ESCUELA SUPERIOR POLITECNICA DE CHIMBORAZO UNIDAD DE NIVELACION

CICLO DE NIVELACIN: SEPTIEMBRE 2012 / FEBRERO 2013

MODULO DE INTRUDUCCIN DE LA COMUNIDAD CIENTIFICA

1.- DATOS INFORMATIVOS - NOMBRES Y APELLIDOS: - DIRECCIN DOMICILIARIA: - CELULAR: - MAIL: - FECHA: Oswaldo Ortega Riobamba 0985349130 Jaimito-oswal16@hotmail.com 11/09/2012

Riobamba Ecuador

PROYECTO DE AULA 1. INTRUDUCCION

El presente proyecto se realiza con el objetivo de darle una mayor compresin y poder profundizar ms los conocimientos que hemos adquirido cada uno de nosotros y nos servir de ayuda para poder tomar una decisin. El siguiente trabajo enfoca al aprendizaje y un buen entendimiento de sntesis as como analizar aplicando los temas de comprensin lectora enmarcado el conocimiento dentro de una temtica en general por lo tanto hemos realizado este trabajo.

2. JUSTIFICACIN Este proyecto se ha elaborado con el objetivo de mejorar la capacidad de sntesis mediante mtodos investigativos con el fin de poder llegar a un buen entendimiento del tema tratado y para poder enterar de lo que el autor ha expresado. En este sentido que los estudiantes conozcan el problema y los antecedentes del tema que se va explicar en donde nos permite conocer los cambios que se dan en la misma y poder reconocer la importancia de una investigacin realizada que permite a los estudiantes dar una respuesta del tema que se pudo realizar.

3. OBJETIVOS Realizar una sntesis de un artculo cientfico denominado la contaminacin en el suelo con el derrame de petrleo en las plantas especies indicadoras de toxicidad por hidrocarburos de petrleo en el suelo

4. DESARROLO

TITULO Crotalariaincana L. y Leucaena leucocephala Lam. (Leguminosae): especies indicadoras de toxicidad por hidrocarburos de petrleo en el suelo RESUMEN Con este estudio se pudo evaluar los efectos txicos que se producan en el suelo gleysol molico contaminando con el petrleo crudo en las plantas de dos especies leguminosas en donde ha afectado a muchos pases del mundo para ello se genero un impacto fitotxico que tiene cinco parmetros atreves del ndice para poder examinar las variables altura, longitud y radcula. Los bioensayos se realizaron bajo un diseo completamente al azar con condiciones semicontroladas para evaluar la sensibilidad de las plantas Crotalaria incana. y Leucaena leucocephala a diferencia de hidrocarburos totales de petrleo se observo efectos altamente significativos al aumentar la concentracin HTP en donde ambas especies mostraron una disminucin significativa en la materia. INTRODUCCIN Las industrias de petrleo en Mxico han tenido un impacto negativo en los recursos naturales en donde han sido afectados extensas zonas por los derrames que han ocurrido durante la conduccin y transporte del petrleo. En donde los efectos negativos aumento debido al mal uso de los contaminantes causado por precipitaciones de regiones tropicales. Los estudios sobre la contaminacin se pudieron realizar de dos maneras que son: mediante anlisis qumico o por la evaluacin de las plantas vivos que cresen en los suelos contaminados sobre los organismos tambin se realizo las pruebas de toxicidad en la plntula para poder obtener la respuesta fisiolgica a las diferentes concentraciones de Hidrocarburos total de petrleo. El objetivo de este estudio es desarrollar y evaluar un ndice que permita establecer parmetros de referencias estadsticamente confiables para determinar el impacto fitotxico que genera los hidrocarburos de contaminantes del suelo. MATERIALES Y MTODOS El diseo estadstico empleado para poder establecer los bioensayos se empleo el azar que es el (DCA) con tres repeticiones y dos leguminosas Leucaenaleucocephala Lam., y Crotalariaincana L. Estas fueron seleccionadas por ser especies que crecen silvestres en reas contaminadas con petrleo; la primera presenta tolerancia, mientras que la segunda muestra sensibilidad a altas concentraciones de petrleo crudo. El suelo empleado en los bioensayos comienza (FAO 1998) que fue colectado en el ejido Arroyo Hondo Santa Teresa, municipio de Crdenas, Tabasco. Se determin el contenido de HTP en las muestras, 1 encontrando un valor de 150 mgkg de peso seco; segn la NOM138SEMARNAT/SS2003 este suelo se considera no contaminado (SEMARNAT 2005).Los estudios de investigacin se realizo en el medio ambiente donde se encuentras las plantas contaminantes Por lo anterior, con L.leucocephala se evaluaron seis tratamientos a altas concentraciones, mientras que con C.incana se evaluaron siete tratamientos a bajas concentraciones (RiveraCruz et al. 2005). En cada bioensayo se utiliz el Protocolo 208 de la Organizacin para la Cooperacin y Desarrollo Econmico (OECD 1984) modificado (RiveraCruz y TrujilloNarcia 2004), que permite identificar en forma sencilla los sntomas de estrs en la planta (Wang y Freemark 1995). Los anlisis de estas dos plantas contaminantes se obtuvieron con los estudios realizados emplendo deferentes mtodos en el suelo del medio ambiente a estas plantas contaminantes se pudo analizar que puede afectar al ser humano. RESULTADOS El anlisis de varianza en las plntulas de L. leucocephala y c. incanaxpuestas a diferentes concentraciones del petrleo mostraron diferencias estadsticas altamente significativa en ambas especies incrementaron al aumentar la concentracin de petrleo en donde significa el crecimiento y desarrollo excepcional. El anlisis de varianza fue acumulada en plntulas de L. leucocephala en donde mostr diferencias estadsticas entre tratamientos (P 0.01). La mayor emergencia se concentr en los primeros cinco das, en los tratamientos con 1 concentraciones de hasta 40 000 mgkg de HTP, pero se observ un retraso de cinco das en la emergencia de plntulas 1 expuestas a 60 000 y 80 000 mgkg . Se encontr una disminucin altamente significativa en la emergencia acumulada con esta ltima concentracin durante los 30 das de exposicin al petrleo.

DISCUSIN Los resultados que obtuvo en este trabajo fue que tena una buena respuesta en el mbito de la naturaleza que pudo disminuir en una cantidad la contaminacin con el derrame de petrleo en el suelo y as se pudo ver que el trabajo investigado se puesto en prctica. Tambin se dio un buen resultado en las plantas que estaban contaminando el suelo. Tambin esta investigacin realizada conside con los deferentes autores que hablan de lo mismo sobre la contaminacin en el suelo con el mal uso del petrleo. Por otra parte, se encontr que la emergencia de ambas especies se retras cinco das con altas Las plntulas de C. incana fueron ms sensibles a los HTP que aquellas de L. leucocephala, a pesar de que las primeras fueron expuestas a menores concentraciones. Esto indica que esta ltima especie presenta una tolerancia espontnea al petrleo en el suelo. Por otra parte, las semillas de L. leucocephala son de mayor tamao que las de C. incana y numerosos estudios muestran que existe un efecto protector relacionado al tamao de la semilla Estos resultados concuerdan con los resultados de otros autores que son Chaneau (1997. Quiones (2003) Kapustka (1998) Rentz (2003). Reynoso (2008), (Quiones 2003), Ogboghodo ( 2004) Agbogidi (2007). Vzquez (2010)En este estudio se evaluaron los efectos txicos que produce un suelo Gleysol mlico contaminado con petrleo crudo, sobre plntulas de dos especies de leguminosas Ceballos (2005)Respecto a los testigos, ambas especies mostraron un retraso de cinco das en la emergencia de las plntulas cuando se expusieron a altas concentraciones de HTP. Una disminucin significativa en la acumulacin de materia seca (MS) con concentraciones superiores a 20 000 mgkg-1 de HTP se observ en ambas especies Prez(2005) Se pretende estimar el efecto de un eventual cambio climtico y edfico sobre el patrn de almacenamiento de carbohidratos en plntulas de un ao de tres especies leosas mediterrneas del gnero Quercus. CONCLUSIONES Esto podra reducir la presencia de las especies en ecosistemas cuyo suelo sea contaminado con petrleo crudo Los resultados confirman que el dao principal ocurre sobre la radcula al entrar en contacto directo con el petrleo, lo cual afecta el posterior desarrollo de la planta. El ndice de impacto fitotxico generado en este estudio es til para integrar y ponderar los daos causados en plantas que crecen en presencia de petrleo en el suelo; proporciona el valor global de los efectos acumulados sobre los organismos estudiados. BIBLIOGRAFA Carreras M.E, Pascualides A.L. y Planchuelo A.M. (2001). Comportamiento germinativo de las semillas deCrotalariaincana (Leguminosae) en relacin a la permeabilidad de la cubierta seminal. Agriscientia 18, 4550. [ Links ] RiveraCruz, M.C. y TrujilloNarcia A. (2004). Estudio de toxicidad vegetal en suelos contaminados con petrleos nuevo e intemperizado. Interciencia 29, 369376. [ Links ] RiveraCruz M.C., TrujilloNarca A., Miranda C.M.A., Maldonado C.E. (2005). Evaluacin toxicolgica de suelos contaminados con petrleos nuevo e intemperizado mediante ensayos con leguminosas. Interciencia 30, 326331. [ Links ] Ross C.W. y Salisbury F.B. (2000). Fisiologa de las plantas 3: desarrollo de las plantas y fisiologa ambiental.Thomson Paraninfo, Madrid, 458 p. [ Links ] vzquez (2010) En este estudio se evaluaron los efectos txicos que produce un suelo Gleysolmlico contaminado con petrleo crudo, sobre plntulas de dos especies de leguminosas Ceballos (2005) Respecto a los testigos, ambas especies mostraron un retraso de cinco das en la emergencia de las plntulas cuando se expusieron a altas concentraciones de HTP. Prez (2005) Se pretende estimar el efecto de un eventual cambio climtico y edfico sobre el patrn de almacenamiento de carbohidratos en plntulas de un ao de tres especies leosas mediterrneas del gnero Quercus.

5. CONCLUSIONES Con toda esta informacin proporcionada pudimos aprender lo fundamental que es en el proceso de formacin de cada estudiante de darle un anlisis a una serie de datos proporcionada. Con el siguiente trabajo podemos desarrollar nuestras ideas y pensamientos y habilidades en el entendimiento de una buena sntesis, la enseanza que hemos aprendido servir para nuestro porvenir en el futuro y poder poner en prctica.

6. RECOMENDACIONES Se sugiere que se realicen con ms frecuencia convivencias, ya que les ayudo a poner en orden las ideas y darse cuenta que este tema en la universidad es muy til, porque les ayuda a los estudiantes. Que para poder realizar una buena sntesis debemos tener muy en claro el tema para poder dar paso a la elaboracin de un nuevo proyecto. Como hemos visto hasta este momento, el desarrollo de proyectos es una tarea compleja que requiere el empleo de unos buenos conocimiento metodolgico.

7.

ANEXOS

Revista internacional de contaminacin ambiental versin impresa ISSN 0188-4999 Crotalariaincana L. y Leucaenaleucocephala Lam. hidrocarburos de petrleo en el suelo (Leguminosae): especies indicadoras de toxicidad por

Dinora VZQUEZLUNA, Mepivoseth CASTELNESTRADA, Mara del C. RIVERACRUZ, ngel I. ORTIZCEBALLOS y Francisco IZQUIERDO R. RESUMEN En este estudio se evaluaron los efectos txicos que produce un suelo Gleysolmlico contaminado con petrleo crudo, sobre plntulas de dos especies de leguminosas. Para ello se gener un ndice de impacto fitotxico (IIF) que integra cinco parmetros, medidos a travs de ndices relativos de impacto (IRIF (x)) para las variables emergencia, altura, longitud radicular, biomasa area y biomasa radicular. Los bioensayos se realizaron bajo un diseo completamente al azar, con tres repeticiones, en condiciones semicontroladas, para evaluar la sensibilidad de Leucaena leucocephala y Crotalariaincana a diferentes concentraciones de HTP (hidrocarburos totales del petrleo). En general, se observaron efectos altamente significativos (P 0.01) al aumentar la concentracin de HTP en el sustrato. La emergencia de L. leucocephala fue 29 % menor con 80 000 1 1 mgkg de HTP, mientras queC. incana disminuy 30 % con 32 000 mgkg de HTP. Respecto a los testigos, ambas especies mostraron un retraso de cinco das en la emergencia de las plntulas cuando se expusieron a altas concentraciones de HTP. 1 Una disminucin significativa en la acumulacin de materia seca (MS) con concentraciones superiores a 20 000 mgkg de 1 HTP se observ en ambas especies. Los IIF respectivos mostraron una disminucin de 50 % con 80 000 y 25 000 mgkg de 1 HTP; sin embargo, L. leucocephala no present efectos significativos con 10 000 mgkg de HTP. Por su parte, la CE50 en L. 1 leucocephala,se presenta con 80 000 mgkg de HTP, mientras que en C. incana este parmetro se observa a partir de 25 000 1 mgkg de HTP. Palabras clave: CE50, contaminacin del suelo, ndice de fitotoxicidad, petrleo crudo. ABSTRACT This study assesses the toxic effects produced by a Gleysolmolic soil contaminated with crude oil on seedlings of two species of legumes. A phytotoxic impact index (IIF) was generated, which includes five parameters measured by relative rates of impact (IRIF(x)) for variables; emergency, height, root length, aboveground biomass and root biomass. Bioassays were conducted under a completely randomized design with three replications under semicontrolled conditions, to assess the sensitivity of Leucaenaleucocephala and Crotalaria incana at different concentrations of HTP (total petroleum hydrocarbons). Effects were highly significant (P 0.01) with increasing concentrations of HTP in substrate. The emergence of L. leucocephala was 29 % 1 1 lower with 80 000 mgkg HTP, while C. incana decreased 30 % with 32 000 mgkg HTP respect to control. Both species showed a fiveday delay in the emergence of seedlings when exposed to high levels of HTP. A significant decrease in the 1 accumulation of dry matter (DM) at concentrations above 20 000 mgkg HTP was observed in both species. The respective IIF 1 1 declined of 50 % with 80 000 and 25 000 mgkg TPH, but L. leucocephala had no significant effect with 10 000 mgkg TPH. 1 Finally, the EC50 in L. leucocephala, is presented with 80 000 mgkg TPH whereas in C. incana this parameter is noted from 25 1 000 mgkg TPH. Key words: EC50, crude oil, phytotoxicity index, soil pollution, total petroleum hydrocarbons. INTRODUCCIN La industria del petrleo en Mxico ha tenido un impacto negativo sobre los recursos naturales. En el sureste del pas extensas zonas han sido afectadas por derrames que ocurren durante la extraccin, conduccin y transporte del petrleo (Rivera Cruz et al. 2005). Los efectos negativos aumentan debido al mal estado de los ductos y a la dispersin de los contaminantes (Vega et al. 2009) causados por las abundantes precipitaciones caractersticas de regiones tropicales (RiveraCruz y Trujillo Narcia 2004). Para entender el efecto de los contaminantes del petrleo sobre los suelos es necesario conocer la relacin que existe entre la cantidad, composicin y grado de afectacin sobre los organismos vivos (AlMutairi et al. 2008). Los estudios de contaminacin de suelos se pueden realizar por dos vas: mediante anlisis qumico de los suelos (Kisic et al. 2009), o bien por la evaluacin de la respuesta in vivo de plantas que crecen en suelos contaminados (Shahriari et al. 2007), lo cual permite evaluar los efectos del contaminante sobre los organismos (Porta et al. 1999). El ltimo es el mtodo empleado en este estudio, por lo que se hacen pruebas de toxicidad en plntulas para medir la respuesta fisiolgica a diferentes concentraciones de HTP (hidrocarburos totales del petrleo) (Chaneau et al. 2003).

La fitotoxicidad estudia los cambios perjudiciales en el funcionamiento, aspecto y crecimiento de las plantas en respuesta a una sustancia dada (OECD 1984). Por ello, en el presente trabajo se hicieron pruebas de toxicidad mediante bioensayos ex situ para determinar el efecto fitotxico en plntulas de Leucaenaleucocephala yCrotalariaincana expuestas a suelo contaminado con diferentes concentraciones de petrleo crudo. El objetivo de este estudio es desarrollar y evaluar un ndice que permita establecer parmetros de referencia estadsticamente confiables para determinar el impacto fitotxico que generan los hidrocarburos contaminantes del suelo sobre la emergencia, longitud radicular, altura y acumulacin de materia seca (MS) en especies leguminosas. MATERIALES Y MTODOS El suelo empleado en los bioensayos corresponde a un Gleysolmlico (FAO 1998) que fue colectado en el ejido Arroyo Hondo Santa Teresa, municipio de Crdenas, Tabasco. Se determin el contenido de HTP en las muestras, encontrando un valor de 1 150 mgkg de peso seco; segn la NOM138SEMARNAT/SS2003 este suelo se considera no contaminado (SEMARNAT 2005). Para establecer los bioensayos se emple un diseo completamente al azar (DCA) con tres repeticiones y dos leguminosas Leucaenaleucocephala Lam., y Crotalariaincana L. Estas fueron seleccionadas por ser especies que crecen silvestres en reas contaminadas con petrleo; la primera presenta tolerancia, mientras que la segunda muestra sensibilidad a altas concentraciones de petrleo crudo (RiveraCruz y TrujilloNarca 2004, RiveraCruz et al. 2005). Por lo anterior, con L.leucocephala se evaluaron seis tratamientos a altas concentraciones, mientras que con C.incana se evaluaron siete tratamientos a bajas concentraciones (RiveraCruz et al. 2005). En cada bioensayo se utiliz el Protocolo 208 de la Organizacin para la Cooperacin y Desarrollo Econmico (OECD 1984) modificado (RiveraCruz y TrujilloNarcia 2004), que permite identificar en forma sencilla los sntomas de estrs en la planta (Wang y Freemark 1995). El suelo fue secado a la sombra hasta 13 % de humedad, se moli y tamiz a 5.0 mm. Los sustratos para los ensayos se 1 prepararon a partir de suelo testigo (150 mgkg HTP) que se mezcl con diferentes cantidades de petrleo crudo ligero y se homogeneiz, sin agregar solvente alguno; las concentraciones a probar se calcularon en base seca 1 (p/p). Leucaenaleucocephala se evalu con 150 (testigo), 10 000, 20 000, 40 000, 60 000 y 80 000 mgkg de HTP. 1 Para Crotalariaincana se evaluaron concentraciones de 150 (testigo), 1700, 3500, 7000, 12 000, 25 000 y 32 000 mgkg de HTP. Despus de homogenizar las mezclas se les adicion agua destilada hasta llevarlas a 2830 % de humedad; se incubaron 24 horas y posteriormente se sembraron 50 semillas de C.incana y 25 de L. leucocephala por repeticin, respectivamente, en contenedores de vidrio de 32 x 22 x 5.5 cm de profundidad. La cantidad de semillas sembradas por especie vegetal, se calcul segn el tamao de la semilla (Leishman et al. 2000), la viabilidad de la especie (Carreras et al. 2001, Bosco 2009) y el rea del contenedor (RiveraCruz y TrujilloNarcia 2004). Las semillas fueron escarificadas previamente para eliminar los tegumentos impermeables que constituyen una barrera para la germinacin (Antoniolli et al. 1993, Carreras et al. 2001). La escarificacin consisti en sumergir las semillas en cido sulfrico durante 15 minutos y posteriores lavados sucesivos con agua corriente hasta eliminar todos los residuos de cido (Huachin y Carvajal 1998). Se realizaron pruebas de germinacin para determinar la viabilidad inicial de las semillas, encontrando valores estndar de viabilidad en ambos lotes (Carreras et al. 2001, Bosco 2009). Durante los ensayos se proporcion agua para mantener la humedad del sustrato a capacidad de campo; no se aportaron nutrimentos N, P y K, para evitar interferencia sobre el crecimiento de los ejemplares. Las variables observadas fueron emergencia, emergencia acumulada, altura, longitud radicular y acumulacin de MS area y radicular. La primera se midi cada cinco das, mientras que las siguientes variables se evaluaron 30 das despus de la siembra; al finalizar dicho perodo se extrajeron las plntulas de los contenedores y se elimin el exceso de suelo, se separ la parte area de la radicular, se colocaron en bolsas de papel etiquetadas y se secaron en estufa (75 C, 48 h). El material se pes en una balanza analtica para obtener los valores de MS. La comparacin mltiple de medias se realiz mediante la prueba de Tukey (a = 0.05). Los resultados numricos fueron analizados mediante el software SAS (1999) versin 9.1, utilizando el procedimiento PROC GLM. El ndice relativo de impacto fisiolgico (IRIF) propuesto, se calcul para cada variable (x) en ambas especies bajo estudio. Para medir el efecto de tratamientos, los IRIF(x) de cada variable fueron comparados con la correspondiente del testigo (150 1 mg.kg de HTP). El IRIF(x) se obtuvo al restar una unidad al ndice de tolerancia (Porta et al. 1999), ya que ste permite evaluar la respuesta biolgica en un suelo contaminado. El ndice de impacto fitotxico (IIF) se obtuvo de la suma de todos los IRIF(x), divididos entre el total de las variables estudiadas, cuyo valor representa la respuesta de la planta al contaminante en funcin del total de las variables fisiolgicas estudiadas. Para ello se utilizaron las ecuaciones siguientes:

donde: IRIF(x): ndice relativo de impacto fisiolgico para la variable x IIF: ndice de impacto fitotxico Tp: concentracin de HTP Tt: testigo R1: repeticin 1n n: nmero de variables Los resultados se interpretaron con los siguientes criterios: si el IRIF (x) es igual a cero, los HTP no afectan la variable en ningn sentido; si el IRIF(x) es menor a cero, los HTP aumentan la expresin de la variable; si el IRIF(x)es mayor a cero, los HTP producen efectos negativos sobre la variable. Se determin adems la CE50 (concentracinefecto) que produce efectos observables en 50 % de la muestra, y la CNOE (concentracin efecto no observable), que es la mxima concentracin que puede existir en el medio sin que se observen efectos despus de 30 das de exposicin al petrleo. RESULTADOS El anlisis de varianza de la emergencia acumulada en plntulas de L. leucocephala mostr diferencias estadsticas altamente significativas entre tratamientos (P 0.01). La mayor emergencia se concentr en los primeros cinco das, en los tratamientos 1 con concentraciones de hasta 40 000 mgkg de HTP, pero se observ un retraso de cinco das en la emergencia de plntulas 1 expuestas a 60 000 y 80 000 mgkg . Se encontr una disminucin altamente significativa en la emergencia acumulada con esta ltima concentracin durante los 30 das de exposicin al petrleo (Fig. 1). Lo anterior coincide con lo encontrado mediante el ndice relativo de impacto fisiolgico para la variable emergencia acumulada (IRIFe), el cual mostr ser 30 % menor respecto al testigo al final de la prueba.

El anlisis de varianza de la emergencia acumulada de plntulas de C.incana, mostr diferencias altamente significativas entre tratamientos (P 0.01). La mayor emergencia acumulada durante 30 das de exposicin al petrleo se present con 1700 1 1 mgkg , en tanto la menor emergencia se registr con 32 000 mgkg (Fig. 2). El IRIFe disminuy 30 % con respecto al testigo.

IRIF para las variables altura, longitud radicular y acumulacin de MS El anlisis de varianza del IRIF para las variables altura, longitud radicular, biomasa area, biomasa radicular y biomasa total de plntulas de L. leucocephala y C. incana mostr diferencias altamente significativas (P 0.01) entre los tratamientos, durante el periodo de exposicin al petrleo. Tanto la altura como longitud radicular de L. leucocephala disminuyeron a 1 mayores dosis de petrleo. El tratamiento con 80 000 mgkg de HTP mostr el mayor IRIF sobre la altura y longitud radicular (Fig. 3), con una disminucin respecto al testigo de 41 y 72 %, respectivamente. La mayor cantidad de biomasa area y 1 radicular se encontr en el testigo y con 10 000 mgkg de HTP, lo que indica que esa concentracin no es txica para esta 1 especie. La menor acumulacin de MS se encontr en suelos con concentraciones de 20 000 a 80 000 mgkg de HTP, donde se encontraron los mayores IRIF (Fig. 3). Este comportamiento se asoci con una produccin 45 % menor de hojas; como consecuencia, el crecimiento de tallos y races fue afectado de manera sustancial, lo que redujo la biomasa radicular en 53 % respecto al testigo.

En el bioensayo con C. incana, el anlisis de varianza de los IRIF para las variables altura, longitud radicular y acumulacin de MS, mostr efectos negativos con el incremento en la concentracin de petrleo (Fig. 4). La altura y longitud radicular 1 mostraron menor magnitud en concentraciones de 12 000 a 32 000 mgkg de HTP, mientras que la mayor acumulacin de MS 1 area y radicular se encontr con concentraciones de 1700 a 7000 mgkg de HTP. Esta diferencia se explica porque los tallos de C. incana con bajas concentraciones presentaron 20 % mayor longituddimetro y longitud de la radcula que en 1 concentraciones mayores a 12,000 mgkg de HTP.

ndice de impacto fitotxico El anlisis de varianza del IIF en plntulas de L. leucocephala y C. incana expuestas a diferentes concentraciones de petrleo mostraron diferencias estadsticas altamente significativas (P 0.01). En ambas especies, losIIF se incrementaron al aumentar la concentracin de petrleo en el sustrato, lo que tuvo repercusiones significativas sobre el crecimiento y desarrollo (Cuadro I). 1 Excepcionalmente, en L. leucocephala con 10 000 mgkg de HTP se encontraron efectos negativos de slo 7 %.

La CE50 para L. leucocephala se observ en suelo con 80 000 mgkg de HTP, mientras que para C. incana este parmetro fue 1 1 obtenido a partir de 25 000 mgkg de HTP. En plntulas de L. leucocephala se encontr la CNOE con 10 000 mgkg , ya que su efecto fue similar al testigo; en C. incana no se encontr una CNOE durante un periodo de 30 das de exposicin al petrleo, lo que muestra una sensibilidad de la especie a concentraciones altas de petrleo (Fig. 5).

DISCUSIN Los resultados de este estudio muestran efectos evidentes sobre la altura y la longitud de la raz, lo que condujo a una menor acumulacin de biomasa en ambas especies. Estos resultados son similares a los encontrados por Chaneau et al. (1997, 2003), Issoufi et al. (2006) y ReynosoCuevas et al. (2008). Los efectos provocados por exposiciones agudas y generalizadas pueden ocasionar problemas de gran magnitud y desequilibrios en el ecosistema (Labud et al. 2007). Durante el desarrollo metodolgico de los bioensayos, la escarificacin de las semillas fue una estrategia adecuada: al retirar los tegumentos impermeables se elimin una barrera fsica para la germinacin (Antoniolli et al. 1993, Carreras et al. 2001), lo que permite concluir que las respuestas observadas fueron resultado de las concentraciones de HTP en el sustrato. Por otra parte, se encontr que la emergencia de ambas especies se retras cinco das con altas concentraciones de HTP. Esto puede deberse a que la capa hidrofbica formada por el petrleo disminuye la retencin de agua hasta en 50 % respecto a suelos no contaminados (Li et al. 1997, Sawatsky y Li 1997) y afecta la primera etapa de la germinacin (Ross y Salisbury 2000), que consiste en la hidratacin de protenas y otros coloides e inicia la activacin de las enzimas que aumentan el metabolismo, la elongacin de las clulas de la radcula y la emergencia de la plntula. Resultados similares fueron reportados 1 por Quiones et al. (2003) en dos variedades de maz expuestas en suelo con 35 000 mgkg de petrleo. Otros autores tambin encontraron disminucin e inhibicin de la germinacin en diferentes especies (Dorn y Salanitro 2000, Chaneau et al. 2003, Besalatpour et al. 2008,Kisic et al. 2009). Las plntulas de C. incana fueron ms sensibles a los HTP que aquellas de L. leucocephala, a pesar de que las primeras fueron expuestas a menores concentraciones. Esto indica que esta ltima especie presenta una tolerancia espontnea al petrleo en el suelo. Por otra parte, las semillas de L. leucocephala son de mayor tamao que las de C. incana y numerosos estudios muestran que existe un efecto protector relacionado al tamao de la semilla (Dolan 1984). Leishman et al. (2000) mencionan que el tamao de la semilla es una caracterstica evolutiva. Algunos estudios sealan que la germinacin puede ser afectada por las fracciones voltiles de los hidrocarburos, las cuales penetran y daan el embrin de las semillas, disminuyendo la germinacin hasta en 70 % (Labud et al. 2007), lo que finalmente afecta la emergencia (Hou et al. 1999). Al respecto, Chaneau et al. (1997) afirman que la fraccin ligera del petrleo (naftas) es veinte veces ms txica que la fraccin pesada. Sin embargo, estudios realizados por RiveraCruz y TrujilloNarcia (2004) mencionan que Mimosa pigra y dos especies de Cyperus aumentaron la germinacin en 200 % por efecto del petrleo en el suelo. Bossert y Bartha (1985) y Salanitro et al. (1997) sealan que ciertas fracciones del petrleo pueden funcionar como fitohormonas promotoras de la germinacin.

La fitotoxicidad observada en plntulas de L.leucocephala y C. incana increment con las concentraciones de petrleo en el sustrato; sin embargo, cada especie mostr diferente sensibilidad. Este efecto puede deberse a que las plntulas de L. leucocephala tienen cotiledones ms grandes y, por tanto, mayor cantidad de reservas que le permiten a la plntula mantenerse independiente de su medio durante un periodo mayor. Al respecto, Hampton y Coolbear (1990) mencionan que las diferencias en el vigor de las plntulas est asociado principalmente a la cantidad de reservas y eficiencia en el metabolismo, lo que podra representar una condicin ventajosa para las especies con cotiledones de mayor tamao. Por otra parte, los cotiledones de las leguminosas tienen una reserva importante de protenas que se metaboliza durante el desarrollo de las plntulas (Chrispeels et al. 1976) para proveer al organismo en crecimiento de aminocidos y energa antes del inicio de la fotosntesis; si se presentan alteraciones en este proceso, el crecimiento posterior de la plntula ser afectado. Las dos especies en estudio evidenciaron disminucin de la altura y longitud radicular de las plntulas por el efecto del petrleo en el suelo. Estos resultados concuerdan con los obtenidos por Chaneau et al. (1997), quienes explican que la inhibicin del crecimiento de las plantas muestra relacin directa con el aumento de la concentracin de hidrocarburos. Quiones et al. (2003) afirman que concentraciones altas de hidrocarburos impiden la absorcin de agua y nutrimentos debido a la formacin de una capa hidrofbica sobre las races. Los resultados obtenidos confirman que el mayor dao ocurre sobre la biomasa radicular debido al contacto con el petrleo. Kapustka y Reporter (1998) encontraron que concentraciones altas de hidrocarburos ocasionan daos severos e inhiben el rebrote de meristemos, disminuyen la elongacin radicular y el crecimiento e impiden la difusin del oxgeno celular debido a las condiciones anxicas del suelo (Rentz et al. 2003). Lo anterior coincide con ReynosoCuevas et al. (2008), quienes identificaron disminucin de la longitud radicular a medida que aumenta la concentracin del hidrocarburo. Este efecto puede atribuirse a que el petrleo forma una capa que limita la absorcin de agua y nutrimentos por la raz (Quiones et al. 2003), lo cual puede afectar el posterior desarrollo y fructificacin. Al respecto, estudios de fructificacin en maz muestran disminucin de la viabilidad de la semilla (Ogboghodo et al. 2004) y reduccin de la composicin qumica (carbohidratos y protenas) de las semillas (Agbogidi et al. 2007). CONCLUSIONES Los resultados obtenidos en los ensayos con L. leucocephala y C. incana muestran que los HTP en el suelo desencadenan varios daos fisiolgicos sobre las plantas expuestas a altas concentraciones, entre ellos el retraso y disminucin de las tasas de emergencia. Esto podra reducir la presencia de las especies en ecosistemas cuyo suelo sea contaminado con petrleo crudo. El ndice relativo de impacto fisiolgico (IRIF) permite medir los efectos de los tratamientos sobre las variables altura, longitud de la raz y acumulacin de MS en plntulas, y compararlos con su variable correspondiente en el testigo. Los IRIF indican que las dos especies estudiadas disminuyeron de manera significativa su produccin de MS en 1 concentraciones mayores a 20 000 mgkg de HTP, lo cual se expres en menor produccin de hojas, tallos y biomasa radicular respecto al testigo. Los resultados confirman que el dao principal ocurre sobre la radcula al entrar en contacto directo con el petrleo, lo cual afecta el posterior desarrollo de la planta. Los IIF permitieron determinar que la CE50 en L. leucocephala,se presenta con 80 000 mgkg 1 incana este parmetro fue observado a partir de 25 000 mgkg de HTP.
1

de HTP, mientras que en C.

Los IIF permitieron determinar la CNEO en plntulas de L. leucocephala, quese observ con 10 000 mgkg y representa una alta tolerancia a los HTP. En C. incana no se observ la CNEO durante los 30 das que duraron los ensayos, lo que muestra alta sensibilidad de la especie. El ndice de impacto fitotxico (IIF) generado en este estudio es til para integrar y ponderar los daos causados en plantas que crecen en presencia de petrleo en el suelo; proporciona el valor global de los efectos acumulados sobre los organismos estudiados y los expresa como porcentaje de dao respecto a un testigo sin dao. El IIF representa de manera numrica el impacto que producen los hidrocarburos sobre el crecimiento de las plntulas, con confiabilidad estadstica y alta correspondencia con los efectos observados visualmente. AGRADECIMIENTOS El primer autor agradece al CONACyT por la beca otorgada para realizar los estudios de posgrado, a la Dra. Luz del Carmen Lagunes Espinosa por su apoyo en el Comit Acadmico del Campus Tabasco y un agradecimiento especial a la Dra. Eustolia Garca Lpez y Carlos Almeida por su ayuda para la identificacin taxonmica de las especies utilizadas en el presente trabajo.

BIBLIOGRAFA Carreras M.E, Pascualides A.L. y Planchuelo A.M. (2001). Comportamiento germinativo de las semillas deCrotalariaincana L. (Leguminosae) en relacin a la permeabilidad de la cubierta seminal. Agriscientia 18, 4550. [ Links ] RiveraCruz, M.C. y TrujilloNarcia A. (2004). Estudio de toxicidad vegetal en suelos contaminados con petrleos nuevo e intemperizado. Interciencia 29, 369376. [ Links ] RiveraCruz M.C., TrujilloNarca A., Miranda C.M.A., Maldonado C.E. (2005). Evaluacin toxicolgica de suelos contaminados con petrleos nuevo e intemperizado mediante ensayos con leguminosas. Interciencia 30, 326331. [ Links ] Ross C.W. y Salisbury F.B. (2000). Fisiologa de las plantas 3: desarrollo de las plantas y fisiologa ambiental.Thomson Paraninfo, Madrid, 458 p. [ Links ] SEMARNAT (2005). Norma Oficial Mexicana NOM138SEMARNAT/SS2003. Lmites mximos permisibles de hidrocarburos en suelos y las especificaciones para su caracterizacin y remediacin. Secretara del Medio Ambiente y Recursos Naturales. Diario Oficial de la Federacin. 29 de marzo de 2005. [ Links ] VZQUEZ (2010)En este estudio se evaluaron los efectos txicos que produce un suelo Gleysol mlico contaminado con petrleo crudo, sobre plntulas de dos especies de leguminosas CEBALLOS (2005)Respecto a los testigos, ambas especies mostraron un retraso de cinco das en la emergencia de las plntulas cuando se expusieron a altas concentraciones de HTP. Una disminucin significativa en la acumulacin de materia seca (MS) con concentraciones superiores a 20 000 mgkg-1 de HTP se observ en ambas especies Prez(2005) Se pretende estimar el efecto de un eventual cambio climtico y edfico sobre el patrn de almacenamiento de carbohidratos en plntulas de un ao de tres especies leosas mediterrneas del gnero Quercus.