D

_
Fisiologa del Desarrollo
FISIOLOGA DEL DESARROLLO:
Estudiaremos la Biologa del desarrollo, desde la formacin del zigoto hasta el nacimiento o eclosin. El desarrollo tiene lugar en fases marcadas, comunes a todo embrin animal con distinta morfologa. Estas fases son; unin de espermatozoide y vulo, fecundacin, segmentacin, gastrulacin, (periodo larvario, metamorfosis) y adulto. TEMA I; Historia de la Biologa del Desarrollo Los primeros documentos sobre embriologa conocidos pertenecen a la civilizacin egipcia. Hipcrates realiz los primeros estudios embriolgicos. Aristteles hablaba ya de Morfognesis; aparicin progresiva de formas en el embrin. Leonardo da Vinci realiz dibujos exactos de disecciones de teros en gestacin.
Durante el siglo XVI comenzaron a aparecer ms cientficos dedicados al estudio de la biologa del desarrollo de los animales. En Italia destacan Vesalio, Falopio y Fabricio. Ciotier estudi la embriologa en aves. Harvey estudi el desarrollo en insectos, aves y mamferos. Pensaba que los animales inferiores aparecan por Generacin Espontnea, mientras que en animales superiores se produca Epignesis, o formacin de nuevas estructuras de nuovo. Por el contrario, Malpigio y Leeuwenhock defendan la teora de Preformacin; crean que los individuos estaban preformados en el interior del espermatozoide; lo llamaron el Homnculo.
Posteriormente Spallanzani descubri el valor de la unin vulo-espermatozoide. Wolff estudi la formacin de las hojas embrionarias, demostrando que la teora de Preformacin era falsa. Von Baer y Haeckel estudiaron embriologa comparada y evolutiva. Describieron los fetos de todos los vertebrados como muy similares en los estados iniciales, y progresivamente ms diferentes. Descubrieron que la ontogenia es una recapitulacin de la filogenia.
Weissmann (1834-1914) fue la primera persona en estudiar la Gentica del Desarrollo, y descubri los cromosomas determinantes. Boveri trabaj con equinodermos para estudiar tambin la gentica del desarrollo. En el siglo XX apareci la Embriologa Experimental, donde se trabaja con mltiples animales, como turbelarios, nematodos, drosophila, equinodermos, peces, anfibios o ratas. Estn implicados muchos cientficos como Boveri, Wilson, Driesch, Roux, Morgan o Spemann. La aportacin de Watson y Crick a la biologa fue muy importante para este campo de la embriologa. Entre las tcnicas utilizadas actualmente destacan la clonacin de mamferos transgnicos, o la tincin con telomerasa para crear telomapas de clulas madre. TEMA II; La Lnea Germinal Las Clulas Somticas son las clulas diferenciadas que conforman los tejidos del cuerpo del animal. Aquellas clulas que permanecen indiferenciadas hasta que forman los gametos reciben el nombre de Clulas Germinales Primordiales. Estas nunca se forman en el interior de las gnadas; se forman en el embrin y posteriormente migran hacia los rganos sexuales. Son clulas diploides y Totipotentes (en cuanto a la especializacin celular).
Las clulas germinales se encuentran en una regin especfica del embrin. El conjunto de las clulas germinales, que son mantenidas en una poblacin de generacin en generacin recibe el nombre de Estirpe Germinal. La estirpe germinal queda diferenciada muy pronto en el desarrollo. El Plasma Germinal es la porcin del citoplasma de una clula que dar lugar a clulas reproductoras. En insectos, las Clulas Polares son clulas germinales que se encuentran inicialmente donde se forma el Blastoporo, futuro ano. La invaginacin de la Gastrulacin facilita inicialmente el movimiento de estas clulas. A continuacin estas clulas penetran en los Sacos Gonadales, en el interior de las Clulas Gonadales somticas del Mesodermo. La migracin de las clulas polares es facilitada por Quimioatraccin; las clulas gonadales secretan sustancias que atraen a las clulas polares. Adems, las clulas del mesodermo secretan sustancias de repulsin. Existen varios genes y protenas implicados (en insectos, algunos encontrados tambin en ratn y humano como gcl): Gen gcl (germ cell less) determina la formacin de las clulas germinales. Si se producen mutaciones, los individuos aparentemente normales son estriles.
Gen Wunen facilita la migracin de las clulas germinales en el Endodermo. Gen Columbus implicado en la Quimioatraccin. Protenas OSKAR, NANOS, VASA relacionados con la aparicin de las clulas polares en la regin posterior de la blstula. Tambin en telesteos. En Telesteos las clulas germinales migran por quimioatraccin desde el Epiblasto hasta el Hipoblasto, utilizando para ello como soporte a clulas del mesodermo dorsal, para alcanzar a las clulas gonadales. La migracin ya se ha producido a las 24 horas del zigoto. En Anfibios se han realizado los primeros estudios sobre el Plasma Germinal (Bounovre, 1934). El Citoplasma Germinal se encuentra en el Polo Vegetal de la Blstula. Al formarse la Gstrula, el Plasma germinal se aproxima al ncleo del Blastmero, y lo recubre. Al igual que en el caso de los insectos, las clulas germinales migran desde el Endodermo (futuro tubo digestivo) hacia las hocedades del Mesodermo, utilizando para ello el Mesenterio Dorsal. Las invaginaciones que se producen en estas hocedades son las futuras gnadas indiferenciadas. La Fibronectina, protena de la matriz extracelular, facilita la migracin ya que se dispone deacuerdo al gradiente de concentracin que es seguido por las clulas en su migracin. Intervienen en la migracin los Microtbulos y la protena motora Kinesina; sta migracin implica cambios en la morfologa celular. Aves y Reptiles tienen un desarrollo especialmente similar, particularmente durante las etapas iniciales. Tienen el mismo tipo de huevo, rico en vitelo, y muchos patrones del desarrollo semejantes. Por ejemplo, la formacin en la blstula de un disco germinativo con pequeos blastmeros que darn lugar al cuerpo del animal en el Polo Animal, y mucho vitelo en el Polo Vegetal. El disco a su vez se diferencia en rea Pelcida y rea Opaca. Las clulas germinales utilizan en este caso las Clulas Endoteliales de los capilares sanguneos embrionarios para migrar por quimioatraccin hacia las gnadas, con las clulas sanguneas. En este caso la quimioatraccin no es especfica; es la misma molcula en las distintas especies. Las clulas germinales se extravasan y se incorporan al epitelio de la gnada. En Mamferos las clulas germinales se forman de manera distinta. No existe un citoplasma germinal, sino que las clulas germinales primordiales son independientes desde el principio, y se diferencian por interaccin con otras clulas vecinas. Para diferenciarlas se puede realizar una tincin con Fosfatasa alcalina. Aunque pueden presentar un desarrollo similar al de aves y reptiles, los mamferos tienen huevos sin vitelo. Se forma un disco germinativo en el polo animal, y un surco primitivo que se invagina e independiza formando una nueva capa de clulas (tubo neural). Las clulas de la mitad posterior quedan determinadas como clulas seas morfogenticas, debido a la accin del Factor BMP 8b (Bone Morfogenetic protein). Al igual que en anfibios, las clulas migran a favor del gradiente de fibronectina por el mesenterio y el tubo digestivo. Estas clula migran situndose entre el saco vitelino (reminiscencia evol. que luego degenera) y el endodermo (digestivo). Ah se produce una invaginacin, el Alantoides, desde donde migran las clulas germinales primordiales hasta las gnadas, prximas al rin, utilizando como soporte las clulas del endodermo, del tubo digestivo. Estn implicados distintos factores; Factor SCF o factor de proliferacin de clulas zepa, facilita la divisin de las clulas germinales y las clulas cepa hematopoyticas. Factor FGF o factor de crecimiento de fibroblastos (fibronectina), que tambin facilita el crecimiento de las clulas germinales. Factor TGF- o factor de crecimiento transformador tambin est implicado.
Pueden producirse errores en la migracin por falta de quimioatraccin. Si las clulas se situan en lugares indebidos pueden producir tumores llamados Teratomas. Son tumores benignos que pueden pasar desapercibidos, pero pueden aparecer donde se encuentran los dientes o en la piel. Las Clulas Germinales Primordiales son clulas diploides y Totipotentes, que se desarrollan en individuos adultos formando gametos femeninos o masculinos; pero tienen en ambos casos caractersticas comunes. Este desarrollo es muy particular, ya que dan lugar a clulas haploides por Meiosis; los Gametos. Al unirse un gameto masculino y uno femenino, aparecer un zigoto, celula de nuevo diploide. Las clulas germinales primordiales son clulas que provienen de la estirpe germinal de la especie, y por lo tanto se sabe que darn lugar a los gametos o clulas reproductoras. El ovocito, femenino, crecer en volumen pues acumular en su citoplasma al vitelo. Estas clulas tienen detencin en la primera meiosis y en la segunda meiosis. El espermatozoide, masculino, adoptar motilidad y slo transportar el material gentico. TEMA III; La Funcin Testicular Las Clulas Germinales sufren distintas especializaciones en las gnadas, hasta transformarse en Gametos. La primera diferenciacin es en Espermatogonias; clulas diploides que siguen multiplicndose activamente. A continuacin se produce un aumento del volumen del citoplasma, formndose los Espermatocitos Primarios. Aqu comienza la primera
divisin meitica que dar lugar a Espermatocitos Secundarios. La segunda divisin da lugar a las Espermtidas, haploides, cuyo citoplasma de especializa y se forma finalmente el espermatozoide. Este proceso se llama Espermatognesis.
Las clulas germinales en las gnadas masculinas se diferencian primero en Espermatogonias A1, con capacidad de mitosis activa; las clulas forman un sincitio ya que la citocinesis no llega a concluirse, y las clulas quedan unidas por puentes citoplasmticos. Estos puentes facilitan el transporte de nutrientes, y el mantenimiento del mismo estado de desarrollo en las distintas clulas. Esta primera diferenciacin depende de la accin del Factor BMP 8b y el aumento de la protena con mismo nombre. Los ratones mutantes BMP(-) son estriles. Estas Espematogonias diferenciadas A1 pasan a ser Espermatogonias A2, lugo A3 y A4. El paso de A1 a A2 tiene lugar en la regin cortical de la gnada. Desde ah, las clulas cada vez ms diferenciadas, se encontrarn ms prximas a la luz. Las Espermatogonias A4 tambin tienen capacidad mittica, y se especializan en Espermatogonias Secundarias, y finalmente en
Espermatogonias B, ambas con capacidad para multiplicarse, y unidas por puentes citoplasmticos. Todas estas clulas diploides existen y se forman a lo largo de la vida del individuo adulto, formando continuamente espermatozoides.
Las Clulas de Sertoli se encuentran a lo largo de los tbulos seminferos actuando como clulas se soporte para las clulas reproductoras que se estn diferenciando, adems de clulas nutritivas y de control del desarrollo de la lnea germinal. De hecho el citoplasma de las Clulas de Sertoli constituye el cuerpo del Tbulo, y alberga a las clulas reproductoras durante su desarrollo. En la cara interna de los tbulos se encuentra la luz, y en la cara externa la membrana basal que cubre toda la superficie.
Adems de actuar como soporte, las Clulas de Sertoli son clulas endocrinas, que liberan el Factor GDNF o factor neurotrfico glial. Este factor es fundamental en el control de la proliferacin y diferenciacin de las clulas reproductoras. Es liberado cuando la hipfisis libera FSH a la sangre; activa la proliferacin celular, inhibiendo a la vez la especializacin o diferenciacin de las clulas madre. De tal manera que cuando su concentracin es baja estas tienden a especializarse y no a multiplicarse. Las Protenas de reconocimiento y adhesin celular N-Cadherinas se encuentran en las membranas de las clulas reproductoras y de las clulas de sertoli. Esta unin tambin es facilitada por los receptores de azcar de las clulas de sertoli, y las Galactosil transferasa de la membrana de las clulas germinales, que unen galactosa. En los Espermatocitos, aumenta el volumen de citoplasma y se inicia la meiosis. Al finalizar la meiosis las clulas haploides o Espermtidas siguen unidas por puentes citoplasmticos. Su transformacin en Espermatozoides libres recibe el nombre de Espermiognesis. El espermatozoide es una estructura compleja formada por varias partes con funciones especficas, y que ha perdido la mayor parte del citoplasma que haba en la Espermtida: El Ncleo con la informacin gentica se encuentra en la Cabeza del Espermatozoide. Tiene forma ovoide y los cromosomas estn condensados por Histonas y Protaminas. Anterior al ncleo se encuentra la Vescula Acrosmica, o Acrosoma, derivada del Aparato de Golgi que contiene las enzimas necesarias para romper las membranas externas del vulo y que se produzca la fecundacin; Hialuronidasa, Acrosina, Fosfatasa, Fosfatasa cida, Neuraminidasa.
El Flagelo se inicia en los Centriolos de la espermtida, prximos al ncleo en la regin posterior del espermatozoide. En la base del flagelo (porcin intermedia), o Axonema, se encuentran agrupadas las mitocondrias que suministran el ATP necesario para el movimiento del flagelo. La Cola o Flagelo se forma por un par de mictotbulos centrales independientes, y nueve pares de microtbulos perifricos unidos (con 13-11 Protofilamentos), formados por protenas Tubulina y .
La porcin final de la cola, ms estrecha, carece de microtbulos. Las protenas Histonas H1 se encargan de la cohesin de los componentes del flagelo. Las protenas Dinena (ATPasa) facilitan la motilidad; se encuentra en brazos transversos entre los distintos pares de microtbulos perifricos.
10
Se diferencian dos tipos de Espermatognesis: La Espermatognesis Cstica es propia de Peces y Anfibios. Las clulas germinales se desarrollan en el interior de quistes en el testculo. En cada quiste se encuentran clulas de un nico tipo celular, como por ejemplo Espermatogonias A1, y se van desarrollando todas en bloque. Tambin se encuentran clulas de sertoli en el interior de los quistes. Estas clulas de sertoli se van destruyendo y regenerando, segn los gametos son liberados de los quistes. La Estermatognesis No Cstica es aquella en la que los gametos se forman en el interior de tbulos seminferos donde se encuentran (ordenados de corteza a lumen) todos los tipos de clulas reproductoras, y donde no hay destruccin de las clulas de sertoli. La participacin de las clulas de sertoli en la espermatognesis en tbulos seminferos destaca por la formacin de uniones estrechas entre estas clulas, formando dos compartimentos. En el compartimento externo, cercano a la membrana basal, se encuentran las espermatogonias, y los ncleos de las clulas de sertoli. A nivel de las uniones estrechas se forma la Barrera Hematotesticular. En la regin interna, hacia la luz del tbulo, se encuentra el segundo compartimento, con un lquido extracelulas diferente. En determinados instantes y lugares concretos las uniones estrechas se rompen para permitir el paso de Espermatogonias en diferenciacin. Esta barrera protectora inmune impide el rechazo de los espermatozoides. En el Testculo se pueden diferenciar dos tipos de tejidos; El tejido Gametognico contiene las clulas germinales, reproductoras y de sertoli; se trata del interior de los quistes o de los tbulos seminferos. El tejido Esteroidognico contiene las clulas endocrinas del testculo; se trata de las Clulas de Leydig. Estas clulas se encuentran agrupadas en paquetes triangulares, en la matriz muy irrigada por capilares sangneos y linfticos, e inervado, que se encuentra en el exterior de los tbulos. Sintetizan y liberan los Andrgenos. Los tbulos seminferos del interior testicular estn agrupados en paquetes por un Intersticio o membrana de tejido conjuntivo, recubierto a su vez por la Tnica Albugnea. Los tbulos seminferos contienen en su Lumen a los espermatozoides recin formados. Los Conductos Eferentes comunican el lmen de los tbulos con el Epiddimo; conjunto de pequeos conductos que abandonan el testculo, donde adems los espermatozoides adquieren movilidad. Este se puede dividir en tres zonas; una porcin inicial, una porcin intermedia, y una cola. Finalmente el epiddimo desemboca en el Conducto Deferente, nico para cada testculo, que lleva el semen hasta la Uretra. Las Glndula pares que se encuentran a lo largo del aparato reproductor sintetizan y liberan los lquidos necesarios para el mantenimiento de la motilidad y la nutricin de los gametos; se trata de las glndulas prostticas y las glndulas de la coagulacin. Se produce el control de la osmolaridad y pH del lquido seminal. El Semen formado se acumula en la vescula seminal. Todas estas estructuras se encuentran en el saco escrotal. Aunque los testculos se forman a nivel del rion, posteriormente descienden por cuestiones de Termorregulacin, para optimizar la produccin de los gametos. Pueden existir espermatozoides anormales; en funcin de su proporcin sobre el total de espermatozoides, estos pueden ser responsables de esterilidad. Entre los principales casos de encuentran las gotas lipdicas en el flagelo, la cola ausente, rota, bifurcada, doblada o enrollada. Tambin puede tener forma de pera, tener una membrana extra o ser demasiado larga o demasiado corta. Estas malformaciones dificultan su motilidad reaccin acrosmica y penetracin en el vulo. La Azoospermia es la ausencia de gametos en el lquido seminal. Se debe a la ausencia de su produccin en los tbulos, por ejemplo por problemas hormonales o
11
ausencia de clulas germinales, por migracin fallida. En ocasiones puede deberse a animalas en los conductos de transporte. Puede deberse a malformaciones congnitas, traumatismos o infecciones. La Oligospermia es el nmero reducido de espermatozoides, con escasa motilidad. Puede deberse a la edad avanzada, el estrs, los excesos de temperatura, o los productos qumicos como el tabaco. Las bajas concentraciones de ADN en el ncleo tambin es causa de esterilidad. Los toros Guernesey son estriles ya que sus espermatozoides quedan decapitados despus de su formacin. En los hbridos, como los mulos, la meiosis se detiene en fase de Espermatocitos Primarios. Los movimientos de la cola vienen marcados por la actividad de las Dinenas sobre los microtbulos. Los brazos de Dinena de ambos lados de la cola estn coordinados en desfase, facilitando el movimiento rectilneo. Este movimiento implica la modificacin de la concentracin de nucletidos y la apertura de los canales de calcio. Estos canales estn regulados por las protenas Cat-Sper, cuyo bloqueo podra ser utilizado como mtodo anticonceptivo. Tambin implica el mantenimiento del pH entorno a unos valores de 7,5; el el tracto femenino el pH es cido. Las elevadas concentaciones de cloro y magnesio, al igual que el calcio, aumentan la motilidad. El Sindrome de Kartagener se conoce en humanos y roedores; se trata de la ausencia de brazos de Dinena, lo que imposibilita la motilidad. Tienen adems propensin a enfermedades bronquiales por ausencia de actividad de los cilios, y elevada probabilidad de tener el corazn en el lado derecho. El Sndrome de Klinefelter se produce en individuos con genotipo XXY, y fenotipo de macho esteril. Carecen de clulas reproductoras en sus tbulos seminferos. La Termorregulacin es fundamental en mamferos para facilitar una temperatura de o 36,5 C, ptima para la espermatognesis. Para ello existe una musculatura especfica que regula la subida y bajada de los testculos al escroto. La concentracin de andrgenos elevada controla la bajada de las gnadas hasta el escroto durante el desarrollo ontognico. La Testosterona y el Factor INSL-3, similar a la insulina, secretados por las Clulas de Leydig, controlan este proceso. En caso de carencia se puede solucionar quirrgicamente, por Criptorquidea, para evitar la infertilidad. La ropa ajustada y otras causas de temperatura elevada son as responsables de esterilidad. Tambin es importante en aves cuyos testculos se encuentran en Sacos Areos. Otras causas de esterilidad son las carencias nutritivas en grasas o vitaminas, las sutancias mutagnicas y radiaciones UV, las drogas, los pesticidas y los productos qumicos txicos o insidiosos (leja, detergente), as como la obesidad. La Funcin Endocrina Testicular depende de las clulas de Sertoli y las clulas de Leydig. Las funciones de las Clulas de Sertoli son variables y necesarias para el desarrollo especfico de las clulas reproductoras. Sostienen, nutren y controlan los movimientos de estas clulas en los tbulos seminferos. Tambin controlan la liberacin de los espermatozoides al Lumen y fagocitan las clulas espermticas que degeneran, digirindolas en lisosomas. Son responsables de la sntesis y liberacin de: Protena ABP (Androgen Binding Protein) que fija los andrgenos facilitando la espermatognesis; contola los niveles adecuados de testosterona el los tbulos.
12
Estrgenos cuyo precursor son los Andrgenos secretados en las clulas de Leydig, que permiten el desarrollo de la Espermatognesis. Enzima Aromatasa. Glucoprotena Inhibina que inhibe la accin de la FSH. Protena Transferina de transaccin del hierro; no se conoce su funcin. Factor SGF o Factor de crecimiento germinal que favorece la mitosis de las clulas reproductoras. AMH es la hormona que impide el desarrollo de los conductos de Mller, propios del aparato reproductor femenino. Las Clulas de Leydig sintetizan los Andrgenos, las principales hormonas sexuales masculinas, que tambin son sintetizadas en corteza de las glndulas adrenales por estimulacin de la ACTH (Hormona Corticotropa). En el periodo fetal sintetizan tambin INSL-3. Se diferencian tres principales andrgenos, cuyo precursor es el Colesterol de las LDL que es procesado en las Mitocondrias y Retculo Endoplsmico; Testosterona (90%), Dihidrotestosterona y Epiadrosterona. Su sntesis viene controlada por el Eje HipotlamoHipfisis-Gnada desde el Sistema Nervioso, tal y como se representa en la siguiente imagen, donde GnRH es la Hormona liberadora de Gonadotropinas, LH la hormona Luteinizante, y FSH la hormona estimulante del folculo.
13
Los Andrgenos, liposolubles, son transportados fcilmente en sangre con ayuda de las protenas Albmina y Globulina. Ejercen su mecanismo de accin penetrando al ncleo de las clulas diana, y modificando la expresin de la informacin gnica. A las siete semanas de desarrollo fetal comienza la funcionalidad de las clulas endocrinas del testculo, debido a la presencia de Hormona hGC (Gonadotropina Corinica humana) materna, que llega a la Placenta. As comienza la Esteroidognesis, o sntesis de Esteroides Sexuales. Durante la Pubertad la concentracin de andrgenos aumenta de tal manera que se diferencian, desarrollan y mantienen los rganos sexuales, las estructuras sexuales accesorias, y los caracteres sexuales secundarios. Adems se inicia as el anabolismo de protenas del hueso y del msculo. TEMA IV; La Funcin Ovrica Al igual que en el caso anterior, las clulas germinales van a proliferar y diferenciarse en el interior de las gnadas. A diferencia de la Espermatognesis, cabe destacar que durante la Ovognesis se produce diferenciacin antes de la meiosis, que la meiosis se detiene dos veces, que, salvando excepciones como equinodermos y anfibios, la poblacin de clulas reproductoras es finita, y que una clula diploide dar lugar a un nico gameto y tres Corpsculos Polares.
Las Clulas Germinales Primordiales se diferencian formando Oogonias diploides, que se multiplican por mitosis en el Embrin y en el Feto. En la edad adulta terminan las mitosis y
14
el nmero de Oogonias disminuye progresivamente por Apoptosis; se trata de la Atnesia. Slo algunas pasarn a transformarse desde la Adolescencia en Ovocitos primarios, que permanecern en la Profase I de la meiosis. Aunque algunos sern destrudos por apoptosis, cuando se alcanza la madurez sexual se desbloquea la meiosis y un grupo de Ovocitos primarios se transformar en Ovocitos Secundarios, que a su vez quedarn bloqueados en Metafase II. La meiosis slo concluir despus de la unin con el Espermatozoide. La ovulacin se produce cclicamente siguiendo un ciclo lunar de 28 das en humanos, marcado por el sistema endocrino: los Ovocitos Secundarios son liberados (uno en humanos) y podrn ser fecundados.
El Ovocito Secundario o vulo contiene un ncleo haploide y una membrana plasmtica con permeabilidad selectiva para sodio y potasio. Tiene un elevado nmero de componentes citoplasmticos variados, un elevado metabolismo y sntesis proteica activa. Despus de la fecundacin la transcripcin de ARNm y la sntesis proteica no tendr lugar, y se debern aprovechar los componentes de reserva sintetizados en el vulo. Entre los principales componentes se encuentran: Determinantes Morfogenticos Citoplasmticos que sern transmitidos a los diferentes blastmeros durante la segmentacin. Se trata de activadores o represores de la expresin gnica. De esta manera las clulas de la blstula podrn diferenciarse. Sustancias Qumicas Protectoras distintas en los diferentes grupos animales. Evitan depredacin, desecacin, infeccin y mutaciones en el huevo. Son especialmente importantes en animales con fecundacin externa. Grnulos de Vitelo nutritivos. El Vitelo es la sustancia de reserva del Embrin. Su cantidad depende de las especies. Se encuentra en Grnulos en el Ovocito. Las Aves y
15
Fisiologa del Desarrollo Reptiles tienen gran cantidad de vitelo, pero los mamferos se alimentan de los tejidos de la madre, y pueden prescindir de vitelo. Mitocondrias. Cortex o Porcin Externa del citoplasma, endurecida. Se encuentra una elevada cantidad de microfilamentos de actina que polimerizan justo en el momento previo a la fecundacin, sobresaliendo y formando las Microvellosidades para la retencin de espermatozoides. Tambin se encuentran los Grnulos Corticales que evitan la Polispermia.
y en los mamferos
Se diferencian varios tipos de huevos por la cantidad de vitelo que contienen y su disposicin. El vtelo impide que se formen los planos de segmentacin. Los huevos Alecitos carecen de vitelo. Se trata de los huevos de mamferos, cuyo embrin se alimenta a travs de la placenta. Los huevos Oligolecitos tienen poca cantidad de Vitelo. Este puede estar repartido por todo el huevo, en huevos Isolecitos, o encontrarse exclusivamente en el Polo Vegetal, en huevos Heterolecitos. Los huevos Telolecitos tienen una gran cantidad de Vitelo. Es el caso de Aves y Reptiles, que presentan segmentacin discoidal y el vitelo queda en el Polo Vegetal. Pueden ser Centrolecitos si el Vitelo queda situado en la regin central del embrin; es el caso de los insectos.
16
Los Equinodermos tienen Ovocitos Isolecitos. Dado que se produce fecundacin externa, tienen una Membrana Gelatinosa externa de Glucoprotenas que tiene como funcin, entre otras, atraer a los espermatozoides. En su citoplasma contiene toda la maquinaria necesaria para la sntesis proteica, y para la multiplicacin del ncleo y la formacin de nuevas membranas plasmticas en la blstula. Contienen vesculas lipdicas. Presentan Vitelogenina, o protena vitelina. Los Insectos tienen Ovocitos Centrolecitos muy ricos en nutrientes. El aparato reproductor femenino consta de dos ovarios que desembocan en oviductos. Las Ovariolas son receptculos que se forman en el Ovario, donde tendr lugar la Ovognesis en sentido prximo-distal, es decir, hacia el oviducto. Se diferencian tres tipos de Ovognesis; en todos ellos est implicada la Vitelogenina, sintetizada en los cuerpos grasos como respuesta a las hormonas HJ (hormona juvenil) y Ecdisona. Es transportada a travs de la Hemolinfa.
En la Ovognesis Paranostica las clulas germinales se desarrollan a lo largo de la Ovariola, quedando cubiertas por las clulas del folculo. El volumen del Ovocito aumenta segn se carga de Vitelo.
17
La Ovognesis Merostica se divide a su vez en dos tipos. En la Telotrfica las clulas germinales van a estar conectadas por puentes citoplasmticos a los Trofocitos; clulas nutritivas, que cargarn el huevo de vitelo. En la Politrfica las clulas germinales permanecen unidas hasta el estado de 16 clulas. En este momento una se diferenciar a ovocito y las otras 15 sern nutricias y cargarn el huevo de vitelo; todas dentro del folculo. El Corion es la membrana protectora formada por las clulas del folculo. Se forma en el una estructura muy particular, se trata del Micropilo, un poro a travs del cual penetra el espermatozoide. As se evita la deshidratacin y se permite el intercambio gaseoso. Los peces tienen huevos telolecitos, similares a los de las aves y reptiles, aunque no presentan sgmentacin discoidal. Pueden ser Ovparos, pudiendo presentar fecundacin externa, u Ovovivparos. El ovocito est cubierto por un Corion con un Micropilo, que tiene un importante papel en la osmorregulacin. Los Anfibios tienen huevos Heterolecitos. El vitelo es un componente citoplasmtico determinante para el establecimiento de los polos animal y vegetal. En el polo animal queda el plasma germinal; el ncleo (denominado vescula germinal) es desplazado por el vitelo. Por encima de la membrana plasmtica se encuentra la Membrana Vitelina, que contiene el Vitelo (Zona Pellucida en Mamferos). Durante la ovulacin el vulo es liberado y quedan adheridas a su superficie algunas clulas del folculo; son las Clulas del Cmulo que forman la Membrana Granulosa. Por encima se encuentran la Teca Interna, muy irrigada, donde se toma la Vitelogenina, y la Teca Externa o epitelio peritoneal.
FSH
LH
La disposicin de los Grnulos de Vitelo, los Microfilamentos y los Microtbulos determinan la distribucin ordenada de las clulas en los polos animal y vegetal. La adquisicin del Vitelo se produce durante la Ovognesis, y puede tardar aos. El Vitelo se dispone en capas concntricas, siempre en el Polo Vegetal. La Hormona Vitelogenina es sintetizada en el
18
hgado como respuesta a la FSH, mediada de forma indirecta por los Estrgenos. Penetra en el Ovocito por Pinnocitosis, en el Polo Vegetal, y a partir de sus vesculas se forman los Grnulos de Vitelo. La hormona LH acta sobre las clulas foliculares facilitando la sntesis de Progesterona, que favorece la Ovulacin y la reanudacin de la meiosis. En Aves y Reptiles los huevos son Telolecitos, y presentan adems de la membrana vitelina y Vitelogenina, otras membranas nutritivas y protectoras como el Albumen, rico en Albmina, muy hidratada, que recubre el vitelo. Tambin se tienen que depositar las membranas interna y externa de la cscara, y la propia Cscara de carbonato clcico. El huevo abandona el ovario y desciende por el oviducto hasta que se produce la puesta a travs de la cloaca. El albumen y las distintas capas de la cscara se depositan durante este recorrido, durante el cual, si ha habido fecundacin, comienza la segmentacin. Las Chalazas son filamentos enrrollados que mantienen el Blastodisco del Polo animal siempre en posicin superior. Hay una cmara de aire, ya que el huevo no realiza intercambios con el exterior, excepto algunos gases; son huevos Cleidoidos. Presentan teca interna y teca externa. Los huevos de mamferos son huevos Alecitos. Las hembras tienen un tero bicrneo y oviductos cortos. En este caso la membrana plasmtica est recubierta por la Membrana Pellucida, que corresponde a la membrana Vitelina. En su exterior se encuentran las clulas foliculares o Clulas de la Granulosa y las tecas interna y externa. La Corona Radiada se forma por un epitelio monoestratificado de clulas foliculares, ms prximas a la zona pellucida. Durante el desarrollo del folculo las clulas de la granulosa abren espacios que hacen aumentar el volumen del folculo; se trata del Antro Folicular, que contiene lquido sintetizado por las clulas de la granulosa. Despus de la ovulacin algunas clulas de la granulosa quedan unidas al vulo y reciben el nombre de Clulas del Cmulo.
19
De hecho, existe un desarrollo del folculo, paralelo al desarrollo del vulo. En una etapa inicial se forma la Ovogonia, sin Folculo. Cuando se forma el Ovocito primario comienza la formacin del Folculo Primario, por multiplicacin de las clulas foliculares. Cuando estas clulas comienzan la liberacin de lquidos que forman por presin las primeras cavidades en el Folculo Secundario. En el Folculo Terciario o de Graaf el Antro Folicular est completamente formado. El Ovocito secundario, la Zona Pelcida, y algunas clulas foliculares (clulas del Cmulo) reciben como conjunto el nombre de Cmulo Oforo o Cmulo Prolgero. Si se produce fecundacin se finaliza la meiosis y los corpsculos polares son liberados. Las clulas de la Granulosa estn unidas al ovocito por uniones GAP, facilitadas por Conexones (protenas conexina). Estas uniones facilitan los intercambios de sustancias entre los citoplasmas de azcares, aminocidos y Factor Inhibidor de la Meiosis, que la bloquea en Metafase II. El Ovocito, a su vez, controla el desarrollo del folculo por medio de varios Factores de Crecimiento (GF), como TGF-, o VEGF (vascular endotelial) muy importante para la irrigacin de la Teca Interna. Si no se produce fecundacin, el vulo es expulsado del folculo y no finaliza la meiosis. La hormona LH modifica las clulas de la granulosa transformndolas de Clulas Lteas. Las clulas del Cuerpo Lteo o Cuerpo amarillo (resto del folculo) degeneran formando el Cuerpo Albicans o Cuerpo Blanco. Si hay fecundacin el balance hormonal ser distinto, y el vulo terminar la meiosis y comenzar la segmentacin. Las clulas perifricas del embrin, o Clulas del Trofoblasto, que formarn la placenta, liberan Hormona hCG (Gonadotropina Corinica humana) que mantienen al Cuerpo Lteo, el cual formar durante el embarazo el Cuerpo Gravdico, fundamental para la sntesis de la hormona Progesterona. Esta hormona, a su vez, estimula el engrosamiento de la pared uterina y facilita la implantacin del embrin, y el aumneto de la irrigacin sangunea. Una vez que se ha formado la Placenta, el Cuerpo Gravdico degenera (3-4 meses). Si se extirpa el Cuerpo Gravdico antes se produce aborto. El desarrollo del folculo, desde la oogonia hasta el cuerpo lteo, sucede en la regin cortical del Ovario. La membrana del Ovario recibe el nombre de Epitelio Germinal, pero no est formado por clulas germinales. Se encuentra altamente irrigado. Todo el proceso viene controlado por la Endocrinologa Femenina. Durante el desarrollo de los Folculos, en presencia de FSH estos comienzan a sintetizar Estrgenos. Cuando las concentraciones de estrgenos son bajas, el Eje Hipotlamo-Hipofisis-Gnada es inhibido, sin embargo cuando el folculo est muy desarrollado y las concentraciones de estrgenos son elevadas, se estimula el Eje y aumenta la liberacin de FSH, y sobre todo de LH. El aumento de LH desencadena por un lado la Ovulacin; en este proceso durante el cual el vulo debe romper la pared del folculo y ser liberado implica varias protenas y enzimas. Las Metaloproteasas son enzimas que digieren la Matriz Extracelular. Las Colagenasas son enzimas especficas capaces de despolimerizar el colgeno. Tambin intervienen Proteasas Activadoras del Plasmingeno. Las Prostaglandinas favorecen el paso del agua al interior del Antro Folicular, haciendo aumentar la presin interna del folculo (as como la presin de turgor de los vegetales). La fuerza ejercida por esta presin termina rompiendo la pared del Folculo de Graaf y facilitando la liberacin del vulo. Esta salida del vulo es facilitada por la regin del folculo en la que la capa de clulas es menos gruesa. Adems, en presencia de LH, el Cuerpo Lteo sintetiza Estrgenos y Progesterona, que inhiben al Eje, Inhibina (inhibe FSH) y Relaxina (facilita la relajacin del msculo liso uterino).
20
21
Los Estrgenos y los Andrgenos se pueden interconvertir. Las Clulas de la Teca sintetizan Andrgenos a partir del Colesterol. El papel de las Clulas de de la Granulosa es de transformar los Andrgenos, que atraviesan la Membrana Basal, en Estrgenos cuando estos son necesarios. Estas Hormonas Esteroideas penetran al ncleo de la clula diana modificando la expresin gnica. Los Estrgenos estn relacionados con el desarrollo del aparato reproductor femenino, del ovario, includos los Folculos, el tero y el Oviducto. Tambin controla el metabolismo de las protenas del hueso y msculo, por lo que con la menopausia puede aparecer osteoporosis. Tambin estn relacionados con el desarrollo y el mantenimiento de los caracteres sexuales secundarios. La Progesterona est relacionada con los procesos necesarios para la gestacin y el parto, como la sntesis de leche en las glndulas mamarias, el crecimiento del Endometrio, la inhibicin de FSH en la Adenohipfisis (implicada Inhibina, sintetizada por el Cuerpo Lteo y Clulas de la Granulosa) y el desarrollo correcto de la gestacin. La Relaxina relaja la musculatura uterina en caso de gestacin. Ralentiza los movimientos de la pared uterina facilitando la implantacin del zigoto. Adems estimula la sntesis de nueva membrana uterina, facilitando el parto. En caso de gestacin, se desarrolla un elevado nmero de receptores para LH y FSH en el Folculo. Algunos ovocitos detenidos en la Meiosis muestran un aspecto caracterstico en el interior del ncleo; se trata de los Cromosomas Plumosos, agrupados por pares homlogos, desespiralizados; estn realizando la sntesis de ARNm de forma muy activa. Este material ser utilizado por el Zigoto y el embrin en los primeros estados, ya que durante ese tiempo se detiene el metabolismo celular.
El Ciclo Menstrual a nivel del tero, del Ovario y del Foliculo tambin es controlado por el sistema Endocrino. Durante la Fase Menstrual (4 das) los folculos primarios sintetizan pequeas cantidades de Estrgenos que inhiben al Eje H-H-G. Se destruye el Estrato Funcional del Endometrio, y solo se mantiene el Estrato Basal, de manera que disminuye el grosor de la
22
pared uterina. Supone la ruptura de capilares y prdida de sangre, adems de prdidas de las mucosidades y de clulas epiteliales. Las Prostaglandinas, que favorecen la ruptura del folculo, tambin ejercen su accin en la pared uterina, facilitando la constriccin de arteriolas y vasos sanguneos, disminuyendo el flujo de sangre y facilitando la muerte celular por falta de oxgeno. Durante la Fase Folicular (9 das) la Hormona FSH estimula el desarrollo del Folculo y la produccin de los Estrgenos en l, que a su vez estimulan la regeneracin del Estrato Funcional del Endometrio. El da 14 del ciclo la concentracin de Estrgenos se hace muy elevada, por lo que se estimula al Eje Hipotlamo (GnRH) Hipfisis (LH y FHS) Gnada (Estrgenos y Progesterona). A su vez, LH estimula la Ovulacin. Entonces aumenta la concentracin de Metaloproteasas y Proteasas Activadoras de Plasmingeno y se rompe el Folculo de Graaf liberando al vulo y las Clulas del Cmulo, y transformndose en Cuerpo Lteo. Durante la Fase Post-Ovulatoria (13 das) el Cuerpo Lteo sintetiza Estrgenos y una gran cantidad de Progesterona. El Estrato Funcional se mantiene ya que cabe la posibilidad de que se produzca fecundacin; si se produce comenzar la sntesis de hCG (Gonadotropina Corionica humana) que mantiene al Cuerpo Lteo y al Estrato Funcional del Endometrio, facilitando la implantacin. Si no el Cuerpo Lteo se transforma en Cuerpo Albicans y cesa la produccin de Progesterona, por lo que el ciclo recomienza. TEMA V; Biologa Celular de la Fecundacin Existen dos caractersticas que definen la Fecundacin; Se produce la fusin del material gentico de los gametos, y se forma el Zigoto, primera clula del futuro individuo. Existen distintas etapas de la fecundacin, comunes a todos los Filum; Contacto vuloEspermatozoide, Reaccin Acrosmica, Contacto Espermatozoide-Membrana Vitelina, Fusin de las Membranas de los Gametos, Penetracin y Fusin de los Ncleos. Existen diferencias entre las especies. Estudiaremos la Fecundacin Externa de Equinodermos y la Fecundacin Interna en Mamferos. En animales con Fecundacin Externa, como muchos invertebrados acuticos o los Telesteos, el Espermatozoide es atrado hacia el vulo por Quimioatraccin o Quimiotaxis. En el caso de muchos peces el espermatozoide debe ser atrado al Micropilo. Esta atraccin debe ser altamente especfica para cada especie animal. Los ovocitos han terminado la meiosis. Es el caso de los Equinodermos; por ejemplo de O. caudiculata, estudiada por Miller en 1978. Los espermatozoides de Equinodermos adquieren motilidad slo en las condiciones de osmolaridad y pH del agua marina, facilitada por Dinena ATPasa Microtbulos del flagelo. Existen protenas distintas para cada especie que facilitan la Quimioatracin, como Resact o Speract. As los gametos alcanzan la cubierta mucosa del vulo. Los Receptores para Pptidos de Guanidil Ciclasa de la membrana del espermatozoide (GTP-GMPc) facilitan la apertura de los canales de calcio y la entrada del in al citoplasma, movilizando el flagelo. Cuando el espermatozoide establece contacto con la Cubierta Mucosa del vulo, se produce la Reaccin Acrosmica. Los Polisacridos unidos a Ines Sulfato en la Cubierta Mucosa permiten su reconocimiento por el espermatozoide, que libera por exocitosis el contenido de la Vescula Acrosmica. Se produce la digestin local de la cubierta del vulo,
23
facilitada por la liberacin de H + que se compensa por la toma de Ca2+. La digestin est acompaada por la extensin del Filamento Acrosmico, que atraviesa la cubierta reblandecida.
La formacin de este filamento acrosmico viene facilitada por la polimerizacin de los Microfilamentos de Actina, que est a su vez favorecido por la entrada de calcio, y la activacin de la protena Rho B. Los Microfilamentos se alargan en la regin anterior del espermatozoide. En la membrana del filamento se encuentran Bindinas que, al igual que las molculas de quimioatraccin y los polisacridos de reconocimiento, son especficas y asegura que la fecundacin se produce entre individuos de la misma especie. El Material Gentico puede penetrar al vulo a travs del Filamento Acrosmico. Los Mecanismos para Evitar la Polispermia son fundamentales en enimales con fecundacin externa. Es muy importante que uno, y slo uno, de los espermatozoides penetre al vulo. Por ello disponen de dos mecanismos diferentes; un Bloqueo Rpido, exclusivo de estos animales, y un Bloqueo Lento, similar al de mamferos, de la Polispermia. El Bloqueo Rpido tarda muy poco tiempo en activarse, pero su efecto es poco duradero, y debe ser solapado por el Bloqueo Lento. A los 3-4 segundos del contacto con el espermatozoide, se produce la despolarizacin del vulo, que pasa de un potencial de reposo externo de membrana de -70mV, a +20mV, por entrada masiva de Sodio y salida de Potasio. Durante la despolarizacin el ovocito no puede ser fecundado, pero al cabo de un minuto la clula recupera el Potencial de Reposo. El Bloqueo Lento se produce por la liberacin de los Grnulos Corticales del Ovocito, y es muy similar en todos los filos. En algunos, casos como los insectos, la presencia del Micropilo como nica va hacia el ovocito funciona como mecanismo para evitar la Polispermia.
24
En Equinodermos, los Proncleos haploides, con sus respectivos Centriolos, tienden a centrarse en el citoplasma y se produce la Fusin del Material Gentico. Despus de la primera divisin del Zigoto, los dos Blastmeros no terminan de separarse. El caso de los Mamferos es ms difcil de estudiar. Para comenzar presentan Fecundacin Interna, y producen una cantidad limitada de ovocitos. En este caso, millones de espermatozoides son eyaculados, y slo uno fecundar a cada vulo (dependiendo de las especies, puede haber solo uno como en humanos, o hasta 10 como en ratas). La importancia de la Quimioatraccin es menor, pero la motilidad de los espermatozoides debe ser estimulado en el lquido vaginal. El espermatozoide deber pasar por varios procesos en la vagina hasta que alcance al vulo; Activacin, Capacitacin, Hiperactivacin, Reconocimiento, Reaccin Acrosmica, Adhesin y Fusin de las Membranas.
Aunque la importancia de la Quimiotaxia es menor que en Equinodermos, existen molculas que atraen al espermatozoide hacia el vulo. Adems los espermatozoides tambin responden a Termotaxia, dirigindose hacia la regin Ampular del tero, donde la tempertatura es de unos 2 oC superior. Entonces se produce la Capacitacin, que es uno de los procesos ms importantes en el caso de los mamferos. Los componentes estructurales y funcionales del espermatozoide van a ser modificados por el fludo interno del tracto femenino. La membrana del espermatozoide va a perder colesterol, que ser capturado por la albmina del fludo. Adems la membrana perder tambin protenas e hidratos de carbono, ya que impiden su unin a la Zona Pellcida del vulo. Se produce la fosforilacin proteica, la entrada de Bicarbonato y Calcio, y la salida de Potasio que producen una hyperpolarizacin de la membrana del
25
espermatozoide. Para terminar la capacitacin los espermatozoides se unen a las paredes del oviducto, antes de alcanzar la regin Ampular. Esta serie de reacciones conlleva un tiempo. Los distintos tiempos de cada espermatozoide contribuye a evitar la Polispermia. La Quimiotaxia se produce por las secreciones de las Clulas del Cmulo, foliculares, que rodean al Ovocito despus de la Ovulacin. Las sustancias secretadas atraen a los espermatozoides capacitados. La Reaccin Acrosmica tiene un papel fundamental para permitir el paso del espermatozoide a travs de la Zona Pellucida. Sucede de forma similar a Equinodermos. Esta membrana, que corresponde en Mamferos a la membrana vitelina, es una Matriz Glucoproteica a modo de entramado, externa a la membrana plasmtica del ovocito. Se encuentran fundamentalmente tres unidades repetidas unidas en el entramado; ZP1, ZP2 y ZP3. ZP3 es la primera con la que contacta la membrana del espermatozoide, despus de contactar con otras protenas perifricas como SED1. Existen distintas protenas de la membrana del espermatozoide que establecen contacto con los componentes de la Zona Pellucida; la Protena SP-56 se une a la Galactosa; el enzima Galactosil transferasa se une a los restos de N-Acetil-Glucosamina en ZP3, activando a la Protena G del Espermatozoide; la Protena P95 se une a ZP3, activando su porcin interna con actividad Tirosin-kinasa. La actividad de la Protena G y de la Regin Tirosina-Kinasa facilita la entrada de calcio al interior del espermatozoide, desencadenndose la exocitosis de la Vescula Acrosmica. ZP2 tiene un papel secundario uniendo al espermatozoide, despus de la liberacin del contenido del Acrosoma.
Despus de la Reacin Acrosmica se produce la Unin de las Membranas Plasmticas de los Gametos, tanto en Invertebrados como en Vertebrados. Al igual que en el caso anterior, la polimerizacin de Microfilamentos de Actina tiene un papel fundamental para la formacin del Cono de Fecundacin, que permitir la penetracin del ncleo del espermatozoide a travs de la Zona Pellucida y la Membrana Plasmtica. Tambin intervienen los Fosfolpidos de membrana y las Protenas Fusognicas cuyo papel es similar al de las Bindinas de
26
Equinodermos. Finalmente se produce contacto, reconocimiento y unin entre las Fertilinas de la membrana del espermatozoide y las Integrinas del ovocito. El Espermatozoide contacta con la membrana del Ovocito lateralmente. El Mecanismo para evitar la Polismermia en mamferos se limita a la Reaccin Cortical, que se corresponde con el Bloqueo Lento de equinodermos. Los Grnulos Corticales de la regin externa del ovocito liberan su contenido por exocitosis unos segundos despus de la fecundacin. La Reaccin Cortical se produce como respuesta a la entrada masiva de iones Calcio al citoplasma del Ovocito. Los receptores de espermatozoide de la membrana del vulo activa a una Protena G, que activa a su vez a Fosfolipasa C. Esta enzima de membrana transforma PIP2 en DAG (Diacil-Glicerol) y IP3 (Inositol Trifosfato). DAG activa a una Protena Kinasa C que facilita la entrada de Sodio y la salida de Potasio y Protones del ovocito, disminuyendo el pH en el exterior. IP3 facilita la apertura de los Canales de Calcio del Retculo Endoplasmtico. De esta manera se libera el contenido de los Grnulos Corticales. Los componentes liberados permanecen entre la membrana plasmtica y la membrana pellucida, impidiendo la adhesin de nuevos espermatozoides. Las Proteasas rompen las estructuras proteicas que unen las dos membranas (y los receptores de Bindinas en Equinodermos). Conforman as la Membrana de Fecundacin. Los Mucopolisacridos absorben agua por presin osmtica aumentando el volumen de esta membrana que se forma. Las Peroxidasas endurecen la membrana de fecundacin. Las Protenas Hialinas comienzan a formar una membrana externa a la membrana de fecundacin, llamada Membrana Hialina, que proporciona consistencia y evita la separacin del los primeros blastmeros despus de la segmentacin. Ambas membranas se forman y se expanden por toda la superficie del vulo desde el punto en que se ha unido el espermatozoide. Adems se produce la Reaccin de Zona, que implica cambios en las protenas ZP3 y ZP2 que impiden su unin a otros espermatozoides. Cuando se produce la Penetracin del Proncleo del espermatozoide, el ovocito an no ha concluido la segunda divisin meitica. Despus de la fecundacin la meiosis concluye, y el segundo corpsculo polar es liberado. En el ovocito exiten reservas de NAD+ kinasa y de ARNm preformados, para facilitar la sntesis proteica. Se produce entonces la Distribucin del Material Citoplasmtico, y los distintos Determinantes Morfogenticos segregan hacia unos u otros Blastmeros, activando y reprimiendo genes. El metabolismo del ovocito acompaa la reorganizacin del citoplasma. Los Movimientos Citoplasmticos importantes son facilitados por sistemas motores de Kinesina ATPasa Microtbulo, como por ejemplo la aparicin de la Media Luna Gris. TEMA VI; La Segmentacin Embrionaria La Segmentacin es la separacin mittica del zigoto diploide para formar primero una Mrula, y posteriormente una Blstula. Estas clulas diploides que resultan de la segmentacin reciben el nombre de Blastmeros, y su volumen es cada vez ms reducido, cuanto mayor es su nmero; de tal manera, el volumen final de la Mrula es el mismo que el volumen inicial del Zigoto. De hecho se trata de un caso especial de Mitosis en cuyo ciclo no se incluye la fase G1 de crecimiento celular. Por ello el volumen de las clulas hijas es del volumen de las clulas madre. Los ARNm y las Protenas sintetizados en el Ovocito regulan la velocidad de divisin y la localizacin final del los distintos Blastmeros. La tasa de multiplicacin celular supera a la del
27
cncer. Los ejes embrionarios son adquiridos por lo general en esta etapa del desarrollo, y el orden y ngulo de los planos de segmentacin que aparecen en el embrin nunca se producen al azar.
Erizo de mar
Rana
Ave
Insecto
El Primer Plano de Segmentacin viene determinado por el punto de entrada del espermatozoide al ovocito, y por los Movimientos Citoplasmticos de la Fecundacin. El resto de planos y surcos de segmentacin estarn controlados por un lado por el contenido citoplasmtico, determinado por el Huso Mittico y el momento en el que este se forma, y por otro lado por la cantidad y posicin del Vitelo en el huevo, ya que en las regiones con vitelo se forman menos Blastmeros, de mayor tamao. As la mayor presencia de vitelo determina el Polo Vegetal, y el resto de Blastmeros, que se dividen ms rpidamente conforman el Polo Animal. La Segmentacin puede ser Holoblstica o Total cuando todo el Zigoto se divide por igual, o Meroblstica o Parcial cuando se divide slo una parte del zigoto, mientras el resto
28
contiene una gran cantidad de Vitelo. Dentro de cada tipo de segmentacin podemos encontrar subtipos, en funcin de los Ejes de Segmentacin del Zigoto.
Se diferencian las segmentaciones Holoblastica Radial, Holoblstica Espiral, Holoblstica Bilateral, Holoblstica Rotacional, Meroblstica Discoidal y Meroblstica Superficial. Adems se diferencian la Segmentacin Igual, cuando todas las clulas resultantes son iguales, y la Segmentacin Desigual, cuando el tamao de las clulas de los Polos Animal y Vegetal es diferente. Las especies que tienen poco vitelo suelen presentar una forma larvaria temprana que debe alimentarse para finalizar su desarrollo. En el caso de los mamferos esta larva es el feto, que se alimenta de la placenta. El Factor MPF (factor promotor de mitosis), adems de reiniciar la mitosis en el zigoto, regula el ciclo celular de los Blastmeros. Se compone de dos subunidades; cdK2 y Ciclina b. La ciclina tiene un comportamiento cclico, y cuando es sintetizada facilita la Mitosis. El Citoesqueleto tiene un papel fundamental durante la mitosis. En la Cariocinesis el Huso Mittico, formado por Microtbulos, juega un papel esencial para la reparticin del material gentico. Durante la Citocnesis los Microfilamentos de Actina forman un Anillo Contractil que facilita la separacin del Citoplasma y la membrana. Los Equinodermos presentan Segmentacin Holoblstica Radial, generalmente Desigual, pero en algunos casos Igual.
29
Desde que se forman los 8 primeros blastmeros, quedan definidos los polos Animal y Vegetal. A partir de la formacin del cuarto plano de segmentacin se produce la alternancia de planos, hasta la formacin de una Mrula maciza, rellena de blastmeros en su interior. En este momento los Blastmeros comienzan a secretar lquidos hacia el interior, desplazando a las clulas y formando una cavidad interna; el Blastocele. Esta estructura recibe el nombre de Blstula. Cuando la segmentacin es Desigual, se pueden diferenciar en el Ovocito antes de la fecundacin tres tipos de Citoplasma, que darn lugar a los tres tipos de Blastmeros, de Polo Animal a Polo Vegetal son; Mesmeros, Macrmeros y Micrmeros. Mesmeros y Macrmeros se subdividen a su vez en capas ecuatoriales, respectivamente An1, An2 y Veg1, Veg2. Cuando se forma la Blstula, todas las clulas quedan en contacto directo con el lquido del Blastocele en el interior, y con la Membrana Hialina en el Exterior. Los blastmeros dispuestos en un estrato forman entre s Uniones Estrechas. Los Blastmeros del Polo Animal secretan enzimas que rompen la Membrana de Fecundacin. Entonces aparecen Cilios externos en la blstula, que facilitan su motilidad. Los Micrmeros presentan un desarrollo independiente a las otras clulas. El factor de trasncripcin -Catenina (Wnt) se acumula en el ncleo de los blastmeros que van a dar lugar a los micrmeros, permitiendo posteriormente la Gastrulacin. Los Ejes de Simetra del embrin quedan definidos; El Polo Vegetal es Posterior, el Polo Animal es Anterior, en relacin con el primer plano de segmentacin. La Expresin del Gen NODAL en el lado Derecho de la Blstula de equinodermos se expresa en el lado derecho (a diferencia de lo que sucede en otros filos) determinando las mitades derecha e izquierda, y en consecuencia Ventral y Dorsal.
Los anfibios presentan Segmentacin Holoblstica Radial Desigual, al igual que la mayora de Equinodermos. Sin embargo, en este caso los Polos Animal (Micrmeros) y Vegetal (Macrmeros) quedan definidos ya en el estado de 8 clulas, y no solo por el contenido citoplasmtico, sino tambin por el tamao; el primer plano de segmentacin ecuatorial est desplazado hacia el polo animal. Desde este momento el distinto tamao de las clulas se
30
mantiene, de manera que al formarse en Blastocele, este se encuentra desplazado hacia el Polo Animal. Los Blastmeros presentan Uniones ntimas mediadas por EP-Cadherinas. En el Polo Vegetal se encuentra el Vitelo, por lo que las divisiones son ms difciles y lentas, y el nmero final de Macrmeros es inferior al de Micrmeros.
Polo Animal Polo Vegetal
Los Ejes de Simetra son adquiridos de un modo particular, debido a los Movimientos Citoplasmticos de formacin de la Media Luna Gris que suceden en el ovocito despus de la Fecundacin. El Polo Animal es Dorsal, y el Polo Vegetal en Ventral. El punto por el que penetra el espermatozoide ser la regin Posterior, y la regin donde se forma la Media Luna Gris ser por lo tanto Anterior. As quedan definidas las mitades Izquierda y Derecha. Muchos invertebrados, como Moluscos no Cefalpodos, Anlidos o Turbelarios presentan Segmentacin Holoblstica Espiral, generalmente Desigual. En este tipo de segmentacin, los planos ecuatoriales son normales, pero los planos meridionales son oblicuos, de manera que los blastmeros quedan desplazados de 45 o.
31
Existen un elevado nmero de contactos entre las clulas, que estn unidas por Uniones GAP, que permiten el intercambio de iones y pequeas molculas hacia las clulas internas. Por ello las clulas de disponen de manera a tener contacto con el mayor nmero posible de clulas circundantes. Adems en este caso se forman Estereoblstulas, que no forman Blastocele. El Giro de los Blastmeros, Dextrgiro o Levgiro, se corresponde con el giro de la concha en Gasterodos. La adquisicin de los Ejes de Simetra no se conoce bien en la actualidad. Se piensa que algunos Determinantes Citoplasmticos del Lbulo Polar pueden definir el Eje DorsoVentral. Los tunicados presentan Segmentacin Holoblstica Bilateral. La distinta pigmentacin ordenada de las regiones del citoplasma del ovocito facilita el estudio de este tipo de segmentacin.
Desde la formacin del Primer Plano de Segmentacin, Meridional, ya quedan definidas las mitades Izquierda y Derecha del Organismo. El Segundo plano de Segmentacin, Ecuatorial, est desplazado definiendo as el Polo Vegetal, Dorsal, y el Polo Animal, Ventral. Los siguientes planos de segmentacin son alternos (ecuatorial-meridional), manteniendo siempre desde el principio la simetra bilateral del Embrin. La regin que aparece pigmentada de amarillo corresponde a la parte Posterior del animal, y su antpoda a la regin anterior. En mamferos se produce Segmentacin Holoblstica Rotacional. Los Ovocitos de mamferos no tienen vitelo, y son de tamao pequeo. Las primaras segmentaciones tienen lugar durante el recorrido del vulo fecundado a travs del Oviducto, o Trompa de Falopio. Las divisiones son muy lentas en comparacin con otros Filos, y adems son asincrnicas; no hay un orden establecido, y las clulas pueden no dividirse al mismo tiempo (pudiendo haber en determinados instantes un nmero impar de blastmeros). En el estado de 8 Blastmeros, estas clulas se encuentran muy separadas, y debe producirse la Compactacin. Las clulas experimentan una cohesin facilitada por
32
Microfilamentos de Actina. La mrula compacta presenta 5 clulas externas y 3 clulas internas.
La Protena UVO-Morulina es una protena de adhesin celular que facilita la Compactacin de la Mrula. Es similar a las E-Cadherinas y forma uniones Homoflicas. Puede ser estudiada por colorantes fluorescentes; despus de la compactacin se concentra en los lugares donde se forman los contactos clula-clula. Despus de la Compactacin tiene lugar la Cavitacin, proceso por el cual se forma la cavidad del Blastocele. Las clulas tienen bombas que sacan Potasio y meten Sodio en su interior, de forma que la diferencia de concentracin osmolar provoca un flujo de entrada de agua hacia el interior de la Blstula, que desplaza a las clulas por presin (similar al Turgor) formando la cavidad.
33
Despus de la Cavitacin se forma el Blastocisto (Blstula de mamferos), donde an se diferencian unos blastmeros externos, o Clulas del Trofoblasto, o Trofoectodermo, y unos blastmeros internos, o Masa Celular Interna. En realidad la diferenciacin de estos dos tipos de clulas se produce durante la Compactacin; en este estado las clulas internas presentan Uniones GAP y las clulas externas Uniones Estrechas. Las Clulas del Trofoblasto formarn la Porcin Fetal de la Placenta y el Corion. Estas estructuras son de gran importancia ya que permiten el intercambio de agua, nutrientes, oxgeno, desechos, hormonas y sistema inmunitario; evita que las clulas de la madre rechacen al embrin. Expresan distintos genes que la Masa Celular Interna. Sintetizan y liberan Eomesodermina que favorece la expresin de los genes caractersticos del Trofoblasto. La Masa Celular Interna formar el Cuerpo del Embrin, y las Estructuras Anejas que aunque no forman parte del cuerpo del adulto, ayudan en el desarrollo, como el Amnios, el Saco Vitelino o el Alantoides. Estas clulas pasan de ser Totipotentes a ser Pluripotentes; son las Clulas Madre Embrionarias. La especializacin de la Masa Celular Interna es determinado por la sntesis de varias protenas, entre las que destacan OCT-4, NANOG y FOX-D-3. Adems estas clulas sintetizan y liberan FGF-4 que estimula la multiplicacin de las Clulas del Trofoblasto. Cuando el Blastocisto alcanza el tero materno, secreta enzima Proteasa Estripsina que digiere la Membrana Pellucida, facilitando la Eclosin o salida del Blastocisto. Una vez liberadas las membranas Pellucida y de Fecundacin puede producirse la Implantacin en el Endometrio. Adems se inicia el proceso de Angiognesis por el que esta regin del tero formar nuevos vasos sanguneos para irrigar el embrin. En embarazos Ectpicos hay hemorragias graves, muerte del embrin y en ocasiones tambin de la madre. La Implantacin es un proceso largo y complejo que implica mltiples protenas y molculas. La madre debe presentar los niveles correctos de Estrgenos y Progesterona. Las Clulas del Trofoblasto destacan por su importante papel en la Implantacin. En el contacto inicial se producen uniones homoflicas entre las E-Cadherinas y P-Cadherinas (EP) que se encuentran en las membranas de las clulas del tero y del trofoblasto. Adems intervienen azcares complejos, Receptores Heparn-sulfato, Colgenos, Laminina y Fibronectina de la Pared Uterina, que interaccionan con los Proteoglicanos, Heparn-sulfato e Integrinas de la membrana de las Clulas del Trofoblasto. Una vez que se ha producido la unin, el Blastocisto debe introducirse completamente en el interior de la Pared Uterina. Para ello deben actuar enzimas que rompen y digieren la Pared del tero. Las elevadas concentraciones de Plasmina activa a las enzimas Proteasas que realizan esta tarea, entre las que destacan Colagenasa, Estromelisina, Activador del Plasmingeno y Metaloproteasas (rompen la matriz extracelular). Las clulas del Trofoblasto se multiplican activamente. A continuacin se forma la Reaccin Decidual (Placenta = Decidua), que implica los procesos de Angiognesis y Vasculognesis. En aumento de la irrigacin facilita los intercambios con la madre, y la formacin de la Placenta. Por otro lado tiene que llevarse a cabo el control de la destruccin del Endometrio y la Pared Uterina, por lo que se libera TGF (factor de crecimiento transformador) que controla a los enzimas proteasas. En el caso de mamferos los Ejes de Simetra se adquieren durante la siguiente etapa del desarrollo; la Gastrulacin.
34
Los Telesteos con huevos Telolecitos presentan Segmentacin Meroblstica. El Micropilo, por donde penetra el espermatozoide, determina la localizacin del Polo Animal, que ser la Zona de Segmentacin. El Vitelo se encuentra en el Polo Vegetal. Los seis primeros planos de segmentacin son meridionales, y a partir del sptimo se alternan los planos ecuatoriales. En Blstulas jvenes se pueden diferenciar ya tres tipos de Blastmeros, que forman en conjunto el Blastodermo.
La Cubierta Envolvente se forma por la capa de clulas externas, que envuelven al resto de Blastmeros impidiendo el paso de agua e iones al interior. Los Blastmeros Profundos presentan Motilidad facilitada por sus Filolamelipodios. Estos pseudpodos facilitan la expansin de las clulas del Blastodermo por la superficie del zigoto, por Movimientos de Epibolia, acompaados por la liberacin de calcio. Las clulas intemedias forman el Sincitio Vitelino por mitosis sin citocinesis, que establece contacto con el Vitelo. Los Blastmeros Profundos darn lugar al cuerpo del embrin. En Aves, Reptiles y Condrctios tambin se produce Segmentacin Meroblstica, pero en estos casos es ligeramente dstinta. Al igual que en el caso anterior, primero se producen varias segmentaciones meridionales en el polo animal, y posteriormente comienzan a alternarse las ecuatoriales. La regin del Polo Animal donde se produce segmentacin recibe el nombre de Epiblasto.
35
En el Epiblasto las clulas se disponen en ditintas capas. Toman agua del Albumen del huevo y la depositan en la Cavidad Subgerminal, que separa al Epiblasto del Vitelo, y corresponde al Blastocele. Se diferencian as las clulas del rea Pelcida, en la regin interna del disco del epiblasto o Blastodisco, y el rea Opaca, en la periferia del Blastodisco, en contacto direto con el Vitelo. A continuacin comienzan a desprenderse las clulas de rea Opaca del Epiblasto hacia la Cavidad Subgerminal donde forman una segunda capa; el Hipoblasto.
La formacin de los Ejes de Simetra Embrionarios viene principalmente determinada por la entrada de agua y sodio desde el Albumen. En la regin superior el pH es de 9,5; ser la regin Dorsal. En la Cavidad Subgerminal, con pH=6,5, se formar la regin Ventral. El peso del blastodermo es desigual en las distintas regiones, lo que provoca un girode la Bstula hacia la regin ms pesada, Anterior. La regin ms ligera ser Posterior. La Protena NODAL facilita la expresin del gen pitx2 en el lado izquierdo del cuerpo. Las Chalazas del huevo de ave tienen la importante funcin de mantener el Blastodisco hacia arriba. Se producen migraciones de blastmeros por la periferia hacia la regin posterior, y despus hacia la anterior por el centro. Los insectos presentan Segmentacin Meroblstica Superficial. Despus de la penetracin del espermatozoide a travs del Micropilo, se inicia la mitosis sin citocinesis, formndose un Blastodermo Sincitial. Posteriormente las clulas migran a la periferia y se forman membranas que delimitan el Citoplasma, formndose as el Blastodermo Celular. La migracin de los ncleos es facilitada por sistemas motores de Microtbulos. Las tres clulas que quedan en el interior son las Clulas Polares, futuras clulas germinales. Los Ejes de Simetra quedan determinados en estados iniciales de la segmentacin de los insectos. El Eje Antero-posterior est determinado en el Ovocito por la distribucin de distintos ARNm y Protenas. Las protenas Bicoid y Hunchback determinan la regin Anterior, y las protenas NANOS y CAUDAL el Posterior. La Protena Dorsal determina las regiones dorsal y ventral, quedando definidas as las mitades Izquierda y Derecha.
36
Fisiologa del Desarrollo TEMA VII; Aspectos Comparados de la Gastrulacin
La gastrulacin es el conjunto de movimientos morfogenticos por los que los blastmeros de la blstula se desplazan y migran formando las tres hojas embrionarias diferenciadas propias de los animales triblsticos. Por este proceso la blstula pasa a ser una gstrula, que posteriormente dar lugar al embrin completamente formado, que pasar finalmente a ser un feto. Las hojas embrionarias ectodermo, mesodermo y endodermo dern lugar a los procesos de organognesis del embrin. Durante la gastrulacin continan las mitosis, pero ms lentamente que anteriormente, y se mantienen las relaciones de volumen entre ncleo y citoplasma, lo que no suceda durante la blastulacin (los blastmeros se dividen pero el volumen de la blstula se mantiene constante). De esta manera, a partir de la gastrulacin se produce un aumento del volumen de la gstrula o del embrin, lento pero constante. En el paso de blstula a gstrula se debe activar el metabolismo celular para el crecimiento, y por el elevado requerimiento energtico de los notables movimientos celulares que se producen en esta etapa. Los blastmeros comienzan a mostrar un importante consumo de oxgeno, y comienza la produccin de energa celular a partir del glucgeno o el vitelo. El consumo de oxgeno es variable en el tiempo y el espacio, y se observa especialmente en el polo animal del embrin, o en clulas que llevan a cabo sus movimientos activos. Se produce un importante aumento de la sntesis proteica de la gstrula. Durante esta fase del desarrollo comienza la expresin e influencia de los cromosomas Y masculinizantes. Los movimientos morfogenticos irreversibles caractersticos de la gastrulacin provocan cambios morfolgicos en la gstrula y no implican mitosis (aunque puedan producirse). Caben destacar la invaginacin o introduccin de clulas formando una cavidad, el ingreso o movimiento individual de clulas hacia una cavidad, la epibolia o recubrimiento de una capa de clulas sobre otras (suele haber alargamiento celular), la intercalacin de dos capas de clulas formando una capa ms larga, la extensin convergente o intercalacin de varias capas de clulas, la deslaminacin o separacin de dos capas de clulas, y la involucin que es el caso de invaginacin sin formacin de una cavidad; las clulas se desplazan arrastrndose sobre otras clulas. Estos movimientos morfogenticos irreversibles no cambian el aspecto externo de la gstrula, pero dan lugar a la formacin de nuevas estructuras internas como el arqunteron, futuro tubo digestivo, el blastoporo, futuro ano, o el tubo neural.
37
El citoesqueleto juega un importante papel en el movimiento celular. Los microtbulos se disponen en paralelo al movimiento de la clula cuando esta se desplaza. Los microfilamentos tienen la importante funcin de dar y mantener la morfologa celular por su distribucin en el interior de las clulas. Por ejemplo, en las clulas en botella que se forman durante la involucin el papel de estos filamentos de actina es determinante para la morfologa de estas clulas. Las drogas de inhibicin de estos componentes del citoesqueleto demuestran su fundamental papel. La gastrulacin en equinodermos se inicia en una blstula nadadora que se ha liberado de su membrana de fecundacin, y que muestra un polo animal (mesmeros) y un polo vegetal (macrmeros y micrmeros). Se produce un aplanamiento y engrosamiento del polo vegetal. Los micrmeros muestran un primer movimiento; el ingreso de micrmeros. La capa de micrmeros, ms plana y gruesa, llamada placa vegetal, comienza a mostrar movimientos de los micrmeros, que se desplazan al azar y contactan con las paredes internas del blastocele, en la regin ventro-lateral. Estos micrmeros se agrupan, apilan y depositan, y comienzan a formar los cables sincitiales que, al mineralizarse por depsitos de sales de carbonato clcico (CaCO3-), darn lugar a la formacin de las varillas esquelticas de la larva plteus. Para el ingreso, los micrmeros emiten filopodios hacia el blastocele, que contactan con la pared interna del mismo arrastrando despus a la clula. Estas clulas pierden su afinidad por los otros blastmeros y por la membrana hialina, y ganan afinidad hacia la membrana basal, por los gradientes establecidos de fibronectina, laminina, cadherinas e integrinas. La migracin de los micrmeros que han ingresado es guiada por contacto; las prolongaciones emitidas por las clulas contactan con otras a travs de molculas de
38
reconocimiento y adhesin celular. La direccin al azar del movimiento de los filopodios tambin viene controlada (o limitada) por movimientos de repelencia. Las principales molculas reconocidas por contacto por los filopodios, que se encuentran en la matriz extracelular de la pared del blastocele, son la fibronectina y las glucoprotenas sulfatadas. Estas molculas permiten la migracin de los micrmeros. Si se elminan estos compuestos se produce el ingreso de los micrmeros, pero no su migracin a las paredes del blastocele. Estas clulas forman el mesnquima primario, y se agrupan donde encuentran elevados niveles de -catenina formando las varillas esquelticas de la larva.
DESARROLLO EN ERIZO DE MAR, DESDE EL ZIGOTO HASTA LA LARVA PLUTEUS
Un segundo grupo de importantes movimientos morfogenticos de equinodermos es el relativo a la invaginacin de blastmeros de la placa vegetal. Las clulas que han quedado en la placa vegetal comienzan entonces un movimiento de invaginacin en la parte central del blastocele, mientras otras clulas que continan ingresando van a dar lugar a la formacin del mesnquima secundario (no micrmeros). Estas clulas establecen con sus filopodios los primeros contactos entre el arqunteron y el polo animal. Los macrmeros del plano vegetal 2 que invaginan dan lugar al arqunteron y en general al endodermo. Quedar asi formado, en el punto de inicio de la invaginacin, el blastoporo. Finalemente el arqunteron perfora la pared superior de la gstrula formando la boca. La placa vegetal tiene capacidad intrnseca para invaginarse, y si se separa experimentalmente del polo vegetal se invagina de igual manera. La membrana hialina se
39
divide a su vez en dos capas, que recubren a los blastmeros externos; en la capa externa se encuentra mayoritariamente protena hialina, mientras que en la capa interna se encuentran fibropelinas y proteoglicano-heparnsulfato. El proteoglicano absorbe agua de forma que la regin interna de la membrana hialina se hincha, y las clulas de la placa vegetal se doblan hacia arriba, mostrando as capacidad intrnseca para invaginarse. Existen tambin movimientos de extensin convergente por los que el tubo del arqunteron se alarga por movimientos de las clulas hacia el interior. El tubo se alarga hacindose ms estrecho, de forma que el nmero de clulas por capa monoestratificada disminuye. Adems las clulas superiores ms prximas al blastocele emiten filopodios que contactan con la pared del polo animal del blastocele y se contraen tirando del tubo hacia arriba.
Pueden realizarse as mapas de determinacin que muestran los destinod celulares finales de las clulas de una blstulas durante la gastrulacin, y en algunas ocasiones en la segmentacin.
40
La gastrulacin de anfibios se inicia en una blstula caracterstica de huevos telolecitos. Las imgenes de gastrulacin de anfibios a menudo son utilizadas para documentales sobre la embriologa humana, pero son fcilmente distinguibles externamente debido a los movimientos morfogenticos caractersticos que dan lugar a la formacin de un tapn vitelino. Los movimientos de invaginacin inicial tienen lugar en las clulas de la media luna gris; estas se introducen hacia el blastocele y van a dar lugar a la formacin de varios labios o hendiduras; primero aparece el labio dorsal y posteriormente los labios laterales y ventral. A continuacin se producen movimientos de involucin y epibolia desde las clulas del polo animal a travs de la regin de la media luna gris. El movimiento de recubrimiento del las clulas del polo animal es por epibolia. La primera involucin conforma el labio dorsal del blastoporo. El blastocele es entonces desplazado a un extremo ya que debe hacer lugar a la cavidad del arquenteron en formacin, que queda rodeado por las clulas endodrmicas. Despus de la formacin del labio dorsal comienza la invaginacin, involucin y epibolia de los labios laterales, y finalmente, del mismo modo, del labio ventral. Los labios son todos ellos estructuras mesodrmicas. El blastocele termina por desaparecer y la nica cavidad que queda es el arqunteron.
Las clulas del blastoporo inicialmente formado cambian constantemente por los movimientos de epibolia e involucin; la capa de clulas que conforma este poro est en contnuo corrimiento desde la regin externa hacia la interna, permitiendo este movimiento el desarrollo de la cavidad del arqunteron. Las clulas que involucionan en el arqunteron van a dar lugar a las estructuras del mesodermo. Las primeras en involucionar darn lugar al tubo digestivo anterior, y ms concretamente corresponden a la futura regin farngea. Las segundas clulas mesodrmicas
41
forman la placa precordal y el futuro mesodemo ceflico. Finalmente, las ltimas darn lugar a la corda mesodermo, futura notocorda. La notocorda es una estructura mesodrmica de esqueleto o sistema de sostn transitorio, siempre situada por debajo del ectodermo nervioso, que desaparece a lo largo de la filogenia y la ontogenia a favor del desarrollo del hueso ectodrmico de la mdula espinal. De hecho la notocorda tiene un papel inductor fundamental para la formacin de dicho tubo. La migracin de las clulas en la formacin del arqunteron y el mesodermo estn guiadas por un gradiente de concentracin de fibronectina de la matriz extracelular. Este gradiente gua por quimiatraccin a las clulas que invaginan e involucionan. Las clulas botella son importantes solo para los movimientos de invaginacin inicial. Guan a las clulas marginales que son las que realmente tienen que llevar a cabo la gastrulacin por involucin; estas clulas se encuentran detrs de las clulas botella. Pero la involucin se lleva a cabo experimentalmente sin las clulas botella, de morfologa caracterstica debida a la disposicin de sus microfilamentos. El cuello de botella siempre se dirige en paralelo al movimiento de la clula.
Existen movimientos de extensin convergente de las clulas del polo animal, que se intercalan entre s formando capas de clulas ms amplias de superficie pero ms finas. Las clulas del polo vegetal son recubiertas por estos movimientos que permiten la epibolia, y formarn finalmente el tapn vitelino. El tapn vitelino (yolk plug) queda finalemente formado en el centro de los labios del blastoporo. Destaca como una estructura que sobresale del blastoporo, en forma de tapn, compuesto por las ltimas clulas externas que quedan del
42
polo vegetal, gruesas y ricas en vitelo. Tambin presentan movimientos de extensin convergente la capa de clulas marginales que deben recubrir la cavidad del blastocele. Las clulas que van a sufrir los procesos de extensin convergente presentan una cohesin diferencial entre ellas, que es mediada por protocadherinas de adhesin celular. Las clulas con protocadherina axial formarn el eje de la notocorda, mientras que las que tienen protocadherina paraxial formarn parte del mesodermo dorsal o paraxial que incluyen las clulas musculares de los somitas, futuros miotomos, y se segmentarn en sentido anteroposterior. La expresin de las protocadherinas determina los movimientos de involucin y extensin convergente, ya que controlan los flujos de calcio que participan activamente en la contraccin y extensin de los microfilamentos de actina. Antes de la formacin de las cluls botella en el futuro blastoporo, comienzan los movimientos citoplasmticos en los blastmeros, que se acentan an ms durante las etapas de movimiento celular. La rotacin vegetal es el movimiento de los blastmeros primarios (imagen A) son fundamentales para la formacin del blastoporo y la adquisicin del eje dorsal del embrin. Tiene lugar en las clulas del polo vegetal prximas a la media luna gris antes de la invaginacin inicial. Estas clulas son ricas en -catenina, lo cual es muy importante para que se produzca la rotacin. Estas molculas son consideradas como seales dorsalizantes que informan sobre la regin donde debe formarse la media luna gris. El centro de Nieuwkoop, que tambin se encuentra en el polo vegetal, justo por debajo de la regin de rotacin vegetal, tambin es rica en -catenina e informa a la regin de la media luna gris para que se inicie la gastrulacin en el blastoporo. Permite que tengan lugar los movimientos fundamentales de rotacin vegetal previos a la invaginacin inicial. Si se destruyen estas clulas informadoras se forma una masa de clulas ventrales que, si son transplantadas a otra blstula forman de nuevo una gstrula normal. Si se aaden estos blastmeros en una larva normal del otro lado se formar una larva con dos cabezas, pues se produciran dos gastrulaciones de forma independiente.
43
La gastrulacin en telesteos tiene lugar y especial relevancia en la capa de blastmeros profundos del blastodisco, que darn lugar al cuerpo del embrin. Se producen un conjunto de movimientos morfogenticos de forma simultnea; se trata de movimientos de epibolia, involucin y convergencia de blastmeros. Tambin da lugar a la formacin de un tapn vitelino, por procesos diferentes. Las E-cadherinas tienen un papel especial en el reconocimiento y adhesin celular. Los gradientes de concentracin de fibronectina son fundamentales, de nuevo, para guiar y dirigir las migraciones celulares durante la involucin.
El escudo embrionario (shield?) se forma durante la gastrulacin y se desarrolla por los movimientos de involucin de las clulas. Finalmente se cierra el tapn vitelino. El escudo
44
embrionario es fundamental para la determinacin de los ejes de simetra en telesteos, pues define el eje dorso-ventral. En experimentos de transplante de escudo embrionario se observa la formacin de dos fetos. Este escudo es semejante al labio dorsal del blastoporo de los anfibios, y es el punto en el que se inicia la gastrulacin, y la formacin de la notocorda y la placa o tubo neural, de disposicin antero-posterior.
El eje antero-posterior queda definido en la regin central del escudo embrionario, a nivel del ectodermo neural, debido a las diferentes concentraciones de FGF (factor de crecimiento de fibroblastos), protena Wnt y cido retinoico, sustancias capaces de activar o reprimir genes. Las interacciones y gradientes de concentracin de estas molculas determinan el desarrollo antero-posterior del ectodermo neural por epibolia e involucin. El eje derecho-izquierdo queda as definido directamente por los otros dos. La vescula de Kupffer es una estructura transitoria que aparece sobre el escudo embronario, donde ya se han formado por ejemplo las vesculas culares, futuros ojos. Esta vescula transitoria marca con el batido lateral de sus cilios la simetra bilateral del animal, y permite diferenciar los lados izquierdo y derecho. Esta misma vescula se encuentra tambin en los labios de anfibios, y en el nudo de henser de aves, reptiles y mamferos. Los movimientos de los cilios dependen de la protena motora dinena; el sndrome de kartagener se explica por la ausencia o deficiencia en la dinena que puede explica la presencia del corazn en el lado derecho, o la formacin de espermatozoides sin motilidad. La gastrulacin en aves y reptiles se inicia en el blastodisco. Las clulas que ingresan al hipoblasto no formarn parte del cuerpo del embrin, y formarn anejos embrionarios. El epiblasto formar todo el cuerpo embrionario y tambin algunas estructuras anejas.
45
Los primeros movimientos morfogenticos tienen lugar en el rea pelcida del epiblasto; se trata de movimientos de convergencia y extensin convergente de las clulas hacia la regin anterior del blastodisco. Sobre este acmulo de clulas aparece la denominada lnea primitiva del epiblasto. Esta lnea se abre en sentido antero-posterior al blastocele. En este momento se inicia un movimiento de ingreso de clulas al blastocele. Durante todo este tiempo, las clulas del hipoblasto continan avanzando en sentido antero-posterior. Las clulas que ingresan al blastocele quedan localizadas entre el epiblasto y el hipoblasto. El ingreso de estas clulas da lugar a la formacin del surco primitivo, cuya parte anterior ms gruesa recibe el nombre de nudo de henser.
46
El nudo de henser es, de hecho, el punto por el cual las clulas botella comienzan a ingresar, y el punto de inicio de la gastrulacin. Se corresponde al labio dorsal del blastoporo de anfibios, y al escudo embrionario en peces. Las clulas que se encuentran en estos puntos se encuentran en contnuo movimiento, lo que significa que son constantemente cambiantes y renovadas. Las clulas, desde este punto, siguen ingresando en sentido antero-posterior formndose en posicin dorsal el surco primitivo. Las primeras clulas que ingresan desde el epiblasto desplazan al hipoblasto en su movimiento, y se sitan en la parte inferior y profunda del disco germinativo. Dan lugar a la formacin del endodermo. Las clulas que ingresan despus forman el mesodermo; el mesodermo extraembrionario, la notocorda, y llos mesodermos ceflico y paraaxial (futuros somitas). Finalmente, el surco primitivo comienza a cerrarse en sentido antero-posterior. La organognesis se inicia en las regiones anteriores donde el surco primitivo ya se ha cerrado antes de que se produzca el ingreso de clulas y la formacin de las hojas embrionarias en las regiones posteriores del embrin. Existen mltiples molculas que regulan y guan la migracin de estas clulas en aves y reptiles. Las E-cadherinas se encuentran en las clulas del epiblasto. Cuando estas clulas llegan al nudo de hensen o al surco primitivo comienzan a sintetizar factor scatter, que inhibe la expresin de las E-cadherinas. Esto modifica la consistencia de estas clulas, que pasan de ser epiteliales a mesenquimticas al separarse y descompactarse. En el interior del blastocele se encuentra cido hialurnico que absorbe agua y se hincha, individualizando a los blastmeros del mesenquima y facilitando sus movimientos individuales. La orientacin de estos movimientos est guiada por el gradiente de concentracin de fibronectina. Los movimientos de epibolia sobre el vitelo son simultneos a los de ingreso desde el epiblasto. Estos movimientos son realizados por las clulas del borde del epiblasto del disco germinativo. Esta migracin no es individual pues es llevada a cabo por toda la capa de clulas en bloque. Estas clulas permanecen unidas por E-cadherinas. El gradiente de concentracin de fibronectina que se establece en la membrana del vitelo sirve como gua para las clulas durnate la epibolia. Esto permite tambin que se produzca un alargamiento del surco primitivo y por lo tanto del tronco del animal. La gastrulacin en mamferos es semejante a la de las aves y reptiles, pero en total ausencia de vitelo puesto que producen huevos alecitos. Se basa en una blstula, ya implantada en el tero, donde se diferencian una masa celular interna que equivale al disco embrionario, y clulas del trofoblasto que darn lugar a anejos embrionarios.
47
Las clulas de la masa celular interna se diferencian en primer lugar en clulas del epiblasto, superiores, que formarn el embrin, y clulas del hipoblasto, ms cercanas al polo vegetal. Se produce deslaminacin de las capas del disco germinativo. En el epiblasto se forma la cavidad amnitica donde se acumular el amnios, lquido en el que se desarrolla el embrin. Esta cavidad amnitica quedar recubierta por clulas del ectodermo extraembrionario que al migrar aslan la cavidad del trofoblasto formando el tapiz interno del trofoblasto. Los movimientos de convergencia en la regin anterior del epiblasto dan lugar a la formacin del nudo de henser y u surco primitivo, que se desarrolla de igual manera que en reptiles y en aves. Los movimientos de ingreso de las clulas del epiblasto a travs del surco primitivo van a dar las hojas embrionarias. Las clulas de ingreso inferior desplazan al hipoblasto y dan lugar al endodermo, las clulas de ingreso medio formarn el mesodermo, y las clulas que no ingresen conformaran el ectodermo. As las tres hojas embrionarias se interponen como tres capas entre la cavidad amnitica y el saco vitelino. La capa del mesodermo prolifera lateralmente y da lugar as al mesodermo extraembrionario que formar anejos embrionarios entre los que destacan los vasos sanguneos de la placenta. Las clulas que ingresan quedan recubiertas por cido hialurnico que permite que se aslen y tomen una estructura laxa. El factor de crecimiento de fibroblastos FGF gua a las clulas en el ingreso. Cavidad amnitica Disco embrionario
Ectodermo Mesodermo Endodermo
Saco vitelino
Las clulas del trofoblasto forman anejos embrionarios. Desde la implantacin se diferencian las clulas del sincitiotrofoblasto y las clulas del citotrofoblasto.
48
Los niveles de oxgeno controlan la proliferacin de las clulas del trofoblasto. Las clulas del sincitiotrofoblasto proliferan y liberan enzimas de implantacin, mayoritariamente proteasas, que facilitan su integracin en la pared uterina. Las clulas del citotrofoblasto formarn el corion, que es la barrera que separa la placenta materna de la placenta fetal. En el corion se forman tambin vasos sanguneos que suministran oxgeno y nutrientes, y se forman tambin las vellosidades corinicas. Las vellosidades corinicas se forman por clulas de citotrofoblasto y del sincitiotrofoblasto que proliferan introducindose en la pared uterina. Pueden ser primarias si solo ha ingresado el sincitiotrofoblasto, secundarias desde que comienza a integrarse el citotrofoblasto, o terciarias cuando se extiende el mesodermo extraembrionario y se forman los primeros capilares sanguneos. Vellosidades corinicas primarias Secundarias terciarias
La sangre fetal nunca se mezcla con la sangre materna, ya que se da un proceso de difusin de sustancias nutritivas y de desecho desde unos capilares hasta los otros a nivel de la placenta. La laguna trofoblstica es una laguna de sangre materna desde donde los capilares fetales pueden intercambiar sustancias con la sangre materna. La placenta tiene un papel de intercambio de sustancias nutritivas, de desecho y excrecin, de respiracin y para el sistema endorino. El sincitiotrofoblasto sintetiza y libera gonadotropina corinica, hormona que mantiene el cuerpo lteo en el ovario, evitando que degenere, de forma que contina la sntesis de estrgenos y progesterona. La hCG es utilizada en los test de embarazo. La progesterona tambin es sintetizada en la placenta y utilizada por el feto cuando se desarrollan los tejidos de las glndulas adrenales; estas la utilizan para sintetizar los corticoides adrenales. El sincitiotrofoblasto sintetiza tambin somatomamotropina, un lactgeno placentario que favorece la produccin de leche materna por va endocrina. Durante la segmentacin y gastrulacin quedan definidos los ejes de simetra de mamferos. El eje antero-posterior est relacionado con el punto por el que el espermatozoide penetra en el ovocito. De hecho el plano antero-posterior corresponde al primer plano de segmentacin. En este mismo eje se extiende el surco primitivo a partir del nudo de henser. Cuando se forma el disco embrionario hay dos zonas que emiten seales anteriores (seales qumicas que delatan la regin anterior): se trata del nudo de henser (donde comienza la gastrulacin) y el endodermo farngeo (futura regin anterior del tubo digestivo). Los genes HOX determinan la regin posterior. El eje dorso-ventral tambin queda definido en la gastrulacin; la regin dorsal es la ms prxima a la cavidad amnitica, y la regin ventral es la ms prxima al hipoblasto y al saco vitelino. Los cilios del nudo de henser deben batir en
49
sentido de derecha a izquiera. Adems el lado izquierdo del embrin expresa las protenas NODAL, PITX2, y LEFTY. As queda finalmente determinada la simetra bilateral del animal. La gastrulacin en invertebrados no equinodermos es muy variada en los distintos taxones. En los anlidos y moluscos no cefalpodos, con segmentacin holoblstica espiral, los planos de segmentacin son oblcuos y los blastmeros se dividen en un ngulo de 45 o. En la gastrulacin hay proliferacin de los micrmeros que avanzan por epibolia sobre los macrmeros, cambiando la morfologa de la gstrula. En tunicados muestran una segmentacin holoblstica bilateral. Las clulas del polo animal que formarn el ectodermo avanzan por epibolia. Los macrmeros del endodermo se invaginan. Las clulas mesodrmicas sufren un proceso de involucin. En los insectos las clulas endodrmicas sufren una invaginacin anterior, y otra posterior; ambas invaginaciones se unen en la porcin media del cuerpo formando un tubo digestivo primitivo con dos aberturas (boca y ano). Las clulas mesodrmicas se forman a partir de un pliegue hacia el interior en la regin media del ectodermo ventral. Las clulas ms externas del pliegue formarn el ectodermo nervioso, y las clulas ms internas formarn el mesodermo. Las clulas mesodrmicas se dividen y dan lugar a la musculatura. El ectodermo nervioso va a formar el tubo nervioso. TEMA VIII; Determinacin Progresiva de las Clulas Embrionarias Existen distintos procesos por los que los destinos de las clulas embrionarias pluripotentes quedan definidos. Estn relacionados con las distintas regiones del embrin y las relaciones entre los blastmeros. Estudios genticos y de embriologa experimental han permitido conocer los distintos procesos por los que los destinos de las clulas embrionarias quedan definidos. La diferenciacin corresponde al instante del desarrollo de distintos tipos celulares especializados donde se implica compromiso celular, es decir, un destino restringido, por primera vez. La diferenciacin puede producirse por especificacin o por determinacin. Varios de ellos tienen lugar en todos los filos, en distintas clulas. La especificacin corresponde a una diferenciacin que implica un compromiso reversible. El destino de la clula queda especificado cuando esta se diferencia autnomamente en un medio neutro, no influyente. La clula se especializar independientemente del medio en que se encuentre. La especificacin autnoma da lugar a un desarrollo en mosaico (un mosaico de clulas que se diferencian en partes). Si se elimina un blastmero, el tejido que estaba destinada a formar no aparece en el embrin, pero s puede aparecer en un medio de cultivo neutro con esa clula. La clula se diferencia porque tiene determinantes morfogenticos que activan o reprimen determinados genes. Es comn en invertebrados como tunicados, moluscos o anlidos. La especificacin condicional da lugar a un desarrollo regulativo. Si se elimina un blastmero, en este caso este blastmero forma un individuo completo, mientras que el resto de la blstula formar tambin un individuo completo. Los blastmeros se condicionan unos a otros, y regulan as su desarrollo y su destino.
50
La especificacin sincitial es propia del blastodermo sincitial de los insectos, infludo por las protenas bicoid (anterior) y NANOS (posterior). Cuando se forma el blastodermo celular, tiene especializacin condicional y posiblemente autnoma. La determinacin corresponde a una diferenciacin que implica un compromiso irreversible. El destino de la clula queda determinado cuando se diferencia autnomamente en un medio o tejido embrionario. El medio es determinante para las clulas que an no se han diferenciado. La teora de preformacin del siglo XVII propone la existencia de un homnculo encapsulado en los gametos (masculinos segn los animaculistas o femeninos segn los ovistas), como un beb preformado que sencillamente crecer en el tero materno. Segn esta teora los individuos estamos unos dentro de otros generacin por generacin, as como las muecas rusas. Esta teora no explica los descendientes mestizos, por mezcla de dos razas. La teora de epignesis se desarroll en el mismo siglo, y entre sus defensores destacan Pander, Harvey y Wolff. Esta acertada teora sostiene que los animales se forman de nuovo a partir de una clula madre, y que no existe nada preformado en los gametos. Haeckel y Von Baer formularon la ley segn la cual la ontogenia recapitula la filogenia, gracias a un error inicial de Von Baer que no etiquet sus muestras, y tuvo mucha dificultad para determinar que embrin corresponda a cada taxn. Las cuatro leyes de la embriologa fundamentales que fueron definidas inicialmente por Von Baer son las siguientes. Las caractersticas generales de un taxn animal aparecen antes que las especficas de la especie en el embrin (por ejemplo las hendiduras farngeas, los somites o el encfalo. Los caracteres menos generales se desarrollan a partir de los ms generales, hasta la aparicin de los ms especficos. El embrin de una especie, en lugar de pasar por el estado adulto de otras especies ms primitivas, se desva cada vez ms de ellos, pero se asemeja a otras especies en sus respectivos estados embrionarios. El embrin temprano de un animal superior nunca se parece al adulto de un animal inferior, sino al correspondiente embrin joven. As, finalmente, dedujo que la ontogenia recapitula la filogenia.
51
Los experimerimentos de Chabry (1886) demuestran la especializacin autnoma y el desarrollo en mosaico de los tunicados. Los blastmeros pigmentados y de fcil reconocimiento facilita el trabajo con embriones de estos animales. Estudi la teratologa y las malformaciones. En el estado de 8 blastmeros los separ de dos en dos, y observ la formacin de las estructuras que se hubieran formado si siguiesen unidos. En un estado ms avanzado del desarrollo, muestran tambin especificacin condicional.
Los experimentos de Weissmann (1893) demostraban el fundamental papel del plasma germinal. Demostr que existen determinantes nucleares que son transmitidos a las clulas germinales de generacin en generacin. Durante la segmentacin, estos determinantes diferentes son transmitidos a unas y otras clulas definiendo el destino de la clula por diferenciacin. Dado que todos los determinantes se mantienen en la estirpe germinal, las malformaciones en clulas somticas no son heredables. Reproduce ratones y les corta las colas durante 19 generaciones, observando que la cola de los descendientes era normal.
52
El experimento de Roux (1888) quera confirmar que se daba un desarrollo en mosaico en anfibios. En una blstula en estado de dos clula destruy una de ellas, y obtuvo medio embrin; pens que eso demostraba el desarrollo en mosaico en anfibios. En realidad no es as; se debe a los restos celulares de la clula destruda que determinan la formacin del embrin de esta manera.
El experimento de Driesch (1892) demuestra el desarrollo regulativo en equinodermos. Asla 4 blastmeros de una blstula muy temprana con solo 2 segmentaciones, y observa la formacin de 4 larvas plteus normales, aunque de pequeo tamao.
Otros experimentos similares al de Driesch demuestran que el desarrollo es regulativo en anfibios. Si se eliminan fragmentos del ectodermo de embriones de anfibio, este suple estas clulas fcilmente, y se forman renacuajos normales. Si se eliminan blastmeros de la regin dorsal y se colocan en la regin ventral, estas clulas se regulan e integran en esta nueva regin modificando as su destino.
53
Los experimentos de Hrstadius demuestran que los micrmeros de equinodermos presentan determinacin autnoma, a diferencia del resto de blastmeros. Trabaj con blstulas en el estado de 8 blastmeros, y separ los polos animal y vegetal, en segmentos de 4 blastmeros cada uno. El polo animal form una blstula permanente anormal, con exceso de cilios. El polo vegetal sin embargo form una larva plteus pseudo-normal, con algunas carencias. Experimento a realizar una separacin meridional en lugar de ecuatorial, y obtuvo en este caso dos larvas plteus normales pero de pequeo tamao. Repiti los mismos experimentos con un zigoto o vulo fecundado, obteniendo los mismos resultados. Pens que deba existir algo en el polo vegetal que controlaba los procesos de desarrollo. Realiz nuevos experimentos con larvas en estados del desarrollo ms avanzados, con capas animal 1, 2 y 3, vegetal 1 y 2, y una capa de micrmeros (futuro endodermo). Al aislar las capas an 1, 2 y 3 observaba la formacin de una blstula anormal permanente. Al aislar las capas an 1, 2 y 3 junto con la capa veg 1 observ la formacin de una estructura extraa e intermedia entre blstula y larva. Al hacerlo junto con la capa veg 2 (eliminando veg 1) observ la formacin de una estructura similar a una larva casi normal. Al aislar los micrmeros con las capas an 1, 2 y 3 se formaba una larva completamente normal, con endodermo, de morfologa ligeramente extraa pero viable. Los micrmeros acumulan -catenina, que les proporciona determinacin autnoma. Esta sustancia comienza a acumularse antes de la formacin de los propios micrmeros. Adems influyen sobre las clulas circundantes para que estas acumulen tambin este compuesto, en menor cantidad, induciendo la invaginacin y el ingreso de clulas en la formacin del tubo digestivo y el mesnquima. En un medio de cultivo, los micrmeros aislados se agregan y forman los filamentos de la larva. Si estas clulas se sitan en el polo animal de la blstula, esta regin se invagina, y los micrmeros ingresan. Las concentraciones de esta molcula en las capas veg 1 y 2 explican los resultados de los experimentos en los que estas son aisladas con el polo animal. En los primeros experimentos, hay que tener en cuenta que las clulas del polo vegetal contienen a los futuros micrmeros. Los experimentos de Spemann (1928) por los que le fue otorgado el premio nobel, tratan el tema de la equivalencia nuclear de las clulas embrionarias. Quera demostrar que no se producan cambios en los ncleos de los distintos blastmeros durante la segmentacin Realiza ligaduras parciales en clulas de embriones de tritn en estado de 8 blastmeros, separando dos fracciones citoplsmicas, una de las cuales contena al ncleo. En el estado de 16 blastmeros cambia el ncleo al otro lado de la ligadura, y observa entonces la formacin de dos tritones distintos, lo que demuestra que no se han producido transformaciones en el ncleo de las clulas en el estado de 8 blastmeros aunque estas han permanecido unidas en todo momento; los ncleos mantienen su capacidad para regenerar un individuo completo.
54
Spemann realizo muchos otros trabajos experimentales enfocados a la embriologa, y sola trabajar con anfibios. Demostr la gran importancia de la media luna gris en la determinacin durante la segmentacin y la gastrulacin. Cortando un zigoto con la media luna gris de lado obtena (B) un individuo normal y otro inviable, pero cuando lo cortaba con la media luna gris de frente (A), realizando un corte simtrico respecto a ella, obtena dos individuos normales.
Tambin trabaj con gstrulas tempranas y tardas de anfibios. En una blstula temprana existe desarrollo dependiente (A); al transplantar una regin de ectodermo nervioso a una regin de la epidermis, los blastmeros trasplantados dan lugar a epidermis pues adquieren una nueva determinacin. En una blstula tarda en desarrollo es independiente (B); al realizar el experimento anterior, en este caso se forman dos placas nerviosas. La clulas conservan aqu su determinacin inicial. A lo largo de la gastrulacin el potencial de desarrollo de las clulas se reduce, y estas pierden la capacidad de modificar su compromiso.
55
Los experimentos de Spenmann y Mangold (1924) pretenden demostrar la induccin embrionaria primaria en anfibios. Realizaron transplantes de clulas de la media luna gris de una gstrula en otra, colocndolos en la regin opuesta a la debida, y observaron que se formaban dos invaginaciones y dos blastoporos. Paralelamente realizaron transplantes del mesodermo del labio dorsal a otras blstulas, en la regin opuesta al labio dorsal, y en este caso observaron la formacin de dos notocordas. Estos grupos de clulas, claramente, inducen la formacin de estructuras del embrin.
En este caso de induccin embrionaria un grupo de clulas es capaz de emitir seales que provocan cambios en las clulas vecinas induciendo el desarrollo del embrin. Por ejemplo, las clulas del mesodermo del labio dorsal del blastoporo son un centro organizador de Spemann-Mangold, es decir, se trata de blastmeros capaces de inducir cambios en los blastmeros circundantes para inducir el desarrollo. Se trata de una induccin embrionaria, pero no es primaria, pues existen otras inducciones aneriores que llevan a que se pueda producir esta. Una induccin embrionaria primaria es por ejemplo la formacin de la media luna gris en la fecundacin por movimientos citoplasmticos.Otra induccin embrionaria primaria fue estudiada en anfibios por Spemann; se trata de una regin profunda de la blstula que corresponde a la media luna gris, y que emite seales dorsalizantes como las -cateninas; se trata del centro de Nieuwkoop.
56
Existen otros experimentos destacables. Por ejemplo, se han realizado transplantes en aves de experimentacin, desde el nudo de henser de un embrin hacia el epiblasto de otro; en este segundo se observa la formacin de dos surcos primitivos y dos tubos nerviosos. Trasplantes de distintas regiones de distintos embriones de anfibios en las mismas fases de desarrollo demuestran la especificacin regional, y como las clulas inducen la formacin de distintas regiones concretas del tubo digestivo.
TEMA IX; Equivalencia Genmica y Expresin Gnica Diferencial El concepto de equivalencia genmica se refiere a que todas las clulas de un embrin tienen exactamente la misma informacin gentica aunque expresen distintos genes. La gentica del desarrollo estudia los genes que determinan el desarrollo de cada clula. Cada clula posee un genoma completo, y el ADN de las clulas diferenciadas con distinto compromiso es el mismo, pues sus genes no se destruyen. La diferenciacin de las clulas se debe a que en cada tipo de clula especializada slo se expresa una pequea parte del genoma, y se producen los ARN especficos de cada tipo celular. Los genes retienen o reprimen el potencial para expresarse.
57
La demostracin de esta hiptesis formulada en 1960 se obtuvo mediante experimentos de transdiferenciacin de clulas o metaplasia, por los que las clulas ya diferenciadas se desdiferencian y adquieren nuevos compromisos distintos. Se han realizado experimentos con embriones de tritn de metaplasia por modificaciones en el medio de cultivo. Se ha logrado as la transformacin del tejido de la retina pigmentaria en retina nerviosa, y de las clulas del iris que se transdiferencian en clulas del cristalino. Estas transdiferenciaciones demuestran que todas las clulas conservan an sus genes originales.
En presencia de Pdx1, las clulas endodrmicas hepticas pueden transformarse en clulas pancreticas. El estudio y la observacin de los cromosomas plumosos de insectos en clulas con distinta diferenciacin sugieren que los cromosomas conservan exactamente la misma morfologa y el mismo patrn de bandas. Tambin se han realizado experimentos de transdeterminacin, en las que clulas determinadas por compromisos celulares cambian su determinacin, y por lo tanto la expresin diferencial de sus genes. Estos experimentos son muy frecuentes y relativamente fciles entre los discos imaginales de insectos. Los discos imaginales de las larvas corresponden a los futuros metmeros organizados del insecto adulto. As las clulas estn determinadas (an no diferenciadas) en cada uno, de manera que formarn ojos, antenas, patas o alas, ente otros apndices y estructuras. Los transplantes entre clulas de distintos metmeros en larvas cambia su compromiso, pero las clulas no estaban an diferenciadas. La clonacin se basa en la utilizacin del ncleo de una clula totalmente diferenciada que se inserta en el citoplasma de un vulo al que se le ha sustrado el ncleo, por electrofusin. A partir de este ovulo se obtiene un individuo completo, casi exacto al individuo
58
madre, lo que demuestra que existe equivalencia genmica. La clonacin de Doly as como otras realizadas en ratones se basaba en el ncleo de una clula de la glndula mamaria con la que se form un zigoto in-vitro, implantado en un tero adoptivo. Los componentes citoplasmticos, que fueron por supuesto conservados, facilitan las modificaciones de expresin gentica.
TEMA X; Interacciones Celulares en el Desarrollo La organognesis es el conjunto de procesos de desarrollo del embrin despus de la formacin de la gstrula completa. Durante estos procesos tiene lugar el desarrollo de los primeros esbozos de los rganos presentes en animales adultos, y estos se desarrollan. En vertebrados, una vez desarrollados se formar el feto, que ya slo crecer en tamao, y en algunos casos podr desarrollar estructuras en estado adulto como caracteres seuales. La morfognesis es el conjunto de procesos por los que algunas clulas se reagrupan ordenadamente dando lugar a distintas estructuras, perdiendo su consistencia inicial en capas de clulas (hojas embrionarias). La morfognesis implica mitosis, cambios de la morfologa celular, cambios en la matriz extra celular, migracin de clulas y muerte celular. Durante la
59
formacin de la mano, los dedos se encuentran inicialmente unidos por un patagio, pero las clulas del patagio mueren permitiendo la emancipacin de los dedos. La afinidad celular diferencial es la afinidad que muestran ciertos tipos celulares por otros tipos determinados. Se producen modificaciones deacuerdo a sus necesidades a lo largo del desarrollo. La afinidad celular diferencial fue demostrada por los experimentos de Townes y Holtfreter (1955) que trabajaron con gstrulas de anfibio. Disgregaron las clulas en un medio alcalino y las aislaron en medio normal. Al mezclarlas, las clulas de la placa neural y del ectodermo ventral se reagrupaban de forma espontnea y ordenada. Sacaron tres conclusiones: Las clulas aisladas se reagrupan al cabo del tiempo. Las posiciones finales de estas clulas son un reflejo de su posicin embrionaria y por lo tanto muestran afinidad selectiva o diferencial. Las afinidades selectivas cambian a lo largo del desarrollo.
Existen experimentos similares con mesodermo y ectodermo. Al disgregar y mezclar estas clulas, estas vuelven a unirse inicialmente al azar, y despus de un tiempo se reordenan de la misma manera que en el embrin. En los desplazamientos y contactos entre clulas, tiene una especial importancia la membrana de las clulas y la matriz extracelular en que se encuentra. El citoesqueleto de la clula, y en particular microtbulos y microfilamentos, tambin estn fuertemente implicados. As, por ejemplo, los microfilamentos facilitan los movimientos y las migraciones celulares gracias a la interaccin con otras protenas como la miosina, la tropomiosina o la -actinina, y con ATP y iones de calcio. Las prolongaciones citoplasmticas como los lamelipodios o los filopodios facilitan el desplazamiento de las clulas. Estas elongaciones se producen a costa de retracciones de otras zonas de la clula. Se establecen contactos que pueden ser positivos, o negativos si evitan que la clula se desplace en ese sentido. Existen mltiples tipos celulares que deben migrar durante el desarrollo, como por ejemplo las clulas germinales, los blastmeros profundos del pez o las clulas de la cresta neural.
60
Los contactos y reconocimientos entre tipos celulares o clulas y su matriz extracelular implican protenas de membrana, como las protenas de adhesin celular, quimiotxis, y otros tipos de tropismos. Por ejemplo la haptotaxis, por la cual las clulas migran arrastrndose sobre otras, a travs de un gradiente de protenas y molculas de adhesin celular. Las molculas de adhesin celular o CAM pueden ser de varios tipos, y son fundamentales para que se produzcan los distintos tipos de interacciones celulares. Las cadherinas son las principales CAM. Son protenas calcio-dependientes que forman uniones homoflicas en su regin glomerular extracelular. Estn ancladas a la doble hemimembrana por una hlice, y pueden unirse en su regin glomerular interna a cateninas , y , y a microfilamentos de f-actina y -actina. Existen distintos tipos de cadherinas cuya nomenclatura las diferencia por una letra inicial que depende del tejido en el que han sido encontradas, por ejemplo E-cadherina (epitelial), N (neural), B (brain) o P (placenta). Las protocadherinas son similares a las cadherinas, pero no forman uniones internas mediante cateninas. Las cadherinas tienen una fuerte importancia en los movimientos celulares, como los movimientos de extensin convergente, en las clulas foliculares ovricas y en el crecimiento axonal y sinaptognesis. Las CAM del tejido nervioso o N-CAM no son calciodependientes, y tambin forman uniones homoflicas. Suelen encontrarse en los blastmeros junto con las N-cadherinas. Generan adherencia o repulsin en funcin de si estn recubiertas o no de cido silico (con cido generan repulsin).
Las molculas de unin celular son tambin muy importantes para el desarrollo, y en particular para la organognesis pues suelen aparecer en clulas que ya han alcanzado su destino en el embrin. Las uniones estrechas entre clulas adyacentes suelen formarse entre clulas epiteliales, ya que permiten impermeabilizar los medios a ambos lados de las clulas. Este tipo de uniones implica protenas de membrana que forman las uniones conectando ambas membranas. Son capaces de impedir incluso el paso de molculas pequeas e iones entre las membranas. Los desmosomas son uniones celulares de contacto y reconocimiento
61
entre clulas, y estn mediados por una amplia variedad de protenas de membrana; las desmocolinas y desmogleinas. Se trata de molculas de adhesin celular calcio-dependientes, similares a las cadherinas, pero sin cateninas. Producen uniones intracelulares con los filamentos intermedios de queratina. Estas uniones proporcionan resistencia y dureza a las uniones entre clulas epiteliales, y por lo tanto al tejido, a travs de los filamentos intermedios. El pemfigus es una patologa autoinmune por la que el feto produce anticuerpos frente a los desmosomas presentando graves alteraciones epiteliales. Las uniones hendidas o GAP son uniones comunicantes que comunican el citosol de dos clulas distintas. Se forman por complejos conexn, formados por seis subunidades de protena transmembrana conexina que forman entre s un canal. Existen distintos tipos de uniones GAP especficas. Las regiones celulares donde se encuentran presentan comunicacin intercelular. Algunas disfunciones por mutaciones en conexinas pueden causar malformaciones cardiacas, sordera o anomalas en la mielinizacin.
Las uniones entre clula y matriz extracelular son tambin de gran importancia para la consistencia de los organismos, y del mismo modo para su organognesis y el establecimiento de las estructuras definitivas del embrin. El entramado de macromolculas de la matriz media la migracin, relacin y establecimiento de uniones de las distintas clulas. Es de gran importancia para la formacin de las hojas embrionarias.
Los colgenos son un elemento fundamental de la matriz extracelular. Se trata de glucoprotenas ricas en glicina y prolina, muy diversas por su composicin, que proporcionan
62
consistencia y dureza a los tejidos animales, representando el 50% de protenas totales del organismo por su abundancia en la piel y los cartlagos entre otros. Por ejemplo, el colgeno tipo II participa en la formacin del hueso largo. Los proteoglicanos son glucoprotenas ricas en glucosaminoglucanos; hidratos de carbono ordenados en disacridos con un grupo amino. Las proporciones de colgeno y proteoglicano en cada tejido es determinante sobre la consistencia y dureza del mismo. As el cartlago blando es rico en proteoglicano, mientras que los tendones, endurecidos, contienen mayor proporcin de colgeno. Los proteoglicanos tienen una fuerte implicacin en los movimientos de migracin celular; los blastmeros que quedan rodeados por proteoglicano no pueden migrar. Adems facilitan el reconocimiento y mantenimiento de las clulas prximas.
Las glucoprotenas son otro gran grupo de molculas de la matriz extracelular que interaccionan con las clulas. Entre las glucoprotenas cabe destacar el importante papel de las fibronectinas, capaces de guiar la migracin de mltiples clulas distintas en funcin de su gradiente de concentracin. La fibronectina es un dmero de glucoprotena con diversos sitios de unin especficos para mltiples molculas de la matriz y protenas de la membrana de las clulas. La fibronectina es sintetizada por los fibroblastos, condrocitos, clulas endoteliales, y amniocitos entre otros, pero se encuentra exclusivamente en la matriz extracelular. La laminina es una glucoprotena componente fundamental de la lmina basal de muchos tejidos de revestimiento, siempre junto con el colgeno tipo IV, al que se une. Facilita la adhesin entre las clulas y el crecimiento de las mismas, y est implicada en las migraciones de las clulas as como la fibronectinas. La tenascina o citotactina facilita tambin la adhesin celular, pero es muy importante por su capacidad para generar repulsin entre las clulas, participando tambin en las migraciones celulares de los blastmeros y clulas germinales.
63
Las principales protenas de membrana celulares responsables de las uniones entre las clulas y la matriz extracelular son las integrinas. Las integrinas forman heterodmeros en la membrana, pudiendo formar distintos tipos especficos de ceterminados componentes de la membrana. Quedan unidas en su dominio interno al citoesqueleto. Se dice que su papel es el de integrar a la clula en su matriz extracelular, ya que estas protenas tienen un dominio externo de unin a fibronectinas y otros elementos inmviles de la matriz extracelular. La unin debe ser facilitada por otras protenas como la talina o la actinina.
Algunas enzimas tienen tambin importantes papeles durante los procesos de desarrollo del embrin. Las glucosiltransferasas son enzimas capaces de transferir disntintos hidratos de carbono a diferentes sustratos (cada tipo es especfico de un sacrido y un sustrato, generalmente proteico). Estn implicadas en los movimientos celulares de la gastrulacin. Las metaloproteasas son una amplia familia de enzimas que digieren la matriz extracelular. Son liberadas por ejemplo por las clulas del trofoblasto de mamferos para digerir la pared uterina durante la implantacin. Estn controladas por inhibidores que impiden que estas puedan digerir al embrin. TEMA XI; Interacciones Tisulares Proximales Cuando las clulas quedan yuxtapuestas o prximas interaccionan unas con otras; del mismo modo, los grupos de clulas suelen interactuar. La induccin es el proceso por el que un grupo de clulas, con su correspondiente matriz extracelular, provoca un cambio en otro grupo de clulas prximas; se puede decir que un tejido induce en el embrin la formacin de otro, y se diferencia un tejido inductor de otro tejido inducido. La induccin primaria es una induccin directa y original. Se habla de induccin secundaria cuando el tejido inductor ha debido de ser antes inducido. As, por ejemplo, la notocorda es un tejido inductor y el tejido nervioso es inducido. Induccin primaria Induccin secundaria Tejido A inductor Tejido B inductor Tejido B inducido Tejido C inducido
64
Los experimentos de Holtzer (1968) demostraron que existen dos tipos distintos de interaccin entre tejidos embrionario. Las interacciones permisivas tienen lugar cuando las clulas especificadas necesitan un medio ptimo para desarrollarse, es decir, cuando el medio es necesario pero no inductor. Las interacciones instructivas por el contrario, son determinantes para el compromiso celular de los tejidos, ya que sin estas instrucciones y seales las clulas no se podran desarrollar como lo hacen. El tejido nervioso, inducido por la notocorda y de origen ectodrmico, es inductor de las vesculas pticas, de forma que induce la formacin del cristalino del ojo en el epitelio ceflico; pero no en otros tejidos en los que el epitelio no es competente para la formacin del ojo. De hecho las vesculas pticas inducen la formacin del cristalino, y finalmente este induce la formacin de la crnea.
Las interacciones epitelio-mesenquimticas son un tipo de interacciones tisulares muy variadas y frecuentes, donde los tejidos epiteliales (ectodermo) y mesenquimticos (mesodermo) se inducen mutuamente para la formacin de mltiples estructuras del organismo. Estas interacciones son de gran importancia pues permiten la formacin de los dientes, glndulas, pulmones, aparato digestivo, faneras, garras, uas, plumas, escamas y otras estructuras drmicas. La formacin de estructuras drmicas corresponde a interacciones epiteliomesenquimticas entre los tejidos epitelial (ectodermo) y la dermis (mesodermo). La primera seal inductora es enviada desde el epitelio, e induce la condensacin de clulas mesenquimticas de la dermis que forman pequeas protuberancias debajo de la piel. Esta induccin da lugar a plumas, escamas o garras entre otras estructuras drmicas. En este tipo de induccin primaria intervienen las protenas shh (sonic hedgehog) y TGF-2 (factor de crecimiento transformador). Las condensaciones de clulas mesenquimticas no se producen al azar, ya que las clulas se condensan ordenadamente en puntos concretos, siguiendo gradientes de concentracin de colgeno y fibronectinas, y dando lugar a formas hexagonales (al unir los puntos por lneas). En funcin de las distintas regiones de piel, por ejemplo en un
65
ave, estas condensaciones darn lugar a distintos tipos de plumas, escamas de las patas, o garras. En este caso existe una especificidad regional de la induccin, que se debe en este caso a una induccin secundaria de las clulas mesenquimticas concentradas al epitelio, pues este ltimo, inicialmente, es exactamente igual en toda su superficie. La especificidad regional de la induccin es fundamental para las interacciones epitelio-mesenquimticas, y permiten la diferenciacin con especificidad creciente de las estructuras.
La especificidad gentica de la induccin epitelio-mesenquimtica es tambin fundamental. Fue estudiada por experimentos de Spemann y Schott (1932) sobre dos especies distintas de anfibios; un anuro (rana) y un urodelo (tritn). Trasplant el ectodermo oral de ambos animales obteniendo ranas con boca de tritn y tritones con boca de rana. Esto demuestra que el epitelio responde a las seales mesenquimticas, pero lo hace deacuerdo a su genoma, de forma que una misma seal desencadena la formacin de estructuras distintas en el mismo tejido, en funcin de la dotacin gentica de la especie.
66
El sentido de la respuesta celular depende de los tipos de seales inductoras y de la especificidad regional y gentica del tejido inducido. Las seales celulares durante el desarrollo se encuentran en un elevadsimo nmero, y se descubren nuevos casos constantemente. Las seales pueden ser de naturaleza endocrina (autocrina o paracrina) o yuxtacrina. Los factores paracrinos son aquellos que actan sobre clulas diana situadas en la cercana a la clula emisora de la seal. Los principales factores paracrinos son los FGF (factor de crecimiento de fibroblastos), dentro de los cuales existe una gran variedad de factores con muchos efectos distintos. Generalmente actan unindose a receptores FGFR en su porcin externa, activando el dominio tirosin-kinasa interno. Siempre actan asociados a proteoglicanos como el heparn-sulfato. Entre otros, dan lugar a la formacin de vasos sanguneos, al crecimiento axonal y el desarrollo de las extremidades de tetrpodos. Pueden tener lugar mutaciones o alteraciones en los FGF que dan lugar a graves anomalas en el desarrollo de muchos tejidos como huesos o cartlagos. Una de ellas es la craneosinostosis o fusin prematura de los huesos del crneo, y otra la acondroplasia o enanismo debida al desarrollo anmalo de los huesos cartilaginosos. Otros factores paracrinos de gran importancia son las protenas hedgehog, muy estudiadas en drosofila pues sus mutaciones provocan la aparicin de quetas ventrales en las larvas. Se encuentran en las clulas de sertoli, hueso cartilaginoso en desarrollo, o la induccin de neuronas motoras y sensitivas desde la notocorda. Destaca la protena sonic hedgehog cuyas mutaciones causan malformaciones como la ciclopia. Tambin son factores paracrinos las glucoprotenas Wnt (amplia familia), los factores TGF (transformador), BMP (seo), GDNF (neurotrfico glial), y las protenas nodal, fundamentales para el establecimiento de la simetra animal. Los factores yuxtacrinos son tambin de gran importancia. Destacan entre ellos las protenas notch, que trabajan en asociacin con receptores especficos influyendo sobre todo en el desarrollo del sistema nervioso y la diferenciacin en tipos celulares nerviosos. Las clulas que se van a diferenciar en neuronas forman la protena notch inhibiendo a las clulas yuxtapuestas, que formarn clulas de la gla. La efrinas tambin tienen receptores especficos en las clulas diana, y son muy importantes para la migracin de blastmeros en los somites y el establecimiento de las rutas o vas por las que se producen las migraciones. La vitamina A o retinos, cuyo precursor es el cido retinoico, es muy importante en el desarrollo. Durante esta etapa se debe mantener un equilibrio de su concentracin, y en niveles bajos o altos es cusante de malformaciones en la cara y las extremidades, como por ejemplo las extremidades extra o el paladar hendido. TEMA XII; Adaptaciones Embrionarias As como sucede con la anatoma y la fisiologa de los individuos adultos de cada especie, los distintos embriones y fetos adquieren adaptaciones especficas que facilitan su supervivencia en el lugar o medio en que se desarrollan, ya sea el tero matero o el lecho de un nido. Las adaptaciones ms destacables de los embriones son de hecho las estructuras extraembrionarias o anejos embrionarios. Estas estructuras de desarrollan en la filogenia y en la ontogenia con la finalidad de maximizar la probabilidad de supervivencia de la descendencia antes del nacimiento, pero son perdidas cuando finaliza el desarrollo del feto.
67
En telesteos el saco vitelino, bajo el sincitio vitelino, se forma por la vescula vitelina y una vena vitelina central. Esta vena transporta el vitelo hasta el tubo digestivo del feto. Ambos estn unidos a travs de un pednculo vitelino que contiene a la vena. En aves y reptiles el saco vitelino y el amnios se desarrollan simultneamente, no as el albumen que contiene protena albmina y agua. El vitelo queda recubierto por las hojas embrionarias para formar as un saco vitelino. La cavidad amnitica se forma simultneamente en posicin dorsal del embrin. Las hojas embrionarias son las responsables de desarrollar las estructuras extraembrionarias. Endodermo y mesodermo extraembrionarios se extienden recubriendo el vitelo desde la regin ventral del embrin. Forman el saco vitelino. La masa del vitelo disminuye conforme aumenta la masa del embrin, puesto que este componente del huevo constituye la principal reserva de nutrientes para el embrin. Ectodermo y mesodermo extraembrionarioas emiten a su vez prolongaciones y pliegues anterior y posterior desde la regin dorsal del embrin. Ambos pliegues se fusionan en la regin dorsal cerrndose as finalmente la cavidad amnitica.
Pueden diferenciarse as, en funcin de las hojas embrionarias que componen la estructura extraembrionaria, dos tipos de hojas extraembrionarias. La somatopleura se forma por ectodermo y mesodermo, y da lugar al amnios y a la membrana serosa en posicin dorsal. Por otro lado, la esplacnopleura se forma por el endodermo y mesodermo, y se desarrolla ventralmente formando el saco vitelino y el alantoides. En el celoma extraembrionario (o cavidad extraembionaria) el mesodermo doble se separa, dando lugar por un lado al mesodermo somtico, y por otro al mesodermo esplcnico o visceral (ambos forman la placa lateral, que formar parte del embrin). Ambos tipos de mesodermo extraembrionario dan lugar a la formacin de mltiples arterias, venas, vasos y capilares sanguneos vitelinos u onfalomesentricos que recubren el saco vitelino para alimentar al embrin. El amnios asegura el mantenimiento de la hidratacin y la temperatura del embrin o feto, y sirve a la vez como sistema amortiguador mecnico. Se forma una musculatura especfica que mueve al amnios y al embrin, asegurando que ambos no se fusionen en ninguna regin. El alantoides es una evaginacin del endodermo posterior extraembrionario recubierto por mesodermo esplcnico (esplacnopleura) de la regin ventral. El alantoides se expande ocupando todo el espacio de la cavidad seroamnitica, es decir, entre el amnios y la membrana serosa. El alantoides desplaza al resto de albumen del huevo a un extremo del mismo. Finalmente el alantoides contacta y se fusiona con la membrana serosa. El mesodermo
68
que recubre el alantoides forma tambin vasos sanguneos que secubren la cascara internamente, y con una funcin principalmente respiratoria. El alantoides se forma con un cierto retraso sobre los otros anejos embrionarios. Tambin interviene en la deshidratacin del albumen, facilita los aportes de calcio desde cscara del huevo hasta el esqueleto del embrin o feto, y sirve como sumidero o depsto de sustancias de desecho. Las excreciones de cido rico del feto tambin se depositan en el alantoides en forma de uratos, su forma cristalizada, que precipita. Esta vescula se desprende del embrin cuando se produce la eclosin.
Las estructuras extraembrionarias de los mamferos tambin son muy especficas, y suponen una adaptacin al viviparismo, que permite una proteccin del feto en el tero materno, en la etapa en la que los descendientes son ms vulnerables. En los mamferos el saco vitelino se forma inicialmente como estructura vestigial o lastre filogentico, pero posteriormente regresa. Existe una cavidad amnitica y un alantoides, pero este ltimo adquiere funciones distintas a las que tiene en el huevo. Lo ms destacable es la formacin de una placenta; carcter considerado como homlogo y fundamental en taxonoma (placentarios).
69
Todas las estructuras extraembrionarias de mamferos se desarrollan a partir de mesodermo extraembrionario que se extiende lateralmente a partir el mesodermo del disco embrionario. Se observa la formacin de un pednculo, futuro cordon umbilical que unir fsicamente al feto y la madre, sin permitir nunca el mezclado de sus sangres. Este mismo mesodermo recubre internamente a las clulas de trofoblasto permitiendo as la aparicin de la placenta fetal.
El amnios se forma por amniognesis de forma simultnea a la formacin del esbozo de saco vitelino. El amnios es una membrana fina y translcida, pero resistente y relativamente turgente, cuyo contenido, el lquido amnitico, es el medio ptimo para el desarrollo del feto pues mantiene su temperatura, proporcionndole adems proteccin mecnica. El lquido amnitico es un filtrado de plasma materno diludo inicialmente. Cuando los riones del feto se vuelven funcionales se aade orina fetal al amnios, y el feto ingiere este mismo lquido. La amniognesis puede desarrollarse de maneras distintas. Puede suceder por plegamiento formndose un plectoamnios, ms primitivo, o tener lugar por cavitacin, formndose en este caso un esquizoamnios, derivado. Existe una amniognesis mixta, por plegamiento y cavitacin, por ejemplo en roedores. En cualquier caso la situacin final es similar pues la cavidad aparece bajo ectodermo y mesodermo somtico, extraembrionarios, dorsales y terminan recubriendo a todo el tejido embrionario. El saco vitelino se forma por mesodermo esplcnico y endodermo extraembrionario ventrales. No cumple una funcin nutritiva pues no existe vitelo en el huevo, pero sin embargo se desarrollan vasos sanguneos a partir del mesodermo y en fases tempranas este anejo interviene en la sntesis de clulas sanguneas embrionarias. Sin embargo su tamao disminuye progresivamente hasta que degenera, y la hematopoyesis fetal pasa a ser una funcin heptica. La placenta se forma de dos partes; una placenta fetal y una placenta materna. La placenta fetal se forma a partir de las clulas de citotrofoblasto y del sincitiotrofoblasto modificados que son irrigados por los vasos sanguneos de mesodermo extraembrionario. La placenta materna se forma por pared uterina modificada y muy irrigada por una arteria y neva uterina. En esta estructura se producen los intercambios entre nutrientes y desechos del feto y su madre, pero nunca se produce mezcla de sangres. En los distintos placentarios se observan
70
adems distintos tipos de placenta. Los tipos ms bsicos son placentas indecduas, primitivas, y placentas deciduales, derivadas. El corion es la membrana o capa de clulas que separa la placenta materna y la placenta uterina. Las microvellosidades del corion son prolongaciones de la placenta fetal hacia la materna, donde se facilitan los intercambios de sustancias qumicas. El alantoides es la evaginacin del tubo digestivo que forma los capilares extraembrionarios de la placenta fetal a partir del mesodermo extraembrionario. Adems forma tambin el cordn umbilical, con el que el embrin o feto puede intercambiar sustancias a nivel de la placenta; se encuentran una vena y una arteria umbilicales.
La placenta indecidua epicorial y difusa presenta unas vellosidades corinicas difusas y dispuestas al azar. La pared uterina y el sincitiotrofoblasto estn superpuestos pero no unidos, y durante el parto ambos se separan con facilidad. La placenta indecidua mesocorial y cotilednea se caracteriza por que la pared uterina solo aparece (o se conserva) en determinadas zonas del sincitiotrofoblasto, pero los
71
capilares se disponen de la misma manera que en el caso anterior. Las vellosidades corinicas se disponen en cotiledones o acmulos. Durante el parto no se produce hemorragia. La placenta decidual endocorial y zonaria presenta capilares sanguneos iguales a los alantoideos, y no hay pared uterina. El sincitiotrofoblasto prolifera tan rpidamente que invade y se sumerge en los vasos sanguneos maternos. Durante el parto los vasos sanquneos maternos se rompen y se produce una ligera hemorragia uterina en las regiones donde se haban formado las microvellosidades corinicas. La placenta decidual hemocorial y discoide es la ms evolucionada. Su estructura permite un intercambio muy efectivo debido a la proximidad de las sangres fetal y materna. La sangre materna se acumula en lagunas del sincitiotrofoblasto, y los capilares fetales se encuentran muy prximos a las lagunas, dando lugar a la formacin de verdaderas microvellosidades corinicas, que se hacen cada vez ms profundas y numerosas. Durante el parto se produce hemorragia en las vellosidades del disco.
Existen patologas y malformaciones de las estructuras extraembrionarias. La amniocentesis es una extraccin por puncin del lquido amnitico que permite determinar el sexo, el grado de desarrollo, el estado del sistema nervioso y las posibles malformaciones o anomalas genticas del feto. Las principales molculas valoradas son la a-fetoprotena fundamental para determinar si el tubo nervioso se ha cerrado correctamente, la creatinina
72
que informa sobre el estado de desarrollo, y la esfingomielina y lecitina que aportan informacin sobre el estado de desarrollo del pulmn. La atresia esofgica impedira al feto deglutir el lquido amnitico. La anencefalia se debe a anomalas en el cierre del tubo nervioso anterior o ceflico. No permite el desarrollo del encfalo ni de la bveda craneana. En ambos casos se produce un exceso en el lquido amnitico o hidramnios. En otros casos, como por ejemplo la malformacin de los riones fetales, puede producirse oligoamnios.
TEMA XIII; Derivado Ectodrmicos; el Tubo Nervioso La organognesis es el periodo en el cual se desarrollan los complejos rganos que corresponden a la anatoma del individuo adulto. Se produce paralelamente un alargamiento del individuo que est formndose, a partir de la estructura redondeada correspondiente al ovocito, la mrula, la blstula y la gstrula. Comienzan a diferenciarse de visu las distintas partes del cuerpo, como encfalo y extremidades. Los anejos embrionarios se separan y hacen claramente distinguibles de la estructura del embrin que se transforma progresivamente en feto. En animales que no respiran a travs de branquias aparecen hendiduras branquiales o farngeas que se diferenciarn formando otras estructuras no relacionadas con la funcin respiratoria, como por ejemplo un cuello que separa la cabeza del tronco del cuerpo. La organognesis se inicia en una gstrula en la que ya se han diferenciado las tres hojas embrionarias bsicas que formarn todas las estructuras adultas por diferenciacin e induccin. Los derivados ectodrmicos ms destacables son la piel o el tegumento, el tubo nervioso y todas las clulas derivadas de la cresta neural y algunos huesos planos o esponjosos, como los huesos del crneo.
73
La formacin del tubo nervioso puede producirse por dos mecanismos distintos. El tipo ms frecuente es la neurulacin primaria. Se forma una invaginacin del ectodermo dorsal; las clulas ms profundas forman la placa neural, y las clulas ms extremas de la zona invaginada forman la cresta neural. En las aves las clulas de la cresta neural migran cuando el tubo nervioso termina de cerrarse. En los mamferos la migracin de estas clulas se inicia antes de que el tubo nervioso se cierre. El destino de estas clulas es mltiple; pueden dar lugar a la formacin de neuronas, clulas de gla y clulas pigmentarias como las de la retina. El cierre del tubo se debe a las caractersticas intrnsecas de las propias clulas de la placa neural y la epidermis, y estrnsecas o de induccin.
En experimentos de aislamiento de las clulas epidrmicas se ha observado la tendencia de las mismas a agruparse en la regin media del embrin, y las clulas de la placa neural presentan una tendencia intrnseca a curvarse para invaginarse. De esta manera cuando las clulas de la placa neural estn juntas, facilitan los movimientos por sus cambios intrnsecos de morfologa. Las clulas que van a dar lugar a la epidermis modifican tambin su morfologa, y tienden a aplanarse paralelamente a la superficie del cuerpo. Las clulas del tubo neural, una vez que este se ha formado, tienden a alargarse y constreirse en determinadas partes del tubo, y toman una forma ms o menos cilndrica. Estos cambios de morfologa implicanmicrotbulos para su alargamiento y microfilamentos para su constriccin. El proceso de neurulacin implica un movimiento paralelo de extensin convergente del ectodermo que facilita el alargamiento y aumento de superficie de esta capa de clulas. En todos los animales con notocorda, los cordados, se producen procesos de induccin por los que la notocorda controla y regula los movimientos de neurulacin o formacin del tubo nervioso. Las clulas profundas de la placa neural, durante la invaginacin, contactan con la notocorda ya que expresan E-cadherinas durante la formacin. Despus de la
74
neurulacin comienzan a expresarse en su lugar las N-cadherinas y N-CAM que nunca se expresan en la epidemis. El proceso de neurulacin secundaria es caracterstico de los peces, aunque tambin se observa en la neurulacin de otros animales, pero exclusivamente en la regin caudal. Se produce inicialmente una condensacin de clulas mesenquimticas que es tambin inducida por la notocorda. A partir de estas clulas se produce una oradacin o cavitacin de forma que el tubo termina formndose. Este mismo tipo de neurulacin de peces se encuentra en los anfibios en la regin caudal del surco primitivo, cuando se produce el alargamiento del embrin simultneamente en el mismo sentido antero-posterior. En este caso el tubo nervioso no se cierra de una vez, pues quedan en los extremos dos orificios por donde puede circular el lquido amnitico; un agujero posterior en el encfalo, ms grande, y otro anterior.
Existen mltiples factores relacionados con la formacin del tubo nervioso, como los aportes de colesterol y cido flico en la dieta, o los genes y protenas, en particular shh (sonic hedgehog), openbrain, PAX 3 o el factor nodal entre otros. Tambin pueden tener fuerte influencia algunos frmacos o sustancias teratgenas, como por ejemplo algunas drogas. Pueden causar anomalas en el cierre del tubo nervioso. Entre las anomalas ms destacables se encuentran la raquisquisis o ausencia del cierre longitudinal de la invaginacin de la neurulacin primaria, o espina bfida que corresponde a una raquisquisis parcial en distintas partes de la columna vertebral. La espina
75
bfida puede ser de varios tipos, y generlamente hay ausencia de una o varias vrtebras, o estas no se cierran en la regin dorsal (espina bfida oculta). En estos casos el sistema nervioso de la mdula no est protegido por hueso, y aparece superficialmente. Puede aparecer pelo. El meningocele es el caso en que sobresalen las meninges con el lquido cefalorraqudeo hacia fuera del cuerpo. No hay osificacin de la vertebra. El mielomeningocele es igual al caso anterior, pero el tubo nervioso sobresale del cuerpo acompaando a las meninges. En ambos casos se producen obstrucciones en el movimiento del lquido cefalorraqudeo pudiendo dar lugar a hinchamientos de la regin desprotegida de la mdula e hidrocefalia o hinchamiento excesivo del encfalo debido a la sobrepresin del lquido. Cuando el tubo nervioso termina de cerrarse correctamente, la presin del lquido cefalorraqudeo acumulado inicialmente a partir de lquido amnitico es responsable del hinchamiento de la regin del encfalo, y esto da lugar a la formacin de las vesculas enceflicas. Un exceso en esta presin es responsable de hidrocefalia. Esto pude operarse, incluso intrauterinamente. La anencefalia se produce cuando no se cierra el tubo nervioso y no se forman el crneo ni la bveda craneana, y generalmente esto implica la muerte feal por hidramnia o exceso de amnios; el embrin es incapaz de traga el mismo lquido. La formacin de las vesculas ceflicas es tambin un proceso fundamental. Se trata del principal proceso de diferenciacin de porciones de tubo nervioso, inicialmente uniforme. La regin posterior dar lugar a la mdula espinal, pero la regin anterior que formar el encfalo debe diferenciarse y dar lugar a las vesculas enceflicas, cuya aparicin es facilitada por la presin generada por el lquido cefalorraqudeo.
1; tubo neural 5; telencfalo
2; prosencfalo 6; diencfalo
3; mesencfalo 7; metencfalo
4; rombencfalo 8; mielencfalo
En el interior de las vesculas se encuentra un espacio llamado neurocele donde se desplaza el lquido cefaloraqudeo. Estas estructuras darn lugar a todas las estructuras nerviosas enceflicas del sistema nervioso central, como la neocorteza y el cerebro, el
76
cerebelo, el blbo raquideo, y tambin estructuras perifricas de la cabeza como las vescula pticas. Si el prosencfalo no se subdivide en telencfalo y diencfalo se produce holoprosencefalia, y en casos extremos ciclopia, y en muchos casos lleva a la muerte. El robencfalo debe a su vez desarrollarse en porciones llamadas rombmeros, con denominacin numrica antero-posterior. Su formacin es independiente y son importantes para el desarrollo y la orientacin de las clulas de la cresta neural. La diferenciacin dorsoventral del tubo nervioso es fundamental para la diferenciacin de las clulas del mismo. Esta diferenciacin es inducida por las distintas seales enviadas por la epidermis dorsalmente y por la notocorda ventralmente. Esto permitir que las clulas de la regin ventral se desarrollen como neuronas sensitivas, las de la regin intermedia como interneuronas, y finalmente las clulas dorsales como neuronas motoras. La epidermis sintetiza y libera BMP 4 y 7, y protenas dorsalina y activina. La notocorda, a su vez, sintetiza protenas ssh que tambin influyen en la diferenciacin de las clulas de los somitas.
La diferenciacin celular del tubo nervioso va a dar lugar a la aparicin de distintos tipos de neuronas y de clulas de gla. Todas ellas aparecen a partir de clulas pluripotentes embrionarias; los neuroblastos. Los ncleos de los neuroblastos de una misma capa se encuentran a distintas alturas del tubo nervioso y van a sufrir mitosis en proximidad al lumen (fase H), o sntesis activa de ARNm en las capas perifricas (fase S). Mientras los neuroblastos se van dividiendo aparecen capas concntricas de clulas, cada vez ms externas, lo que permite el aumento en grosor del tubo. Se denomina neuroepitelio germinal a la capa interna del tubo neural, que prolifera permitiendo el aumento en grosor del tubo nervioso. La diferenciacin de las paredes del tubo nervioso se produce cuando el neuroepitelio germinal comienza su proliferacin, y en el tubo comienzan a diferenciarse de interno a externo la capa ependimal o zona ventricular, la capa del manto o zona intermedia y la capa o zona marginal. Esta diferenciacin se produce cuando se produce la diferenciacin celular de los neuroblastos. En la capa del manto se encuentran los cuerpos neuronales y formar la sustancia gris, y la capa marginal perifrica se forma por sus prolongaciones axnicas que se
77
desarrollan dando lugar a la sustancia blanca de la mdula y los nervios. Esto tiene lugar de la misma manera en toda la mdula espinal y el bulbo raqudeo y el rombencfalo. Sin embargo en las vesculas anteriores las sutancia gris adquiere una forma en alas de mariposa que quedan rodeadas por la sustancia blanca, y posteriormente se invierte, quedando la sustancia gris dorsalmente externa a la blanca. Adems a nivel de la sustancia gris se produce un surco limitanta en la zona intermedia, que separa las regiones dorsal y ventral. En la regin ventral se forman las placas alares sensitivas, mientras en la regin ventral se forman las placas basales motoras. En todos estos procesos la induccin por parte de la notocorda es fundamental, y se realiza en etapas muy tempranas. El cerebelo presenta tambin modificaciones importantes en base a la misma estructura inicial del tubo neural. En primer lugar se produce la migracin de un grupo de neuroblastos hacia la sustancia blanca, y ah se diferencian en ncleos cerebelosos de neuronas, que actan como unidades funcionales permitiendo la comunicacin entre el cerebelo y otros centros nerviosos. En segundo lugar, otro grupo de neuroblastos migra, y estos se colocan en posicin externa a la capa marginal, formando la zona germinal externa, con capacidad de proliferacin. Estas clulas son las clulas pregranulares, precursoras de las neuronas granulares. Las neuronas pregranulares vuelven hacia atrs y sintetizan BMP, formndose una segunda capa de clulas constituda por neuronas granulares. Estas clulas son de gran importancia para el funcionamiento del cerebelo. Finalmente aparecen las clulas de purkinge, formndose as las tres capas caractersticas de la paleocorteza. Estas neuronas se caracterizan por su pequeo cuerpo redondeado y su rbol dendrtico altamente ramificado. Estas clulas tambin funcionan como unidades de conexin entre el cerebro y los ncleos cerebelosos. Adems tienen capacidad para sintetizar ssh, fundamental para la persistencia de las clulas granulares.
Cualquier capa celular o tipo neuronal ausente puede causar malformaciones y anomalas en los fetos. En ratones se conocen ms de 30 mutaciones que causan anomalas cerebelosas. Las clulas de la gla de bergmann son utilizadas por las neuronas preganglionares para su migracin hasta la capa granular. La astrotactina es una protena de
78
adhesin celular producida por las clulas de gla de bergmann que permiten esta migracin, y por lo tanto la formacin de las clulas de purkinge. Por ejemplo los ratones mutantes de weaver carecen ce migracin de las clulas granulares de modo que las clulas de purkinge no pueden desarrollar su rbol dendrtico, y no presentan repuesta al in potasio. Los mutantes de staggerer presentan anomalas en las cortezas del cerebro y cerebelo, y sus neuronas de punringe carecen de respuesta a la tirotoxina. El cerebro, y en particular la neocorteza o corteza cerebral, aparece tambin como resultado de la migracin de clulas del tubo neural, que formarn las neuronas de las seis capas de la neocorteza. En una primera migracin, los somas neuronales se situan en la zona ms externa del telencfalo, formando una capa de clulas llamada corteza neoplica. Esta corteza primaria se va a desarrollar en capas horizontales y verticales dando lugar a la formacin del neocortex o corteza cerebral. Cada una de las capas de neocorteza estar formada por distintos tipos neuronales ycaracterizadas entre otras cosas por los distintos tipos de conexiones que forman entre si y con otros ncleos, rganos sensoriales, u rganos motores, y finalmente por su funcionalidad. La lisencefalia es una anomala que puede producirse en humanos en distintos grados, por falta de circunvoluciones, lo que implica una superficie de neocorteza inferior a la normal. Los ratones mutantes reeler presentan anomalan en la corteza cel cerebro y del cerebelo. Presentan anomalas en sus clulas de purkinge y una composicin anormal en la matriz extracelular de las clulas de cajal-retzius. Los tipos celulares derivados de los neuroblastos son como hemos visto muy variados; de hecho las clulas nerviosas son las que mayor variedad morfolgica presentan. De hecho los neuroblastos deben formar entre otras clulas toda la gran variedad existente de neuronas y clulas de la gla. El citoesqueleto de las clulas es responsable de la formacin de sus prolongaciones dendrticas y axonales. Es particularmente el desarrollo direccional del axn desde el cono de crecimiento axonal. El factor VEGF tiene una especial importancia en este proceso. Los axones formados deben quedar recubiertos por vainas de mielina (si son mielnicos) formadas por las clulas de la gla. En el sistema nervioso central esto es llevado a cabo por los oligodentrocitos, mientras que en el perifrico es llevado a cabo por las clulas de schwann.
79
TEMA XIV; Derivado Ectodrmicos; la Cresta Neural Los tipos celulares derivados de las clulas de la cresta neural son tambin muy variados y de gran importancia. Las clulas de la cresta neural se desarrollan de forma independiente al tubo neural, y dan lugar a la formacin de distintas estructuras en funcin de su localizacin ceflica (1), del tronco (2), cardiaca (3) o neural sacro-vagal (4). Siempre migran para diferenciarse en distintas regiones del cuerpo. Se ordenan de anterior a posterior de la siguiente manera: Anterior 1 3 4 2 4 Posterior
Las clulas de la cresta neural ceflica comienzan a migrar mientras el tubo neural se est an terminando de cerrar. Se diferencian dos grupos de clulas de la cresta ceflica que migran; unas dorsales, y otras ventrales que se dirigen a las bolsas farngeas, desde los rombmeros. Estas clulas ventrales van a formar las branquias, el cuello, el timo, las glndulas tiroides y paratiroides, y cartlagos del cuello. La orientacin de la migracin de estas clulas depende de la orientacin de los 7 rombmeros en regin ventral.
Las clulas de los rombmeros I, II y III migran al primer arco farngeo formando los huesos de las mandbulas, los odontoblastos o clulas formadoras de diente, los huesos del odo medio, los huesos de la cara y las neuronas del ganglio trigmico. Las clulas de los rombmeros III, IV y V migran al segundo arco farngeo y forman el cartlago hioides, los huesos del odo medio y las neuronas del nervio facial. Las clulas de los rombmeros V, VI y
80
VIII migran al tercer y cuarto aros farngeos formando el timo, las glndulas tiroides y paratiroides, y la porcin posterior del cartlago hioides. Las clulas de los rombmeros III, V y VII migran lateralmente hacia porciones correspondientes a los rombmeros anteriores y posteriores. Las migraciones de estas clulas a unos y otros arcos branquiales implica a la protena efrina; estas efrinas tienen un efecto disuasorio sobre las clulas de la cresta neural de los rombmeros III, V y VII. Inhiben la polimerizacin de los microfilamentos de actina inhibiendo el movimiento de las clulas. El patrn de distribucin de los genes Hox (Hox A, Hox B,) determina el comportamiento migratorio y el destino final de estas clulas.
La segunda poblacin de clulas de la cresta neural van a migrar pero permaneciendo en la regin dorsal del embrin, y van a formar clulas de la gla que guan el axn de las clulas sensitivas desde las placodas craneales hasta el rombencfalo. Las placodas craneales del encfalo son de hecho estructuras pasajeras y temporales. Se trata de engrosamientos ectodrmicos de la cabeza y el cuello que constituyen que constituyen el componente nervioso sensitivo de los futuros rganos sensoriales. Son por ejemplo las placodas ticas, del cristalino, u olfatorias. Su formacin es contempornea a la del nudo de hensen. Esta poblacin de clulas de la cresta neural son las nicas de este tipo que pueden dar lugar a componentes esquelticos, es decir, cartlago o hueso. Las clulas de la cresta neural del tronco siguen tambin dos rutas de migracin; una dorsolateral, y otra ventrolateral. Las clulas que siguen la ruta dorsolateral (1) van a formar los melanocitos, o clulas pigmentarias de la piel. Migran por encima de los somitas, externamente al dermomiotomo, es decir, entre este y la epidermis. Todas las clulas pigmentarias del tegumento de los animales
81
tienen su origen en las clulas de la cresta neural que migran siguiendo esta ruta, a excepcin de las de la retina. Deficiencias en esta ruta son responsables de neurocristopatas o de albinismo. Las clulas que siguen la ruta ventrolateral (2) darn lugar a componentes nerviosos perifricos. Forman las neuronas de los ganglios de la raz dorsal, de los ganglios simpticos, de la mdula adrenal y forman tambin clulas de schwann. Migran entre los dermomiotomos y los esclerotomos, slo por la porcin anterior del esclerotomo, puesto que en las regiones posteriores se encuentran efrinas que inhiben su migracin. Las clulas que se encuentran sobre la regin posterior se desplazan lateralmente en su migracin, hacia las regiones posteriores de los somitas anterior y posterior. Esto est relacionado con la maduracin de los esclerotomos cuya regin anterior madura antes.
La regulacin de la migracin es facilitada por factores paracrinos, protenas de adhesin celular, y molculas de la matriz extracelular. BMP4 y BMP8 se encuentran en la regin ectodrmica, futura epidermis. Estas facilitan la migracin por la ruta dorsolateral al igual que la quimioatraccin de las clulas epidrmicas. Inicialmente se forma una estructura epitelial con molculas de adhesin E-cadherinas, por lo que las clulas de la cresta neural sintetizan y liberan las protenas SLUG, que rompen los enlaces de E-cadherinas en la cresta neural dotando a las clulas de consistencia mesenquimtica laxa y permitindolas migrar, y protenas RhoB que acta sobre el citoesqueleto de las clulas de la cresta neural para permitir la migracin. Durante su deplazamiento, las clulas se encuentran con matrices extracelulares de naturaleza distinta, que puede guiar la migracin celular por quimioatraccin o quimiorepulsin. Estos componentes suelen ser detectados por las integrinas de las clulas, y entre ellos destacan la fibronectina, el colgeno, los proteoglicanos, la laminina, la tenastina, y tambin la trombospondina que se encuentra en la regin anterior de cada esclerotomo y
82
las efrinas y semaforinas de repulsin en la regin posterior. El factor SCF (clulas cepa) favorece la proliferacin de las clulas de la cresta neural. El destino final de la diferenciacin de las clulas est muy relacionado con los componentes de la matriz extracelular del medio final en el que se encuentra la clula despus de migrar. Si antes de la diferenciacin se cambia a las clulas de ambiente, se observa que no tenan un destino determinado, pues modifican el destino de su diferenciacin. Intercambiando, por ejemplo, las clulas de la cresta neural del tronco de las regiones del SNA simptico y parasimptico, estas clulas cambian el destino de su diferenciacin en funcin de su localizacin final en el embrin, y se dice entonces que son clulas pluripotentes. Las clulas de la cresta neural vagas y sacras forman neuronas del SNA parasimptico, que inervarn al intestino. Estas fibras son muy importantes, pues son responsables de los movimientos peristlticos. Si se producen patologas en estas clulas o en su migracin, se forma un megacolon; este se hincha pues no es capaz de expulsar las heces. Las clulas de la cresta neural cardiaca (nerviosa o cervical) se encuentran muy prximas a la regin farngea, en el lugar donde se forma inicialmente el corazn. Estas clulas van a formar un elevado nmero de estructuras variadas, entre ellas melanocitos y cartlagos de los arcos farngeos III, IV y VI. Estas mismas clulas van a formar partes del corazn, as como el endotelio de los arcos articos, y el tabique de separacin entre la aorta y la arteria pulmonar. Van a formar los arcos articos y las neuronas de los arcos articos. Las anomalas en las rutas de migracin de estas clulas pueden dar lugar a patologas y malformaciones cardiacas, comunicacin entre arterias aorta y pulmonar y mezcla de sangres, neurocristopatas o deficiencia de clulas T en el timo. Los principales componentes nerviosos embrionarios, cresta y placa neural, estn influenciados por mltiples factores neurotrpicos y neurotrficos que, respectivamente, dirigen el movimiento de las clulas, y controlan su desarrollo. Estas molculas pueden causar repulsin o atraccin, y algunos factores pueden dirigir simplemente el crecimiento axnico de las clulas cuyo soma ya ha migrado y se ha establecido. Para ello pueden seguir por ejemplo la capilares o vasos sanguneos. Entre estos factores se encuentran por ejemplo NGF, BDNF, NT3, NT4, NT5, FGF5 o GDNF. TEMA XV; Derivado Ectodrmicos; el Epitelio Por ltimo, la epidermis y otras estructuras derivadas tambin encuentran su origen en la hoja ectodrmica. Forman el tegumento, que recubre la dermis de todos los animales, as como otras estructuras como son plumas, pelos, dientes o glndulas mamarias. La dermis es una estructura de origen mesodrmico y de la cresta neural (ectodrmico), que se encuentra por debajo de la epidermis, y tiene una fuerte influencia en la induccin de su formacin. A partir de la neurulacin, el ectodermo superficial forma el peridermo, y se inicia la formacin de la piel. Se trata de una estructura que se desarrolla en estratos o capas, desde el interior hacia el exterior. Las clulas cepa de la piel se encuentran en la regin ms profunda, en la denominada lmina basal. Estas clulas proliferan continuamente durante toda la ontogenia del individuo, dando lugar y renovando las otras capas superficiales. Las clulas que pasan al siguiente estrato, el estrato espinoso, dejan de proliferar y comienzan a producir queratina. A continuacin se encuentra el estrato granuloso, donde las clulas comienzan a mostrar grandes acmulos de queratina en grnulos, lo que dota de una consistencia
83
endurecida a este estrato. El estrato crneo es el ms superficial. En l se acumulan las clulas muertas, ricas en queratina y endurecidas, que muestran el ncleo deslaplazado a un extremo por los grnulos, y que progresivamente se van desescamando. Los melanocitos de la dermis, cuyo origen es la cresta neural, se introducen en el estrato basal de la epidermis, y transmiten melanocitos a las clulas de la piel; se trata de grnulos de pigmento. El desarrollo de la epidermis est controlado por fundamentalmente por dos factores; TGF (transformador) es un factor autocrino liberado por las clulas del estrato basal, que favorece la proliferacin de las mismas, y KGF (de queratinocitos) es un factor paracrino liberado por los fibroblastos de la dermis, que regula tambin la multiplicacin de las clulas del estrato basal. Las interacciones epitelio-mesenquimticas (el mesenquima se forma por mesodermo y clulas de la cresta neural) dan lugar a la formacin de las otras estructuras de la piel. Estas estructuras siempre muestran una disposicin ordenada en la piel. Este orden viene determinado por las distintas concentraciones de varias protenas en la propia piel, entre las que destacan Wnt, shh y BMP. Estas molculas determinan los puntos en que se produce la agregacin de los fibroblastos en el mesenquima, y este mismo punto es el lugar en el que aparecer despus la estructura epitelial.
Los pelos son estructuras que aparecen en los puntos de la dermis donde se acumulan los fibroblastos; las papilas drmicas. En los fetos aparecen inicialmente protuberancias en estos lugares, debido a la agregacin de las clulas mesenquimticas. Encima de cada papila drmica, las clulas epiteliales comienzan a proliferar activamente, emitiendo prolongaciones hacia la dermis. Finalmente las papilas drmicas con los fibroblastos quedan embebidas en estas prolongaciones de la epidermis, y se desarrollan formando los pelos. Estas estructuras inducen la formacin de capilares arteriales y venosos, nervios, glndulas sebceas que proporcionan al pelo el componente oleaginoso, y msculos erectores de origen mesodrmico, que se insertan en la mitad del pelo. En la parte basal del pelo, o raz, se acumulan clulas cepa del folculo basal que se multiplican activamente durante toda la ontogenia permitiendo el contnuo crecimiento del pelo. Tambin existen cmulo de clulas cepa de melanocito que se encargan de la pigmentacin del pelo, y que degeneran con la edad. Los primeros pelos que aparecen en el embrin o feto se denominan lanugo. Despus aparece el vello y el pelo, inicialmente muy finos, que tienden a engrosarse con la edad. El lquido amnitico podra
84
daar la piel del embrin o feto, por lo que esta queda cubierta por clulas desescamadas, pelos y secreciones oleaginosas que forman la vernix caseoso, similar a un barniz de proteccin. Existen anomalas en la distribucin de los pelos, debidas a alteraciones de las protenas determinantes para su formacin, como la atriquia (ausencia de pelo) o la hipertricosis (exceso). Las plumas son estructuras ectodrmicas que aparecen en disposicin hexagonal debido a las interacciones epitelio-mesenquimticas. Aparecen placodas drmicas muy similares a las papilas drmicas, donde se concentran los fibroblastos de acuerdo a la reparticin de colgeno y fibronectina. Su desarrollo es similar al de los pelos. Si se aade experimentalmente colagenasa en la dermis, no se forma el mismo patrn de plumas. Los engrosamientos epiteliales queratinizados, como las uas, garras o pezuas, y tambin los cuernos, con componente seo interno, son clulas epiteliales muy queratinizadas y muertas, que dan lugar a estructuras endurecidas. Proliferan a partir de agrupaciones de clulas cepa. Las glndulas mamarias aparecen en disposicin regular y simtrica en la regin ventral de las hembras de mamfero. Cada una se acompaa de un pezn, donde desembocan al exterior. Su origen es tambin ectodrmico. En hembras lactantes aumenta el volumen de los conductos, porque comienza la produccin activa de leche. Los dientes se forman inicialmente como condensaciones de clulas en el epitelio bucal, que forman la lmina dental, donde aparecern los esbozos de los futuros dientes. Inicialmente se forma la lmina dental por engrosamiento y proliferacin de las clulas ectodrmicas, que se introducen hacia el mesnquima. Estos engrosamientos forman una cavidad cncava en su regin basal, ms profunda en el mesnquima. Durante este periodo de caperuza aparecen unas clulas mesenquimticas cuyo origen es la cresta neural, y que van a dar lugar a la papila dental; estas clulas se sitan dentro de la cavidad cncava del engrosamiento. Las clulas de la papila dental forman los odontoblastos que formarn la dentina del diente, en cuya regin interna se encuentra la pulpa dental con los vasos sanguneos y nervios. La porcin externa, ectodrmica, dar lugar a los ameloblastos que forman el esmalte dental. La vaina del diente lo sujeta a la enca y a la mandbula, como el ligamento. Aparecen tambin otras clulas de origen mesenquimtico que van a formar el cemento del diente; son los cementoblastos, que aparecen en el desarrollo poco antes del nacimiento. El cemento es una fina capa de hueso que se encuentra en el diente.
85
Los pliegues de las aletas impares de peces y larvas de anfibio son tambin estructuras epiteliales complejas. Tienen un componente epidrmico y tejido conjuntivo en su interior, cuyo origen es la cresta neural. Puede tener tambin componentes seos en peces. Las branquias externas son tambin estructuras epiteliales presentes en algunos peces pulmonados y larvas de anfibios. Tienen epidermis, tejido conjuntivo, vascularizacin y musculatura. Los balancines son dos tentculos que aparecen situados detrs de la boca de las larvas de los urodelos, que les sirven para apoyarse sobre el sustrato. Adems de epidermis y tejido conjuntivo, secretan sustancias adherentes y mucus. Los rganos fijadores de larvas de anuros son glndulas que liberan sustancias mucosas para mantener el equilibrio. Las extremidades pares de los tetrpodos tienen tambin un importante componente ectodrmico de piel y otras estructuras de la piel. TEMA XVI; Derivados Ectodrmicos; rganos de los Sentidos La formacin de los rganos de los sentidos suele implicar componentes ectodrmicos neurales y ectodrmicos epiteliales. Inicialmente se forman placodas; se trata de engrosamientos ectodrmicos relacionados con clulas nerviosas sensitivas. Estas placodas permiten la comunicacin de los rganos de los sentidos con el sistema nervioso central.
Placodas olfatorias
Placodas del cristalino
Placodas ticas
La formacin del ojo se inicia en unas prolongaciones del diencfalo que forman las dos placodas o vesculas ticas como dos prolongaciones laterales que se aproximan al ectodermo epitelial. Las protenas SIX3 y PAX6 estn relacionadas con la diferenciacin de estas placodas. Las protenas shh estn relacionadas con el desarrollo simtrico de dos vesculas ticas, y su ausencia da lugar a patologas como la ciclopia. Estas placodas ticas inducen la formacin de las placodas del cristalino, las cuales inducen a su vez la formacin de la crnea en posicin externa. Desde aqu se producen mltiples inducciones recprocas que dan lugar a la formacin de un ojo completo, y de la retina nerviosa que es concretamente inducida por el cristalino.
86
La retina nerviosa est formada por tres capas de neuronas. Los conos y os bastones son los fotorreceptores, y se encuentran en la regin ms interna o profunda de la retina, donde los pigmentos captan la luz y la transducen en seales nerviosas. A continuacin se encuentra una capa de clulas bipolares y por ltimo una capa de clulas ganglionares cuyos axones forman el nervio ptico, que se proyecta sobre el sistema nervioso central. El cristalino est formado por clulas alargadas. Durante el desarrollo las clulas redondeadas se diferencian y adoptan esta forma. Sus ncleos quedan entonces desplazados y se forman protenas cristalinas, constituyndose as las clulas del cristalino. El cambio de la forma de las clulas permite que el cristalino formado pueda doblarse y ajustarse al enfoque. El epitelio germinal del cristalino est formado por clulas de diferentes formas que se multiplican y diferencian a lo largo de toda la vida del adulto. Los msculos del iris son una excepcin pues son los nicos que proceden del ectodermo nervioso, no del mesodermo.
87
La crnea del ojo contiene el estroma donde migran las clulas de la cresta neural. Est formada por distintas capas de colgenos, e inicialmente cuenta tambin con un importante componente de cido hialurnico que capta y retiene el agua facilitando su hinchamiento. Una vez formada la crnea la tiroxina facilita su deshidratacin. Patologas de la formacin de la crnea pueden ser responsables de microftalmia (ojos diminutos) o anoftalmia (sin ojos). Los rganos olfatorios se forman a partir de las placodas olfatorias. Su formacin est inicialmente asociada a uno o dos nervios que se prolongan desde el telencfalo. Los rganos de Jacobson de los reptiles se encuentran en el paladar; se trata de un epitelio intensamente inervado que juega el papel de un rgano olfatorio. Las estructuras auditivas se forman apartir de placodas auditivas que se inician como prolongaciones del rombencfalo inductoras, que adems inervarn en el futuro estos rganos sensoriales. Invaginaciones de estas placodas darn lugar a las vesculas auditivas. Los rganos de la lnea lateral de los peces y larvas de anfibios son un conjunto de cilios que se extienden desde la cabeza y todo a lo largo del cuerpo, que informan sobre cambios de presin y de las corrientes de agua.
El odo de los mamferos se forma de un odo interno, un odo medo y el odo externo. El odo interno se forma a partir de una invaginacin inicial del ectodermo epitelial o superficial, que formar la vescula auditiva. La porcin dorsal dar lugar al utrculo, a los conductos endolinfticos y a los conductos semicirculares. La porcin ventral formar el conducto coclear del equilibrio. El odo medio se forma en la primera bolsa farngea, a partir del epitelio de la boca, de origen endodrmico. As se forman la cavidad timpnica, la trompa
88
de Eustaquio, y los huesos del odo. Estos ltimos huesos se forman a partir de clulas de la cresta neural, y se corresponden a los huesos de las branquias de los peces. Finalmente el odo externo forma el tmpano, e implica componentes ectodrmicos epiteliales, mesenquima y endodermo. El pabelln de la oreja se forma por cartlago, y su desarrollo se inicia en prominencias mesenquimticas. TEMA XVII; Formacin y Desarrollo Inicial del Mesodermo El mesodermo es una hoja embrionaria difcil de diferenciar, pero muy importante en el reino animal, pues diferencia a los primitivos animales diblsticos de los animales triblsticos, con tres hojas embrionarias. Los destinos ms importantes de las clulas del mesodermo son la formacin de la dermis, los msculos y los huesos de distintos tipos. Adems formar las clulas sanguneas, y las clulas endoteliales de los vasos sanguneos. Por ltimo, estas clulas son las formadoras del aparato reproductor y el aparato excretor (en muchos casos llamado urogenital). En aves reptiles y mamferos las clulas del mesodermo son las primeras que migran desde el surco primitivo hacia el interior del disco embrionario, pero el origen de estas clulas es variable en los distintos taxones, y por ejemplo en erizo de mar son los micrmeros que ingresan los que dan lugar al mesodermo. Una vez formado, el mesodermo se caracteriza por estar situado entre las otras dos capas embrionarias; ectodermo y endodermo.
La cordamesodermo es la primera estructura constituida por las clulas mesodrmicas, y dar lugar a la formacin de la notocorda. Esta estructura es muy importante para inducir la formacin de todo el sistema nervioso a partir de la hoja ectodrmica. Adems acta como soporte esqueltico para el embrin, y para algunos individuos adultos como los anfioxos. Esta estructura exclusiva de cordados suele degenerar en los adultos de vertebrados, en el momento de la formacin de la columna vertebral. Slo algunas fracciones de la
89
notocorda son mantenidas por los vertebrados durante toda la vida; estas fracciones se situan entre las vertebras; se trata de los discos intervertebrales. El mesodermo ceflico o craneal va a dar lugar a la formacin de los msculos de la parte posterior del crneo y de la cara (a excepcin de los del iris). Esta porcin de mesodermo se sita a la altura del rombencfalo, donde quedan tambin situadas algunas clulas de la cresta neural (rombmeros). Estas ltimas clulas darn lugar a muchas estructuras, entre las cuales se encuentran las mandbulas y tambin algunos msculos. El mesodermo paraxial o somtico se forma a ambos lados de la notocorda, y a lo largo de todo el tronco del cuerpo del embrin. Va a formar los somitas, estructuras segmentadas, que posteriormente formarn la dermis, los huesos y cartlagos de las vrtebras y las costillas, y varios tipos musculares entre los que destacan los del esqueleto del tronco, de la pared del cuerpo, de las extremidades y la lengua. Las bandas paraxiales se van dividiendo o segmentando en bloques o somitas de forma peridica y regular, de manera que las divisiones van apareciendo progresivamente en sentido antero-posterior (mismo sentido en el que se forma el surco primitivo y se va alargando el tronco del cuerpo. Las divisiones, de hecho, van apareciendo de forma simultnea al cierre del tubo nervioso. El punto exacto donde se va a producir cada segmentacin viene determinado por las concentraciones de las protenas Wnt, Notch y el factor FGF. As, estas molculas determinan los lugares en los que quedar formado cada somita en funcin del tiempo, lo que viene determinado por el patrn propio de una especie. La periodicidad de la sntesis de protena hairy determina el patrn de segmentacin temporal de la especie. Las efrinas aparecen en la regin posterior del somita antes de su segmentacin. As se forman los somitmeros que se desarrollan formando posteriormente los somitas. Las regiones posteriores de los somitmeros determinan los puntos de separacin. Los somitmeros presentan inicialmente una estructura mesenquimtica, y las clulas no presentan cohesin. El somita se forma por la epitelializacin de este tejido, y la aparicin de N-cadherinas y de fibronectina en la matriz. As quedan finalmente formados bloques compactos de clulas.
Las clulas de los somitas tienen un destino caracterstico y predeterminado. Se han intercambiado experimentalmente los somitas torcicos de un ave a la regin cervical, observndose el desarrollo de costillas en el cuello del pollo. La determinacin anteroposterior de los somitas est regulada por los genes HOX. Dentro de un somita, la diferenciacin de las clulas depende de mltiples factores paracrinos. Esta diferenciacin se adquiere despus de la formacin del somita, y depende de hecho de la posicin de cada clula dentro del bloque. Inicialmente los somitas del mesodermo paraxial se dividen en un esclerotomo interno, es decir, cercano al tubo nervioso,
90
y un dermomiotomo externo o cercano al ectodermo epitelial. El dermomiotomo se va a dividir de hecho tambin en dos fracciones; un dermotomo y un miotomo.
Las clulas del esclerotomo pierden su consistencia epitelial, y migran para rodear al tubo neural y a la notocorda, dando lugar as a las vertebras, y en algunos segmentos tambin a costillas. Despus desaparecer la notocorda, excepto en los discos intervertebrales, y se formar hueso en su lugar. Entre los factores paracrinos que determinan el destino celular cabe destacar el factor Pax1 que determina la diferenciacin en condroblastos y osteoblastos para la osificacin. La protena shh, sintetizada por la notocorda y el tubo nervioso inferior, induce la sntesis de este factor. Las clulas del dermatomo, ms superficiales, formarn la dermis. Estas clulas tambin pierden su estructura compacta para migrar hacia la capa basal del ectodermo epitelial, donde formarn la dermis. Su diferenciacin es inducida por la protena Wnt sintetizada en la regin superior (dorsal) del tubo nervioso y en la epidermis, y neurotrofina sintetizada por el tubo nervioso. Las clulas del miotomo se separarn en un miotomo superior o epiaxial, que forma la musculatura vertebral, y un miotomo inferior o hipoaxial, que da lugar a la musculatura lateral y de las extremidades. La diferenciacin de las clulas del miotomo epiaxial se ve influenciada por las Wnt y shh sintetizadas en la regin dorsal del tubo nervioso. La diferenciacin del miotomo hipoaxial est influida por las BMP sintetizadas en el mesodermo de la placa lateral.
91
Las clulas del miotomo van a formar la musculatura. Los procesos de desarrollo de estos rganos, fundamentalmente locomotores o mecnicos, es relativamente sencilla, y tienen una fuerte influencia sobre ellos, de nuevo, los factores paracrinos. Los mioblastos, clulas mesenquimticas musculares, se multiplican activamente y proliferan en presencia de FGF. Adems, estas mismas clulas sintetizan bHLH (basic hlix-loop-helix), factores que a su vez activan genes de la musculatura. Los mioblastos se fusionan y forman los miotubos polinucleados o sincitiales, que se desarrollan formando finalmente las miofibrillas contrctiles. Varias de estas miofibrillas van a unirse lateralmente formando los msculos. La alineacin de estos mioblastos, y su fusin en miotubos, tiene lugar en presencia de cadherinas y de fibronectina en la matriz (reconocida y unida por integrinas), y solo se produce despus de un descenso en la concentracin de FGF. Adems la formacin de los miotubos implica la degradacin de la matriz extracelular, para lo que son necesarias una metaloproteasas especficas; las meltrinas. Las miofibrillas, finalmente inervadas, persentan capacidad para contraerse. Existe un depsito de clulas cepa en los msculos, que permiten la regeneracin de este tejido en adultos.
El mesodermo de la placa lateral esplcnico o visceral formar la musculatura lisa y el corazn (a partir de la aortas embrionarias). El mesodermo paraxial o de los somitas va a formar la musculatura del esqueleto axial, de la pared del cuerpo y de las extremidades. Finalmente los msculos de la cabeza se forman a partir del mesodermo ceflico o craneal. Como nica excepcin, los msculos del iris son de origen ectodrmico nervioso.
92
TEMA XVII; Derivados Mesodrmicos; los Huesos y las Extremidades La osificacin intramembanosa se caracteriza por la ausencia total de tejido cartilaginoso. Las clulas originales, mesenquimticas, tienen origen en la cresta neural y no en el mesodermo. Estos huesos estn presentes en el caparazn de la tortuga, pero tambin forman los huesos planos de la bveda craneana. Su desarrollo se caracteriza por que las clulas mesenquimticas deben inicialmente contactar con el epitelio enceflico, que libera BMP. Estas protenas son las que inducen la diferenciacin de las clulas de la cresta neural. Estas clulas mesenquimticas expresan entonces el factor CBFA1, y se diferencian as en osteoblastos. En primer lugar estas clulas se agrupan en centros de osificacin, y posteriormente se transforman en osteoblastos y capilares sanguneos. Los osteoblastos depositan una matriz osteoide con proteoglicanos y colgenos. Sobre esta matriz, posteriormente, se depositarn sales de carbonato clcico formndose la matriz sea, calcificada y endurecida. Los osteoblastos que quedan atrapados en lagunas de esta matriz reciben entonces el nombre de osteocitos. Se produce un desarrollo en espculas que aparecen desde el centro de osificacin, expandindose progresivamente. Simultneamente se forma el periostio, por los mismos procesos, en la regin externa del hueso. Los centros de osificacin permiten el crecimiento progresivo de los huesos planos del crneo durante el crecimiento del feto y el juvenil.
La osificacin endocondral, a diferencia de la anterior, precisa de la formacin de un cartlago antes de la osificacin del tejido. Se forma a partir de clulas mesenquimticas del esclerotomo, y del mesodermo de la placa lateral en el caso de los huesos de las extremidades. Existe un elevado nmero de factores paracrinos implicados en el desarrollo de los huesos endocondrales. La accin de las protenas shh sobre las clulas mesenquimticas hace que estas expresen en este caso los factores Pax1 y Sclerasis. Entonces las clulas mesenquimticas expresan genes caractersticos del cartlago tansformandose en condrocitos, y se condensan formando un modelo de hueso de tejido cartilaginoso. La congrognesis es el proceso de formacin del modelo cartilaginoso. Implica la adhesin de las clulas mesenquimticas, mediada por protenas N-cadherinas y N-CAM. En la periferia del cartlago se mantienen clulas mesenquimticas que proliferan formando nuevos
93
condrocitos y permitiendo el crecimiento de la estructura. Se forma una matriz extracelular propia del cartlago, rica en colgenos y proteoglicanos. Los condrocitos siguen multiplicndose y liberan el factor VEGF (vascular endotelial), mediante el cual inducen la formacin de vasos sanguneos perifricos que irrigan el esbozo de hueso. El volumen celular de los condrocitos crece, y estos pasan a llamarse condrocitos hipertrficos. Estos modifican su metabolismo aerobio y adquieren un metabolismo anaerobio. Adems secretan enzimas por exocitosis que favorecen la mineralizacin de la matriz con sales de carbonato clcico. Finalmente resulta la apoptosis de los condrocitos hipertrficos, y estos comienzan a desaparecer en la porcin central profunda del tejido. A su vez, los vasos sanguneos transportan condroclastos que fagocitan los condrocitos hipertrficos y destruyen el tejido cartilaginoso de esta regin, donde posteriormente se encontrar la mdula sea. Aqu, posteriormente, la sangre transportar clulas hematopoyticas.
La osificacin tambin es facilitada por la circulacin sangunea que transporta osteoblastos hacia la regin central del modelo cartilaginoso, y estas clulas comienzan a secretar una matriz sea mineralizada y rica en colgeno. Cuando la matriz queda osificada y estas clulas quedan atrapadas en lagunas, pasan a llamarse osteocitos. Este proceso se inicia en la porcin central o difisis del hueso, donde actan tambin los osteoclastos, y se extiende hacia las epfisis. Posteriormente aparecen dos centros de osificacin secundarios, uno en cada epfisis, que permiten la osificacin de los extremos de los huesos, exactamente por los mismos procesos.
94
Para permitir el crecimiento del hueso, se mantienen dos placas de crecimiento en los extremos de la difisis, donde se encuentran condrocitos que proliferan, y se van hipertrofiando hacia la porcin central de la difisis del hueso. Finalmente aparecen los osteoblastos, osteocitos y osteoclastos, por este mismo orden. En estos procesos tambin intervienen las hormonas, cuyo papel es fundamental en este caso. Las hormonas del crecimiento GH, las hormonas tiroideas y las hormonas paratiroideas regulan la homeostasis del calcio, y facilitan su transporte hasta el esqueleto del embrin, desde la cscara en las aves o de la placenta en mamferos. Tambin intervienen el factor ILGF (factor similar a la insulina) y FGF. Las anomalas o carencias de FGF pueden causar importantes malformaciones como el labio leporino con paladar hendido, las costillas fundidas, o esternn bfido. Este mismo tipo de osificacin da lugar a la formacin de las vrtebras, las costillas, y los huesos largos, pero en el caso de las vrtebras y costillas, las clulas proceden del esclerotomo. Se produce una intercalacin de los somites del esclerotomo y del miotomo, de forma que la disposicin relativa final de la musculatura y las vrtebras permite arquear la espalda del animal. Para ello los esclerotomos deben dividirse en sentido anteroposterior y fusionarse de forma distinta.
Esclerotomo
Miotomo
Vrtebra
Msculo
El crneo formado consta de dos porciones o tipos de hueso de distinto origen. Los huesos planos de la bveda craneana y las trabculas de la base, que separa el sistema nervioso del paladar reciben el nombre de neurocrneo. El neurocrneo tiene distintos orgenes; la bveda se forma por osificacin intramembranosa mientras que la base es de origen endocondral. El viscerocrneo est constitudo por el resto de huesos de la cara, y estos tambin pueden ser intramembranosos o endocondrales. La formacin de las extremidades implica distintos componentes ectodrmicos y mesodrmicos. Las clulas procedentes del miotomo, de consistencia mesenquimtica, forman dos placas laterales bajo el ectodermo, en posicin ventral. Cada placa lateral dar lugar posteriormente a cada una de las extremidades de tetrpodos, por interaccin epiteliomesenquimtica. En primer lugar la porcin ectodrmica externa a la placa lateral formar una protuberancia llamada cresta apical ectodrmica, que se desarrolla formando el esbozo de la extremidad. Esta regin formada inicialmente es fundamental para que se produzca el desarrollo de la regin distal de la extremidad, es decir, los dedos, debido a las interacciones espitelio-mesenquimticas (estas clulas ectodrmicas son competentes para los factores paracrinos mesenquimticos). Si se eliminan estas clulas ectodrmicas, no se desarrolla la porcin distal de la extremidad. Si se aade una capa extra se observa la formacin de dos
95
regiones distales de la extremidad, distintas. Si se intercambian las regiones ectodrmicas correspondientes a las extremidades anterior y posterior, se forman las regiones distales de las extremidades posteriores en las anteriores y viceversa.
Para el desarrollo de las extremidades es muy importante el cido retinoico, que avanza desde el nudo de henser formando un gradiente de concentracin. Esta concentracin va a determinar la expresin de los distintos genes HOX. Adems las distintas extremidades anteriores y posteriores de vertebrados tetrpodos debe formarse en determinados somitas muy concretos, esto viene controlado por Tbx5 en extremidades anteriores y Tbx4 en las posteriores. La determinacin de los ejes de simetra de la extremidad es tambin muy temprana. La zona de actividad polarizante determina la diferenciacin antero-posterior, pues sintetiza protenas shh. El eje dorso-ventral viene determinado por la sntesis y liberacin de Wnt7 en la regin dorsal de la extremidad.
La seal primaria procedente de las clulas del mesodermo de la placa lateral es el FGF10, que en aves se expresa ente los somitas 15 y 20. Este factor acta sobre la cresta apical ecodrmica, la cual responde liberando FGF8, que a su vez acta sobre el mesenquima. Este segundo factor facilita la proliferacin activa de las clulas mesenquimticas, prolongando e
96
intensificando la sntesis de FGF10 por las mismas. La interaccin FGF10-FGF8 contina durante todo el desarrollo de la extremidad permitiendo su desarrollo prximo-distal. Existe una fuerte interaccin entre la zona de actividad polarizante, que libera shh, la regin dorsal del embrin que libera Wnt7 y los FGF8 de la cresta apical ectodrmica, determinndose as los ejes de simetra del desarrollo de las extremidades. Trasplantando la zona de actividad polarizante de una extremidad a otra distinta se pierde el eje anteroposterior y se producen importantes malformaciones. Las protenas BMP actan despus de la formacin de la extremidad, induciendo la apoptosis de las membranas interdigitales (o patagios), membranas de epitelio y dermis que unen los dedos. Estas membranas son conservadas, por ejemplo, en las extremidades anteriores de los murcilagos, o en las posteriores de los nsares. La amelia es la falta de extremidades. La micromelia es la formacin de extremidades muy cortas en proporcin al cuerpo. La meromelia es el caso en el que los tejidos de las extremidades aparecen fusionados a los del tronco. La sindactilia es una malformacin por la que no se produce apoptosis de la membrana interdigital. La polidactilia corresponde a la aparicin de un dedo extra. La sirenomelia es un caso particular, donde ambas extremidades posteriores aparecen fusionadas entre s. Esta malformacin suele estar acompaada de otros problemas abdominales internos. Los anfibios tienen capacidad de regenerar su extremidades en estado adulto. TEMA XVIII; Derivados Mesodrmicos; el Mesodermo de la Placa Lateral El mesodermo de la placa lateral es el mesodermo correspondiente al mesodermo parietal o somtico (dorsal) y al mesodermo visceral o esplcnico (ventral). Estas clulas formarn todo el sistema cardiovascular del embrin y del feto, incluidas las propias clulas sanguneas y los vasos sanguneos extraembrionarios, como los vitelinos o los del cordn umbilical. Entre la capa parietal, que recubre el amnios, y la capa visceral, que recubre al saco vitelino, se forma el celoma. La cavidad del celoma incluye a la cavidad pericrdica, la cavidad pleural y la cavidad peritoneal o abdominal. C
97
El corazn es el primer rgano en formarse en el embrin, y comienza a latir antes de la formacin del sistema nervioso. Sus clulas son las primeras en adquirir actividad contrctil. En rata las pulsaciones comienzan a los 9,5 das, en pollos a las 33 horas, y en humano a los 22 das. En la mitad de la lnea primitiva hay clulas que ingresan entre el mesodermo esplcnico y el endodermo, situndose en la mitad anterior del disco. Las clulas que van a formar el corazn se sitan en la porcin esplcnica, separndose del resto de las clulas de la placa lateral, y forman el mesodermo cardiognico. La evolucin de todas estas clulas est muy influda y relacionada con el endodermo yuxtapuesto, que libera BMP y FGF. El tubo digestivo an no se ha cerrado. Este mesodermo cardiognico dar lugar a todas las clulas del miocardio. Inicialmente se forman dos poblaciones aisladas de clulas; una en la mitad izquierda y otra en la derecha. Se trata de las aortas embrionarias. Segn el tubo digestivo se va cerrando y revertiendo en sentido antero-posterior, las dos aortas pueden irse aproximando, hasta que finalmente se fusionan. Antes de su fusin, las dos aortas independientes ya comienzan a contraerse, y aparecen en sus clulas bombas de sodio-calcio. Tambin tiene una fuerte influencia el gradiente de concentracin de fibronectina antero-posterior.
D B
As finalmente queda formado el tubo cardiaco en el interior de la cavidad pericrdica del celoma. Este tubo se diferencia en un epicardio (Na) un miocardio (Ca) y un endocardio. La -miosina, la actina cardiaca y el factor natriurtico auricular son muy importantes durante la formacin y el desarrollo del tubo cardiaco. Cuando las dos aortas se fusionan forman un tubo liso y uniforme. Entonces aparecen engrosamientos divididos y se adquiere polaridad antero-posterior. A continuacin el tubo con cuatro engrosamientos se dobla enrrollandose sobre s mismo, y adquiere finalmente una polaridad bilateral (izquierda-derecha). Despus aparecen las divisiones entre aurculas y ventrculos. El mesodermo cardiognico est determinado en distintas regiones por mltiples factores paracrinos y autocrinos antes de su diferenciacin macroscpica. Los
98
electrocardiogramas de fetos son semejantes a los de adultos, pero con mayor frecuencia. Si los dos tubos no llegan a fusionarse se forman dos corazones distintos; esta malformacin se denomina cardia bfida.
El corazn comienza a latir antes de ser inervado, e incluso antes de la formacin de las propias clulas sanguneas. La ritmicidad inherente del cardias viene determinada por el seno venoso, que acta como regin marcapasos adems de ser el principal punto inicial de entrada de sangre. En el seno venoso se desencadenan impulsos despolarizantes sodio-calciodependientes que son transmitidos a todas las dems regiones del corazn a travs de las fibras de purkinge. Posteriormente se formar el SNA simptico y parasimptico que modificar el tono cardiaco, as como el bulbo raqudeo, centro cardiovascular que regula la frecuencia cardiaca y el dimetro de los vasos sanguneos. El cido retinoico es responsable de la diferenciacin del seno venoso y la aurcula. Las primeras clulas sanguneas comienzan a formarse en el saco vitelino, y son impulsadas por las dos aortas separadas. Los tabiques del corazn se formarn posteriormente separando as la sangre oxigenada sistmica (izquierda) y la desoxigenada pulmonar (derecha). Las fibras de purkinge se reparten desde el seno venoso por todas las paredes internas cardiacas. Los vasos sanguneos se forman por dos procesos distintos. Primero se produce la vasculognesis, y a continuacin, en algunos casos, se produce angiognesis que da lugar a vasos de mayor calibre. La vasculognesis comienza en las clulas mesenquimticas de la placa lateral visceral o esplcnica, que se diferencian en hemangioblastos. Estas clulas se agrupan formando cmulos donde se diferencian dos tipos celulares; las clulas cepa hematopoyticas ms internas y los angioblastos externos que forman el endotelio de los capilares. Estos hemangioblastos siguen proliferando y formando las primeras redes bsicas de capilares sanguneos. Inicialmente la vasculognesis tiene lugar en el saco vitelino, destinado a nutrir al embrin, y este proceso recibe el nombre de vasculognesis extraembrionaria. En este mismo lugar, de hecho, se forman los primeros eritrocitos.
99
La angiognesis consiste en la remodelacin de los plexos capilares embrionarios para formar vasos de mayor calibre y ms complejos y diferenciados, como arteriolas, vnulas, arterias y venas. Este proceso slo puede tener lugar previa vasculognesis. Implica la formacin de una membrana basal y de la musculatura lisa propia sobre los capilares.
Existen multitud de factores paracrinos que permiten que se produzca correctamente los procesos de vasculognesis y angiognesis. En la vasculognesis intervienen los FGF implicados en la especificacin de las clulas mesenquimticas de la placa lateral en hemangioblstos. El factor VEGF (vascular endotelial) facilita la proliferacin de los capilares sanguneos. Las angiopoyetinas favorecen la unin de los pericitos alrededor de los primeros vasos sanguneos; estas clulas formarn la musculatura lisa que permite la vasodilatacin y vasoconstriccin. Por otro lado, durante la angiognesis, tiene una destacable importancia el factor VEGF y las metaloproteasas que disgregan las redes capilares iniciales y destruyen su matriz extracelular. Despus de las disgregacin hacen su efecto los factores TGF (transformador), que endurece la matriz de los vasos que van a ser definitivos, y PDGF (platelet derived) que capta nuevos pericitos en los vasos sanguneos de mayor dimetro, aportando consistencia y contractibilidad a los vasos definitivos. Aparecen tambin colgenos e inhibidores de metaloproteasas. La efrinas (y receptores de efrinas) facilitan las uniones entre las clulas endoteliales, y pueden inhibir la angiognesis en determinados lugares del embrin. Durante la formacin de tumores tienen lugar los procesos de vasculognesis y angiognesis. Las clulas tumorales emiten sustancias atrayentes que inducen la formacin de vasos sanguneos, los cuales alimentan y mantienen a las clulas oncognicas. La circulacin embrionaria, una vez formado el tubo cardiaco, irriga inicialmente los arcos articos, donde se aporta la mayor parte de la sangre oxigenada que sale del corazn. Esta circulacin es muy importante para animales de respiracin branquial, pues cada arco artico irriga un arco branquial, futuras branquias. En animales de respiracin pulmonar area, los arcos generan vasos adecuados a la fisiologa del animal, que se encuentran en la regin cervical o torcica.
100
Pares de arcos articos I II III IV V VI
Destino en animales de respiracin pulmonar Degenera Degenera Arterias cartidas Arteria subclavia derecha y arco de la aorta (del cual deriva la subclavia izquierda) Degenera Arteria pulmonar y conducto arterioso
El conducto arterioso es una comunicacin directa entre la arteria pulmonar hacia la aorta. Slo se mantiene durante la vida fetal, cuando los pulmones no pueden ser funcionales. En estas etapas los pulmones se encuentran colapsados, y por ello no necesitan un aporte
101
importante de sangre, que s ser fundamental para los intercambios de la respiracin area. Este conducto degenera en el nacimiento. En los fetos de mamfero se encuentra hemoglobina fetal, distinta de la adulta por tener mayor afinidad por el oxgeno. Tambin hay una elevada cantidad de mioglobina. As el feto se asegura el suministro suficiente de oxgeno de la sangre materna.
El foramen oval es un orificio que comunica las aurculas izquierda y derecha. La sangre que proviene de la placenta por la vena umbilical, llega a la aurcula derecha a travs de la vena cava inferior, y pasa directamente a la aurcula izquierda a travs del foramen oval. Desde ah es proyectada por el ventrculo izquierdo a travs de la arteria aorta a todo el cuerpo, y es recogida por la vena cava superior, retornando as a la aurcula derecha. Desde ah puede tambin pasar directamente al ventrculo derecho y salir por la arteria pulmonar, en este caso la sangre es desviada por el conducto arterioso a la aorta. A travs de la aorta la sangre puede tambin regresar a la placenta para intercambiar CO 2 y desechos con la sangre materna. La sangre fetal se mezcla continuamente, y no hay delimitaciones claras en el corazn entre la sangre oxigenada y desoxigenada. Por ello la hemoglobina fetal y la mioglobina son de gran importancia. En el nacimiento los pulmones se vuelven funcionales, y el conducto arterioso degenera y cesa de ejercer su resistencia al flujo de sangre pulmonar. Los tabiques del corazn terminan de formarse, y as en el recin nacido comienza a diferenciarse la sangre oxigenada de la desoxigenada. El aumento de la presin sangunea en el lado izquierdo del corazn, muy por encima de la del derecho, favorece que se colapsen y cierren progresivamente tanto el conducto arterioso como el foramen oval (tardan un tiempo desde el nacimiento). La circulacin placentaria se corta con el cordn umbilical. Anomalas en el cierre del conducto arterioso o de los tabiques del corazn causan malformaciones y patologas como la mezcla de sangres, la dilatacin del cardias, o edemas pulmonares.
Antes del nacimiento
Despus del nacimiento
102
Las clulas cepa hematopoyticas (steam cells) son las clulas centrales de los cmulos de hemangioblastos que aparecen durante la vasculognesis, que van a dar lugar a las clulas sanguneas. El factor SCF (clulas cepa) favorece su proliferacin activa. Se distinguen dos grandes grupos de clulas sanguneas; las mieloides (CMP) y las linfoides (CLP), en cuya diferenciacin estn implicados mltiples factores paracrinos, entre los que se encuentran interleukinas y citokinas. Estas clulas se acumulan en la matriz del tejido donde se forman las clulas sanguneas, que es variable a lo largo de la ontogenia. Los factores paracrinos dan lugar a la formacin de los microambientes hematopoyticos donde estas clulas proliferan a lo largo de toda la vida.
La formacin de los glbulos rojos depende de la protena eritropoyetina, que ejerce su accin como factor paracrino. Se sintetiza cuando hay bajos niveles de oxgeno en sangre, o poca cantidad de eritrocitos. Activa la gnesis de glbulos rojos y la sntesis de hemoglobina. Los deportistas se inyectan eritropoyetina como mtodo de dopaje, ya que no se puede detectar, excepto realizando un hematocrito. Los centros de alto rendimiento son centros de entrenamiento para deportistas de lite, que se encuentran en elevada altitud, donde se favorece la sntesis de eritropoyetina por la bajada de la presin parcial de oxgeno. Los osteoclastos derivan del grupo de los CMP, pues son en realidad macrfagos. La interleukina 6 favorece la gnesis de estas clulas, que son a su vez inhibidas por los estrgenos. Los lugares de sntesis de estas clulas son variables durante la ontogenia, especialmente durante el desarrollo embrionario y fetal. Inicialmente estas clulas se sintetizan en la aorta, la cresta genital y los mesonefros por un lado, y por el saco vitelino por otro lado en las especies con vitelo (no en anfibios). A continuacin estas funciones son asumidas por el hgado, despus el bazo, y finalmente la mdula sea en la mayora de vertebrados adultos, y la bolsa de fabricio en el caso de las aves cuyos huesos son muy ligeros para permitir el vuelo. En placentarios, la propia placenta es una importante fuente de clulas cepa sanguneas para el embrin.
103
TEMA XVIII; Derivados Mesodrmicos; el Mesodermo Intermedio El mesodermo intermedio es la fraccin de la capa de clulas mesodrmicas que une inicialmente a la placa lateral con cada somita. Esta porcin de mesodermo va a dar luga a la formacin del aparato urinario, el aparato reproductor, y la corteza de la glndula adrenal ( o tejido esteroidognico).
Existen tres tipos evolutivos de aparato urinario. En los animales ms evolucionados se forman todos los tipos a lo largo del desarrollo, pero los adultos slo mantienen el tipo ms evolucionado de unidad funcional en sus riones; la nefrona. De hecho, en animales evolucionados, el tipo ms primitivo se forma en los segmentos corporales de la regin anterior, y los siguientes se van desarrollando hacia la regin posterior. El pronefros es el tipo de aparato excretor ms primitivo, y no es funcional en reptiles, aves y mamferos. Las unidades excretoras del pronefros se presentan como tubos urinferos simples, de disposicin segmentarias de acuerdo a la segmentacin de los somitas. Presentan glomrulos irrigados donde se extraen las excreciones, y un conducto ciliado o nefrostoma, por donde es dirigida la excrecin hasta el conducto pronfrico comn a travs del cual todos los nefrostomas vierten al exterior. Los conductos pronfricos se mantienen en larvas de telesteos y larvas de anfibios. El conjunto de glomrulo y nefrostoma de cada segmento forma un nefrotomo. Hay un nefrotomo por cada somita (uno en cada segmento y a cada lado del cuerpo).
El mesonefro es el tipo de rin intermedio evolutivamente, y tambin por su disposicin relativa antero-posterior. Las unidades excretoras del mesonefro ya no guardan relacin de segmentacin con los somites, y son de hecho ms numerosas que estos. En este
104
caso el mesodermo intermedio se disgrega y adopta consistencia mesenquimtica, y estas clulas se situan por detrs del pronefros formando el mesnquima nefrognico. Si se elimina experimentalmente el pronefros, no se forma el conducto mesonfrico o de wolf que es una prolongacin del mismo conducto pronfrico, el cual degenera progresivamente. Las unidades escretoras se forman de un glomrulo y un tbulo mesonfrico que vierte al conducto mesonfrico comn. Este tipo de aparato urinario se conserva en los adultos de telesteos y anfibios, y es funcional en embriones de reptiles, aves, y mamferos con placentas primitivas.
El metanefros es el tipo de rin ms evolucionado, presente en aves, reptiles y mamferos adultos. Se forma a partir del mesnquima nefrognico, al igual que el metanefro. La unidad excretora fundamental de este tipo de aparato urinario es la nefrona. No se aprecia divisin segmentaria de ningn tipo. Se forma un conducto metanfrico o urter que es a su vez una prolongacin del tubo mesonfrico, por donde las nefronas vierten sus excreciones a travs de los conductos colectores. En este caso no se trata de una prolongacin longitudinal, como en el caso anterior, sino que se desarrolla como una evaginacin inicial de este conducto mesonfrico o de wolf. Si se eliminan los conductos anteriores, este tampoco se forma. En este proceso est de nuevo implicado un proceso de induccin recproca; la yema urtrica, evaginacin inicial del conducto de wolf induce la diferenciacin del mesenquima metanfrico que forma las nefronas, y este a su vez induce el crecimiento del urter desde la yema. Pueden existir malformaciones renales como la agenesia renal (ausencia de rin), la hipoplasia (rin de pequeo tamao) y otras como aparicin de riones extra, o riones ms situados en el abdomen.
105
La gnadas se forman a partir de la migracin de las clulas germinales de consistencia mesenquimtica. Estas clulas se originan en el saco vitelino, y migran a travs del endodermo hasta la regin posterior del embrin, cerca del metanefros, antes del cierre del tubo digestivo. Aqu se encuentran con una gnada indiferenciada, en cuyo interior penetran. En los lugares donde estas clulas se incrustan en las gnadas indiferenciales, aparecen cordones sexuales primitivos. Esta gnada indiferenciada podr dar lugar tanto a un ovario como a un testculo, pero esto viene determinado genticamente.
La gnada masculina o testculo se forma de varias estructuras. La corteza o epitelio de la gnada indiferenciada se va a reducir y transformar en tnica albugnea. Los cordones sexuales primarios, en cuyo interior se van a situar las clulas germinales, van a formar los tbulos seminferos ahuecndose en la madurez, y darn lugar en su interior a las clulas de sertoli. Estas clulas van a sintetizar AMH (hormona antimulleriana) que va a desencadenar la degeneracin del conducto paramesonfrico o de mller. Las clulas mesenquimticas van a formar las clulas de leydig en el tejido intersticial. Las gnadas femeninas u ovarios se forman a partir de la misma estructura. El epitelio o corteza prolifera hacia el interior y forma la regin cortical donde se produce el desarrollo de los vulos y los folculos. Estas mismas clulas forman las clulas de la granulosa de los folculos. En el interior se encuentran las clulas germinales junto con clulas mesenquimticas que van a forman vasos sanguneos, y darn lugar tambin a las clulas de la teca.
106
Los conductos de los aparatos reproductores son diferentes, e inicialmente todo embrin consta de dos gnadas indiferenciadas y cuatro conductos gonadales, dos de los cuales debern degenerar. Uno de ellos es el conducto de wolf o conducto mesonfrico, que en varones formar el epiddimo y los conductos deferentes que desembocan en la uretra, pero en mujeres degenera. Por otro lado se forman unos conductos paramesonfricos, paralelos a los conductos de wolf, tambin llamados conductos de mller. Los conductos de mller degeneran en varones debido a la secrecin de AMH, pero en mujeres forman los oviductos, el tero, y la vagina, con un orificio externo independiente de la uretra.
En telesteos y anfibios no tienen metanefros y el mesonefro es utilizado entonces como conducto urinario. En este caso los machos utilizan los conductos mesonfricos tanto para la eliminacin de la orina como para la salida del esperma. El testculo utiliza de hecho al rin mesonfrico para la eyaculacin. En hembras el mesonefro es urinario, y el ovario utiliza el conducto paramesonfrio, y ninguno de los conductos degenera. TEMA XIX; Derivados Endodrmicos Entre los derivados endodrmicos se encuentran todas las estructuras que derivan del tubo digestivo; esto incluye todo el sistema digestivo, el pncreas, el hgado, glndulas endocrinas, la bolsa de fabricio de las aves y la vejiga natatoria de los peces. Existen importantes interacciones epitelio-mesenquimticas e inducciones recprocas que implican a mltiples factores paracrinos y a los genes HOX. La hoja endodrmica es constituda por las clulas que ingresan desde el surco primmitivo y desplazan al hipoblasto, estas mismas clulas forman el mesodermo.
107
El endodermo va a formar un tubo que inicialmente no est cerrado, pues su interior forma un espacio contnuo con el interior del saco vitelino. As, en primer lugar se forma el tubo digestivo anterior y el posterior, y ms tarde cuando se cierra el saco vitelino quedar formado el tubo digestivo medio.
A nivel del corazn se forma una primera evaginacin ventral del tubo anterior, antes de que este se cierre, que dar lugar al tubo respiratorio. En esta regin las clulas del endodermo quedan recubiertas por clulas de del mesodermo de la placa lateral visceral o esplcnica, que formarn la musculatura lisa (esta capa de mesodermo con endodermo forma la esplacnopleura). Esta invaginacin de la trquea forma ms y ms ramificaciones que va a dar lugar a los bronquios, bronquiolos y alveolos. Los alveolos quedan recubiertos por fosfolpidos especficos que van a constitur el sulfactante. El sulfactante es una de las ltimas estructuras en formarse en el feto, y es el motivo de la inmadurez pulmonar de los recin nacidos. Adems es un avisador del parto, ya que su seal llega al tero facilitando las contracciones. En la diferenciancin del pulmn intervienen factores como FGF10, shh o BMP, liberadas por el mesodermo.
108
En la regin ms anterior del tubo, prximos al corazn, se encuentran la bolsas farngeas con epitelio endodrmico interno, ectodrmico externo, y clulas mesenquimticas de la cresta neural. De esta regin derivan el timo, las glndulas tiroides y paratiroides, las amgdalas, y otras glndulas cercanas a la trquea. Otras evaginaciones del tubo digestivo se van a desarrollar para formar el hgado y el pncreas. El mesodermo esplcnico libera factores paracrinos que determinan donde se van a formar estos rganos, al igual que los pulmones y glndulas. En la regin anterior del tubo los epitelios ectodrmicos y endodrmicos se abren formando el estomodeo, futura boca. Sucede lo mismo en la regin anterior donde se forma el proctodeo, futuro ano. El ectodermo oral va a formar la adenohipfisis, mientras que el ectodermo nervioso va a formar la neurohipfisis.
La bolsa de Fabricio es un rgano que se encuentra en la regin posterior del tubo digestivo de las aves, a nivel de la cloaca. Se trata de un rgano inmunolgico. La vejiga natatoria es una evaginacin del tubo digestivo de muchos peces que aparece detrs de las branquias, de forma similar a los pulmones. Se llenan de gases actuando como rganos de flotacin.
109

D

Transféré par

Informations du document

Titre original

Copyright

Formats disponibles

Partager ce document

Partager ou intégrer le document

Options de partage

Avez-vous trouvé ce document utile ?

Ce contenu est-il inapproprié ?

Droits d'auteur :

Formats disponibles

D

Transféré par

Droits d'auteur :

Formats disponibles

_

Fisiologa del Desarrollo

FISIOLOGA DEL DESARROLLO:

Fisiologa del Desarrollo

Fisiologa del Desarrollo

Fisiologa del Desarrollo

Fisiologa del Desarrollo

Fisiologa del Desarrollo

Fisiologa del Desarrollo

Fisiologa del Desarrollo

Fisiologa del Desarrollo

Fisiologa del Desarrollo

Fisiologa del Desarrollo

Fisiologa del Desarrollo

Fisiologa del Desarrollo

Fisiologa del Desarrollo

Fisiologa del Desarrollo

Fisiologa del Desarrollo

Fisiologa del Desarrollo

Fisiologa del Desarrollo

Fisiologa del Desarrollo

Fisiologa del Desarrollo

Fisiologa del Desarrollo

Fisiologa del Desarrollo

Fisiologa del Desarrollo

Fisiologa del Desarrollo

Fisiologa del Desarrollo

Fisiologa del Desarrollo

Fisiologa del Desarrollo

Fisiologa del Desarrollo

Fisiologa del Desarrollo

Fisiologa del Desarrollo

Polo Animal Polo Vegetal

Fisiologa del Desarrollo

Fisiologa del Desarrollo

Microfilamentos de Actina. La mrula compacta presenta 5 clulas externas y 3 clulas internas.

Fisiologa del Desarrollo

Fisiologa del Desarrollo

Fisiologa del Desarrollo

Fisiologa del Desarrollo TEMA VII; Aspectos Comparados de la Gastrulacin

Fisiologa del Desarrollo

Fisiologa del Desarrollo

DESARROLLO EN ERIZO DE MAR, DESDE EL ZIGOTO HASTA LA LARVA PLUTEUS

Fisiologa del Desarrollo

Fisiologa del Desarrollo

Fisiologa del Desarrollo

Fisiologa del Desarrollo

Fisiologa del Desarrollo

Fisiologa del Desarrollo

Fisiologa del Desarrollo

Fisiologa del Desarrollo

Fisiologa del Desarrollo

Ectodermo Mesodermo Endodermo

Fisiologa del Desarrollo

Fisiologa del Desarrollo

Fisiologa del Desarrollo

Fisiologa del Desarrollo

Fisiologa del Desarrollo

Fisiologa del Desarrollo

Fisiologa del Desarrollo

Fisiologa del Desarrollo

Fisiologa del Desarrollo

Fisiologa del Desarrollo