DETERMINACIN DE VITAMINA C

INTRODUCCIN

Las vitaminas son compuestos que nuestro organismo necesita, pero que no puede fabricar y que, por tanto, deben ser ingeridas en la dieta para el buen funcionamiento de muchas funciones metablicas Es por ello, que considero de inters que los alumnos conozcan la importancia de la vitamina C para el mantenimiento de la salud, cules son los alimentos en los que se encuentra y en qu cantidad, como un primer paso para conseguir una dieta equilibrada y saludable.

LAS VITAMINAS

Las vitaminas son compuestos orgnicos, de naturaleza y composicin variada, muy sensibles al calor, al oxgeno, a cambios de pH y a la luz. Son imprescindibles en los procesos metablicos que tienen lugar en la nutricin de los seres vivos. No aportan energa, ya que no se utilizan como combustible, pero sin ellas el organismo no es capaz de aprovechar los elementos constructivos y energticos suministrados por la alimentacin. Normalmente se utilizan en el interior de las clulas como precursoras de coenzimas, a partir de las cuales se elaboran miles de enzimas que regulan las reacciones qumicas de las que viven las clulas.

Las vitaminas deben ser aportadas a travs de la alimentacin, puesto que el cuerpo humano no puede sintetizarlas. Una excepcin es la vitamina D,

que se puede formar en la piel con la exposicin al sol, y las vitaminas K, B1, B12 y cido flico, que se forman en pequeas cantidades en la flora intestinal.

CLASIFICACIN

VITAMINAS LIPOSOLUBLES

Suelen consumirse con alimentos que contienen grasas y por lo mismo se pueden almacenar en el organismo por un tiempo, lo que hace innecesario su consumo diario. Su carencia responde a malos hbitos alimenticios.

Dentro de este grupo encontramos a la vitaminas A, D, E y K.

VITAMINAS HIDROSOLUBLES

Son todas aquellas que se pueden disolver en agua. A veces tambin se les llama complejo vitamnico B. No pueden ser almacenadas dentro del cuerpo humano, y por lo tanto se deben consumir con frecuencia, idealmente a diario.

Entre este tipo encontramos las ocho vitaminas del grupo B y la vitamina C.

VITAMINA C O CIDO ASCRBICO

Interviene en el mantenimiento de huesos, dientes y vasos sanguneos por

ser buena para la formacin y mantenimiento del colgeno. Protege de la oxidacin a la vitamina A y vitamina E. Desarrolla acciones anti-infecciosas y antitxicas y ayuda a la absorcin del hierro no hmico en el organismo.

El hombre, carece de la enzima que cataliza la etapa terminal de la sntesis de cido ascrbico, la gulonolactona oxidasa, por lo que debe adquirirlo a travs de la alimentacin.

La vitamina C se encuentra en alimentos de origen vegetal.

|Alimento | |Jugo de naranja |Pimiento rojo |Pimiento verde |frutillas |1 copa |105 |

|Porcin

|Vitamina C |mg. (miligramos) |

|1 copa (220 ml) |1 pimiento |1 pimiento |225

|124 | |

|120

| |1 copa (220 ml) |95 |90 | |50 |30 |23 | | | |107 | | |

|cranberry - arndano rojo - Jugo |coles de Bruselas

|1 copa |1 taza

|Brcoli (hervido, colado y sin sal) |kiwi

|1 fruto (75 gr.) |70 |100 gr.

|Coliflor (hervido, colado y sin sal) |moras (crudas) |tomate (rojo, crudo)

|1 taza (180 g.) |180 g.

Puede presentarse en dos formas qumicas interconvertibles: cido

ascrbico (forma reducida) y cido dehidroascrbico (forma oxidada), siendo ambas formas funcionales biolgicamente y mantenindose en equilibrio fisiolgico. Si el cido dehidroascrbico es hidratado se transforma en cido dicetogulnico, no activo biolgicamente, siendo esta transformacin irreversible. Esta hidratacin ocurre espontneamente en disolucin neutra o alcalina.

[pic]

La ausencia de esta vitamina da como resultado la enfermedad conocida como escorbuto la cual se caracteriza por un defecto de la sntesis de colgeno, que queda de manifiesto por la falta de cicatrizacin de heridas, defectos de la formacin de los dientes, rotura de capilares que conducen a la aparicin de abundantes petequias, debilidad muscular, prdida del cabello, entre otros

Si bien, como con la mayora de las vitaminas, los excesos se descartan por va urinaria, el alerta radica en que como lo ingerido es un cido, las dosis excesivas pueden rebasar la resistencia de la pared gstrica y su intensa recirculacin renal puede afectar el rin.

La vitamina C es un compuesto inestable, debido a la facilidad con la que se oxida e hidrata. Se destruyen con facilidad en el procesamiento y conservacin de los alimentos, por lo que es utilizada como indicador de la prdida vitamnica de un alimento durante su procesamiento y

almacenamiento. Por otra parte, el calor y los cationes metlicos destruyen la vitamina C. Alimentos como los ctricos, kiwi, brcoli, lechuga, entre otros, son fuente natural de vitamina C, y su contenido depende de la especie, rea geogrfica en las que son cultivados, las condiciones de almacenamiento una vez recogidos y del estado de maduracin (generalmente aumenta con la maduracin).

Los requerimientos diarios en un hombre adulto son de 90 mg./da y en una mujer de 75 mg./da, aunque existen siempre situaciones donde es necesario aumentar la dosis de vitamina a travs de un suplemento.

|edad |

|Hombres |(mg/da) |ND |15 |25 |45 |75 |90 |90 | |

|Mujeres

|(mg/da) | | | | |45 |65 |75 |75 |80 a 85 |115 | | | | | |

|0 a 12 meses |1 a 3 aos |4 a 8 aos |9 a 13 aos |14 a 18 aos |19 a 50 aos |>50 aos |Embarazo |Lactancia

La vitamina C se puede reconocer mediante azul de metileno. Este colorante cuando est oxidado es de color azul y se reduce fcilmente formando un compuesto incoloro. Por otra

parte, la cromatografa y la titulacin volumtrica de xido-reduccin son mtodos utilizados para cuantificar el contenido de vitamina C de un alimento. La cromatografa lquida de alta presin (HPLC) es el mtodo ms utilizado por ofrecer una gran precisin de los resultados.

DETERMINACIN DE VITAMINA C

VOLUMETRA DE XIDO REDUCCIN

En el anlisis volumtrico o titulomtrico se determina una sustancia por titulacin, que es el proceso de agregar una solucin de reactivo (titulante) de concentracin o ttulo conocido hasta que, idealmente, todo la sustancia haya reaccionado; o sea, hasta que se haya agregado una cantidad equivalente del titulante. La solucin titulante se llama comnmente solucin valorada y se agrega desde una bureta. En la determinacin del punto final en forma visual, se agrega titulante hasta que un indicador adecuado manifieste un cambio, generalmente, de color.

El mtodo que se seleccion para la determinacin de vitamina C est basado en la transferencia de electrones, una volumetra de xidoreduccin, en la que interviene el yodo como agente oxidante.

El indicador que se utiliza para visualizar el fin de la reaccin es el almidn, debido a que forma un complejo de color azul intenso con el yodo. Esto se debe a que fraccin activa del almidn es la amilosa, un polmero de la -D-

glucosa que se presenta en forma de una espiral. En presencia de almidn y de yoduro, el yodo forma cadenas de molculas de I6, que se alojan a lo largo del interior de la espiral de amilosa. El color azul oscuro del complejo yodo-almidn se debe a la absorcin de luz visible por las cadenas de I6 alojadas en el interior de la espiral. El almidn, no es un indicador redox, porque responde especficamente a la presencia del yodo, no a un cambio de potencial.

Hay que tener en cuenta, que el almidn se hidroliza con facilidad y uno de los productos de la hidrlisis es la glucosa, la cual tiene carcter reductor, por tanto, una disolucin de almidn parcialmente hidrolizada puede ser una fuente de error en una titulacin redox, de manera que sus disoluciones o deben ser recientes o se deben preparar con un conservante, como el HgI2.

Para la determinacin del contenido de vitamina C, se utilizar una disolucin de triyoduro como agente oxidante, que constituye el titulante, dado que la vitamina C tiene carcter reductor. Por lo tanto cuando al cido ascrbico se le aade disolucin de triyoduro, este se reducir a yoduro a costa de que el cido ascrbico se oxide.

[pic]

I3 - + 2e-

3I

[pic]

[pic]

Dado que la reaccin entre el triyoduro y el cido ascrbico presenta una estequiometra 1:1, en el punto final de la titulacin el nmero de moles de yodo reducido es equivalente a los moles de cido ascrbico oxidado. Entonces, cuando ya no quede vitamina C reducida el triyoduro se unir al almidn y aparecer el color azul indicando el fin de la titulacin.

Es importante sealar que con este mtodo se determina la capacidad reductora total de la disolucin, por ello, si la disolucin a titular contiene otras sustancias reductoras adems del cido ascrbico el volumen de la disolucin oxidante consumida puede estar aumentada, y por tanto, el contenido de cido ascrbico sobrestimado.

PRCTICO DE LABORATORIO

OBJETIVOS

Estudiar las vitaminas: clasificacin, funciones, fuentes, requerimientos diarios, caractersticas fsico-qumicas.

Introducir las bases estructurales para la determinacin de la vitamina C (cido ascrbico)

Determinar la concentracin de cido ascrbico contenido en diferentes jugos naturales.

MATERIALES Y REACTIVOS

MATERIALES

Bureta de 25 ml

Erlenmeyer de 100 ml

Embudo

Pipetas de 1mL, 10 mL, 20 mL

Vasos de precipitado

Matraz de 100 mL

Varilla de vidrio

Gasas para filtrar el jugo

Soporte universal

Mechero

Trpode

Tela de amianto

NOTA: las cantidades de cada uno de los materiales depende de la cantidad de muestras problema que se disponga.

REACTIVOS

Disolucin de yodo (triyoduro) 0.0241 M (0.0482 N):

Indicador de almidn

cido clorhdrico 15% (v/v)

Tiosulfato de sodio 0.07 M (0.07 N)

Yodato de potasio 0.01 M (0.06 N)

cido sulfrico 0.5 M.(1N)

Carbonato cido de sodio

Jugo de ctricos

Agua destilada

PROCEDIMIENTO

PREPARACIN DE LOS REACTIVOS

INDICADOR DE ALMIDN

El indicador de almidn se prepara haciendo una pasta con 1 g de almidn soluble y 1 mg de HgI2, con 10 mL de agua (d). Se vierte la pasta en 100 mL de agua hirviendo, y se contina hirviendo hasta que la disolucin se clarifica.

CIDO CLORHDRICO 15% (V/V)

Medir 15 mL de HCl (c) con una pipeta e incorporar a un matraz que contenga un poco de agua destilada y posteriormente, enrasar a 100 mL.

TIOSULFATO DE SODIO 0.07M (0.07 N)

Se prepara disolviendo 1.74 g de Na2S2O3.5H2O en 100 mL de agua (d), recientemente hervida, que contenga 0.01 g de Na2CO3. Guardar esta disolucin en una botella color topacio bien cerrada.

YODATO DE POTASIO 0.01M (0,06 N)

Se pesa 0.5 g de reactivo slido, y luego se disuelve en 250 mL de agua (d) en un matraz aforado.

CIDO SULFRICO 0.5M. (1 N)

Diluir 2.8 mL de cido sulfrico en 50 mL de agua, en un matraz, y aforar hasta la marca de 100 mL

DISOLUCIN DE YODO (TRIYODURO) 0.0241 M (0.0482 N)

Se prepara disolviendo 1.53 g de I2 en 250 mL de agua destilada. Aadir 3.5 g de KI, homogeneizar la disolucin, en caso de no disolverse totalmente, dejar en reposo. La reaccin de formacin de triyoduro es:

Se estandariza, envasa y rotula.

JUGO DE CTRICOS

1. Exprimir los ctricos.

2. Filtrar el jugo obtenido a travs de una gasa.

Puede utilizarse tambin zumos de fruta de venta en establecimientos comerciales.

ESTANDARIZACIN DE LOS REACTIVOS

ESTANDARIZACIN DE LA SOLUCIN DE TIOSULFATO DE SODIO

PROCEDIMIENTO

Se pipetean 25 mL de la disolucin de yodato de potasio (0.06 N) en un erlenmeyer.

Se aaden 1 g de yoduro de potasio slido y 0.5 mL de cido sulfrico 0.5M.

Valorar inmediatamente con tiosulfato hasta que la disolucin haya perdido casi todo su color (hasta color amarillo plido). Entonces aadir 2 mL del indicador de almidn (la disolucin se tornar azul intenso) y acabar la valoracin cuando se produzca la decoloracin del complejo yodoalmidn. Repetir dos veces ms.

Se utiliza la frmula:

V1 x N1 = V2 x N2

ESTANDARIZACIN DE LA SOLUCIN DE YODO CON TIOSULFATO DE SODIO

PROCEDIMIENTO

Transferir 25 mL de la solucin de yodo a un erlenmeyer de 250 mL y diluir

hasta 50 mL.

Agregar 1,5 mL de cido sulfrico 1 N.

Titular con tiosulfato de sodio hasta que la solucin adquiera un color amarillo.

Aadir 2 mL de indicador de almidn.

Proseguir la titulacin hasta que el color azul cambie a incoloro.

Calcular la normalidad como el promedio de tres titulaciones.

Se utiliza la frmula:

V1 x N1 = V2 x N2

DETERMINACIN DE CIDO ASCRBICO EN LA MUESTRA PROBLEMA

TITULACIN DEL CIDO ASCRBICO

PROCEDIMIENTO

1. Colocar en un Erlenmeyer de 100 ml:

10 ml de jugo

15 ml de agua destilada

0,25 ml de HCl (15% v/v)

0,25 ml de indicador de almidn.

2. Llenar la bureta con 15 ml de la disolucin de yodo.

3. Titular lentamente y agitando la disolucin de zumo contenida en el erlenmeyer, hasta que vire al azul.

NOTA: El color amarillo del zumo de naranja puede enmascarar en parte el color azul por lo que hay que tener cuidado para observar

DISCUSIN Y ANLISIS DE RESULTADOS

1) Anota los volmenes gastados de la solucin de yodo durante la titulacin y los volmenes de la muestra en el siguiente cuadro:

|MUESTRA SOLUCIN DE YODO (mL) |

|VOLUMEN MUESTRA (mL)

|VOLUMEN

|JUGO DE NARANJA |JUGO DE LIMN

|10 |10

|1.5 |1,3 |

2) Determina la concentracin de vitamina C en cada muestra utilizando la siguiente frmula (incluye los clculos):

V1 x N1 = V2 x N2

Donde:

V1 es el volumen aadido al erlenmeyer desde la bureta al titular el preparado de vitamina C.

N1 es la concentracin conocida de la disolucin de yodo utilizado en la titulacin.

V2 es el volumen de la muestra con una concentracin de vitamina C desconocida que hemos puesto en el erlenmeyer.

N2 es la concentracin desconocida de vitamina C en la muestra problema.

Muestra N 1: jugo de naranja

V1: 1.5 mL

N1: 0.0482 N

V2: 10 mL

N2: ?

V1 x N1 / V2 = N2

1.5*10-3 L x 0.0482 N/ 10*10-3 L = 7.23*10-3 N

N2: 7.23*10-3 N

Muestra N2: jugo de limn

V1: 1.3 mL

N1: 0.0482 N

V2: 10 mL

N2: ?

V1 x N1 / V2 = N2

1.3*10-3 L x 0.0482 N/ 10*10-3 L = 6.266*10-3 N

N2: 6.266*10-3 N

3) Calcular la cantidad de vitamina C en la muestra en mg/L sabiendo que el

peso molecular de la vitamina C es 176 ( Equivalente qumico = 88 g)

Muestra N 1: jugo de naranja

7.23*10-3 N x 88 g/eqq = 0.63624 g/L de vitamina C

0.63624 g/L de vitamina C x 1000 mg/g = 636.24 mg/L de vitamina C

Muestra N2: jugo de limn

6.266*10-3 N x 88 g/eqq = 0.5514 g/L de vitamina C

0.5514 g/L de vitamina C x 1000 mg/g = 551.4 mg/L de vitamina C

4) Completa el siguiente cuadro con los resultados obtenidos de vitamina C

|MUESTRA | | |JUGO DE NARANJA |JUGO DE LIMN |N

|VITAMINA C

|VITAMINA C (mg/L)

| |7.23*10-3 |6.266*10-3

| |636.24 |551.4 | |

5) Comparar los resultados obtenidos.

De acuerdo a los resultados obtenidos, se puede decir que el contenido de

cido ascrbico en la muestra N 1 (jugo de naranja) es mayor que el de la muestra N 2 (jugo de limn)

6) Vara la cantidad de vitamina C con el tiempo?

Esta determinacin no se realiz, pero sera interesante comprobar si la cantidad de cido ascrbico disminuye tan rpidamente, como se cree comnmente. En este caso se determinara la cantidad de vitamina C presente en distintas muestras extradas a distintos horarios.

|MUESTRA | | | |JUGO DE NARANJA | | | |JUGO DE LIMN | | |6 h | |12 h |6 h |12 h |

|TIEMPO

|VITAMINA C

|N

|VITAMINA C (mg/L)

|0 h

| | |0 h |

| | |

| |

| |

| |

| |

7) De acuerdo la cantidad diaria recomendada de vitamina C: con cuntas piezas de fruta o volumen de jugo se consigue esa cantidad?

Por ejemplo, para una mujer de entre 14 y 18 aos, la dosis media recomendada de vitamina C es de 65 mg/ da. Si se considera a las cantidades determinadas de vitamina C en el jugo de naranja, 636.24 mg/L, se necesitan aproximadamente 100 mL de jugo por da para cumplir los requerimientos de vitamina, lo que equivale a una o dos naranjas.

GUA DE ESTUDIO

1. Qu son las vitaminas? Cmo se clasifican?

2. Cul es la importancia de las vitaminas?

3. Qu tipo de vitamina es la vitamina C? Qu caractersticas tiene?

4. Cul es el requerimiento diario de vitamina C? Qu consecuencias ocasiona su dficit? Y su exceso?

5. Qu tipo de volumetra se utiliza en determinacin de vitamina C?

6. El indicador que se utiliza es almidn: Es un indicador redox? Cmo acta?

BIBLIOGRAFA

Harris, D. Anlisis Qumico Cuantitativo Editorial Revert S. A. Segunda

edicin. Espaa. 2001.

Kolthoff, I., Sandell, E., Meehan, E., Bruckentein, S. Anlisis Qumico Cuantitativo Librera y Editorial Nigar S. R. L. Cuarta edicin. 1969.

http://www.estilohoy.com/notas/88385-Clasificaci%C3%B3n-de-lasvitaminas-

http://www.zonadiet.com/nutricion/vit-c.htm