TEMA 1: GERMINACIN DE SEMILLAS

La germinacin de las semillas se define como un proceso metablico que consiste en la reanudacin de crecimiento del embrin y desarrollo de las estructuras esenciales para el desarrollo de la planta. Al ser un proceso metablico, en l intervienen enzimas e isoenzimas, las cuales trabajan en disolucin, ya sea en el laboratorio artificialmente, en el citoplasma celular o en el medio acuoso de orgnulos concretos. El proceso de formacin de la semilla consta de tres fases principales: formacin del embrin, fase de llenado de sustancias de reserva y fase de maduracin y deshidratacin. Una vez el embrin ha terminado su crecimiento y ha acumulado sustancias de reserva, comienza la fase de maduracin que consiste en una fuerte deshidratacin de la semilla. En la semilla deshidratada, las enzimas no pueden funcionar, y solo cuando sta se rehidrate podrn reiniciar su actividad metablica. Este perodo temporal en el que no hay actividad metablica en la semilla desprendida ni desarrollo embrionario, se denomina LETARGO o DIAPAUSA, de forma que la semilla no puede germinar, an cuando las condiciones externas son adecuadas. Diferenciamos esta definicin de Quiescencia, que es cuando la semilla no germina porque las condiciones externas no son favorables. Distinguimos dos formas de latencia: Latencia exgena: retraso en la germinacin debido a las propiedades fsico-qumicas de las cubiertas. Podemos referirnos a ella como latencia impuesta por las cubiertas. En este caso, el embrin es capaz de germinar si se asla. Los mecanismos que actan son: - Impermeabilidad al agua de la cubierta por presencia de cutcula o parnquima muy desarrollado. - Impermeabilidad al intercambio de gases de los tejidos que rodean al embrin, de forma que se impide la respiracin, frenando la germinacin. - Resistencia mecnica mediante un pericarpio duro, a veces incluso lignificado, como el de los piones, que el embrin no puede romper. - Presencia de inhibidores en las cubiertas, que son eliminados cuando deben mediante lixiviacin. Por ejemplo, el tomate presenta inhibidores del crecimiento para que la semilla no germine antes de caer al suelo. Latencia endgena: retraso que viene determinado por las caractersticas anatmicas, morfolgicas y fisiolgicas del propio embrin. Es decir, en este caso, aunque se asle el embrin, no crecer. Distinguimos: - Latencia morfolgica: se debe a que el embrin no se ha desarrollado totalmente (inmadurez embriolgica), como Ginkgo biloba. - Latencia fisiolgica. Para que la germinacin pueda darse, es necesaria a rehidratacin de la semilla o imbibicin, la cual reiniciar la actividad metablica del embrin: respiracin, sntesis proteica y movilizacin de reservas promovidas por las enzimas hidrolticas previamente sintetizadas. ste va a ir diferencindose, mientras se alimenta del endospermo o de los cotiledones.

MOVILIZACIN DE RESERVAS
En la naturaleza encontramos semillas ligeras y semillas pesadas. Las semillas ligeras, al caer al suelo, quedan en la superficie, teniendo acceso a la luz, y pudiendo desencadenar reacciones fotosintticas a partir de la sntesis de clorofila que les aportan energa para su desarrollo. Por el contrario las semillas pesadas se hunden en el suelo, siendo difcil que capten la luz solar, e incapaces de sintetizar clorofila ni fotosintetizar azcares y aa. Por ello, estas semillas necesitan unos cotiledones fuertes, llenos de moleculas que se degraden quimioergnicamente, no fotoergnicamente, porque no tienen acceso a la luz, y as pueda desarrollarse el embrin. Las semillas contienen cantidades relativamente importantes de reservas alimenticias, que mantienen el crecimiento y el desarrollo de la plntula hasta que sta es capaz de alimentarse por s misma. El porcentaje de estas reservas vara mucho de un tipo de semilla a otra, y pueden ser: hidratos de carbono, como almidn, lpidos y protenas.

EL ALMIDN
El almidn tal cual, como carbohidrato, no es asimilable para el embrin, pero tiene que hacerlo para obtener glucosa y ATP. Para esta hidrlisis necesitamos enzimas hidrolticas, denominadas AMILASAS, de las que diferenciamos dos tipos: las que rompen enlaces 1-4 y las que rompen enlaces 1-6 de las ramificaciones. La degradacin del almidn dar lugar en ltima instancia a glucosa, la cual se degrada por glicolisis a cido pirvico y despus a AcilCoA, que entra en el ciclo de Krebs y se obtiene ATP de l.

El almidn es un homopolisacrido de -D-glucosa. Puede ser: - Amilosa: estructura lineal de -D-glucosa unidas por enlaces -1,4 glicosdicos. - Amilopectina: amilosa ramificada, formada por enlaces -1,6 glicosdicos de dos glucosas. Se pierde el poder reductor en las glucosas doblemente enlazadas, y se mantiene nicamente en la glucosa inicial.

Se investig la movilizacin del almidn en los granos de trigo, cebada y similares, y sorprendentemente se encontraron dos tipos de amilasas 1-4: -amilasa: enzima exoamilasa (acta en el terminal de la molcula) que rompe las uniones -1,4. Si ataca a amilosa da lugar a todas las maltosas posibles, pero si ataca a la parte lineal de una amilopectina, esta no se llega a hidrolizar completamente. Es una enzima que est en el embrin mientras se encuentra en letargo, pero est inactiva: la -amilasa tiene grupos sulfhidrilo libres cuando est activa por donde se une al almidn, los cuales se unen a otros grupos sulfhidrilo de otra -amilasa dando lugar a puentes disulfuro, y quedando estas dos enzimas desactivadas. Con un agente reductor se rompen los puentes SS y se recupera la actividad enzimtica. -amilasa: enzima endoamilasa que rompe los enlaces 1,4 de la amilosa y amilopectina. El embrin tiene que ser sintetizada de novo, porque no est en cantidad suficiente como para llevar a cabo una hidrlisis eficiente del almidn. Esta sntesis se lleva a cabo gracias a las protenas de reserva, las cuales son degradadas por las proteasas.

Aa1-CO-NH-aa2+ H2Oaa1-COOH//H2N-aa2 Se realizaron diversos experimentos para comprobar el desarrollo de la -amilasa, mediante el uso de agua marcada con tritio, y se corrobor lo que se pensaba, que se sintetizaba de novo. La diferencia de por qu una enzima se encuentra innata y otra no, es porque la -amilasa es una protena constitutiva, de forma que su gen est funcional durante toda la vida de la clula; mientras que la -amilasa es una protena inducible, es decir que inicialmente su opern o promotor est bloqueado por un represor y por tanto el gen estructural no puede llevar a cabo su transcripcin. La activacin de la -amilasa no es igual de simple que la -amilasa, la cual nicamente necesita de la rehidratacin de la semilla para ponerse a funcionar, sino que necesitamos una molcula que desreprima su gen. Este compuesto es una hormona vegetal denominada GIBERELINA. Giberelinas Las giberelinas derivan del geranil-geranil pirofosfato, compuesto voltil de sealizacin de 20C. Del l tambin derivan las plastoquinonas, el fitol de las clorofilas y los carotenoides, y de estos ltimos deriva el cido abscsico que acta como hormona de envejecimiento.

Las giberelinas fueron descubiertas por cientficos americanos y britnicos en 1950, pero sus efectos de crecimiento se conocan de mucho antes gracias a los agricultores japoneses, a cuyas plantas de arroz les afectaba una enfermedad que las haca crecer demasiado, de forma que no soportaban su propio peso y se torcan, haciendo imposible el cultivo del arroz. Esta enfermedad la produce un hongo patgeno Gibberella fujikuroi, de la que deriv el nombre de estas hormonas. El embrin no tiene GGPP sino que tiene Kaureno, que consiste en la molcula GGPP ciclada. El Kaureno ha perdido todo el carcter hormonal y es inactivo porque posee 20C, y para que sea una molcula activa tiene que tener 19, como el GGPP, por lo que el Kaureno tiene que expulsar un C, pasando uno de sus hexanos a pentanos. Se ha demostrado que las giberelinas aumentan la produccin de la -amilasa a nivel de transcripcin, es decir, las giberelinas estimulan la expresin de los genes de estas enzimas. El proceso de activacin de la ruta de sntesis de la -amilasa es el siguiente: El embrin produce giberelinas que se unen a protenas de membrana receptoras de GA. Encontramos entonces una serie de intermediarios en la sealizacin de las GA: esa unin activa protenas G, que producen cGMP las cuales inducen la activacin de una PK, y as se abren los canales inicos, los cuales dejan pasar al ncleo un intermediario desrepesor del gen que lleva la informacin para la sntesis del factor de transcripcin de la GA. Una vez sintetizado, este se une a promotor del gen de la -amilasa, y se inicia su transcripcin y sntesis.

TRIGLICRIDOS
Hay otras semillas que no tienen almidn como sustancias de reserva, sino triglicridos o grasas. La degradacin de lpidos se realiza por betaoxidacin, de la que nicamente se obtiene distinto nmero de ATP segn la longitud de la cadena del cido graso. La reserva de carbohidratos no puede utilizarse en su totalidad para dar energa, porque necesita pentosas para unir sus bases y as formar nucletidos para sus RNAs. Esto ltimo lo han conseguido mediante el desarrollo de la gluconeognesis, una derivacin del ciclo de Krebs en el que parte de esa grasa puede convertirse en azcares. A partir de oxalacetato, comienza la ruta, fosforilndose y formando PEP, que finalmente se transformar en glucosa.