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LABORATORIO N2

MICROBIOLOGA II

ALUMNO(A): ALVINO GRANADOS, Katherine

PROFESOR: TELLO CEBREROS, Jorge

TEMA: LABORATORIO NO2: CONCENTRACIN DE MICROORGANISMOS

LABORATORIO N2

MICROBIOLOGA II

I.

INTRODUCCIN

A medida que aumenta la demanda de la poblacin y de la industria y que las aguas subterrneas se hacen insuficientes, es mayor el nmero de ciudades y poblaciones que utilizan los lagos, corrientes, depsitos y reutilizan lo desechos domsticos. Las algas son habitantes comunes y normales de aguas poco profundas y se encuentran en todo suministro de agua expuesto a la luz del sol aunque algunas algas se encuentran en el suelo y en superficies expuestas al aire. Conocer el nmero y clase de algas presentes en estanques de aguas negras es de gran utilidad para ver el avance del proceso de oxidacin. La metodologa empleada es la que utilizan la gran mayora de los laboratorios; consiste en un anlisis cualitativo y cuantitativo; en este ltimo se emplea el mtodo de celda de Sedgwick-Rafter.

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OBJETIVOS FUNDAMENTO TERICO MATERIALES PROCEDIMIENTO RESULTADOS Mtodo de la celda S R Mtodo de la franja CONCLUSIONES RECOMENDACIONES BIBLIOGRAFA CUESTIONARIO CONGA

4 4 7 8

10 15 20 21 21 23 25

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II. -

OBJETIVOS Determinar la concentracin promedio de microorganismos por los mtodos de celda Sedgwick Rafter y la franja, y hallar el nmero de campos de cada uno de ellos, con los objetivos 10X y 43X. Comprender los mtodos para determinar la concentracin de microorganismos, observar y determinar cul de los dos mtodos es el ms preciso. Hallar la cantidad de campos para ambas celdas por medio del microscopio ptico. Determinar la concentracin de los microorganismos encontrados en la muestra.

III.

FUNDAMENTO TERICO

DEFINICIN DE ALGAS Las algas difieren de los otros grupos de seres pequeos o microscpicos por poseer sus pigmento internos llenos de clorofila, que a veces estn ocultos parcialmente o enmascarados por otros pigmentos, lo que las capacita en presencia de la luz, combinar agua con anhdrido carbnico para formar almidn o sustancias anlogas y liberar oxgeno. Las algas tienen la capacidad de modificar el pH, la alcalinidad, el color y la turbiedad. En el proceso de purificacin natural, las algas oxigenan el agua y utilizan subproductos del proceso de depuracin. Las pequeas algas verdes unicelulares son las ms importantes para mantener el nivel adecuado de oxgeno disuelto en los estanques de estabilizacin.

LABORATORIO N2 La ingenieria sanitaria divide a las algas en cuatro grandes grupos: Algas verdeazules Algas verdes Flagelados pigmentados Diatomeas

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La clasificacion completa de un organismo obliga a tener en cuenta numerosos elementos (reimo, clase, orden, familia, etc.) pero la denominacion cientifica convencional consta de dos partes: el genero y la especie MTODO DE LA CELDA SEDGEWICK RAFTER Mtodo cuantitativo donde los organismos tienen que distribuirse uniformemente en toda la superficie de la celda, para ello se debe de contar con una muestra homognea. Podemos ayudarnos con la retcula del ocular de Whipple para hacer el procedimiento ms. Imaginariamente con el microscopio se toma una divisin (campo) de la celda y contabilizamos la cantidad de microorganismos, posteriormente se toma otra divisin igual y tangente a la anterior, hasta cubrir toda la celda. La concentracin se calcular multiplicando la cantidad de microorganismos promedio por campo y la cantidad total de campos en la celda, dividida entre el volumen de muestra analizada que es 1 ml.

Utilizado para el conteo del nmero de fitoplancton. Este modelo es apropiado por las especies de fitoplancton que son mayores de 10 a 15 micras, que tienen una poblacin densa mayor a 105 clulas por litro. El tamao es de 50 mm x 20 mm x 1 mm con un volumen de 1.0 ml.

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MTODO DE LA FRANJA Similar al mtodo anterior, con la diferencia que se analiza una gota de muestra sobre un portaobjetos y sobre la gota se coloca el cubreobjetos, sin dejar la presencia de burbujas, con el microscopio tomamos una divisin (campo) de la celda y contabilizamos la cantidad de microorganismos, posteriormente se toma otra divisin igual y tangente a la anterior, hasta cubrir toda la celda.

La concentracin se calcula multiplicando la cantidad de microorganismos promedio por campo y la cantidad total de campos en la celda, dividida entre el volumen de muestra analizada que es el volumen de una gota. Para encontrar ese volumen contabilizar la cantidad de gotas que forman cierto volumen y con regla de tres simple encontrar el volumen de una gota; este volumen depende de la abertura del gotero.

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IV.

MATERIALES Y EQUIPOS

MATERIALES EQUIPOS PORTAOBJETOS MICROSCOPIO

CUBREOBJETOS

MUESTRA

CELDA SEDWIGTH RAFTER

CONTADOR

GOTERO

PIPETA VOLUMTRICA

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V.

PROCEDIMIENTO

Mtodo de la Celda - SEDGEWICK RAFTER

que hay en 10 ml Tomar 1 ml de muestra

Verterlo en la celda

Observar los campos a travs del microscopio

Realizar el conteo de microorganismos en cada campo

LABORATORIO N2 Mtodo de la franja

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Medir las gotas que hay en 5 ml

Tomar 1 gota de la muestra

Verter la gota sobre el portaobjetos, y colocar sobre ella el cubreobjetos.

Observar los campos y realizar el conteo de microorganismos

LABORATORIO N2 VI. RESULTADOS

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Objetivo 10X

Objetivo 43X

13 campos

50 campos 45 campos

Determinacin del nmero de campos a lo largo de la celda: N de campos a lo ancho de la Celda S-R N de campos a lo largo de la Celda S-R

Ancho 20 mm Largo 50 mm

N de campos a lo largo de la Celda S-R= N de campos a lo ancho x

OBJETIVO 10X:

N de campos a lo largo de la Celda S-R= 13 x N de campos a lo largo de la Celda S-R= 33 campos

OBJETIVO 43X:

N de campos a lo largo de la Celda S-R= 45 x N de campos a lo largo de la Celda S-R= 113 campos

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Determinacin del nmero de microorganismos por campo OBJETIVO 10 X:

CALCULAR EL PROMEDIO DE MICROORGANISMO POR CAMPO: N DE CAMPOS 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 Total de N de campos: 13 N DE MICROORGANISMOS 53 38 29 28 42 33 19 44 28 47 37 24 20 Total de N de microorganismos: 442

Promedio de microorganismos:

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OBJETIVO 43 X: N DE CAMPOS 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 N DE MICROORGANISMOS 1 1 2 4 1 2 2 3 4 2 1 5 6 1 2 3 2 2 4 2

N DE N DE CAMPOS MICROORGANISMOS 1 3 2 4 3 2 4 1 5 0 6 3 7 4 8 5 9 3 10 2 11 1 12 5 13 2 14 5 15 3 16 2 17 1 18 1 19 4 20 5 21 6 22 7 23 3 24 2 25 1 Total de N de campos: 45

Total de N de microorganismos: 125

CALCULAR EL PROMEDIO DE MICROORGANISMO POR CAMPO: Promedio de microorganismos: =

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DETERMINACIN DEL N DE CAMPOS EN TODA LA CELDA S-R:

PARA EL OBJETIVO 10 X:

PARA EL OBJETIVO 43X:

DETERMINACIN DE LA CONCENTRACIN DE MICROORGANISMOS:

PARA EL OBJETIVO DE 10 X

PARA EL OBJETIVO DE 43 X

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HALLANDO EL ERROR:

Tomando al objetivo de 10 X como valor real, respecto al nmero de microorganismos por campo. ( ) ( ) ( )

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OBJETIVO 10 X:

N DE CAMPOS 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 Total de N de campos: 16

N DE MICROORGANISMOS 12 14 13 15 14 14 11 13 12 11 13 14 15 11 7 4 Total de N de microorganismos: 193

Laboratorio de Microbiologa 1ra Sesin: 11/04/12 Hora: 12:00pm 2da Sesin: 18/04/12 Hora: 11:30am Temperatura: 27 C

CALCULAR EL PROMEDIO DE MICROORGANISMO POR CAMPO: Promedio de microorganismos: =

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LABORATORIO N2 OBJETIVO 43 X:

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N DE N DE CAMPOS MICROORGANISMOS 1 1 2 2 3 3 4 0 5 2 6 3 7 5 8 1 9 3 10 6 11 1 12 0 13 5 14 2 15 1 16 0 17 1 18 0 19 3 20 1 21 3 22 7 23 0 24 1 25 2 Total de N de campos: 50

N DE CAMPOS

N DE MICROORGANISMOS 26 3 27 5 28 7 29 1 30 1 31 2 32 2 33 1 34 4 35 2 36 5 37 4 38 3 39 1 40 2 41 4 42 3 43 1 44 2 45 4 46 1 47 2 48 2 49 3 50 4 Total de N de microorganismos: 122

CALCULAR EL PROMEDIO DE MICROORGANISMO POR CAMPO: Promedio de microorganismos: =

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DETERMINACIN DE NO DE CAMPOS EN TODO EL CUBREOBJETOS.

Numero de campos a lo ancho (lado) del cubre objeto = 16 campos Numero de campos a lo largo (lado) del cubre objeto = 16 campos

PARA EL OBJETIVO 10 X:

PARA EL OBJETIVO 43X:

Determinacin del volumen de una gota

70 gotas 1 gota

<> <>

5 mL X mL

Volumen de una gota: X = X = 0.07143 ml

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DETERMINACIN DE LA CONCENTRACIN DE MICRORGANISMOS.

( )

PARA EL OBJETIVO DE 10 X

PARA EL OBJETIVO DE 43 X
( )

HALLANDO EL ERROR: Tomando al objetivo de 10 X como valor real, respecto al nmero de microorganismos por campo. ( ) ( ) ( )

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MTODO DE LA CELDA SEDGWICK-RAFTER OBJETIVO 10X N DE CAMPOS A LO ANCHO DE LA CELDA N DE CAMPOS A LO LARGO DE LA CELDA N DE CAMPOS EN EL TOTAL DE LA CELDA PROMEDIO DE M.O. POR CAMPO CONCENTRACIN DE M.O./ML 13 33 429 34 14586 OBJETIVO 43X 45 113 5 085 3

MTODO DE LA FRANJA OBJETIVO 10X N DE CAMPOS A LO LARGO DEL CUBREOBJETOS N DE CAMPOS EN EL TOTAL DEL CUBREOBJETOS PROMEDIO DE M.O. POR CAMPO VOLUMEN DE LA GOTA UTILIZADA (ML) CONCENTRACIN DE M.O./ML 16 256 12 0.07143 ml 60648 OBJETIVO 43 X 50 2500 2 0.07143 ml 70 000

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LABORATORIO N2 VII. CONCLUSIONES El mtodo de la celda


OBJETIVO 10X N DE CAMPOS EN EL TOTAL DE LA CELDA PROMEDIO DE M.O. POR CAMPO CONCENTRACIN DE M.O./ML 429 34 14586 OBJETIVO 43X 5 085 3

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El mtodo de la franja OBJETIVO 10X


PROMEDIO DE M.O. POR CAMPO VOLUMEN DE LA GOTA UTILIZADA (ML) CONCENTRACIN DE M.O./ML 12 0.07143 ml 60648

OBJETIVO 43 X
2 0.07143 ml 70 000

Contrastando promedios de concentracin de microorganismos obtenidos en ambos mtodos, con objetivo 10X, el mtodo de franja posee menos microorganismos (12M.O./campo) que el mtodo de la celda (34 M.O/campo). Con el mtodo de la franja se obtiene una mayor concentracin de microorganismos (60648M.O./ml) que con el de la celda (14586M.O./ml). Las algas contabilizadas fueron las verdes, los microrganismos oscuros no fueron tomados en cuenta ya que se trataba de algas muertas. El mtodo ms eficaz para realizar el recuento de microorganismos es el de la celda S-R, debido a su fcil manipulacin y tambin a que nos proporciona datos razonables, ya que utiliza un micrmetro ocular Whipple. Esto se refleja en los errores hallados, el error con la celda S-R es de 4.58 % mucho menor al de la franja que es de 15.48%. Aun agitando la muestra en el mtodo de la celda se observa que la disposicin de microorganismos no es uniforme por toda la celda. Como las pruebas se realizaron con una diferencia la concentracin de microorganismos varia pues las condiciones de las muestras como se dejaron no fueron las adecuadas, adems de que no tienen nutrientes necesarios para que se reproduzcan a un nivel constante.

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LABORATORIO N2 VIII. RECOMENDACIONES

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Se debe agitar la muestra antes de captarla mediante los instrumentos para que la concentracin de microorganismos sea uniforme. En el caso del mtodo de la franja no se debe tener un uso excesivo de la lmpara porque esta genera calor y hace que la muestra se evapore. Evitar la formacin de burbujas ya que distorsionan la adecuada determinacin de la concentracin de microorganismos. Realizar los dos el mismo da, ayudara a verificar cual es el mejor mtodo y ms preciso para la toma de una muestra. Sin embargo esto no se pudo debido a la falta de tiempo por lo que se realizo en dos sesiones. En el mtodo de la celda se debe agitar la muestra dentro de ella para tener una concentracin mas uniforme por todas las zonas de la celda. Dependiendo de la toma de la muestra se obtendr resultados ya sea captada cerca de la superficie, cerca de las paredes o en el fondo.

IX. -

BIBLIOGRAFA MURIEL BRANCO SAMUEL, Hidrobiologa aplicada a Engenharia Sanitria, 3 edicin, 1986, Editorial CETESB. http://www.ejemplode.com/36-biologia/1017-las_algas_verdeazules.html http://webcache.googleusercontent.com/search?q=cache:QnZkVDq26W4J:ww w.acuafilia.com/2009/03/10/algunos-microorganismos-vistos-al-microscopioen-una-gota-deagua/+microorganismos+presentes+en+una+gota+de+agua+de+estanque. http://webcache.googleusercontent.com/search?q=cache:ywvH1tCgPCYJ:www .madrimasd.org/experimentawiki/feria/La_vida_en_una_gota_de_agua+micro organismos+presentes+en+una+gota+de+agua+de+estanque. http://www.disasterinfo.net/desplazados/documentos/saneamiento01/1/12recom.htm http://sisbib.unmsm.edu.pe/bibvirtual/Tesis/Basic/Marchand_P_E/discusion.ht m http://www.aguabolivia.org/situacionaguaX/IIIEncAguas/contenido/trabajos_v erde/TC-011.htm http://www.lenntech.com/espanol/Eutroficacion-de-lasaguas/Efectos%20generales% 20de%20la%20eutrofizacion.htm
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LABORATORIO N2 X. CUESTIONARIO

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POR QU ES IMPORTANTE DETERMINAR LA CONCENTRACIN DE MICROORGANISMOS? La concentracin de microorganismos da una idea de cuan contaminada esta una muestra o cuerpo de agua, es un parmetro de polucin del agua, en base a ello se realizan los diferentes procesos para el tratamiento de agua para eliminar o disminuir la posible contaminacin por parte de los microorganismos. QUE DIFERENCIA EXISTE ENTRE EL CORRECTIVO CONTROL PREVENTIVO Y EL CONTROL DE MICROORGANISMOS? CONTROL CORRECTIVO: Son las medidas a tomar cuando ya hay presencia de microorganismos en una muestra o cuerpo de agua Cloracin: es un mtodo relativamente eficiente como tratamiento correctivo y el ms usual, si se aplica en cantidades adecuadas. Cl residual 0.5 Hipocloracin: Forma de desinfeccin con cloro, es ms fcil de llevar a cabo que la cloracin. Existen dos hipocloritos que se usan para desinfectar, el hipoclorito sdico y el hipoclorito clcico. Ozonizacin: el ozono es un desinfectante muy eficaz a una dosis y un tiempo de contacto adecuado. Luz ultravioleta: La luz UV mata las bacterias y los virus atacando a su material gentico y por tanto impidiendo la reproduccin celular.

CONTROL PREVENTIVO: Medidas que se deben tomar con el fin de evitar la introduccin de desechos que puedan servir de vehculo para los microorganismos, es por ello que aqu se disminuyen las condiciones para el desarrollo de microorganismos. Por ejemplo en el caso de algas se elimina el nitrgeno y fosforo. La diferencia sera en que el control preventivo conserva las condiciones del agua sin alterarlas y el correctivo somete a procesos de tratamiento de filtracin y cloracin que son procesos fsicos y qumicos.

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COMO SE PRODUCE EL CONTROL CORRECTIVO DE BACTERIAS Y VIRUS? PREVENCIN Y CONTROL DE BACTERIAS Y OTROS MICROORGANISMOS El mejor control de microorganismos consiste en la desinfeccin peridica de los filtros y cloracin continua del agua a base a inyecciones de compuestos como cloro gaseoso, hipoclorito de sodio o hipoclorito clcico, el cloro acta inhibiendo la actividad enzimtica de las clulas evitando su proliferacin. La efectividad de la accin del cloro est condicionada por algunos factores externos como: pH y temperatura, a su vez el tiempo de contacto entre desinfectante y agua tambin influye en el poder biocida de los compuestos clorados. A mayor temperatura, el poder desinfectante del cloro es mayor, sin embargo, es menos estable, perdindose con mayor rapidez. Con respecto al tiempo de contacto entre los compuestos clorados y el agua de riego, depende en gran medida del contenido de materia orgnica ya que la oxidacin es lenta, por lo que con aguas ricas en materia orgnica necesita incrementar la cantidad de cloro a aplicar o aumentar el tiempo de contacto. En general, es aconsejable que el tiempo de contacto no sea inferior a 30 minutos. CONTROL PREVENTIVO: Para la prevencin y control de bacterias y microorganismos se utiliza hipoclorito de sodio, a la dosis de 15-20 cc/m3 de agua. Tambin dan buenos resultados tratamiento frecuentes, cada 10 15 das, a dosis de 100 200 cc de hipoclorito sdico por metro cbico de agua, manteniendo la solucin clorada en la instalacin durante media hora, lavando posteriormente. COMO SE CONTROLA EL CRYPTOSPORIDIUM EN EL AGUA? De todos los procedimientos establecidos desde la antigedad hasta nuestros das, dos son los que permanecen en uso como los ms simples y efectivos para reducir el riesgo de ingestin de patgenos por el agua de bebida y son: La cloracin y la filtracin. Si bien ambos son efectivos para evitar la exposicin de los patgenos que prevalecen en el medio acutico y que utilizan esta ruta para llegar al hombre, algunos son capaces de evadir estas barreras hacindose resistentes al cloro, o debido a su tamao son capaces de pasar los sistemas de filtracin.

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MICROBIOLOGA II Un ejemplo de ello es la emergencia de Cryptosporidium cuyos quistes permanecen en los sistemas de filtracin y que en los procesos de reciclado de los mismos existe el riesgo de exposicin al consumidor.

Este protozoario, as como la Giardia y Cyclospora cayetanensis, es encontrado con alta frecuencia en las descargas de aguas residuales y en el ambiente donde desembocan los colectores. Giardia y Cyclospora constituyen uno de los patgenos de mayor incidencia en nios de zonas marginales de Lima. Para combatir el Cryptosporidium se realiza en la planta con tratamientos de filtracin lenta en arena. EL CONTROL DE LOS PROTOZOARIOS: En aguas de abastecimiento se realiza a travs de sedimentacin, de la coagulacin y sedimentacin en los decantadores de la planta de t ratamiento y de la filtracin. Otro tratamiento posible es el uso de iodo pero en este ultimo hay que tener mucho cuidado, ya que, su exceso en el agua puede causar hipertiroidismo a 5 mg/L, sus valores ideales deben ser inferior de 1 mg/L en la red para evitar la formacin de olor y sabor, tambin se debe tomar en cuenta la sensibilidad alrgica del iodo a la poblacin.

QUE INCONVENIENTES PRODUCE EL CRECIMIENTO DE MICROORGANISMOS EN ZONAS DE RECREACIN? En piscinas el problema seria la turbiedad, color (verde) y olor, lo que generara un rechazo en los usuarios, adems que el agua no seria adecuada para el aseo. El problema de las algas siempre aparecer en depsitos de agua, se quiera o no, en pequeos lugares como esquinas o paredes aparecen algas; que hacen que a la superficie jabonosa y resbaladiza lo cual producira accidentes.

- Las algas filamentosas su desarrollo es tal que forma cubiertas flotantes y esto puede impedir el uso recreacional de las aguas (natacin, pesca). - Las algas diatomeas en forma de cubiertas hacen que los pisos de las piscinas sean resbalosos.

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La minera forma parte primordial del futuro de Cajamarca. Y como tal, el Proyecto Conga es una oportunidad de desarrollo econmico y social para la regin, y especialmente para las provincias de Celendn y Cajamarca.

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OPININ Segn lo ledo sobre el EIA del proyecto Conga y las opiniones dadas por los peritos, el Proyecto Conga es viable, debido a que genera una gran cantidad de agua, tanto es as, que recomiendan que los reservorios y represas de lagunas se podran elevar para dar mas agua para la poblacin, hasta se podra duplicar lo prometido, y no habra ningn problema. Esto es algo positivo, ya que Cajamarca a pesar de ser una zona eminentemente minera, es una de las ms pobres, y no posee agua las 24 horas; y se sobrentiende que al no tener agua o tenerla contaminada todo ello genera problemas gastrointestinales en las personas y de saneamiento en la poblacin. Por otro lado, se dice que el proyecto podra ampliar los reservorios y hacer pequeos reservorios de captacin que funcionaran como manantiales de manera permanente para aquellas poblaciones que solo tienen agua estacional (lluvias), esto es un gran beneficio para las poblaciones sin agua. Respecto a la calidad del agua de las Lagunas Azul, Chica (inadecuadas para la vida animal) y Perol (conos volcnicos colapsados), se sabe que no son aptas para el consumo humano ni siquiera para el ganado en algunas de ellas hay alta incidencia de coliformes, y en otras una elevada alcalinidad (duras) pero esto es tpico de zonas volcnicas, la ganadera de los alrededores y las caractersticas de la zona generan contaminacin de las aguas, el proyecto intentara salvar aquellas lagunas que se encuentran con un elevado ndice de contaminacin. As tambin, el EIA prev la construccin de una planta para el tratamiento de los residuos de aguas acidas. Pero los peritos consideran esta una opcin cara y ms bien evalan el uso de totorales para el tratamiento de biorremediacin natural de aguas acidas de minas Un aspecto importante a tener en cuenta es que: Las cabeceras son el origen de las aguas en sentido geogrfico, no de los caudales producidos en ella no porque sea la parte ms alta de una cuenca o divisoria de cuenca es donde llueve ms, con esto se cierra la boca a muchos que dicen que las cabeceras de cuenca no se pueden. Tambin seria una gran oportunidad para el sistema de control de microcuencas que no existe en el Per. Para generar un avance tecnolgico, siempre se va a ocasionar un sacrificio ambiental, pero con el EIA, uno comprende que Conga no es peligroso, para la salud, ni la vida, la ganadera, ni para nadie... Simplemente es un sacrificio mnimo que se debe de hacer para obtener beneficios mximos, y estos se vern reflejados en la gran mejora tanto para Cajamarca como para el pas. Por lo antes expuesto CONGA SI VA!

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