitud no puede establecerse basndose slo en datos analticos. La complejidad de los que, hay factores que afectan la eficacia y/o seguridad los cuales no pueden ser detectados ana Es esencial una rigurosa prueba de eficacia y seguridad - con estudios clnicos diseados adecu condiciones definidas - No se pueden inferir de datos derivados del mercado. Es necesario que las entidades encargadas de la vigilancia sanitaria a nivel mundial se pronunci registro y comercializacin de productos biol-gicos y, los llamados biosimilares dando las d caso para evitar confusiones innecesarias que pongan en riesgo la salud de los pacientes. Bibliografa
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