1

TRANSPORTE NO FLOEMA E PARTIO DE TRANSPORTE NO FLOEMA E PARTIO DE FOTOASSIMILATOS FOTOASSIMILATOS

Introduo O floema e xilema fazem parte dos tecidos vasculares das plantas. O floema responsvel pelo transporte de vrias substncias sintetizadas nas folhas a outros rgos da planta, bem como gua e alguns minerais. O floema tem funo importante no transporte de elementos minerais e da gua regies meristemticas, onde inexiste uma adequada corrente transpiratria para suprir via o xilema os minerais e a quantidade de gua necessria, ou mesmo devido ausncia de conexes destes tecidos com o xilema. Enquanto o transporte via xilema unidirecional, ocorrendo sempre da raiz para a parte area da planta, seguindo a corrente transpiratria, o transporte via floema, pode ocorrer bidirecionalmente, ou seja, da parte area para a raiz, e da raiz para a parte area. Contudo, para um mesmo tubo de seiva s existe uma direo. A direo do transporte no floema no definida com respeito fora gravitacional, mas sim pela localizao relativa das reas de produo e utilizao dos produtos da fotossntese. A translocao ocorre das regies de suprimento (fontes) para as regies de metabolismo ou armazenagem (drenos). As Fontes correspondem a qualquer rgo que exporta, tipicamente as folhas maduras que produzem fotoassimilados em excesso a seu prprio consumo. Outro exemplo de fonte um rgo j desenvolvido e que passa a efetuar exportao (ex: acares so mobilizados durante a brotao de certos tubrculos e razes e so redistribudos para os ramos em crescimento; o mesmo ocorre durante a germinao de sementes). Exemplos de drenos so as razes, tubrculos, frutos em desenvolvimento e folhas imaturas, que tm que importar carboidratos para um desenvolvimento normal. Um exemplo bastante ilustrativo o fato de que folhas novas, apesar de fotossintetizarem, no sintetizam carboidratos em quantidades suficientes para manter as suas atividades biossintticas, dependendo, por exemplo, da importao de sacarose produzida pelas folhas maduras, as quais, por sua vez, produzem fotoassimilados em quantidades superiores s suas necessidades, podendo ento exportar via floema o excedente de sua produo. A transio entre a fase dreno para a fase fonte, durante o desenvolvimento de uma folha, varia de espcie para espcie, mas normalmente ocorre quando a folha se encontra com uma rea foliar entre 25% a 40% da sua rea foliar mxima.

2 Anatomia do Floema A palavra floema vem da palavra grega phloios, a qual significa casca. Anatomicamente, no caule, o floema se localiza externamente ao xilema, estando ento mais prximo da casca do caule, razo pela qual foi atribudo esse nome a este tecido. O floema constitudo de clulas com placas crivadas (elementos do tubo crivados), que perderam o ncleo e o vacolo durante seu desenvolvimento. As clulas maduras tambm perdem os microfilamentos, microtbulos, aparelho de Golgi e ribossomas, e se mantm com paredes no lignificadas. Permanecem na clula um nmero reduzido de mitocndrias, plastdeos, e algum retculo endoplasmtico. Esta ausncia de muitas estruturas celulares, as quais esto presentes normalmente em uma clula, especializa o tubo seiva para o transporte a longa distncia de compostos sintetizados. Os elementos crivados so caracterizados pela rea crivada, que corresponde a pores da parede celular com poros, que interconectam clulas condutores vizinhas pelas suas extremidades, dando origem a uma seqncia longitudinal denominada tubo crivado, cujos poros formam canais abertos que permitem o transporte direto entre as clulas. As placas crivadas contm plasmodesmas engrossadas, rodeados por depsitos de calose (observe a fig. 2b, mostrando a bordadura de calose em uma vista superior do poro da placa crivada).

Fig. 2: a) Esquema da estrutura da clula companheira e do elemento seiva. b) Micrografia eletrnica da clula companheira e do elemento seiva.

Cada clula crivada est associada a uma ou mais clulas companheiras, interligadas s clulas crivadas pelos plasmodesmos. As clulas companheiras tm importantes funes metablicas, tais como: sntese de protenas, produo de ATP, e fluxo de fotoassimilados para os tubos crivados. As clulas companheiras podem se diferenciar em clulas de transferncia, com importante papel na transferncia de assimilados pelas clulas do mesofilo para as clulas crivadas. Composio da seiva do floema: Com freqncia, 90% das substncias (solutos) transportadas pelo floema so carboidratos, e dentre estes, a concentrao de sacarose pode chegar at 1,5 M. Nitrognio ocorre na forma de aminocidos e amidas. cidos orgnicos, protenas, ons, hormnios e vrus so encontrados em concentraes muito baixas. A anlise da seiva do floema tem sido facilitada pela coleta de exsudato de estiletes de afdios.

Figura 3: Composio geral de uma seiva do floema;

A via de translocao (fonte para dreno) segue regras anatmicas e de desenvolvimento, ou seja: as fontes no suprem igualmente as todas as partes de uma planta, sendo que certas fontes suprem preferencialmente certos drenos. A velocidade de translocao no floema varia entre 30 a 150 cm h-' com uma mdia em tomo de 1m h-', muitssimo acima do processo de difuso/osmose (taxa de difuso de um metro em oito anos). Macromolculas tambm podem ser transportadas no floema. Seja qual rota envolvida no transporte de substncias no floema, sempre estaro os plasmodesmatas envolvidos, sendo esses elementos essenciais ao transporte pelo floema. Devido ao plasmodesmatas possurem um dimetro entre 4 e 6 um, acreditou-se por longo perodo que somente protenas com peso molecular menor que 12000 kDa poderiam ser transportadas, visto a possurem um raio menor ou igual ao dimetro do plasmodesmata.
.

4 Contudo, hoje em dia sabe-se que protenas de at 40 kDa podem ser transportadas pelos plasmodesmas. Mais de 200 protenas j foram identificadas no floema, pertencendo estas a vrias classes de polipeptdeos, entre as quais destacam-se a glutareodoxina, tioredoxina, cinases de protenas, chaperones, ubiquitina e cistatinas. Acredita-se que transporte dessas protenas de maior peso molecular via os plasmodesmas possa ocorrer graas a ao de protenas denominadas de chaperones, as quais alterariam a estrutura da protena, permitindo sua passagem pelo poro do plasmodesma (fig. 4).

Fig. 4: Mecanismo de alterao da conformao de protenas para seu transporte via plasmodesma

As viroses causadoras de doenas das plantas tambm so transportadas via o floema e plasmodesmatas. Neste caso, a prpria virose codifica para uma protena, denominada de protena do movimento viral, a qual interage com protenas do plasmodesma, alterando a sua conformao e provavelmente o seu limite de excluso de molculas, permitindo que o vrus seja transportado atravs deste tecido. Dois modelos so propostos para explicar esse transporte, sendo que em um deles postulada a presena de receptores codificados pela planta que interagiria com a protena do movimento, permitido o transporte da virose. Mecanismo de translocao no floema: Modelo do Fluxo por Presso J em 1930, Mnch props um Modelo de Fluxo por Presso. No modelo a gua se move para o interior de dois osmmetros por osmose se as concentraes internas forem diferentes das externas. A presso aumenta mais rapidamente no interior do osmmetro com menor potencial osmtico, ou seja, maior concentrao interna de solutos. O resultado um fluxo de massa sob presso entre os osmmetros interligados.

Fig. 5: Esquema do fluxo sob presso no floema. Valores aproximados dos valores reais so apresentados para diferentes regies do floema e xilema.

Na figura acima (fig. 5) pressuposto que ocorre uma diferena de potencial osmtico. Na figura abaixo (fig.6), apresentada uma evidncia que suporta o modelo do fluxo sob presso. Na verdade existe um gradiente de potencial osmtico ao longo de todo o floema de uma planta, o que significar um gradiente de presso, possuindo sempre a regio superior de um tubo seiva uma presso maior que a regio imediatamente inferior, e assim por diante. A hiptese de Mnch estabelece que o fluxo da seiva nos elementos do floema devido a um gradiente de presso, gerado por osmose entre a fonte e o dreno. O gradiente de presso estabelecido resulta do carregamento do floema na fonte e descarregamento do floema no dreno. Isto , o carregamento ativo do floema (com gasto de energia metablica) gera um baixo potencial osmtico (s) nos tubos do floema nos tecidos da fonte, resultando em reduo

6 no potencial hdrico (). A conseqente absoro de gua pelo floema resulta num aumento do potencial de turgescncia (potencial de parede). No dreno, final de via de translocao, o descarregamento leva a uma reduo do potencial de parede (p) nos tubos crivados. A presena das placas crivadas aumenta a resistncia ao longo da via, resultando na manuteno de um gradiente de presso considervel entre a fonte e o dreno. Carregamento no Floema Podemos dividir o carregamento em 3 diferentes fases: 1. Triose-P produzida na fotossntese (nos cloroplastos) transportada para o citossol, onde a sacarose sintetizada. 2. A sacarose do mesofilo se movimenta at as vizinhanas do floema, simplasticamente, de clula a clula. Esta fase um transporte que envolve pequenas distncias, isto , algumas clulas. 3. O carregamento da sacarose no floema pode ento ser feito via a rota simplstica (fig. 7; em espcies de plantas que possuem clulas intermedirias no seu floema) ou via a rota apoplstica (em espcies de plantas que possuem clulas companheiras em seu floema). A rota apoplstica necessariamente envolve a necessidade do gasto de energia.

Fig. 7: Esquema apresentando as duas formas possveis de carregamento do floema em uma folha de uma planta.

Observe que a rota apoplstica tambm pode envolver um transporte simplstico entre algumas clulas. Enquanto a rota simplstica deve, obrigatoriamente, envolver sempre um transporte via os plasmodesmas entre todas as clulas envolvidas, a via apoplstica, pode ser definida como uma rota de transporte que envolve pelo menos um passo onde ocorre um transporte apoplstico.

7 Carregamento apoplstico do floema Este tipo de carregamento predomina entre as plantas herbceas, as quais tem maior importncia para a agricultura. O transporte apoplstico explica-se pela necessidade de uma separao entre as clulas que possuem uma alta concentrao de osmlitos (normalmente em torno de 0,8 M, na clula companheira e no elemento seiva, os quais possuem uma continuidade citoplasmtica devido presena abundante de plasmodesmas entre essas clulas), daquelas clulas com menor concentrao de substncias (como as clulas do mesfilo, nas quais a sacarose pode checar at um limite superior de 150 mM). Inicialmente dever haver um transporte da sacarose de dentro da clula do mesfilo para o apoplasto adjacente clula companheira. Esse transporte envolve uma protena carregadora da sacarose, a qual pode utilizar o mecanismo antiporte, aproveitando o menor pH do apoplasto. A sacarose agora presente no apoplasto envolta da clula companheira, pode ser transportada para dentro da clula companheira atravs de uma outra protena carregadora da sacarose, a qual utiliza o mecanismo simporte. Esses dois carregadores necessitam ento energia indiretamente, a qual gasta pelas ATP hidrolases (ATPases) da membrana, as quais geram o gradiente de prtons necessrios para o carregamento do apoplasto e o carregamento da clula companheira.

Fig. 8. Esquema mostrando o carregamento da clula companheira da sacarose presente no apoplasto envolvendo a ATP hidrolase e o carregador simporte da sacarose.

Dessa forma, na rota apoplstica h necessidade de gasto de energia, o qual fundamental para gerar o gradiente eletroqumico necessrio para que as protenas carregadoras da sacarose faam o transporte da sacarose de uma regio de menor concentrao para uma regio de maior concentrao. Carregamento simplstico do floema O carregamento simplstico do floema principalmente observado em espcies de plantas arbreas, arbustivas ou trepadeiras. Quanto a distribuio climtica, plantas que possuem o transporte simplstico so plantas normalmente presentes em climas tropicais e sub-tropicais. Plantas que apresentam transporte simplstico so aquelas que apresentam clulas intermedirias, ao invs de clulas companheiras. Clulas intermedirias so clulas que possuem uma grande riqueza de conexes plasmodesmticas com as clulas do mesfilo, o que muito raro para as clulas companheiras. Elas tambm so maiores do que as ltimas. A figura abaixo sumariza as principais diferenas entre esses dois tipos de clulas:

Fig. 9: Esquema sumarizando as principais diferenas entre as clulas envolvidas no carregamento apoplstico e simplstico.

Como apresentado na figura acima, plantas que possuem o carregamento simplstico podem transportar um outro tipo de acares denominados de oligosacardeos, os quais podem ser trisacardeos, tetrasacardeos, e pentasacardeos entre outros. Estes oligossacardeos podem ser sintetizados nessas plantas a partir da sacarose. O carregamento simplstico do floema envolve grandes controvrsias. Como pode ser uma clula com alta concentrao de um metablito (clula intermediria e elemento seiva) ser carregada via plasmodesmas por uma clula com menor concentrao do metablito (clula do mesofilo)? O que impede a difuso espontnea de volta desse

9 metablito da clula intermediria para a clula do mesfilo. A modelo hipottico que tenta responder essas perguntas denominada modelo de captura pelo polmero, o qual apresentado na figura abaixo.

Fig. 10: Esquema mostrando o modelo de captura pelo polmero que tenta explicar o carregamento simplstico do floema.

Trs pressupostos so importantes para sustentar essa hiptese: 1) A sacarose deve estar mais concentrada na clula do mesofilo do que na clula intermediria, de forma que um movimento passivo da sacarose ocorra entre essas clulas. 2) As enzimas para a sntese da rafinose e estaquiose devem estar preferencialmente localizadas nas clulas intermedirias 3) Os plasmodesmas ligando as clulas da bainha vascular e as clulas intermedirias devem excluir molculas maiores do que a sacarose. Descarregamento do Floema Aps a translocao para os drenos, ocorre o reverso do carregamento, quando os assimilados so transferidos para o interior dos tecidos, para armazenagem ou metabolizao. O descarregamento do floema e o transporte para as clulas dos tecidos dreno pode ser por via simplstica ou apoplstica dependendo do tecido (do rgo) e da espcie. Trs diferentes tipos de descarregamento so conhecidos (fig. 11).No descarregamento simplstico o transporte das molculas transportadas ocorre sempre via os plasmodesmas. Na via apoplstica de descarregamento (tanto o tipo 1 como o tipo 2), os assimilados tm que atravessar em pelo menos uma clula as membranas de uma das clulas. Entre as outras clulas pode ento as molculas seguirem via os plasmodesmas. O tipo 1 de descarregamento apoplstico ocorre uma descontinuidade entre a clula companheira e a clula da bainha vascular.

10

Fig. 11: Esquema apresentando os diferentes tipos de descarregamento do floema possveis de serem observados nas plantas

No tipo 2a de descarregamento apoplstico, a descontinuidade entre os citoplasmas (ausncia de transporte via plasmodesmas) ocorre entre as clulas da bainha vascular e as clulas do parnquima de reserva dos rgos dreno. O tipo 2b difere do tipo 2a devido que a descontinuidade do transporte via plasmodesma ocorrer mais distante do feixe vascular. O tipo 2 de descarregamento apoplstico normalmente observado em sementes. Na figura abaixo (fig. 12) apresentada duas micrografias das clulas dos feixes vasculares de plantas com descarregamento simplstico (figura esquerda) e com carregamento apoplstico (figura direita).

Fig. 12: Micrografia eletrnica de feixes vasculares de plantas com diferentes tipos de descarregamento.

No descarregamento apoplstico ocorrer via a ao de uma protena carregadora de sacarose, a qual ainda no foi caracterizada. No apoplasto, a molcula de sacarose descarregada pode ser metabolizada por invertases, originando hexoses no apoplasto, sendo ento as hexoses absorvidas por carregadores simporteres de hexoses.

11 Uma mesma planta pode apresentar diferentes tipos de descarregamento durante o seu desenvolvimento. Em tubrculos de batata, por exemplo, nos momentos iniciais do desenvolvimento do tubrculo, o descarregamento apoplstico. Com o trmino do perodo de diviso celular, comea a expanso celular, momento no qual formam-se ento as conexes plasmodesmticas, predominando ento o descarregamento simplstico a partir dessa fase. J em sementes, permanece sempre o descarregamento apoplstico. Fatores que Afetam o Fluxo no Floema Todos os fatores que afetam a respirao e a produo de ATP, como a temperatura e oxignio podem tambm afetar tambm o fluxo no floema. Inibidores metablicos, que bloqueiam a respirao, podem impedir a translocao no floema de plantas que utilizam a via apoplstica. A mudana direo do fluxo no floema pode ocorrer durante o desenvolvimento. Assim, por exemplo, ao invs de uma folha enviar a sacarose para as razes, ela pode envila para outros tipos de dreno, como por exemplo, para novas estruturas reprodutivas que estejam sendo diferenciadas, como mostrado na figura abaixo:

Fig. 13: Mudana do fluxo do floema com o surgimento de novos rgos dreno.

Um fato comum s plantas a competio entre drenos. Muitas prticas culturais procuram manipular a competio entre os drenos e alterar a direo do fluxo do floema. As podas de frutificao, por exemplo, realizadas em espcies frutferas de clima temperado (pessegueiro, ameixeira, cerejeira, entre outras). Objetivam eliminar a competio entre o crescimento de novos ramos vegetativos, com a florao, que nessas espcies coincidem com o incio da primavera. Ela normalmente feita no outono, aps o perodo em que j houve a acumulao de reservas no caule, e consiste na remoo de ramos vegetativos, reduzindo o nmero de brotaes que originaro folhas e ramos na prxima primavera. Dessa forma, ser menor a competio entre drenos na primavera, sobrando mais reservas durante a florao, o que resultar em melhor vingamento de frutos e maior fertilidade dos pomares.

12 Outra prtica cultural importante na agricultura o desbaste de frutos. Muitas flores so fertilizadas, mas muitos frutos no se desenvolvem, visto a grande competio entre eles em estgios de desenvolvimento quando a taxa de crescimento dos mesmos maior. Desbastar os frutos ainda pequenos pode resultar em maior produtividade, impedindo a perda de energia no desenvolvimento de frutos que no iriam se desenvolver, energia essa que passa ento a ser aproveitada pelos frutos no desbastados, os quais acumulam ento maior matria seca. Outro exemplo de mudana da direo do fluxo do floema o anelamento (fig. 14). No anelamento, rompemos o floema, o qual se encontra sempre mais externamente nos ramos lenhosos, prximos a casca. Ao rompermos o floema, interrompemos o fluxo de seiva elaborada das partes superiores de uma rvore para a parte radicular, acumulando maior quantidade de sacarose na parte area. O aumento da sacarose um estmulo florao em muitas espcies. Com o anelamento podemos provocar a florao de um pomar de plantas frutferas fora da estao normal de produo, obtendo melhores preos para as frutas produzidas. Contudo o anelamento no pode ser repetido todos os anos, visto que ocorre uma debilitao do sistema radicular, o que entre outras conseqncias negativas do anelamento, pode levar a uma progressiva reduo da produtividade das plantas.

Fig. 14: Anelamento de um ramo de uma espcie de planta lenhosa pode afetar a florao e o enraizamento.

Outro aproveitamento prtico do anelamento o enraizamento de ramos. Pelo floema tambm so transportadas quantidades significativas de auxinas. Com esse bloqueio, acumular-se- auxinas, as quais induziro o enraizamento. Nessas regies aneladas comum cobrir-se com um saco cheio de p de xaxim, ou terra, de forma a proteger as novas razes do dessecamento, auxiliando no enraizamento mais rpido dos ramos anelados. Mobilizao e Redistribuio de Assimilados A distribuio diferenciada dos fotoassimilados na planta entre diferentes rgos denominada de partio. A distribuio dos fotoassimilados entre diferentes rotas metablicas dentro de uma mesma clula denominada de alocao.

13 O destino do carbono fixado pode ser classificado em: 1. Sntese de Compostos de Armazenamento: O amido primrio (nos cloroplastos) re-mobilizado noite, resultando na formao de sacarose, que, aps translocada pelo floema, dar origem ao amido secundrio (nos tecidos drenos). Alguns tecidos so acumuladores de Frutosanas (polmeros de frutose). Algumas espcies podem acumular sacarose no vacolo ao invs de amido no cloroplasto. Outras podem acumular ambas formas. Um pequeno grupo de plantas pode acumular lipdeos no cloroplasto. Utilizao Metablica Sntese de Compostos de Transporte: exemplo clssico a sacarose.

2. 3.

A partio dos assimilados, ou sua alocao, so regulados por enzimas chaves que participam da sntese e degradao do amido e sacarose. As Trioses-P (gliceraldedo 3fosfato e dihidroxiacetona-fosfato), produzidas no ciclo de Calvin, podem ser usadas tanto para a sntese de amido como de sacarose. As trioses-P que se destinam sntese de amido permanecem no cloroplasto, enquanto que aquelas destinadas sntese de sacarose so transportadas para foram dos cloroplastos, em direo ao citosol. A fora do dreno uma funo do tamanho do dreno e da sua atividade, como mostrado na frmula abaixo: Fora do Dreno = Tamanho do Dreno x Atividade do Dreno Normalmente, o tamanho de um rgo dreno definido nos estgios iniciais do seu desenvolvimento. A diviso celular concentrada nos primeiros dias de desenvolvimento de um fruto ou tubrculo, ou de uma semente. Aps esse perodo ocorre a expanso celular, a qual ento seguida da fase de acumulao de matria seca. Se ocorrer uma restrio nutricional da planta nesse curto perodo de tempo, o que pode ser causada, por exemplo, por um curto perodo de seca, a produtividade de uma planta agrcola poder ser seriamente comprometida, visto ao dano irreversvel na restrio do tamanho do dreno. A importncia da fora dreno pode ser compreendida com analisando os resultados de experimentos feitos com enxertia recproca entre plantas de batata tuberizadas e no tuberizadas (fig. 15). As plantas tuberizadas possuem maior fora dreno, o que resulta na maior remoo de sacarose do floema, o que acaba impedindo a acumulao de sacarose na folha, a qual, pode inibir a fotossntese.

14

Fig. 15: Experimento de enxertia recproca entre uma planta tuberizada e outra planta no tuberizada de batata. O aumento da fora dreno (porta-enxerto da planta tuberizada) aumenta a fotossntese do enxerto advindo da planta no tuberizada.

Na enxertia recproca mostrada na figura acima, observamos que a presena do tubrculo (como parte do porta-enxerto), aumentou o nvel de fotossntese do enxerto advindo da planta no tuberizada. Esse mesmo efeito pode ser observado quando removemos outras folhas fontes, ou a sombreamos, reduzindo sua fotossntese. As folhas fontes restantes sero mais exigidas quanto a sua sntese de sacarose, e sua fotossntese ser aumentada aps a remoo (ou sombreamento) daquelas folhas. A reduo da fotossntese apresentada na figura acima nas folhas de uma planta oriunda do tratamento de enxertia recproca, onde o porta-enxerto advindo de uma planta no tuberizada e o enxerto oriundo de uma planta tuberizada, pode ser explicado por uma seqncia de conseqncias metablicas advindas da reduo da fora dreno (fig. 16):

Fig. 16: Esquema do mecanismo que explica a reduo da fotossntese pela reduo da fora dreno.

15 A reduo da fora dreno resulta no acmulo de sacarose na folha, inibindo a sntese de sacarose. A inibio da sntese de sacarose resultar na reduo do fosfato dentro da clula, prejudicando a sada de trioses-fosfato do cloroplasto e a entrada de fosfato (Pi). Dentro do cloroplasto acumular-se- trioses-P, resultando no acmulo de 3-PGA (cido 3fosfoglicrico), o qual o ativador da enzima AGPase. De outro lado, ocorrer a reduo de fosfato dentro do cloroplasto, o qual inibidor da AGPase. O efeito conjunto do aumento do ativador (3-PGA) e da reduo do inibidor (Pi), levam a ativao da AGPase, resultando em grande acmulo de amido no cloroplasto, o qual poder reduzir as reaes fotoqumicas e o Ciclo de Calvin. Assim, plantas que possuem uma maior fora dreno poderiam ter maior produtividade, reduzindo uma inibio potencial da fotossntese pelo acmulo de sacarose na folha.