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Mster CITURME
Dr. Alfonso Mate Dpto. Fisiologa y Zoologa Facultad de Farmacia. Universidad de Sevilla
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POP Farmacia
LABORATORIO DE HEMATOLOGA g #Organizacin Circuito de autoridad Circuito de material de trabajo Circuito de informacin #Laboratorios. Localizacin y estructura rea de trabajo Espacios secundarios Espacio de circulacin
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EXTRACCIONES
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#Facultativos
Jefe servicio J f i i Jefe seccin
#Enfermera
Supervisor DUE Enfermeros TEL Auxiliares de clnica
#Personal administrativo
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#Laboratorio de Urgencias g
Funciona las 24 h Nmero de pruebas limitado Respuesta lo ms rpida posible Problemas de calibracin, reproducibilidad
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#Laboratorio Programado g
Horario de recepcin de muestras limitado Todo tipo de pruebas Tiempo estandarizado para cada prueba El control de calidad tiene mejores resultados Agrupa determinaciones menos frecuentes Resultados ms fiables con mayor rendimiento de trabajo y menor coste
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VOLANTES
#Partes de un volante
Datos del paciente Peticionario Datos de la muestra Pruebas solicitadas Secc del a o a o o a a d g da Seccin de laboratorio a la que va dirigida
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VOLANTES
#Caractersticas de un volante
Autocopiable o no Automatizable Nmeros y etiquetas
#Tipos de volantes
Blancos o abiertos Preestablecidos
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VOLANTES
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INFORMES
Tipos Integrados Elaborados Archivos de informes Solicitud de copia de informes
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Centrifugas
Baos
Termostato
Reloj Balanzas
pH-metros Desionizador
Bombas de vaco
Bomba peristltica
Dosificadores Agitadores
Estufa
Mquina hielo
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EAA
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Composicin
Clasificacin
Protenas plasmticas
Funciones
Transporte Regulacin pH sanguneo Defensa inmunitaria Hemostasia Nutritiva Viscosidad Presin onctica = = presin coloidosmtica
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#Puncin venosa
Regin antecubital yugular o femoral en RN dorso de antecubital, RN, la mano y pie en ancianos y obesos Puncin limpia. Evitar cogulos En pacientes con terapia de anticoagulante se debe presionar la herida durante 10 min. Procedimiento
Brazo caliente y cinta elstica en el brazo Cerrar el puo para ver las venas Limpiar con solucin desinfectante Realizar puncin limpia Liberar el compresor Abrir puo y extraer aguja. Presionar
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#Puncin venosa
Tubos estriles al vaco con anticoagulante Tubos En el caso de jeringa y aguja se llenan de sangre los tubos (que llevan anticoagulante), quitando previamente la aguja y resbalando la sangre por la pared de los tubos, y se mezcla por inmersin Tubos bien identificados. Botn rojo muestras infecto-
contagiosas
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#Puncin capilar
Muestras d sangre pequeas o difi lt d M t de dificultades para realizar la venopuncin Pulpejo del dedo, lbulo oreja o taln del pie (RN) Lancetas estriles con un tope Tcnica:
Vasodilatacin Desinfectar y secar Pinchar con la lanceta, desechar las primeras gotas y llenar el capilar o pipetas
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ANTICOAGULANTES EN HEMATOLOGA
#Utilidades anticoagulantes
Obtener plasma o muestras de sangre total Estudiar caractersticas morfolgicas Realizar recuentos celulares
#Propiedades anticoagulantes
No alterar la morfologa de los leucocitos No alterar el tamao eritrocitario No producir hemlisis Impedir agregacin plaquetaria Mximo tiempo de conservacin de la muestra
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ANTICOAGULANTES EN HEMATOLOGA
#EDTA
Efecto quelante sobre el C Ef t l t b l Ca EDTA-Na2 EDTA-K3. Para recuento celular en autoanalizador
#Heparina
Impide el paso protrombina trombina No modifica las caractersticas celulares de leucocitos y eritrocitos, pero proporciona color azul en los frotis de tinciones panpticas
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ANTICOAGULANTES EN HEMATOLOGA
#Citrato sdico
Impide i i I id ionizacin d l C i del Ca Se utiliza en: Pruebas de hemostasia (1:9) VSG (1:4)
#Oxalato sdico
Pruebas de hemostasia (1:4)
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EXTENSIONES DE SANGRE
Materiales: Portaobjetos esmerilados, limpios y libres de grasa Cubreobjetos Mtodo de los dos portaobjetos: Depositar una gota de sangre en un extremo del portaobjetos Colocar otro portaobjetos sobre el anterior con la gota de sangre, con una inclinacin de 45 Desplazarlo hacia atrs hasta entrar en contacto con la gota y permitir que, por capilarizacin, la gota se extienda a lo largo del canto del portaobjetos Deslizar el segundo portaobjetos inclinado sobre el primero de manera suave y rpida, para permitir que la gota de sangre queda extendida A mayor inclinacin, extensin ms gruesa. Menor inclinacin = extensin ms fina Secado a temperatura ambiente
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EXTENSIONES DE SANGRE
Realizacin de un frotis
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EXTENSIONES DE SANGRE
Partes de un frotis Mtodo de los dos cubreobjetos
Mtodos de los dos cubreobjetos: Dos cubres sin grasa limpios y secos D b i li i Colocar en uno una pequea gota de sangre Sujetarlo por los vrtices e invertirlo colocndolo sobre el otro rotndolo 45 Por capilaridad se extiende la gota Secar
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PROCESAMIENTO DE MUESTRAS
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COLORANTES EN HEMATOLOGA
#Tipos de colorantes
Bsicos ( B i (catinicos): b i i ) basofilia fili cidos (aninicos): acidofilia Neutros (aninicos y catinicos): acidofilia o basofilia
#Tipos de tinciones
Tincin pancromtica: azul de metileno, eosina, Wright Tincin panptica: May-Grnwald-Giemsa i i i
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COLORANTES EN HEMATOLOGA
#Terminologa
Acidofilia: A ide po colo antes cidos (e g eosinfilos) Avidez por colorantes (e.g. Basofilia: Avidez por colorantes bsicos (e.g. basfilos) Azurofilia: Coloracin violcea-rojiza (y no azul) Hipocroma: Falta de intensidad en la coloracin
(e.g. Anemia ferropnica)
Plasmticos: Plasmticos:
albmina VSG / fibringeno y globulinas VSG carga elctrica, nmero, tamao y forma
Eritrocitarios:
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VSG retardada
Recin nacidos Hipoproteinemia por dilucin plasmtica sin anemia
Parmetros cuantitativos
Hemoglobina Hematocrito Recuentos celulares ndices eritrocitarios: VCM, HCM, CHCM Recuento de reticulocitos
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Anisocitosis (tamao)
Macrocitosis Microcitosis Esquistocitosis Megalocitosis Microesferocitosis
Poiquilocitosis (forma)
Esferocitosis Eliptocitosis Drepanocitosis D epanocitosis Dianocitosis Equinocitosis Estomatocitosis Dacriocito Acantocito
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Anisocroma (coloracin)
Hipocroma Hipercroma Policromasia
Inclusiones eritrocitarias
Punteado basfilo Anillos de Cabot Cuerpos de Howell-Jolly Parsitos (Plasmodium)
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10.02
109/L LEU
%
89.7 6.0 1.9 1.2 .5
109/L NEU 8.98 LINF .60 MONO .19 EOS .12 BASO .05
Rango de normalidad: Neutrfilos: 60-70% Linfocitos: 20-40% Monocitos: <10% Eosinfilos <5% Basfilos <1-3%
Frmula leucocitaria
3.96 1012/L HEM 13.4 g/dL Hb 44.1 % Hct 111.4 fL VCM 33.7 pg HCM 30.3 g/dL CHCM 20.4 % RDW Nmero de plaquetas: V.N.: 150-400 109/L Volumen plaquetario: V.N.: 7,5-9,5 fL
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Dilucin muestra
GR: Lquido de Hayem o s.s. (dilucin: 1:100) GB: Lquido de Trk (dilucin 1:10) Plaquetas: solucin oxalato (dilucin 1:100)
Cmara Neubauer
Autoanalizador
Mide los cambios en la resistencia elctrica que se producen cuando una partcula no conductora en suspensin en un electrolito atraviesa un pequeo orificio, desplazando su propio volumen de electrolito. Este es medido como un pulso de voltaje. La altura de cada pulso es proporcional al volumen de la partcula. Controlando la cantidad de suspensin que circula a travs del orificio es posible contar y medir el tamao de las partculas.
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ADE normal
ANISOCITOSIS
Recuento de reticulocitos
Sangre y azul cresilo brillante Extensin de sangre Nmero: 5-15 reticulocitos/1000 GR
Disminucin reticulocitos : Anemia arregenerativa Aumento de reticulocitos: Anemia regenerativa
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El hierro de transporte
ndice de saturacin de la transferrina (IST) Capacidad total de saturacin de la transferrina (CTST)
Determinacin de la sideremia
TF-Fe 3+
PRECIPITACIN REDUCCIN
TF + Fe 2+ Compuesto coloreado
Fe 2+ + Cromgeno
Anemia ferropnica SIDEREMIA A. enfermedades crnicas Anemia inflamatoria Hemocromatosis Talasemias SIDEREMIA A. sideroblstica Alcohol (hepatitis agudas y crnicas)
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satura la TF
Determinacin de la ferritinemia
Ferritina: compuesto hidrosoluble de Fe3+ unido a una protena (apoferritina). Fe depsito en hgado, mdula sea, bazo Determinacin por radioinmunoanlisis (RIA) o inmunorradiomtrica (IRMA) IRMA: Muestra + antiferritina humana fase slida Extraccin Ab marcado no unido Radioactividad unida proporcional a la ferritina en la muestra Valores medios normales: 123 g/L (hombres) / 56 g/L (mujeres) Anemia ferropnica: Disminuye ferritina Sobrecarga frrica: Aumento ferritina Incubacin, lavado
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TP: Presencia de hemosiderina en el citoplasma de cualquier tipo de clulas, de una extensin de sangre o de mdula Mtodo:
1. 1 Fijar con alcohol metlico 2. Introducir la extensin fijada en solucin clorhdrica de ferrocianuro a T ambiente 3. Lavar 4. Contrateir con hematoxilina de Harris 5. Lavar con agua y con etanol, lavar, secar y observar grnulos intensos color azulverdoso que se observan en la zona de macrfagos
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IST
CTST
Ferritina
Sideroblastos
Eritropoyesis Ineficaz
NO
=
NO
SI
Talasemia minor
SI
Talasemia minor
Tincin de Perls
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ANEMIAS MACROCTICAS
Megaloblastosis y anemias megaloblsticas: mtodos de estudio
VCM >100 fL 95% Anemias megaloblsticas 5% Anemias macrocticas no megaloblsticas
Alcoholismo Aplasia medular Embarazo Enfermedad heptica crnica Ictericia obstructiva Neoplasias Neoplasias
cido flico y vitamina B12 en la maduracin celular Anemias megaloblsticas por dficit de cido flico
Dieta inadecuada Aumento necesidades Sndrome malabsorcin Interferencia metablica de los folatos: alcohol, medicamentos
Mdula sea
Sangre perifrica
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Hemlisis extravascular
Bilirrubinemia Esplenomegalia haptoglobina LDH
Intracorpusculares
MEMBRANOPATIAS ENZIMOPATIAS HEMOGLOBINOPATIAS
Extracorpusculares
INMUNITARIAS NO INMUNITARIAS
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Supervivencia eritrocitaria
Valores de referencia: 120 15 das Valores inferiores proceso hemoltico
Mtodo falciformacin Gota sangre diluida en un portaobjetos. Cubreobjetos cuyos bordes son sellados. Despus incubacin 37 C 1 h eritrocitos falciformes
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A. hemolticas extracorpusculares
Test de Coombs
en banda
e banda en ba da
en banda
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Recuento diferencial de leucocitos (RDL) Mtodo visual (manual) 100-200 leucocitos Calidad extensin Zona de recuento Tincin Experiencia
Recuento diferencial de leucocitos (RDL) Mtodo automtico 10.000-30.000 leucocitos q Medida volumen + anlisis citoqumico
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Absoluto (x 109/L)
Relativo (%)
ALTERACIONES EN EL RDL
Alteraciones cuantitativas Aumento de una subpoblacin Disminucin de una subpoblacin Presencia de blastos (clulas inmaduras)
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(> 4 x109/L)
, mononucleosis infec.
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Mielemia
Asociada a leucocitosis y neutrofilia Mielocitos + metamielocitos + promielocitos + neutrfilos en banda Patologas Reaccin leucemoide (infecciones, inflamacin) (infecciones SMPC: LMC, policitemia vera, trombocitemia esencial
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Eritroblastosis
Eritroblastos + proeritroblastos Patologas Extramedulares: erit. fetal, anemias Medulares: diseritropoyesis, eritremias
Presencia de blastos
Blastos en general g Patologas Leucemias agudas Linfoma leucemizado
Alteraciones nucleares
Anomala Pelger-Het
(SMD, SMPC, LMA)
Ncleo en anillo
(SMD, SMPC)
Ncleo hipersegmentado
(SMD, LMC)
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Alteraciones citoplasmticas
Hipogranulacin
(SMD, SMPC, LMA, LMMC)
(normal)
Hipergranulacin
(infecciones, quemaduras)
Granulacin Alder-Reilly
Alteraciones citoplasmticas
Cuerpos de Dhle
(infecciones, quemaduras, SMD, SMP)
Bastones de Auer
(LMA, Leucemia promieloctica)
Astillas
(Leucemia promieloctica)
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Alteraciones nucleares
Linfocito bilobulado
Alteraciones citoplasmticas
Tricoleucocito
(tricoleucemia)
Linfocito velloso
(linfoma esplnico)
Linfocito urpodo
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