DESTRUCCIÓN DE COLIFORMES FECALES Y HUEVOS DE HELMINTOS EN

LODOS FISICOQUÍMICOS POR VÍA ÁCIDA

José A. Barrios, Blanca Jiménez, Oscar González, Germán Salgado, Leopoldo

Sanabria y Rosario Iturbe.

Instituto de Ingeniería UNAM, Apartado Postal 70-472, Ciudad Universitaria, 04510,

México, D.F., Tel. (5) 622-3321, fax (5) 616-2164

RESUMEN

Se estudió la estabilización ácida de lodos fisicoquímicos con altas concentraciones de

huevos de helmintos (113.8 huevos/g ST) para producir biosólidos. Se emplearon lodos
fisicoquímicos provenientes de la planta de tratamiento de aguas residuales de San
Pedro Atocpan (Distrito Federal) con concentraciones de 6.37 a 6.70% de sólidos
totales. Los ácidos empleados fueron sulfúrico, perclórico, peracético y acético en dosis
de 1,000 a 57,600 ppm dependiendo del ácido. La concentración mínima de huevos de
helmintos alcanzada fue de 1.3 huevos viables/g ST empleando ácido acético. En
cuanto a coliformes fecales, el ácido peracético logró reducir su densidad por debajo
del límite de detección (< 3 NMP/g ST). En todos los casos se cumplió con las
densidades requeridas de coliformes fecales para los lodos clase B de acuerdo con la
US EPA y la NOM-004-ECOL-2000.

INTRODUCCIÓN

En la actualidad, el manejo integral de los lodos residuales ha cobrado gran importancia

debido al potencial de reúso benéfico que éstos presentan. Dentro de las opciones
para reutilizar los lodos, su aplicación en suelos es la práctica más empleada en
diversos países de la Comunidad Europea así como en los Estados Unidos,
representando aproximadamente 45 y 56% respectivamente (Lue-Hing et al., 1996 y
Bastian, 1997). En México su manejo se ha limitado a la disposición en lagunas y
rellenos sanitarios principalmente, pero se espera que la tendencia se enfoque al reúso
benéfico con la publicación de la Norma Oficial Mexicana NOM-004-ECOL-2000 que
establecerá los límites máximos permisibles de contaminantes para los lodos residuales
que sean dispuestos o aprovechados. Esta norma regulará el contenido de metales y
microorganismos así como la reducción de la atracción de vectores. Para lograr cumplir
con los límites de microrganismos que dicha norma establecerá, es necesario aplicar
algún proceso de tratamiento que reduzca considerablemente los contenidos de
coliformes fecales, Salmonella sp. y huevos de helmintos contenidos en los lodos.
Dentro de las opciones de tratamiento existen los procesos convencionales (digestión
aerobia y anaerobia, elaboración de composta y estabilización alcalina) y los no
convencionales. En estos últimos se incluyen procesos de tratamiento que no han sido
del todo estudiados y que no se conoce a detalle su eficiencia en la estabilización de los
lodos. Uno de estos procesos es la estabilización ácida que aún cuando ha sido
reportada en la literatura, las condiciones de operación del proceso no han sido
establecidas con detalle al igual que el tipo de ácido más recomendado. Con relación a
esto último, se han reportado estudios de estabilización ácida empleando ácido
sulfúrico, clorhídrico, peracético, acético y propiónico principalmente (Roth y Keenan,
1971; Fraser et al., 1984; Godfree et al., 1984; Owen, 1984; y Kiff y Lewis-Jones,1984).
De ellos, el ácido peracético demostró importantes reducciones en la densidad de
bacterias así como en la viabilidad de los huevos de helmintos, lo cual resulta
importante en nuestro país al contener los lodos altas concentraciones de ellos.
Adicionalmente, el ácido peracético ha demostrado su gran poder bactericida y virucida
en agua residual empleando tiempos de contacto cortos (5 min) y condiciones
ligeramente ácidas (Baldry y French, 1989).

El objetivo de este trabajo es presentar los resultados de la estabilización ácida de

lodos fisicoquímicos empleando ácidos sulfúrico, perclórico, peracético y acético
evaluando la destrucción de coliformes fecales y huevos de helmintos.

MATERIALES Y MÉTODOS

El lodo empleado en las pruebas de estabilización ácida fue tomado de la purga de los
sedimentadores primarios de la planta de tratamiento de San Pedro Atocpan en el
Distrito Federal. La planta opera a un caudal promedio de 35 L/s de agua residual a la
cual se le dosifica sulfato de aluminio en dosis de 66 mg/L. Los lodos generados son
llevados de la purga de los sedimentadores primarios hacia un espesador en el que
permanecen un período aproximado de 15 días antes de ser desalojados de la planta.
Las muestras tomadas para la realización de este estudio presentaron un contenido de
sólidos totales de 6.37 a 6.70%.

Las muestras de lodo crudo fueron estabilizadas empleando ácidos sulfúrico, perclórico,
peracético y acético en diferentes dosis de acuerdo con la Tabla 1. Como se observa
en ella, las concentraciones de los ácidos empleados difieren notablemente entre sí.
En el caso de los ácidos sulfúrico y perclórico se trabajó a una concentración del 20%
para facilitar su manejo y disminuir el riesgo de quemaduras. Respecto al ácido
peracético, el producto obtenido (Perabac-QPM, Quimiproductos) se comercializa a esa
concentración máxima (3.7%), recomendando su uso directo como desinfectante. Por
su parte, el ácido acético se manejó a una concentración del 50% debido a que sus
características químicas lo catalogan como un ácido débil con pocas restricciones de
manejo.
 Tabla 1. Tipo de ácido, concentración y dosis empleadas en la estabilización ácida.

Sólidos totales, Concentración del ácido, Tipo de Dosis,

% % v/v ácido ppm
6.70 20 Sulfúrico 4,400 - 57,600
6.56 20 Perclórico 2,600 - 32,900
6.70 3.7 Peracético 1,000 – 5,000
6.37 50 Acético 3,700 - 22,000

Las dosis empleadas de ácido sulfúrico y perclórico fueron determinadas en el

laboratorio mediante una curva de pH–dosis de ácido para lograr alcanzar los pH’s
recomendados para la estabilización (menores de 3.5 unidades; Roth y Keenan, 1971;
Wortman et al., 1986; y Blais et al., 1992). Para el ácido peracético, estas dosis fueron
considerablemente mayores que las presentadas en la literatura (500 ppm) debido a
que en ella se reportan tiempos de contacto de hasta 7 días (Owen, 1984). De igual
modo, en el caso del ácido acético, los tiempos de contacto reportados son de hasta 19
días con dosis de 400 ppm (Kiff y Lewis-Jones, 1984).

Para las pruebas de estabilización ácida se empleó un equipo de prueba de jarras

operando a una velocidad de agitación de 320 rpm durante 30 minutos, al final de los
cuales se tomaron las muestras para determinación de pH, sólidos totales, coliformes
fecales y huevos de helmintos viables de acuerdo a las técnicas recomendadas por los
Métodos Estándar (APHA-AWWA-WPCF, 1995) y la Agencia de Protección al Ambiente
de los Estados Unidos (EPA, 1992). En todos los casos se emplearon muestras de 1 L
de lodo con excepción del ácido peracético en el que se emplearon muestras de 0.8 L
debido a la gran cantidad de espuma que se genera durante la reacción del ácido
peracético y del peróxido de hidrógeno con algunas enzimas.

RESULTADOS Y DISCUSIÓN

pH

La importancia del pH en el lodo estabilizado radica en el efecto que éste tiene sobre la
floculación de los lodos para su acondicionamiento y posterior deshidratación con el
objeto de facilitar su manejo y disminuir los costos de transporte. El pH del lodo
determina la carga eléctrica superficial de las partículas así como el grado de ionización
de los polímeros empleados en el acondicionamiento (Allied Colloids, 1988). Estos
polímeros operan generalmente en un intervalo de pH de 4 a 12 unidades por lo que
una excesiva acidificación del lodo puede acarrear problemas durante el deshidratado.
Adicionalmente, el pH del lodo afecta de manera directa la destrucción y recrecimiento
de microrganismos, aparentemente desnaturalizando las enzimas, impidiendo la
supervivencia de la mayoría de ellos a pH’s por debajo de 4 unidades (McKinney,
1962). Por lo anterior, es indispensable evaluar el pH del lodo estabilizado para
determinar su influencia en la estabilización y en el futuro desaguado.
La Figura 1 presenta los valores de pH obtenidos durante las pruebas con cada tipo de
ácido. En ella se observa que el empleo de ácido acético aún a dosis mayores de
20,000 ppm no reduce el pH por debajo del intervalo recomendado para el
acondicionamiento, lo cual representa una ventaja importante sobre los ácidos
restantes que deberá ser considerada para efectos de selección del ácido a emplear en
futuros estudios.

6
Sulfúrico
Perclórico
5 Peracético
Acético

0
0 10000 20000 30000 40000 50000 60000

Dosis de ácido, ppm

Figura 1. Valores de pH en lodo estabilizado con diferentes ácidos.

En el caso de los ácidos sulfúrico y perclórico, la disminución del pH es notable debido

a la fortaleza de ambos. Cabe mencionar que las diferencias del pH con estos dos
ácidos se pueden deber a la alcalinidad del lodo que posiblemente varió de un
muestreo a otro o, más probablemente, a que el ácido perclórico posee una constante
de disociación mayor que el ácido sulfúrico (Ka=107 vs. 103).

Coliformes fecales

Los coliformes fecales son empleados como indicadores de contaminación fecal en

agua y lodos debido a que sus características de indicadores incluyen una mayor
densidad, y persistencia que otros microrganismos patógenos presentes en las heces
fecales. Por ello se pueden utilizar para evaluar de manera indirecta la destrucción de
estos últimos. Así, es posible determinar indirectamente la destrucción de las bacterias
del género Salmonella por medio de ellos y con ello evaluar la eficiencia lograda en la
estabilización ácida. En los lodos fisicoquímicos, la densidad de coliformes fecales
puede llegar a ser de 1010 NMP/g ST (Jiménez et al., 1997), superando hasta en 3
unidades logarítmicas la densidad en lodos primarios crudos generados en los Estados
Unidos (Lue-Hing et al., 1992) por lo que es fundamental que se logre una reducción
significativa.

Para el caso de los lodos empleados en el presente trabajo, la densidad de coliformes

fecales varió de 1.5 x 106 a 1.1 x 107 NMP/g ST en el lodo crudo. Como ya se
mencionó, la disminución en el pH resulta en una destrucción importante de las
bacterias, incluyendo coliformes fecales, lo cual confiere al lodo su estabilidad en este
aspecto. En el caso de Salmonella, su actividad se desarrolla a pH’s de 5.5 a 9.0 por lo
que los pH’s manejados en la investigación las inhiben por completo (Reimers et al.,
1986).

La Figura 2 presenta la destrucción de coliformes fecales en las pruebas de

estabilización ácida. De acuerdo con los límites establecidos por la EPA para lodos
clase A (< 1,000 NMP/g ST), los ácidos sulfúrico, peracético y acético cumplirían en
más del 80% de las muestras con este criterio (100% en el caso del peracético). Por su
parte, el ácido perclórico sería capaz de producir lodos clase B que podrían ser
empleados como fertilizantes o mejoradores de suelos, entre otros, debido a las
restricciones en su aplicación con el fin de evitar el contacto público con los lodos. La
menor destrucción del ácido perclórico aparentemente está relacionada con su baja
capacidad oxidante así como con la moderada toxicidad que presenta.

8
Sulfúrico
7 Límite Clase B Perclórico
Peracético
6
Acético
5

4
Límite Clase A
3

0
0 10000 20000 30000 40000 50000 60000
Dosis de ácido, ppm

Figura 2. Destrucción de coliformes fecales mediante estabilización ácida.

Se observa también que el ácido peracético logra disminuir la densidad de coliformes

fecales por debajo del límite de detección aún empleando dosis significativamente
menores que con los demás ácidos. Aparentemente, ésto se debe a que al
descomponerse se libera una gran cantidad de oxígeno activo que combinada con la
acción oxidante del peróxido de hidrógeno contenido (28%) actúan sobre los grupos
funcionales de las enzimas de los microrganismos destruyendo la membrana de los
mismos.
Comparando los valores de pH de la Figura 1 con la destrucción de coliformes fecales
de la Figura 2 para las muestras que emplearon ácido acético se aprecia que el pH no
está directamente relacionado con dicha destrucción. Se presume que ésta se debió al
efecto inhibitorio en la reproducción de las células que posee el ácido acético sobre las
bacterias (Richardson y Gangolli, 1993), efecto que es aprovechado en la preservación
de alimentos.

Huevos de helmintos

El destruir o inactivar los huevos de helmintos en los lodos es de vital importancia si se

planea aplicarlos en suelos debido a su capacidad para sobrevivir por largos periodos
de tiempo aún en condiciones adversas (EPA, 1991). En México se estima en 33% la
población infectada únicamente por Ascaris (Biagi, 1990), lo cual concuerda con los
altos porcentajes (> 90%) de huevos de esta especie encontrados en los lodos
estudiados. Además, los huevos de esta especie están considerados entre los más
resistentes de los helmintos (Carrington y Harman, 1984) lo cual incrementa su
importancia.

La Figura 3 muestra los resultados de los análisis de huevos de helmintos en las

muestras de lodo crudo y acidificadas. Se puede notar un valor máximo en la muestra
de lodo crudo antes de agregarle el ácido perclórico de 113.8 huevos viables por cada
gramo de sólidos totales. Sin embargo, se nota una definida reducción en el número de
huevos contados en todas las muestras acidificadas, logrando llegar a concentraciones
de 1.3 huevos viables/g ST en la muestra de ácido acético (22,000 ppm).
120
Sulfúrico
Perclórico
100
Peracético

80 Acético

60

40

20

0
0 10000 20000 30000 40000 50000 60000 70000
Dosis de ácido, ppm

Figura 3. Destrucción de huevos de helmintos mediante estabilización ácida.

En el caso de los ácidos perclórico, peracético y acético, se observa que logran

reducciones importantes en la concentración de huevos de helmintos. Aparentemente
existe una mayor compatibilidad entre algunos tipos de ácidos con las enzimas de la
membrana de los huevos lo cual ocasiona el rompimiento de la membrana y la
penetración del ácido en el núcleo logrando su inactivación.

En cuanto al ácido sulfúrico, éste presentó una menor reducción comparada con los
demás ácidos. Cabe mencionar que para determinar la viabilidad de los huevos de
helmintos las muestras son incubadas en una solución de ácido sulfúrico 0.1 N lo cual
sugeriría que el efecto inhibidor de este ácido sobre los huevos sea bajo, requiriendo
dosis muy altas o concentraciones mayores para lograr la inactivación.

De acuerdo con la normatividad de la EPA, los lodos clase A no deben contener más de
1 huevo de helminto viable por cada 4 gramos de sólidos totales. Comparando ese
valor límite con las concentraciones de huevos de helmintos en las muestras
acidificadas se determina que no cumplen con dicho criterio. Cabe mencionar que las
concentraciones de huevos de helmintos en lodos primarios generados en Estados
Unidos son alrededor de 2 órdenes de magnitud menores (< 1 huevo/g ST; Lue-Hing,
1998).
En cuanto a la Norma Oficial Mexicana (NOM 004-ECOL-2000), los límites de huevos
de helmintos propuestos son de 35 y 10 huevos por gramo de sólidos totales para las
clases B y A respectivamente. De acuerdo con esos valores, únicamente las muestras
estabilizadas con ácido perclórico (> 8,000 ppm) y algunas con ácidos peracético y
acético podrían cumplir para la clase A. Para la clase B, el 100% de las muestras que
fueron acidificadas con ácidos perclórico, peracético y acético cumplirían con los
valores propuestos.

Con respecto al ácido sulfúrico, únicamente la muestra que fue estabilizada con 57,600
ppm cumpliría con el criterio de clase B de la NOM por lo que sus posibilidades de
aplicación se reducen considerablemente.

Tabla 2. Eficiencias de destrucción de coliformes fecales y de inactivación de huevos de

helmintos.

Huevos de helmintos,
Coliformes fecales, log %
Ácido Máx Mín Prom Máx Mín Prom
Sulfúrico 4.81 3.13 4.05 61% 2% 31%
Perclórico 4.00 2.98 3.15 97% 62% 80%
Peracético 5.70 5.70 5.70 92% 77% 83%
Acético 5.56 1.41 4.61 98% 69% 88%

La Tabla 2 presenta un resumen de las eficiencias de destrucción de coliformes fecales

y de inactivación de huevos de helmintos logradas con cada uno de los ácidos
empleados. Se observa que en cuanto a coliformes fecales, el ácido peracético logró
una mayor destrucción en todas las dosis, llegando a valores por debajo del límite de
detección (3 NMP/g ST). Por su parte, el ácido acético logró una mayor inactivación de
huevos de helmintos llegando a concentraciones de 1.3 huevos viables/g ST. De
acuerdo con las eficiencias de estabilización para ambos parámetros, el ácido acético
presenta las mayores destrucciones por lo que se recomienda su uso en futuros
estudios de estabilización ácida.

La Figura 4 muestra tres huevos de Ascaris provenientes del lodo acidificado con ácido
acético. En el primero se observa claramente el daño presentado en la membrana del
huevecillo al parecer derivado de la acción del ácido sobre la membrana. Por su parte,
el segundo muestra el núcleo dañado por el ingreso del ácido acético al interior del
huevo impidiendo de esta manera el desarrollo de la larva. Los dos primeros huevos
fueron obtenidos después del período de incubación por lo que al no presentar larva en
su interior no se consideran viables, mientras que el tercero se encuentra larvado y se
presenta como ejemplo.

Fig. 4.a Fig. 4.b

Fig. 4.c
Figura 4. Huevos de Ascaris dañados en la estabilización con ácido acético: 4.a Huevo
dañado en la membrana; 4.b Huevo con el núcleo dañado; 4.c Huevo larvado.

CONCLUSIONES

De acuerdo con los resultados obtenidos en este trabajo, es factible emplear la

estabilización ácida para producir biosólidos que cumplan con las normas de la US EPA
y con la Normatividad Mexicana para su disposición o aprovechamiento en cuanto a
contenido de microrganismos y huevos de helmintos.
De los ácidos empleados en la estabilización, el acético presenta importantes ventajas
sobre los demás considerando los niveles de coliformes fecales y huevos de helmintos
alcanzados, así como el pH del lodo estabilizado. Adicionalmente, características como
su biodegradabilidad, facilidad de obtención e inexistencia de subproductos tóxicos lo
proyectan como el mejor ácido de los cuatro evaluados.

Es necesario realizar estudios adicionales con el ácido peracético y de ser posible

obtener un producto con una concentración mayor para evaluar su efecto sobre los
huevos de helmintos. Sin embargo, su alta reactividad y dificultad de manejo podrían
reducir la factibilidad de aplicarlo en un proceso a escala real.

El ácido sulfúrico presentó buenas remociones de coliformes fecales mas no así de

huevos de helmintos por lo que su uso en pruebas posteriores no se recomienda
además de la reducción considerable del pH que limitaría la aplicación de polímeros
para el acondicionamiento y desaguado.

Respecto al ácido perclórico, las densidades de coliformes fecales y huevos de

helmintos alcanzadas podrían producir lodos clase B de acuerdo con las normas. Sin
embargo, es necesaria una evaluación económica para determinar su factibilidad dentro
del proceso.

Es necesario realizar estudios posteriores que determinen la existencia de

recrecimiento de bacterias en los lodos estabilizados con el propósito de determinar su
aplicabilidad en la agricultura sin riesgos potenciales a la salud.

Tomando como base los resultados de este trabajo, se demuestra que el tipo de ácido
influye más en la destrucción de huevos de helmintos que el pH al cual se lleva a cabo
la estabilización.

AGRADECIMIENTOS

Los autores agradecen al Consejo Nacional de Ciencia y Tecnología y a la Dirección

General de Asuntos del Personal Académico de la UNAM el apoyo brindado para la
realización de este trabajo.

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